Formical-4脱钙剂在骨组织脱钙中的应用

在骨组织病理制片中，脱钙是至关重要的步骤之一。目前使用的脱钙剂多为无机强酸类制剂，虽脱钙效果较好，但常造成组织形态，特别是细胞结构的破坏，使得病理形态观察受到影响。笔者使用一种快速脱钙剂Formical-4，不仅能够保持组织形态良好，亦能用于特殊染色和免疫组化标记，现介绍如下。     

骨及钙化组织脱钙后除酸方法的改良

骨及钙化组织石蜡切片,一般先经有机酸或无机酸稀溶液浸渍脱钙,再用流水洗涤２４ｈ,除去组织内的酸〔１〕,然后才能按常规脱水、浸蜡、切片、ＨＥ染色。此种方法除酸时间长,而且染色效果并不十分理想,在不同程度上延误了患者的诊断与治疗。我们经过反复实践,探索出...     

骨组织脱钙及其脱钙后染色的研究

近年来为配合白血病、淋巴瘤等疾病的诊断而开展了骨髓穿刺活体组织病理检查,特别是2003年以来,为了配合“非典”患者治疗后期相继出现股骨头坏死等病症的科研工作,我科先后为中国医学科学院实验动物研究所及中国人民解放军军事医学科学院等科研单位制作了大量实验动物的骨组织标本的病理学切片。在制作这些骨组织病理切片的“脱钙-染色过程中”遇到了一些问题：骨组织脱钙不足（脱钙液浓度过低、时间过短）造成组织太硬,不易切片且极易脱片;骨组织脱钙过度（脱钙液浓度过高,时间过长）严重影响骨髓组织细胞染色效果,造成细胞核无法正常着色,要么细胞核不着色或着色很浅亦或被伊红染成红色,从而影响对病变组织的病理诊断及实验动物的研究工作。为解决出现的上述问题,我们在工作中认真仔细地分析研究了骨组织的特点,经过反复实验,摸索总结出一套适用于骨穿组织及实验动物骨组织的“脱钙-染色方法”,并获得了满意的结果,现将将此方法作一简单介绍以供读者参考。     

介绍一种改良脱钙液在骨组织制片中的应用

骨、含有骨质的肿瘤及钙化组织和骨髓穿刺组织很坚硬,将其制成几微米切片相当困难,常用的方法是先经脱钙处理,使其变软后再切片,所以脱钙是这类组织制作病理切片的关键技术.脱钙液和脱钙方法很多,传统方法脱钙一般用硝酸,其效果不稳定,骨组织脱钙不足,切片破碎甚至切不成片且极易脱片;骨组织脱钙过度,破坏组织的形态结构和细胞成分的性质,造成细胞核不着色或着色很浅,从而影响对病变组织的病理诊断.已有学者对此进行了改进[1~4], 但目前尚无公认的理想方法.为此我们在工作中反复摸索,结合Plank-Rycho脱钙液总结出一套改良的脱钙液并获得了满意效果,现将此方法介绍如下.     

免疫组化染色中骨组织脱钙方法

由于骨组织的特殊性,制备好的骨组织标本免疫组化并不是一件容易的事。由于骨组织中60％以上为钙盐组成的羟基磷灰石结晶,因而脱钙是制备标本的重要一环。一些强酸如盐酸,硝酸等虽能快速有效除去骨组织中钙盐,但对其中的抗原蛋白也产生了致命性破坏。本实验仿照目前国外利用EDTA低温脱钙方法,取得了比较满意的结果。     

三种脱钙液对骨组织表面脱钙效果的比较

<正>骨组织是一种致密的结缔组织,细胞基质含有大量钙盐沉积,质地坚硬^[1]。骨组织必须进行脱钙处理才能制片,而脱钙过度会导致骨组织的结构被破坏,相关细胞表面抗原丢失,严重影响HE染色制片和免疫组化制片效果,影响病理诊断^[2]。脱钙液种类繁多,且尚未有相关文献报道各种脱钙液表面脱钙效果的优劣。本实验拟采用临床工作中常用的三种脱钙液对骨组织表面脱钙效果进行比较,为病理医师选用合适的表面脱钙液提供参考。     

EDTA脱钙在骨组织大切片制片中的应用效果

骨肿瘤病理大切片可以观察组织全貌,准确评估病灶大小、侵袭范围以及手术切缘,对于确定骨肿瘤的边界和临床预后非常重要.但骨组织中丰富的钙盐导致完整制片困难,尤其是大切片的制作.普通酸性脱钙液因破坏细胞及组织结构,影响染色、镜下观察和分子检测,已不适用于日常工作,而EDTA脱钙液性质温和,能有效保护组织内的核酸和组织抗原,日...     

微波辅助脱钙技术在猪脱钙骨基质制备中的应用研究

以猪后腿骨干骺端为对象,考察微波辅助脱钙技术在脱钙骨基质制备过程中的作用.以脱钙骨的脱钙率考察微波对脱钙效果的影响;利用Micro-CT和显微镜观察脱钙骨的大体三维结构;利用Micro-CT测量其孔隙率,利用显微镜及Digimizer3.1软件测量其孔径大小;利用物性测试仪测量脱钙骨的压缩模量以表征其力学性能.结果表明,脱钙骨脱钙率的测量结果显示,与传统脱钙法相比,微波制备法仅需2h就可使脱钙率达到100％,脱钙时间可缩短82％;且制备的脱钙骨具有良好的孔隙率和互相连通的孔径结构,孔隙率达到85％以上,孔径大小为( 345±76) μm,与传统制备方法无显著差异(P＞0.05);并具有良好的力学性能,在脱除90％以上的钙后脱钙骨的压缩模量仍可达到7.11 N/mm2.微波技术可以有效提高脱钙骨基质的制备效率,且制备效果良好,为微波技术在脱钙骨制备领域的应用提供了试验依据.     

微波快速脱钙及其脱钙液的选择

微波快速脱钙及其脱钙液的选择杨传红，赖晃文，唐赓云，姜秀英骨组织超薄切片的制备是进行骨组织超微结构研究的先决条件。常规脱钙方法时间太长且超微结构保存不良，不利于临床病理的快速诊断。我们选择不同脱钙液在微波条件下探讨快速脱钙的方法，以达到快速诊断的目的...     

塑料包埋非脱钙骨技术在骨组织学与图像分析中的应用

骨是一种坚硬的结缔组织,细胞间质含大量的矿物质、有机盐和无机盐。为获得高质量的骨组织学图像和准确的骨组织计量学参数。我们对非脱钙切片、染色和图像处理做了一些工作,现总结如下。     

脱钙液在微波辐射下对骨组织作用效果及免疫组织化学染色的影响

骨组织脱钙常规多采用酸性液体（如硝酸、盐酸、甲酸等）进行脱钙，一般需较长时间，组织细胞结构很难保持完整清晰，有些甚至破坏组织结构很严重，从而影响病理学的诊断和研究。骨组织中的蛋白抗原得不到很好的保存，有时甚至丢失。为此我们对９例骨组织用乙二胺四乙酸二...     

不同脱钙方式对骨组织样本不同病理分析的影响

<正>骨与软组织肿瘤生物学特性复杂,在临床病理工作中有时依据形态学较难做出准确的病理诊断,需行免疫组化、FISH、PCR、Sanger测序及NGS等检测^[1]。骨组织质地坚硬,应使用脱钙液将组织软化后制片。目前,临床使用较多的仍为混合酸性脱钙液,其脱钙速度快,但易对组织抗原及DNA造成不可逆的损伤; EDTA性质温和,对组织抗原及核酸保存较好,但缺点是脱钙时间久且效果差。有研究显示改良EDTA常温处理骨髓样本20～24 h,HE染色佳,免疫组化染色强度适中,定位准确^[2]。     

骨钉和脱钙骨在骨创伤和骨缺损中的应用

目的：探讨同种异体冻干骨钉固定关节内骨折和脱钙骨移植治疗骨缺损的实用价值。方法：应用骨钉治疗关节内骨折７例，其中股骨头骨折４例，距骨骨折１例，内踝骨折２例；应用脱钙骨皮质骨条、松质骨粒移植治疗四肢骨折骨不连６例、骨良性病变切除术后骨缺损６例。结果：术后随访３～１２个月，骨钉固定者８个月后骨钉与宿主骨融合，脱钙骨皮质骨条和松质骨粒植骨者２～６个月愈合，无一例发生免疫排斥反应，近期效果满意。结论：认为骨钉为临床治疗关节内骨折提供了一种新的内固定材料，避免再次手术取内固定物，脱钙骨皮质骨条或骨粒适宜于骨不连和骨缺损的填充植骨治疗。     

有脱钙骨组织标本超薄切片的制作方法

在骨超微结构研究和临床外检工作中，我们利用Epon812含钙盐的骨组织标本来制备超薄切片。由于不脱钙的超薄切片在电镜下显示了骨组织的真实结构，更利于深入地研究骨组织的形态学。     

表面脱钙法在骨髓组织病理诊断中的应用

<正>病理工作中常遇到骨或含骨的组织、伴大片钙化的组织,这些组织无法常规直接制片,传统方法是将这些组织固定后进行脱钙,使钙盐溶解组织变软后再脱水、透明、浸蜡、包埋制片。然而,常规脱钙处理往往导致组织染色效果欠佳、组织抗原丢失及DNA等核酸分子严重片段化等[1],有时     

微波技术在牙齿脱钙中的应用

牙齿脱钙既往均采用酸性脱钙液,所需时间长,组织和细胞结构保存欠佳。本文通过摸索发现用络合剂乙二酸四乙酸钠（EDTA）作为脱钙液,利用微波脱钙可大大缩短脱钙时间,且组织细胞结构保存很好,现介绍如下。1材料和方法1．1材料收集成年鼠牙32例,随机分为4组。1．2试剂配制（1）EDTA脱钙液：EDTA10g,蒸馏水100ml,加NaOH搅拌溶解后,用1mol．L－1HCI调pH至7．0,然后加4％甲醛15ml。（2）酸性脱钙液：浓HCl7ml,甲酸8ml,AlCl36g,蒸馏水100ml.1．3方法按下列4种方法进行：（1）EDTA十微波组：将牙齿放入装有EDTA脱钙液的…     

微波辐射下螯合剂脱钙技术在骨大切片制作中的应用

在骨病理技术中,去除骨组织中的钙盐即脱钙,是最关键的步骤,它直接影响到骨制片,特别是股骨头大切片的制作。为此我们对山羊股骨头组织用乙二胺四乙酸二钠(ＥＤＴＡ)作为脱钙液,在微波辐射下进行脱钙[1],经反复实验,将整个脱钙和制片过程在4ｈ内完成,做出高质量的骨组织大切片,取得了较为理想的效果。一、材料与方法1材料:本地山羊24只,雌、雄不限,体重≥20ｋｇ,出生时间≥10个月。实行手术通过不同程度的阻断血管后,观察股骨头在术后不同时期的病理变化。山羊处死后立即取出双侧的股骨头,用骨锯沿冠状切面锯开,取整个股骨头及干骺端切面,其…     

试剂对脱钙骨基质成骨能力影响的实验研究

目的 :研究异体骨基质制备过程中常用的脱脂和脱钙试剂溶液对其成骨能力的影响。方法 :8周鼠龄的Wistar雌鼠作为供体 ,切取胫股骨 ,碾磨成 12 5～ 80 0微米的颗粒 ,分成四组 ,分别用丙酮 -盐酸、丙酮 -乙二胺四乙酸 (EDTA)、三氯甲烷 -甲醇 -EDTA或三氯甲烷 -甲醇 -盐酸 (控制组 )脱脂和脱钙。冷冻干燥处理后 ,每 3 0mg装入一胶囊中。 60只 6周鼠龄的Wistar雌鼠作为受体 ,植入腰背肌中 ,每只鼠接受同一组植入材料 2枚。术后 6周取标本测定重量、干燥后的重量、钙含量、碱性磷酸酶含量和组织形态学定量测定。结果 :丙酮 -盐酸组的干燥重量 (P <0 .0 1)和钙含量 (P <0 .0 5 )明显高于控制组。结论 :用丙酮清除脂质的异体骨基质成骨能力优于用三氯甲烷 -甲醇混合液。EDTA或盐酸脱钙对其成骨能力无明显影响。     

石蜡包埋块中钙化组织的脱钙方法

石蜡包埋块中钙化组织的脱钙方法梁化印郭瑞峰杜双存刘颖成伟在常规病理切片中，骨组织的制片需在组织充分固定后，于脱水前用适宜的脱钙液脱钙。常规脱钙液品种较多，而脱钙方法并不多，且均耗时较长。特别是当被切制蜡块的软组织中有较大钙化灶时，极易损伤刀刃影响制片...