慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织自噬相关蛋白的变化

目的研究在慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)大鼠肺组织中自噬相关蛋白的变化。方法单纯烟熏法构建慢阻肺大鼠动物模型,采用Real time PCR,Western blot技术检测检测大鼠肺组织中PI3K、AKT、p-AKT、m TOR、p-m TOR及自噬相关基因LC3Ⅱ/Ⅰ、Atg5、Beclin1、P62、Atg7、Atg12的mRNA及蛋白表达,探讨在慢阻肺大鼠肺组织中自噬水平及自噬相关蛋白的变化。用LC3B免疫组化比较COPD组与正常大鼠间自噬水平的变化。结果 Real time PCR分析结果显示,与正常组相比,慢阻肺组大鼠肺组织中自噬相关基因Beclin1、Atg5、Atg12的mRNA表达显著增高(P0.05,其中Beclin1、Atg5两组比较P0.01)。Atg7的mRNA表达在慢阻肺组与正常组之间差异无统计学意义(P0.05)。Western blot分析结果显示,慢阻肺组大鼠肺组织中PI3K蛋白、p-AKT/AKT及p-m TOR/m TOR蛋白表达显著降低(P0.05)。自噬相关基因LC3Ⅱ/Ⅰ、Atg5、Beclin1蛋白表达增高(P0.05,其中LC3Ⅱ/Ⅰ、Atg5两组比较P0.01)。P62蛋白表达显著下降(P0.01)。LC3B免疫组化显示,慢阻肺组LC3B表达高于正常组。结论烟熏12周的慢阻肺大鼠与正常组相比,自噬通路上游蛋白PI3K、p-AKT/AKT、p-m TOR/m TOR的表达降低,自噬蛋白表达增加,自噬水平增加。     

体外培育牛黄对慢阻肺大鼠IL-17及Caspase-3的干预作用研究

目的:探讨体外培育牛黄对慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)大鼠血清及肺泡灌洗液中IL-17含量及肺组织中Caspase-3表达情况的干预作用。方法:50只雄性SD大鼠随机分正常对照组(A)、慢阻肺模型组(B)、牛黄干预组(C)、激素干预组(D)、牛黄+激素干预组(E)。B、C、D、E组以烟熏联合脂多糖制备慢阻肺模型。每次烟熏前1 h各组分别给予相应的药物进行干预,造模后比较5组大鼠血清及肺泡灌洗液IL-17含量、肺组织病理改变及Caspase-3表达情况。结果:5组大鼠IL-17含量除C组和D组尚不能认为组间差异有统计学意义外(P0.05),余各组间差异有统计学意义(P0.05);5组大鼠以免疫组化技术检测Caspase-3表达,各组多重比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论:牛黄及布地奈德可使IL-17水平降低,有减轻炎症反应的作用;并可减少肺组织中Caspase-3表达,有抑制大鼠肺泡上皮细胞凋亡的作用。     

阿奇霉素经 TLR-4／NF-κB信号通路干预COPD大鼠炎症的机制研究

目的：探讨阿奇霉素通过TLR‐4／NF‐κB信号通路干预慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠炎症的机制。方法36只SD大鼠分为健康对照组、模型组、阿奇霉素组。模型组及阿奇霉素组采用烟熏联合气管内滴入脂多糖1个月建立COPD大鼠模型。阿奇霉素组烟熏前30 min给予50 mg／kg阿奇霉素灌胃,健康对照组及模型组给予等量生理盐水。1个月后,处死大鼠,苏木素‐伊红（HE）染色观察肺组织病理形态;ELISA法检测肺组织匀浆中肿瘤坏死因子‐α（TNF‐α）、IL‐1β、IL‐6水平;RT‐PCR检测Toll样受体4（TLR4）及核因子‐κB（NF‐κB）、磷酸化p65（pp65） mRNA表达;Western blot检测 TLR4、pp65、基质金属蛋白酶2（MMP‐2）及MMP‐9表达水平。并对大鼠支气管肺泡灌洗液进行细胞分类和计数。结果与模型组比较,阿奇霉素组能改善肺组织形态,降低中性粒细胞数（P＜0．01）,减少肺组织匀浆中 TNF‐α、IL‐1β、IL‐6、MMP‐2及MMP‐9的分泌（P＜0．01）,并抑制TLR4表达及pp65（P＜0．01）。结论阿奇霉素能通过TLR‐4／NF‐κB信号通路干预COPD大鼠炎症。     

辛伐他汀对慢性阻塞性肺疾病大鼠基质金属蛋白酶及炎症因子表达的影响

目的探讨辛伐他汀早期干预对慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)大鼠基质金属蛋白酶(MMP)及炎症因子表达的影响。方法 40只雄性Wistar大鼠随机均分为正常组(A组)、辛伐他汀组(B组)、慢阻肺模型组(C组)及辛伐他汀干预组(D组)。C组和D组采用反复香烟烟雾暴露法制备慢阻肺模型。B组和D组大鼠采用辛伐他汀5 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃,其他两组用等体积的生理盐水灌胃,共16周。造模结束后进行大鼠肺功能检测及肺组织病理学观察。用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定肺组织匀浆中MMP-2、MMP-9、白细胞介素6(IL-6)、IL-8及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。结果 C组大鼠的气道内阻力[(0.813±0.019)cm H_2O·s~(-1)·L~(-1)]和D组大鼠气道内阻力[(0.622±0.012)cm H_2O·s~(-1)·L~(-1)]显著高于A组[(0.402±0.021)cm H_2O·s~(-1)·L~(-1)]和B组[(0.417±0.019)cm H_2O·s~(-1)·L~(-1)](P0.01)。但D组大鼠气道内阻力低于C组(P0.01)。A组和B组大鼠气道内阻力差异无统计学意义(P0.05)。C组大鼠肺组织病理切片的支气管炎症及肺气肿程度均较D组明显,A组和B组大鼠未见支气管炎症及肺气肿改变。ELISA检测结果显示:C组大鼠肺组织匀浆中MMP-2[(0.226±0.008)ng/m L]及MMP-9[(1.441±0.059)ng/m L]的含量较D组MMP-2[(0.174±0.007)ng/m L]及MMP-9[(1.094±0.047)ng/m L]的含量升高(P0.01)。C组大鼠肺组织匀浆中IL-6[(44.59±1.91)pg/m L]、IL-8[(84.30±6.56)pg/m L]及TNF-α[(40.75±1.55)pg/m L]的含量较D组IL-6[(36.14±1.41)pg/m L]、IL-8[(58.17±6.28)pg/m L]及TNF-α[(34.42±1.83)pg/m L]的含量均增高(P0.01)。结论辛伐他汀对慢阻肺者的肺部炎症有抑制作用,可降低肺内MMP及炎症因子的表达。     

HMGB1表达水平与慢性阻塞性肺病大鼠模型气道、肺血管重构的关系及其临床意义

目的：探讨慢性阻塞性疾病（Chronic obstructive pulmonary disease,COPD）大鼠模型气道、肺血管重构与高迁移率族蛋白B1（High mobility group protein B1,HMGB1）表达水平的相关性。方法：健康无特定病原体（Specific pathogen free,SPF）级SD雄性大鼠24只,分为3组,每组8只。正常对照组（A）：正常饲养6周;COPD组（B）：第 1、14天经气道内注入脂多糖（Lipopolysac－charide,LPS）溶液,200 μg/次,烟熏1 h/d,共6周;COPD并低氧组（C）：第 1、14天经气道内注入LPS,200 μg/次,熏香烟1 h/d,共6周,实验最后2周在烟熏的同时,给予18％低氧8 h/d。造模结束后观测各组大鼠气道炎症、重构以及肺小动脉的病理改变,用Western blot检测各组肺组织中HMGB1蛋白的表达。结果：①B、C组气道重构指标细支气管管壁厚度与气管外径比值（MT％）、管壁面积和气管总面积比值（MA％）与A组比较均明显增高（P<0．05）。②B、C组肌化型动脉百分比与A组相比增多（P<0.05）;C组肺小动脉管壁厚度与血管外径比值（WT％）以及管壁面积与血管总面积比值（WA％）与A组相比较均增大（P<0．05）。③Western blot电泳结果显示：B、C组HMGB1蛋白表达水平与A组相比明显增强（P<0.05）,C组较B组HMGB1蛋白表达增强（P<0.05）。结论：随着COPD疾病进展出现进行性加重的气道、肺血管重构,同时HMGB1的表达逐渐增强,说明HMGB1的表达与COPD的气道、肺血管重构有关。     

泻肺汤对肺纤维化模型大鼠炎症因子及VEGF蛋白表达的影响

目的观察泻肺汤对博莱霉素致肺纤维化模型大鼠炎症因子及血管内皮细胞生长因子(VEGF)蛋白表达的影响。方法 SPF级SD大鼠84只随机分为空白对照组,模型组,泻肺汤低、中、高剂量组,醋酸泼尼松组,每组各14只。除空白对照组外,其余各组采用气管滴注博莱霉素法制备肺纤维化大鼠模型,空白对照组气管内滴注等量生理盐水,造模24 h后,泻肺汤低、中、高剂量组用泻肺汤(剂量分别为10、20、40 g/kg)灌胃,醋酸泼尼松组用醋酸泼尼松(1.8 mg/kg)灌胃,空白对照组和模型组用等体积生理盐水灌胃,第29天处死动物。HE染色法观察肺组织的病理形态变化,酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定各组大鼠血清IL-6和IL-10的含量,实时荧光定量PCR法测定各组大鼠肺组织VEGF和Caspase-3的基因表达,蛋白质印迹(Western blot)法检测各组大鼠肺组织VEGF的蛋白表达。结果与空白对照组比较,模型组病理评分和炎细胞计数均增高,血清IL-6含量升高,肺组织caspase-3基因表达和VEGF基因表达、蛋白表达均升高,血清IL-10含量降低(P0.01)。与模型组相比,泻肺汤各剂量组肺组织VEGF基因表达显著降低,泻肺汤中、高剂量组病理评分和炎细胞计数、血清IL-6含量、肺组织caspase-3基因表达和VEGF蛋白表达均显著降低(P0.05或P0.01);而泻肺汤中、高剂量组血清IL-10含量均显著升高(P0.05或P0.01)。结论泻肺汤在肺纤维化疾病中可以延缓疾病进展,其作用机制可能是通过抑制炎症反应、细胞凋亡和血管新生达到对肺纤维化的治疗作用。     

The correlation between the expression of HMGB1 and the airway remodeling, pulmonary vascular reconstruction in rats with chronic obstructive pulmonary disease and clinical significance

目的:探讨慢性阻塞性疾病(Chronic obstructive pulmonary disease,COPD)大鼠模型气道、肺血管重构与高迁移率族蛋白B1(High mobility group protein B1,HMGB1)表达水平的相关性.方法:健康无特定病原体(Specific pathogen free,SPF)级SD雄性大鼠24只,分为3组,每组8只.正常对照组(A):正常饲养6周;COPD组(B):第1、14天经气道内注入脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)溶液,200μg/次,烟熏1 h/d,共6周;COPD并低氧组(C):第1、14天经气道内注入LPS,200μg/次,熏香烟1h/d,共6周,实验最后2周在烟熏的同时,给予18％低氧8h/d.造模结束后观测各组大鼠气道炎症、重构以及肺小动脉的病理改变,用Western blot检测各组肺组织中HMGB1蛋白的表达.结果:①B、C组气道重构指标细支气管管壁厚度与气管外径比值(MT％)、管壁面积和气管总面积比值(MA％)与A组比较均明显增高(P＜0.05).②B、C组肌化型动脉百分比与A组相比增多(P＜0.05);C组肺小动脉管壁厚度与血管外径比值(WT％)以及管壁面积与血管总面积比值(WA％)与A组相比较均增大(P＜0.05).③Western blot电泳结果显示:B、C组HMGB1蛋白表达水平与A组相比明显增强(P＜0.05),C组较B组HMGB1蛋白表达增强(P＜0.05).结论:随着COPD疾病进展出现进行性加重的气道、肺血管重构,同时HMGB1的表达逐渐增强,说明HMGB1的表达与COPD的气道、肺血管重构有关.     

哮喘大鼠模型支气管肺组织骨桥蛋白表达的变化及其调控机制的初探

目的 研究哮喘大鼠模型支气管肺组织骨桥蛋白(OPN)表达变化及其调控机制;探讨地塞米松(DXM)对哮喘大鼠模型支气管肺OPN表达的影响及其机制.方法 SD大鼠24只,随机分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、DXM治疗组(C组).以卵蛋白(OVA)致敏和激发建立大鼠支气管哮喘模型,肺组织切片用于HE染色以观察支气管组织学变化;用免疫组织化学和免疫印迹法分析三组大鼠支气管肺组织中OPN的表达及ERK、p38的磷酸化水平.结果 B组大鼠支气管肺组织OPN表达较A组增加,DXM对其表达有明显抑制作用(P<0.05);B组支气管肺组织ERK磷酸化水平较A组明显增加,DXM对其磷酸化有明显抑制作用(P<0.05);而支气管肺组织p38磷酸化水平在B组与A组之间无明显变化,但C组p38磷酸化水平明显下降.结论 DXM对OPN表达的增加有抑制作用,其可能的机制是通过ERK信号通路影响OPN的表达.     

氨茶碱和辛伐他汀对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症和气道黏液高分泌的影响

目的：观察氨茶碱和辛伐他汀对慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)的防治作用并从气道炎症和气道黏液高分泌角度探讨其作用机制。方法：采用烟熏和大鼠气管内注入脂多糖的方法建立慢阻肺模型。将40只雄性SD大鼠随机均分为对照组、慢阻肺组、氨茶碱组和辛伐他汀组。对照组和慢阻肺组用生理盐水1 mL/100 g灌胃,1次/d;氨茶碱组用氨茶碱溶液(5 g/L)1 mL/100 g灌胃,1次/d;辛伐他汀组用辛伐他汀溶液(0.5 g/L)1 mL/100 g灌胃,1次/d。用肺功能仪检测大鼠肺功能,HE染色观察大鼠支气管、肺组织病理变化,酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(IL)-8,IL-17及肿瘤坏死因子(TNF)-α含量,Western印迹法检测大鼠支气管肺组织中黏蛋白5AC和TLR4蛋白的表达,荧光实时定量(RT)-PCR检测大鼠支气管肺组织中黏蛋白5AC mRNA和TLR4 mRNA的表达。结果：慢阻肺组支气管、肺组织改变及肺功能变化符合慢阻肺病理生理特点。与对照组相比,氨茶碱组和辛伐他汀组支气管肺组织均出现不同程度的损伤,但损伤程度轻于慢阻肺组。慢阻肺组各项肺功能指标均明显低于对照组(均P<0.01),而氨茶碱组和辛伐他汀组均明显高于慢阻肺组(均P<0.01),辛伐他汀组呼气峰值流量明显高于氨茶碱组(P<0.01)。慢阻肺组BALF中IL-8,IL-17及TNF-α含量均明显高于对照组(均P<0.01),而氨茶碱组和辛伐他汀组均明显低于慢阻肺组(均P<0.01),氨茶碱组BALF中IL-8,IL-17及TNF-α含量均明显低于辛伐他汀组(均P<0.05)。慢阻肺组支气管肺组织黏蛋白5AC mRNA和TLR4 mRNA及其蛋白的表达水平均明显高于对照组(均P<0.01);而氨茶碱组和辛伐他汀组均明显低于慢阻肺组(均P<0.05),且两组间差异无统计学意义(均P>0.05)。结论：氨茶碱和辛伐他汀可降低慢阻肺模型大鼠BALF中IL-8,IL-17及TNF-α水平,抑制支气管肺组织中黏蛋白5AC和TLR4蛋白的表达,通过减轻气道炎症和气道黏液高分泌作用来达到防治慢阻肺的目的。     

参芪补肺方对慢性阻塞性肺疾病稳定期大鼠Nrf2和MUC5AC表达的影响

目的探讨参芪补肺方对大鼠肺组织Nrf2、MUC5AC的m RNA及蛋白表达水平的影响。方法将Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、中药组、可比特组。参照相关建模实验方法建立COPD肺肾气虚型大鼠模型,采用烟熏合脂多糖(LPS)气管滴入建立COPD大鼠模型,空白对照组大鼠不做任何干预,其余三组分别给予生理盐水灌胃、参芪补肺方中药汤剂灌胃、可比特雾化吸入,连续30天。实验后处死大鼠提取肺组织,用PCR法检测Nrf2和MUC5AC的m RNA表达量,用western-blot检测Nrf2和MUC5AC蛋白的表达情况。结果与空白对照组相比,模型对照组大鼠肺组织Nrf2和MUC5AC的m RNA及蛋白表达水平明显升高(P0.05),中药组和可比特组Nrf2和MUC5AC的表达水平较模型对照组显著降低(P0.05),中药组和可比特组比较无差异(P0.05)。结论参芪补肺方能够影响大鼠肺组织中的Nrf2、MUC5AC的m RNA及蛋白表达水平,从而发挥对COPD大鼠模型的抗氧化和抗粘液高分泌机制的调节作用。     

噻托溴铵对慢性阻塞性肺疾病大鼠血清、肺泡灌洗液及肺组织中IL-8、TNF-α、PLA2的影响

目的研究噻托溴铵对慢性阻塞性肺疾病（简称慢阻肺）大鼠血清、肺泡灌洗液及肺组织中炎症因子水平及肺组织病理结构的影响,以证实噻托溴铵治疗慢阻肺的抗炎作用。方法采用烟熏加气管内注入内毒素法建立大鼠慢阻肺模型。将雄性SD大鼠随机分为对照组、慢阻肺组和噻托溴铵干预组,每组10只。HE染色观察大鼠肺、支气管的病理改变,测定肺平均内衬间隔（MLI）及平均肺泡数（MAN）。行支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞计数及分类。酶联免疫吸附试验检测各组大鼠血清、BALF及肺组织中IL-8、TNF-α、磷脂酶A2（PLA2）的含量。结果慢阻肺组大鼠肺、支气管HE染色符合慢阻肺的病理改变;慢阻肺组大鼠出现明显肺气肿,噻托溴铵组也出现肺气肿,但程度较轻。慢阻肺组大鼠BALF中细胞总数、中性粒细胞及淋巴细胞比例,血清、BALF及肺组织中炎症因子水平较对照组均明显升高（P〈0.01）;噻托溴铵干预组与慢阻肺组相比,BALF中细胞总数、中性粒细胞及淋巴细胞比例,血清、BALF及肺组织中炎症因子水平均显著降低（P〈0.01）,但仍明显高于对照组（P〈0.01）。结论噻托溴铵可以通过减少炎症细胞渗出降低慢阻肺大鼠血清、BALF及肺组织中IL-8、TNF-α、PLA2水平,减轻气道及肺组织炎症,发挥抗炎作用。     

辛伐他汀对肺动脉高压大鼠趋化因子及肺血管炎症的影响研究

目的观察辛伐他汀对野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠趋化因子CCL2、FKN的表达和血管炎症的影响,探讨炎症与血管重构的关系。方法33只SD大鼠随机分为3组：野百合碱组（M组）、辛伐他汀组（S组）各12只,对照组K组）9只。M、S两组以野百合碱50mg／kg单次腹腔注射造模后s组以辛伐他汀20mg／（kg．d）灌胃,M组以等体积NS灌胃对照。C组一次性腹腔注射NS作为对照。4周后：western—blot检测肺组织CCL2、FKN蛋白表达及肺血管炎症细胞浸润情况。结果S组CCL2、FKN表达较M组明显降低（P〈0．05）,肺血管炎症浸润明显减轻。结论辛伐他汀能抑制肺动脉高压趋化因子CCL2、FKN表达,减少肺高压血管炎症侵润,一定程度上抑制肺血管重构。     

罗格列酮对慢性阻塞性肺疾病大鼠的抗炎作用

目的 研究罗格列酮对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织匀浆中白细胞介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响.方法 采用气管内滴注脂多糖联合香烟烟熏建立COPD大鼠模型.SPF级成年雄性Wistar大鼠50只随机分为5组,对照组(A组)、模型组(B组)、罗格列酮组1(C组)、罗格列酮组2(D组)、罗格列酮组3(E组),每组10只, C组、D组、E组每天上午烟熏前分别给予罗格列酮钠片0.1、0.15、0.2 mg/kg灌胃,A组、B组给予1 mL生理盐水灌胃,30 d后观察大鼠的一般状况和体重改变.采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织匀浆中IL-6、MMP-2、MMP-9及TNF-α含量,观察罗格列酮对COPD大鼠的抗炎作用.结果 实验开始前所测的各组大鼠体重差异无统计学意义(P>0.05).实验结束时,与A组体重变化相比,B组大鼠体重增长最少,C组、D组、E组次之(P<0.05).C、D、E组三组大鼠之间体重变化差异无统计学意义(P>0.05).B组肺组织匀浆中MMP-2、TNF-α的表达均较A、C、D、E组明显升高(P<0.05),C、D、E组中MMP-2、TNF-α的表达较A组升高(P<0.05),较B组减低(P<0.01),3组间差异无统计学意义(P>0.05).B组肺组织匀浆中MMP-9、IL-6的含量最高,A组最低,C、D、E组随着罗格列酮浓度的升高MMP-9、IL-6的含量逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 罗格列酮对抑制肺部炎症介质的释放、基质金属蛋白酶的产生具有重要作用,可减轻气道炎症、肺实质损伤和气道重塑.罗格列酮在COPD的防治中具有一定的作用.     

夏枯草提取物对肾草酸钙结石模型大鼠肾组织骨桥蛋白表达的影响

目的研究夏枯草50％甲醇提取物对大鼠肾组织骨桥蛋白（osteopontin，OPN）表达的影响。方法采用乙二醇和氯化铵诱导建立大鼠肾草酸钙结石模型，将24只Wistar大鼠随机分成3组：对照组（A）、结石组（B）、夏枯草组（C）。C组则通过灌胃方式予一定剂量的夏枯草50％甲醇提取物。饲养4周后，检测各组大鼠肾组织病理学改变和草酸钙结晶沉积情况。采用原位杂交RT—PCR观察各组大鼠肾组织中OPN mRNA表达，免疫组织化学和Westem blot检测各组大鼠肾组织OPN蛋白的表达水平。结果A组肾小管正常，B组肾小管腔可见大量成片草酸钙结晶存在，管腔明显扩张；C组肾小管腔可见少许散在草酸钙结晶存在，管腔轻度扩张。原位杂交显示A组大鼠肾组织中仅肾脏髓质小部分亨利氏袢中检测到OPN mRNA的表达，与此相反在B组和C组大鼠肾组织中则明显检测到OPN mRNA的表达，只是C组中OPN mRNA的表达强度相对弱于成石对照组。RT-PCR检测结果与原位杂交一致。免疫组化显示A组中仅能检测到OPN蛋白的微弱表达，B组大鼠肾组织中OPN表达则明显增强，C组大鼠肾组织中OPN表达强度低于B组。Western blotting检测显示A组轻度表达OPN，而B组则显著表达，C组表达强度低于B组。结论夏枯草50％甲醇提取物能有效抑制大鼠肾组织OPN的表达，减少肾组织草酸钙结晶的沉积，从而能有效抑制大鼠肾草酸钙结石的形成。     

罗格列酮抑制慢性阻塞性肺疾病模型大鼠炎性反应的机制研究

目的利用气管内滴注脂多糖联合香烟烟雾暴露建立慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)大鼠模型,观察罗格列酮对模型大鼠炎性反应的保护作用。方法 50只SPF级成年雄性Wistar大鼠随机均分为5组,每组各10只。利用气管内滴注脂多糖联合香烟烟熏法,在4组大鼠中构建慢阻肺模型,3个实验组分别加以0.1 mg/kg、0.15 mg/kg和0.2 mg/kg罗格列酮灌胃,共30 d;模型组、健康对照组则给予生理盐水。实验结束后,使用颈部脱臼法处死大鼠,取右肺进行苏木精-伊红染色,进行气道炎症病理评分并计算平均内衬间隔(MLI)和平均肺泡数(MAN),检测肺组织中p-Stat3和p-NF-κB表达水平。结果相对于健康对照组,模型组大鼠可见明显的气管炎性反应和肺气肿病理改变,给予梯度浓度的罗格列酮,其上述病理改变较模型组减轻,其中0.2 mg/kg罗格列酮组大鼠的气道炎症病理评分最低,但三组间MLI和MAN差异无统计学意义。相对于健康对照组,模型组大鼠气管中受浸润的淋巴组织、气管黏膜上皮及肺组织中p-Stat3和p-NF-κB表达均显著升高,给予梯度浓度的罗格列酮后,淋巴组织、气管黏膜上皮及肺组织中p-NF-κB表达下降,淋巴组织中p-Stat3下降,气管黏膜上皮及肺组织中p-Stat3表达不受影响。结论罗格列酮能通过抑制NF-κB信号通路,抑制慢阻肺肺组织中的炎性反应,从而减轻肺实质的损伤和气道炎症程度,延缓慢阻肺的进程。     

芪白平肺胶囊对慢性阻塞性肺疾病痰瘀阻肺证大鼠血清Rock-1、Rock-2表达的影响

目的:观察芪白平肺胶囊对慢性阻塞性肺疾病(COPD)痰瘀阻肺证模型大鼠肺功能、形态学改变以及对于血清Rock-1(Rho关联卷曲蛋白激酶1)、Rho关联卷曲蛋白激酶2(Rock-2)表达的影响。方法:健康SD雄性大鼠50只,随机分组为正常对照组、模型组、芪白平肺胶囊低剂量组、芪白平肺胶囊高剂量组、法舒地尔组,复制COPD痰瘀阻肺证大鼠模型,每日造模结束后予大鼠灌胃。模型组、正常组每天生理盐水灌胃10 m L/kg,芪白平肺胶囊低剂量组、芪白平肺胶囊高剂量组每天给药量分别为1000 mg/kg、250 mg/kg(含芪白平肺胶囊50 mg/m L),法舒地尔每天给药量为2 m L/kg(含法舒地尔15mg/m L),每只大鼠每日灌胃1次,直至造模结束,测定大鼠肺功能、观察肺血管重构的病理改变,ELISA检测模型大鼠血清Rock-1、Rock-2的表达。结果:模型组肺小动脉管壁变厚、管腔变小,血清中Rock-1、Rock-2较正常组含量显著升高,(P0.01);FEV0.3、FEV0.3/FVC、PEF均明显降低,差异有统计学意义(P0.01);各治疗组与模型组比较肺小动脉管壁变薄,管腔增大,血清中Rock-1、Rock-2表达水平均有不同程度下降(P0.01-0.05)。结论:芪白平肺胶囊对COPD大鼠的肺组织具有保护作用,可有效的防止痰瘀阻肺证慢阻肺模型大鼠肺功能的下降,降低COPD痰瘀阻肺证模型大鼠血清Rock-1、Rock-2表达水平。     

阿奇霉素对哮喘大鼠瘦素表达及气道炎症的影响

目的探讨阿奇霉素对肥胖哮喘大鼠气道炎症肺组织内及气道平滑肌细胞(ASMC)内瘦素表达的变化及抗炎作用。方法将大鼠随机分为正常对照组、正常哮喘组、正常干预组和肥胖对照组、肥胖哮喘组、肥胖干预组,建立肥胖、哮喘模型以及体外培养大鼠ASMC,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)及细胞上清液中瘦素浓度,Westernblot法检测肺组织和ASMC内瘦素蛋白的表达。结果肥胖对照组、肥胖哮喘组和肥胖干预组BALF白细胞总数及中性粒细胞数,肺组织瘦素蛋白表达及血清、BALF和细胞上清液中瘦素浓度与体质量正常相应组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论肥胖哮喘大鼠气道炎症肺组织内瘦素表达增加,阿奇霉素能抑制气道炎症并部分降低哮喘大鼠瘦素的表达。     

姜黄素对哮喘大鼠肺内转录因子T-bet和IFN-γ表达及气道炎症的影响

[摘要] 目的　通过观察姜黄素对哮喘大鼠肺泡灌洗液总细胞数及嗜酸性粒细胞计数、肺组织转录因子T-bet、IFN-γ表达的影响,探讨姜黄素对哮喘的治疗作用。方法　36只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、姜黄素治疗组(C组)各12只,采用卵蛋白(OVA)致敏大鼠哮喘模型,观察3组动物哮喘发作症状、肺泡灌洗液总细胞数及嗜酸性粒细胞计数情况及免疫印迹法(Western blot)测定肺组织中T-bet蛋白表达,ELISA法测定IFN-γ含量变化。结果 B组大鼠哮喘发作症状最明显,C组大鼠症状轻,A组无症状。B组肺泡灌洗液总细胞数及嗜酸性粒细胞计数均明显高于其余两组; C组明显少于B组; A组最少。肺组织中T-bet蛋白表达B组微弱表达, C组较强, A组表达最强。IFN-γ表达B组较弱， C组表达较强，A组最强。结论 姜黄素可抑制哮喘大鼠的气道炎症,其作用机制可能是通过增强转录因子T-bet的表达而导致IFN-γ表达增加来实现。 　　[关键词] 姜黄素 哮喘 转录因子T-bet IFN-γ 气道炎症     

阿奇霉素对慢阻肺大鼠肺脏病理损伤、氧化应激及TLR4/NF -B信号通路的调节作用

目的 探讨阿奇霉素(Azi)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠肺脏病理损伤、氧化应激的影响及其机制。方法 选择6～8周龄雄性SD大鼠60只,随机分为对照组(Control组)、模型组(COPD组)和治疗组1(COPD+Azi25 mg)、治疗组2(COPD+Azi 50 mg)、治疗组3(COPD+Azi 100 mg)5组。通过烟熏联合气管内滴入脂多糖的方法诱导建立大鼠COPD模型。治疗组于烟熏前30 min给予对应浓度的阿奇霉素灌胃,对照组和模型组给予等量的生理盐水,1次/d,连续4周。测定右肺湿重/干重比值(W/D);HE和MASSON染色检测肺组织病理形态及纤维化情况;Western blot检测裂解形式的半胱天冬酶3(Caspase-3)、基质金属蛋白酶9(MMP 9)的蛋白表达;RT-PCR和Western blot检测Toll样受体4(TLR4)、核因子 κB(NF κB)p65和NF -B抑制蛋白(IkBα)的mRNA及蛋白表水平;ELISA法检测肿瘤坏死因子 α(TNF α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH Px)和丙二醛(MDA)含量。 结果 与模型组相比,阿奇霉素治疗能降低W/D比值(P＜0.05);减轻肺组织充血、水肿、炎性细胞浸润和胶原沉积;下调Caspase 3、MMP-9蛋白表达(P＜0.05);降低TNF、IL-1β和IL-6含量(P＜0.05);增加SOD和GSH Px活性,降低MDA表达(P＜0.05);同时抑制TLR4、NF -B p65和IκBα的磷酸化水平(P＜0.05)。 结论 阿奇霉素能改善慢阻肺模型大鼠肺脏组织形态和纤维化,并抑制其氧化应激,这与抑制TLR4/NF -B信号通路激活有关。     

阿奇霉素对哮喘大鼠气道重塑的影响

目的探讨阿奇霉素对哮喘大鼠气道重塑的影响及其作用机制。方法将32只Sprauge-Dawley大鼠随机分为空白对照组(C组)、哮喘模型组(M组)、阿奇霉素组(A组)、地塞米松组(D组),每组8只,各组动物于末次雾化激发后24 h内处死,留取右肺组织制成病理切片,行组织病理学检查观察肺组织病理学改变;医学图像分析系统测量气道重塑参数;免疫组织化学技术检测肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)在肺组织中的表达情况。结果与C组相比,M组支气管、血管周围见大量炎性细胞浸润,气道壁增厚,胶原沉积增加,黏液分泌增多,A组和D组上述改变明显减轻;A组、D组总管壁厚度、平滑肌厚度较C组增高(P<0.01),较M组明显降低(P<0.01);A组、D组大鼠肺组织TGF-β1、MMP-9、VEGF表达水平较C组升高(P<0.01),较M组降低(P<0.01);大鼠气道平滑肌厚度与肺组织中TGF-β1、MMP-9、VEGF的表达水平呈正相关(P<0.01),肺组织中TGF-β1、MMP-9、VEGF表达水平两两相关(P<0.01)。结论阿奇霉素可改善哮喘大鼠气道重塑程度,其机制可能与下调TGF-β1、MMP-9、VEGF表达有关。