实验性脑出血大鼠缺氧诱导因子-1α的表达与脑水肿及细胞凋亡的相关性研究

目的研究脑出血(ICH)血肿周围缺血半暗带区缺氧诱导因子(HIF)-1α的表达及与脑水肿和细胞凋亡的关系。方法采用自体血脑内注射法建立脑出血动物模型,应用免疫组织化学方法检测脑出血后不同时间血肿周边脑组织中HIF-1α蛋白表达情况,并应用干湿比重法测定脑组织含水量及应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测凋亡细胞。结果脑出血后血肿周围缺血半暗带区HIF-1α蛋白表达与脑水肿呈正相关(r=0.466,P<0.01),与细胞凋亡呈正相关(r=0.195,P<0.05)。结论缺血半暗带区脑组织中HIF-1α表达与细胞凋亡和脑水肿呈正相关。     

缺氧诱导因子-1α对肺癌细胞凋亡、增殖的影响及与Livin、Caspase-3表达的相关性

目的 研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对人肺腺癌A549细胞株及人小细胞肺癌H446细胞株的凋亡、增殖的影响,以及HIF-1α表达与Livin、Caspase-3表达的关系.方法 常规培养A549、H446细胞,转染含有HIF-1α基因的质粒过表达HIF-1α基因,筛选干扰序列干扰HIF-1α基因表达,将对数生长...     

RhEPO对脑出血大鼠缺氧诱导因子和细胞凋亡影响的实验研究

目的研究重组人促红细胞生成素（RhEPo） 对大鼠实验性脑出血后凋亡细胞及缺氧诱导因子（ hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α） 的影响。方法随机分为脑出血组、脑出血 RhEPO 干预组、假手术组,动物模型采用自体血脑内注射的方法,其中脑出血 RhEPO 干预组为大鼠造模后给予 5 000 U/kgRhEPO腹腔注射,取组织后应用免疫组化方法检测脑出血后不同时间血肿周边脑组织中 HIF-1α蛋白表达情况,应用 TUNEL 法检测凋亡细胞。结果出血后,HIF-1α蛋白阳性表达率随时间进行性增加,并于出血后 72 h 达到高峰,此后 HIF-1α蛋白表达的阳性率逐渐下降,脑出血后不同时间点阳性率比较差异有统计学意义（P 〈0. 05） ; 脑出血 RhEPO 干预组较脑出血组及假手术组各时间点细胞凋亡数低及 HIF-1α蛋白阳性率低（P 〈0. 05） 。结论 EPO 能显著降低 HIF-1α表达,并对脑出血后脑组织有良好的保护作用。     

糖尿病大鼠视网膜组织中缺氧诱导因子-1α、内皮素-1的表达研究

目的检测缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）与内皮素-1（ET-1）在糖尿病视网膜组织中的表达变化,探讨其在糖尿病视网膜病变（DR）发生、发展中的作用。方法将SD大鼠随机分为对照组（CON）和糖尿病（DM）组。其中糖尿病组采用STZ一次性尾静脉注射建立糖尿病模型,制模成功后分别于2、4、8、12周处死大鼠,取眼球组织,应用免疫组化和放免法检测各组大鼠视网膜组织中HIF-1α、ET-1的表达变化。结果免疫组织化学染色显示正常对照组大鼠视网膜不表达HIF-1α,DM组2周时有少量表达,4周时阳性细胞数量增多,8周达到高峰,12周时表达已降低,各组之间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。经放免法测定,对照组大鼠视网膜组织中仅有少量ET-1,而DM组大鼠随病程延长,视网膜组织中的ET-1含量呈进行性增加。各组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论HIF-1α与其下游基因ET-1在DM病程中的表达变化提示二者可能与视网膜组织的损伤有关,并在DR的发生、发展中发挥重要作用。     

缺氧诱导因子-1α在胶质瘤中的表达及意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在人脑不同级别胶质瘤中的表达,分析HIF-1α、血管内皮生长因子（VEGF）和微血管密度（MVD）之间的相互关系及意义。方法采用免疫组化法检测54例胶质瘤组织中HIF-1α及VEGF的表达情况,并以VIII-R-Ag作为标记计数微血管密度（MVD）。结果58例胶质瘤组织HIF-1α的表达阳性率为65.5%（33/58）,HIF-1α的表达强度和胶质瘤的病理分级呈正相关（χ2=14.24,P〈0.05）。HIF-1α的表达和VEGF的表达呈正相关（χ2=4.02,P〈0.05）,HIF-1α和MVD呈正相关（t=3.22,P〈0.05）。结论HIF-1α与人脑胶质瘤组织中血管生成及病理分级密切相关,为治疗胶质瘤的提供一种可能的途径。     

缺氧诱导因子-1α在宫颈癌中的表达及意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在宫颈癌发生发展过程中蛋白表达情况。方法应用免疫组织化学S-P方法检测HIF-1α在正常宫颈组织（NCE）20例、宫颈上皮内瘤变组织（CIN）28例、宫颈癌（ICC）组织70例中的表达情况。结果在正常宫颈上皮、宫颈上皮内瘤变组织、宫颈癌（I—IIA期）组织中，HIF-1α蛋白的阳性表达率分别是0、32．14％、72．86％（P〈0．01）。结论HIF-1α的表达与宫颈癌的发生发展密切相关，促进宫颈癌的发生发展。     

缺氧诱导因子-1α与妇科肿瘤

缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）是一类重要的缺氧应答调控因子,与肿瘤的发生、发展密切相关。其在维持氧稳定、细胞的能量代谢和肿瘤血管生成以及转移、细胞增殖、凋亡等方面有重要的作用。HIF-1α已成为近年来在肿瘤学术研究方面的一个热点,现就HIF-1α与妇科肿瘤的关系作以概述。     

缺氧诱导因子1α表达与胃癌的关系

目的 探讨缺氧诱导因子1α(HIF-lα)在胃癌组织中的表达与胃癌发生、发展的关系.方法 应用组织芯片方法检测162例胃癌组织和32例癌旁组织中HIF-1α的表达;采用RT-PCR方法检测11例胃癌组织和12例胃正常组织中HIF-1α mRNA的表达水平.结果 HIF-1α在胃癌组织和癌旁组织中表达的阳性率分别为37.04％(60/162)和9.38％(3/32)(P＜0.05);HIF-1α的表达与TNM分期、浸润深度和淋巴结转移有关(P＜0.05).HIF-1α mRNA在胃癌组织和胃正常组织中的表达水平分别为(6.62±0.63)和(7.32±1.12)(P＜0.05).结论 HIF-1α在胃癌组织中高表达,并与胃癌的发生、发展及转移密切相关.     

缺氧诱导因子-1α在中耳胆脂瘤中的表达

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在中耳胆脂瘤发病机制中的作用,检测其在中耳胆脂瘤和外耳道正常上皮中的表达情况.方法:取32例中耳胆脂瘤和15例外耳道正常上皮标本用免疫组织化学技术检测HIF-1α蛋白的表达.结果:在中耳胆脂瘤中HIF-1α的表达较外耳道正常上皮明显增多(P＜0.05).结论:中耳胆脂瘤中HIF-1α的表迭显著升高,推测HIF-1α在中耳胆脂瘤的发生、发展过程中具有极其重要的作用,并且缺氧有可能是中耳胆脂瘤发病机制中的一个诱因.     

兔脑出血灶周缺氧诱导因子-1α、IL-6表达的实验研究

目的 探讨缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible facor-1α，HIF-1α）、IL-6在脑出血灶周的表达，并探讨其表达的意义。方法 家兔28只，分为A、B、C、D4组，A组4只为对照组，B、C、D各8只，采用不同量的新鲜动脉血制作脑出血模型。应用免疫组化技术检测家兔脑出血模型灶周脑组织中HIF-1α、IL-6的表达。结果 各组脑出血灶周组织中HIF-1α、IL-6的表达有显著意义（P〈0．05）。结论 脑出血灶周存在HIF-1α、IL-6表达，为判断脑出血灶周缺血半暗带的存在提供了依据；HIF-1α可能具有神经细胞保护作用。     

大鼠肺动脉平滑肌细胞原代培养及低氧对缺氧诱导因子- 1α的影响

目的获得活力稳定、高度纯化的体外培养大鼠血管平滑肌细胞,为肿瘤研究提供实验材料;并探讨低氧对抗肿瘤药物研究新靶点：缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的影响。方法无菌下取SD大鼠心肺组织,然后分离出肺动脉段,分离肺动脉中膜层,用组织块贴壁法培养,倒置相差显微镜观察细胞形态、普通免疫组织化学法（SP法）进行细胞鉴定。随后,将体外培养的大鼠PASMCs,设计常氧组、低氧组H2,H6,H12,H24,用Western blotting法检测HIF-1α的蛋白表达。结果用组织贴块法成功培养大鼠PASMCs,得到生长稳定、纯度高的PASMCs,且培养与纯化可以同时进行,可获得稳定传代的细胞;HIF-1α蛋白在常氧组有少量表达,在低氧条件下,其表达明显增加。结论成功建立体外大鼠肺动脉平滑肌细胞原代培养模型;低氧条件下促进其中HIF-1α的表达;这提示HIF-1α蛋白的表达可能是肿瘤细胞适应缺氧环境的重要原因。     

缺血预处理诱导PC12细胞对缺血的耐受与缺氧诱导因子-1α的表达

目的:在PC12细胞水平上研究缺血预处理诱导的缺血耐受与缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达。方法:采用氧葡萄糖剥夺(OGD)的方法建立PC12细胞缺血模型。用MTT比色分析法观察随缺血时间的延长,细胞存活率的变化,观察短时间缺血预处理(IP)是否能在24h后诱导细胞耐受长时间的缺血。用WesternBlot法检测缺血预处理后HIF-1α的表达。结果:随缺血时间的延长,细胞存活率逐渐下降,缺血6.0h和9.0h存活率较低(P<0.01)。IP0.5h,IP1.0h和IP1.5h后间隔24h分别再经缺血6.0h和9.0h,细胞存活率均显著高于单纯缺血组,其中IP1.0h组高于IP0.5h组,IP1.5h组高于IP1.0h组。IP1.0h和IP1.5h组HIF-1α蛋白的表达均明显增加,IP1.5h组的蛋白表达量比IP1.0h组高(均P<0.01)。结论:IP0.5h和IP1.0h,IP1.0h和1.5h分别可以诱导PC12细胞对缺血6.0h和9.0h的耐受,其中IP1.0h对缺血6.0h的保护作用比IP0.5h强;IP1.5h对缺血9.0h的保护作用比IP1.0h强,与IP1.5h时HIF-1α蛋白表达高有关。     

缺氧诱导因子-1α和Endostatin在乳腺浸润性导管癌中的表达及相关性

目的:探讨乳腺浸润性导管癌组织中缺氧诱导因子-1α和Endostatin的表达、两者的内在相关性及其与乳腺癌生物学行为之间的关系。方法:采用免疫组织化学SP方法,检测86例乳腺浸润性导管癌和12例乳腺良性肿瘤组织中缺氧诱导因子-1α和Endostatin的表达。结果:86例乳腺浸润性导管癌组织中缺氧诱导因子-1α阳性表达率为52.33%(45/86),Endostatin阳性表达率为46.51%(40/86),两者在乳腺良性肿瘤组织中均不表达(0/12);缺氧诱导因子-1α和Endostatin的表达率显著高于乳腺良性肿瘤组织,缺氧诱导因子-1α和Endostatin表达率与乳腺浸润性导管癌患者临床分期、病理组织学分级、肿瘤大小、淋巴结转移、5年生存率密切相关(P<0.01),缺氧诱导因子-1α的表达和Endostatin呈负相关(P<0.01)。结论:在乳腺浸润性导管癌组织中,肿瘤血管生成通过缺氧诱导因子-1α上调肿瘤的血管生成因子,或血管生成抑制因子Endostatin下调肿瘤的血管生成因子,来实现肿瘤组织的恶性发展或好转。缺氧诱导因子-1α和Endostatin的表达可能成为评价乳腺浸润性导管癌临床分期、病理组织学分级、肿瘤大小、淋巴结转移、5年生存率等生物学重要指标。     

缺氧诱导因子-1α及血管内皮生长因子在食管癌中表达相关性及其意义

目的：探讨缺氧诱导因子1α（HIF—1α）和血管内皮生长因子（VEGF）在食管癌组织中的表达及其相关性。方法：对48例食管癌患者手术切除后的标本连续切片和HIF—1α、VEGF免疫组织化学检测。结果：HIF-1α蛋白呈高表达,阳性率为66．7％,VEGF阳性表达率为60．4％。VEGF阳性表达与HIF—1α阳性表达程度呈正相关。结论：联合检测食管癌组织中VEGF和HIF—1α的表达。可能预测食管癌的侵袭转移。     

缺氧诱导因子-2α在胃癌组织中的表达及与肿瘤细胞凋亡的关系

目的检测胃癌组织中缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)、肿瘤细胞凋亡率及凋亡基因生存素(Survivin)、Bcl-2、p53的表达,分析HIF-2α与胃癌细胞凋亡的关系,并探讨临床意义。方法免疫组化染色(SP)法检测38例胃癌组织(其中30例有癌旁组织)标本癌旁组织石蜡标本HIF-2α、Survivin、Bcl-2、p53的表达情况;TUNEL法检测胃癌细胞的凋亡情况并计算凋亡指数(AI)。结果胃癌组织中HIF-2α、Survivin、Bcl-2、p53阳性表达率分别为84.21%(32/38)、76.32%(29/38)、73.68%(28/38)、52.63%(20/38),癌旁组织中四种蛋白阳性率则分别为30.00%(9/30)、33.33%(10/30)、36.67%(11/30)、40.00%(12/30)。HIF-2α、Survivin、Bcl-2在胃癌组织中表达强度高于癌旁组织(P<0.05),而p53在胃癌组织中表达与癌旁组织差异无统计学意义(P>0.05)。TUNEL结果显示HIF-2α强表达组的胃癌细胞凋亡指数明显高于HIF-2α弱表达组(P<0.05)。Spearman相关分析显示,肿瘤组织中HIF-2α与Survivin、Bcl-2表达分别存在正相关关系(P<0.05),Survivin与Bcl-2表达有正相关关系(P<0.05)。结论 HIF-2α在胃癌组织中表达增强,HIF-2α可能通过调节凋亡基因Survivin、Bcl-2表达而促进胃癌细胞的凋亡抵抗能力。     

缺氧诱导因子-1α在前置胎盘组织中的表达及临床意义

目的检测缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)在前置胎盘组织的表达水平,分析其临床意义。方法选取我院产科诊治的121例前置胎盘患者作为观察组对象,选举同期120例正常孕妇胎盘组织作为对照组,应用免疫组化法和RT-PCR法检测胎盘组织中HIF-1α阳性表达水平,对比分析两组间HIF-1α阳性表达率和表达量的差异性。结果观察组患者HIF-1α阳性表达率、IOD均值以及HIF-1αm RNA/β-actin比值均显著高于对照组,经统计学分析,P<0.05,差异具有显著性。结论 HIF-1α在前置胎盘孕妇的胎盘组织中阳性表达率显著升高,其可作为早期诊断前置胎盘的指标之一。     

心肌转染缺氧诱导因子-1α对大鼠心肌梗死的影响

目的评价心肌内注射缺氧诱导因子(HIF)-1α进行基因转染对大鼠心肌梗死的影响,包括HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)的基因表达、血中VEGF水平、心肌毛细血管密度以及心肌梗死面积的变化。方法选择体质量在250~350 g的雄性大鼠72只进行实验,分为3组,第1组为转染腺病毒HIF-1α的Ad-HIF-1α组;第2组为转染空质粒的Ad-null组(转染空质粒组);第3组为假手术组。每组以术后的不同时间处死取材分3,7,14 d 3个亚组,每个亚组8只。建立心肌梗死模型。当左前降支被结扎后,在室游离壁的3个不同部位分别注射50μg Ad-HIF-1α和50μg的Ad-dull,然后关胸缝合。假手术组不结扎左前降支。分别在转染3、7及14d后观察HIF-1α和VEGF的基因表达、血中VEGF水平、心肌毛细血管密度以及心肌梗死面积的变化。结果转染腺病毒HIF-1α基因的心肌组织中第3天即可测出478 bp的HIF-1α及291 bp VEGF部分转录产物,第7、14天检测仍有表达,而Ad-dull组的心肌组织有表达,但相对于转染腺病毒HIF-1α基因的心肌组织表达明显较弱;血中VEGF水平在Ad-HIF-1α组比Ad-null组在37、d升高更显著(P<0.01);心肌转染组的毛细血管密度与未转染组相比明显增加(P<0.01);转染14 d后的心肌梗死面积在转染组为(23.8±2.2)%,明显小于对照组的(38.7±3.1)%(P<0.01)。结论心肌内注射HIF-1α进行基因转染可以增加HIF-1α和VEGF的基因表达,血中VEGF水平升高,心肌毛细血管密度明显增加,心肌梗死面积明显减少。