端粒酶HTRT在鼻咽癌及癌前病变中的表达

目的观察端粒酶HTRT在鼻咽癌及癌前病变中的表达,探讨其在鼻咽上皮癌变中的可能作用.方法运用免疫组化(LSAB)法检测端粒酶HTRT在正常鼻咽黏膜、鼻咽黏膜异型增生和鼻咽癌组织中的表达.结果鼻咽正常黏膜全部为阴性,异型增生鼻咽组织阳性表达率较低,而鼻咽癌组织HTRT阳性表达率明显升高,但其表达与肿瘤分化程度、临床分型及淋巴结转移不相关.结论HTRT表达在鼻咽癌发生中起一定作用.     

鼻咽癌中Rad52的表达及其临床意义

目的：研究同源重组修复相关基因Rad52在鼻咽癌组织中的表达并探讨其临床意义。方法：采用免疫组织化学三步法检测38例鼻咽癌患者癌组织及其相应存在的癌旁组织的Rad52蛋白的表达,并比较其表达结果,分析癌组织中Rad52的表达与患者的临床资料（如性别、年龄、临床分期等）的关系。结果：鼻咽癌组织与癌旁黏膜的Rad52蛋白表达相比差异有统计学意义（P〈0.05）。Spearman等级相关分析显示,癌组织中Rad52蛋白表达情况与患者的临床分期呈负相关性（P〈0.05）,而与患者的性别、年龄、复发率、淋巴结转移率等无显著相关性（P〉0.05）;生存分析显示,Rad52蛋白的高表达对患者的生存时间有显著影响（P〈0.05）。结论：Rad52蛋白对鼻咽癌患者的治疗效果及预后评估有重要意义。     

鼻咽癌肿瘤c—myc基因表达及p16基因失活的研究

目的 以原发性鼻咽癌为研究对象,探讨ｐ１６抑癌基因,ｍｙｃ家族癌基因在鼻咽癌发生、发展及其生物学行为的变化规律。方法 用多重聚合酶链反应（ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ,ＭＰＣＲ）,限制性内切酶ＰＣＲ、免疫组化及逆转录ＰＣＲ（ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ ＰＣＲ,ＲＴ ＰＣＲ）方法,检测６９例鼻咽癌活检肿瘤组织中,Ｐ１６基因纯合缺失、甲基化、ｐ１６基因蛋白表达（免疫组化）、ｃ－ｍｙｃ基因表达等情况。结果 Ｐ１６基因纯合缺失７例,甲基化１１例,总失活率为２６．１％（１８／６９）。免疫组化检测ｐ１６基因蛋白表达阴性６０．９％（４２／６９）;阳性３９．１％（２７／６９）。ＲＴ ＰＣＲ,ｍｙｃ基因检测表达结果７３．９％（５１／６９）,无表达者２６．１％（１８／６９）。     

Tiam1基因表达与鼻咽癌浸润转移的关系

目的:探讨Tiam1基因表达与鼻咽癌浸润转移的关系。方法:应用RT-PCR技术,对41例鼻咽癌组织和20例正常鼻咽部组织进行Tiam1mRNA表达水平的检测。结果:41例鼻咽癌组织的Tiam1mRNA平均表达水平(1.83±0.73)明显高于正常鼻咽部组织(0.87±0.45)(P<0.01);鼻咽癌组织中Tiam1mRNA高表达率与临床分期、T分级呈正相关;有淋巴结转移者Tiam1mRNA高表达率为59.3%(16/27),无淋巴结转移者为21.4%(3/14),二者之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Tiam1基因在鼻咽癌组织中的表达明显高于正常鼻咽部组织,其过表达与鼻咽癌浸润转移呈正相关。     

CHFR基因在鼻咽癌中异常甲基化的研究

目的:检测鼻咽癌中CHFR基因的转录表达及其启动子区甲基化状态,探讨其在鼻咽癌中的转录失活机制及其意义;评价鼻咽拭子检测CHFR基因甲基化状态在鼻咽癌诊断和治疗中的意义。方法:RT-PCR检测鼻咽癌细胞株中CHFR基因的转录表达水平。甲基化特异性PCR检测鼻咽癌细胞株、鼻咽癌活检组织、正常鼻咽组织及配套的鼻咽拭子样本中CHFR基因的甲基化状态。亚硫酸氢盐测序分析鼻咽癌细胞株和鼻咽癌组织、正常鼻咽组织中CHFR基因启动子区的具体甲基化状态。5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-dC)处理鼻咽癌细胞株后观察CHFR基因转录表达水平的改变情况。结果:CHFR基因在鼻咽癌细胞株中转录表达下调或沉默;CHFR基因在鼻咽癌细胞株和鼻咽癌组织中均呈高频率、肿瘤特异性的甲基化。鼻咽癌患者鼻咽癌组织和配套鼻咽拭子样本中CHFR基因的甲基化频率分别为65.5%和63.8%,两者符合率达86.2%。鼻咽癌组织和细胞株中CHFR基因启动子区大部分的CpG位点为甲基化,而正常组织全为非甲基化;5-aza-dC可显著恢复鼻咽癌细胞株中CHFR基因的转录表达。结论:鼻咽癌中CHFR基因由于启动子区CpG岛的DNA甲基化而转录表达下调。鼻咽...     

CK13基因与EB病毒DNA在鼻咽癌中的表达及临床意义

目的 探讨细胞角蛋白基因13（CK13）和EB病毒DNA在人鼻咽癌（NPC）组织中的表达及意义。方法 应用Northern杂交对32例NPC和8例慢性鼻咽炎（CINE）组织进行CK13mRNA水平检测,同时应用PCR方法进行EB病毒DNA检测。结果 ＣＫ１３基因在鼻咽炎组织中高表达,在ＮＰＣ组织中的表达显著下调。下调的频率达６５.63%(21/32)。结论 ＮＰＣ组织的分化可能与ＣＫ１３基因的表达下调有关。     

nm23-H1基因表达与鼻咽癌浸润转移的关系

nm23-H1是对肿瘤细胞有转移抑制作用的基因,目前在国内外多种肿瘤的研究中证实其与肿瘤细胞浸润、转移有关[1,2],nm23-H1基因突变、蛋白表达异常在鼻咽癌浸润转移中的研究有少量报道[3,4].     

Fas基因与EB病毒感染及鼻咽癌的关系

探讨凋亡相关基因Ｆａｓ与ＥＢ病毒感染及鼻咽癌发生的关系。方法应用免疫组化和ＰＣＲ技术分别检测４６例鼻咽癌组织中Ｆａｓ和ＥＢ病毒潜伏膜蛋白的表达水平及ＥＢ病毒ＤＮＡ。化：Ｆａｓ表达异常可能与鼻咽上皮癌变有关;ＥＢ病毒对Ｆａｓ表达可能有抑制作用。     

中晚期鼻咽癌中核苷酸切除修复交叉互补基因1表达与铂类药物疗效的相关性研究

目的:探讨中晚期鼻咽癌组织中核苷酸切除修复交叉互补基因1(ERCC1)的表达,并分析其表达与铂类药物化疗疗效的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测107例中晚期鼻咽癌组织及48例癌旁组织中的ERCC1的表达情况。结果:ERCC1在鼻咽癌组织中低表达55例,高表达52例,而癌旁组织中低表达30例,高表达18例,2组差异无统计学意义。ERCC1表达与鼻咽癌患者临床综合分期有关,与年龄、性别、组织学类型、T分期、N分期均无关。ERCC1低表达病例近期治疗有效率(81.8%)比高表达病例近期有效率(63.5%)高,二者差异有统计学意义。97例随访,2例发生死亡,5例发生肝或肺转移,ERCC1不同组间的差异无统计学意义。结论:ERCC1蛋白可作为预测鼻咽癌患者对铂类药物化疗敏感性的指标之一,也有助于肿瘤患者个体化治疗方案制定,而免疫组织化学检测亦是简便而有效的检测手段,值得广泛推广。     

DNA repair capacity in lymphocytes of nasopharyngeal cancer patients

Possible hereditary factors in the tumorigenesis of nasopharyngeal cancer (NPC) have not yet been clearly identified. In the present study, the DNA repair capacity of lymphocytes after exposure to the nitrosamine NDEA was quantified in order to elucidate whether this measure may be a factor in susceptibility to NPC. The alkaline single-cell microgel electrophoresis (Comet) assay was used to quantify chemically induced DNA damage and repair capacity in lymphocytes of 30 NPC patients (NPC) and 29 non-tumor donors (NTD). The induction of DNA single strand breaks, alkali labile and incomplete excision repair sites after exposure of lymphocytes to NDEA was assessed as differences between repair intervals of 0 min, 15 min, 30 min and 60 min, respectively. A RC_total was assessed using the difference between the OTMs of 0 min of repair time and the 60-min repair interval for both groups. Repair capacities (RC) were calculated for the intervals according to the Olive Tail Moment (OTM), a quantitative measure for DNA migration in the Comet assay for the group of NPC patients and the NTD, accordingly. RCs were compared between the two groups using the Mann-Whitney U-Test. RC_{15 min}, RC_{30 min} RC_{60 min} and the RC_total after a 60-min repair interval demonstrated no significant difference between the two groups. Furthermore, when comparing grades of DNA migration (OTM<2, 2–5, 5–10, 10–20, 20–30 and >30), there were no differences evident. In this investigation, rejoining of DNA single strand breaks in lymphocytes of NPC and NTD appeared to be accomplished to an equal degree and in equal time periods. However, the applied method does not give evidence concerning the quality of the single strand break rejoining processes. In this group of patients, tumorigenesis in NPC could not be associated with a decreased DNA repair capacity.     

鼻咽癌干细胞miRNA表达特征研究

目的 探讨鼻咽癌干细胞的miRNA表达特征.方法 分离扩增CNE2细胞株鼻咽癌干细胞,流式细胞术检测其干细胞标志物CD133和CD44表达活性,并与鼻咽癌细胞6 10B、5-8F、CNE1、CNE2、HONE1及鼻咽上皮细胞NP69进行对比分析,继行肿瘤相关miRNAs的qRT-PCR检测.同时,在以免疫组化法检测不同临床分期鼻咽癌原发灶组织CD133和CD44表达活性基础上,qRT-PCR法分析其特异性miR 200b表达特征及其与临床分期的相关性.结果 CNE2鼻咽癌干细胞以CD133标志物为突出特征,联合检测CD44具有更高敏感性和特异性;在所检测的肿瘤相关miRNAs中,鼻咽癌干细胞以miR 200b活性低下甚至缺失为基本特征,甚至低于高转移潜能鼻咽癌细胞5 8F.鼻咽癌原发灶组织标本干细胞标志物也以CD133为突出特征,并平行表现与临床分期相关的鼻咽癌干细胞特异性miR 200b活性显著低表达趋势.结论 鼻咽癌干细胞以CD133为特征性标志物,miR-200b活性特异性低表达甚至不表达,可能是其特征性分子靶点。     

端粒酶hTRT mRNA在口腔癌前病变中的表达

目的探讨端粒酶hTRT mRNA在口腔癌前病变中的表达相关性。方法采用原位杂交方法检测病变组织中hTRT mRNA的表达水平。其中非典型增生18例、单纯性增生5例、肿瘤周围邻近组织5例、正常口腔黏膜2例，共30例口腔病理标本。结果55．6％非典型增生（10／18）、20％单纯性增生（1／5）、20％肿瘤周围邻近组织（1／5）、0％正常口腔黏膜（0／2）端粒酶hTRT mRNA显示阳性表达。其中重度非典型增生与轻度及中度非典型增生之间端粒酶hTRT mRNA表达差异有显著性意义（P〈0．05）。结论端粒酶hTRT mRNA在口腔癌前病变中有表达。端粒酶活性的激活可能发生在口腔癌前病变晚期。其活性的激活是口腔癌前病变恶变及恶性肿瘤形成的重要因素。     

基质金属蛋白酶2在鼻咽癌组织中的表达及其与肿瘤细胞生物学行为的关系

目的研究基质金属蛋白酶2（MMP2）在鼻咽癌组织中的表达及其与鼻咽癌细胞生物学行为的关系。方法采用免疫组化Elivision Plus二步法对50例鼻咽癌组织、15例炎性鼻咽黏膜组织的MMP2表达活性进行检测与比较。结果鼻咽癌组织中的MMP2表达显著高于炎性鼻咽黏膜组织（P〈0.05）,并随鼻咽癌临床浸润分期的升高和淋巴结转移的发生而上调,差异具有统计学意义（P〈0.01）。结论MMP2在鼻咽癌细胞突破基底膜向外扩散及转移中可能起着重要作用,对于判断鼻咽癌细胞的侵袭性及估计其预后中有一定意义。     

表皮生长因子受体在鼻咽癌及癌前病变组织中的表达

运用免疫组织化学标记链霉菌素－生物素技术，检测表皮生长因子受体在正常备咽粘膜、鼻咽粘膜异型增生和鼻咽癌中的表达。发现鼻咽正常粘膜全部为阴性，异型增生阳性表达率较低，而一旦鼻咽粘膜癌变后，表达率明显升高。ＥＧＦＲ的表达与鼻咽癌的低分化性相关，ＥＧＦＲ表达的肿瘤易发生淋巴结转移，５年生存率较低。提示ＥＧＦＲ的表达与鼻咽癌的发生有一定关系，并可作为判断鼻咽癌生物行为和预后的一个有用指标。     

EB病毒在鼻咽癌发生中的作用

目的 :探讨鼻咽癌 (NPC)组织及患者外周血白细胞和血清中EB病毒DNA的分布及其与NPC的关系。方法 :采用多聚酶链反应 (PCR)检测 39例NPC组织 (NPC组 1)中EB病毒DNA ,2 4例NPC患者 (NPC组 2 )外周血白细胞及血清中EB病毒DNA ,2 0例慢性鼻咽炎组织 (对照组 1)中EB病毒DNA ,10例头颈部其他部位肿瘤患者 (对照组 2 )和 10例慢性鼻咽炎患者 (对照组 3)外周血白细胞及血清中EB病毒DNA ;同时采用免疫酶法检测NPC组 2、对照组 2和对照组 3血清中EB病毒VCA IgA抗体效价。 结果 :NPC组 1EB病毒DNA阳性率为 71.8% (2 8/ 39) ,对照组 1阳性率为 15 .0 % (3/ 2 0 ) ,其差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;NPC组 2外周血白细胞中EB病毒DNA阳性率为 4 1.6 7% (10 / 2 4 ) ,对照组 2阳性率为 10 .0 0 % (1/ 10 ) ,对照组 3外周血白细胞中EB病毒DNA为阴性 ,NPC组 2分别与对照组 2和对照组 3比较 ,差异均有统计学意义 (均P <0 .0 5 ) ;NPC组 2、对照组 2和对照组 3血清中EB病毒DNA均为阴性 ;NPC组 2血清中EB病毒VCA IgA抗体效价分别与对照组 2和对照组 3比较 ;差异均有统计学意义 (均P <0 .0 1)。结论 :NPC组织中检测出EB病毒DNA的阳性率较高 ,外周血白细胞中阳性率较低 ,血清中未能检测出EB病毒DNA ,说明EB病毒从癌组织—→外     

声带癌前病变及癌变动态喉镜追踪观察

目的　探讨动态喉镜下声带癌前病变的表现及其在癌变追踪中的观察价值。方法　用动态喉镜检测声带癌前病变 5 2例 ,观察静态图像及动态图像中粘膜波及振幅的改变 ,并追踪观察癌变 1～ 5 5年。结果　声带癌前病变 5 2例中粘膜波消失或减弱占 86 3% (45 / 5 2 ) ,振幅减弱占 9 6 %(4/ 5 2 )。发现癌变 (声门癌 )T114例 ,粘膜波消失 10 0 %、振幅消失或减弱 10 0 %。结论　动态喉镜可用于声带癌前病变与早期声门癌的鉴别诊断 ,并作为癌变追踪观察的一种简便监测手段。     

声带癌前病变及癌变动态喉镜追踪观察

目的 探讨动态喉镜下声带癌前病变的表现及其在癌变追踪中的观察价值。方法 用动态喉镜检测声带癌前病变５２例,观察静态图像及振幅的改变,并追踪观察癌变１～５．５年。结果 声带癌前病变５２例中粘膜波消失或减弱占８６．３％（４５／５２）,振三弱占９．６％（４／５２）,发现癌变（声门癌）Ｔ１１４例,粘膜波消失１００％,振消失或减弱１００％。结论 动态喉镜可用于声带癌前病变与早期声门癌的临别诊断,并作为癌变追     

p38MAPK信号传导通路关键靶点基因及肿瘤坏死因子在鼻息肉组织中的表达与意义

目的探讨p38MAPK信号传导通路关键靶点基因及TNF-α在鼻息肉发病机制中的介导与调控作用。方法35例鼻息肉标本及15例下鼻甲组织标本，常规HE染色鉴别嗜酸性粒细胞浸润情况，免疫组织化学S-P法检测p38MAPK、P-p38MAPK、TNF-α的活性表达程度，并进行图像分析。结果鼻息肉组中p38MAPK、P-p38MAPK及TNF-α的表达活性均明显高于下鼻甲组（P〈0．05），而且p38MAPK及TNF－α表达干胞浆中，P-p38MAPK主要表达干胞核；p38MAPK、P-p38MAPK及p38MAPK及TNF-α蛋白的表达具有相关性。在对照标本，没有或仅少量表达p38MAPK、P-p38MAPK及TNF-α。结论在鼻息肉的发病机制中，p38MAPK信号传导通路处于激活状态，并且可能通过TNF-α蛋白表达活性的增强而加剧黏膜炎症反应，促进鼻息肉的发生与发展。