清眩润目饮对蒸发过强型干眼模型鼠角结膜炎症因子表达的影响

目的探讨清眩润目饮对蒸发过强型干眼模型鼠角、结膜炎症因子表达的影响。方法将18只SD大鼠随机分为3组,空白对照组、模型组、清眩润目饮组,空白对照组不做任何处理,其余2组采用纤维电针改良的灼烧器直接灼烧模型鼠睑板腺开口造模;清眩润目饮组予中药清眩润目饮灌胃qd,模型组以等量生理盐水灌胃qd,连续灌胃28 d。各组分别于造模前、造模后即刻、造模后4 w行角膜荧光素染色(CFS)、泪膜破裂时间(BUT)、泪液分泌量检查(SIT)。造模后28 d处死动物,并进行角、结膜炎性因子水平及相关蛋白含量测定及用光镜观察角、结膜组织病理学改变。结果 (1)CFS、BUT、SIT:造模后4 w,清眩润目饮组的CFS评分、BUT、SIT均优于模型组(P0.05),且结果与同期空白对照组接近(P0.05)。(2)各组大鼠结膜组织炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达量比较:模型组大鼠IL-1β、IL-6、TNF-α较空白对照组大鼠数值明显升高(P0.01);清眩润目饮组较模型组IL-1β、IL-6、TNF-α降低(P0.01);清眩润目饮组较空白对照组,无统计学显著性(P0.05)。(3)各组大鼠结膜组织TLR4和MYD88蛋白表达量比较:模型组大鼠TLR4、MyD88蛋白较空白对照组大鼠数值明显升高(P0.01);清眩润目饮组较模型组降低(P0.01)。(4)病理组织学检查:空白对照组实验鼠角、结膜组织内未见明显炎性细胞浸润;模型组、清眩润目饮组实验鼠角、结膜组织中均有不同程度的炎性细胞的表达,中药清眩润目饮组角、结膜炎性细胞表达明显弱于模型组。结论清眩润目饮可以减轻睑板腺功能障碍所致蒸发过强型干眼角、结膜的炎性反应,降低炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的含量,影响TLR4、MyD88蛋白质在角、结膜中的表达,其对干眼的治疗作用可能与此有关。     

养阴润目丸对干眼模型大鼠结膜上皮细胞中IL-1、TNF-α、NF-κB表达的影响

目的:研究养阴润目丸对干眼模型大鼠结膜上皮细胞中白介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核转录因子-Kappa B(NF-κB)表达的影响。方法:将SD雄性大鼠60只随机分为5组,每组12只,分别为正常组、假手术组、养阴润目丸组、新泪然组、模型组。养阴润目丸组、新泪然组及模型组3组均采用去势法制造干眼模型。治疗3个月后,取大鼠结膜上皮细胞,采用免疫组化法检测IL-1、TNF-α、NF-κB的表达。结果:养阴润目丸组和新泪然组结膜上皮细胞中IL-1、TNF-α、NF-κB的表达明显少于模型组(均P0.05)。结论:养阴润目丸能有效治疗干眼的作用机制可能与下调结膜上皮细胞中IL-1、TNF-α、NF-κB的表达有关。     

二至丸通过抑制NF-κB 通路对干眼小鼠炎症的调控研究

目的：通过对比不同剂量二至丸对东莨菪碱诱导的小鼠干眼模型干眼症状及炎症状态的治疗效 果,从而探讨二至丸在干眼中的疗效及作用机制。方法：选取30 只C57/BL6 小鼠,将小鼠分为5 组,每组 6 只,其中24 只采用皮下注射东莨菪碱的方法诱导干眼模型,最终分为：空白对照组（不建立干眼模型,口 服0.9%氯化钠溶液1 mL）,模型组（建立干眼模型后,口服0.9%氯化钠溶液1 mL）,高剂量组（建立干眼模 型后,口服高剂量二至丸12 g/kg）,中剂量组（建立干眼模型后,口服中剂量二至丸6 g/kg）,低剂量组（建立 干眼模型后,口服低剂量二至丸3 g/kg）,分别在造模前1 天,造模后隔日检测各组小鼠泪液分泌量以及角膜 荧光素染色评分的变化,并于14 d 后处死小鼠,收集角结膜组织,检测角结膜组织中炎症因子肿瘤坏死因 子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-4 表达,采用实时定量PCR 技术检测RNA 水平改变,流式细 胞仪的液相蛋白定量技术（CBA） 检测蛋白水平的改变,收集泪腺组织,采用Protein Simple 公司的Wes 全自 动蛋白质印迹定量分析系统对泪腺的核因子κB（NF-κB） 通路核心蛋白P65 以及磷酸化P65 进行胞浆和胞核 定性定量的检测验证。结果：用药14 d 后,在对干眼症状的改善方面：对比模型组,二至丸各个剂量组的泪 液分泌量及角膜荧光素染色评分均有不同程度改善（P＜0.05）,其中低剂量组与中剂量组的治疗效果相近,高 剂量组的治疗效果最佳。在对眼表炎症的改善方面：①mRNA 水平,与模型组相比,高剂量组的TNF-α、 IL-1β、IL-4 的mRNA 水平均明显下降,差异有统计学意义（P＜0.05）。高中低3 个剂量组的IL-4 的mRNA 表达水平均低于模型组,差异有统计学意义（P＜0.05）。说明不同剂量的二至丸对眼表炎症因子IL-4 的 mRNA 表达均具有抑制作用,但高剂量组同时可以抑制TNF-α、IL-1β 的mRNA 表达。②蛋白水平：高中低 3 个剂量组的TNF-α、IL-1β 蛋白表达量均低于模型组,差异有统计学意义（P＜0.05）。各实验组IL-4 蛋白 表达均小于模型组,但差异无统计学意义（P＞0.05）。提示各剂量二至丸对TNF-α、IL-1β 的蛋白表达均有抑 制作用,但对IL-4 的蛋白表达抑制作用不明显。在对泪腺炎症相关通路影响方面：高中低3 个剂量组中二至 丸均可抑制细胞浆内P65 的磷酸化及磷酸化的P65 向核内转运,从而抑制NF-κB 通路的激活。结论：二至丸 不仅可以有效改善干眼小鼠的泪液分泌和角膜荧光色素染色评分,同时也可以改善干眼小鼠眼表的炎症状态, 其对干眼小鼠的炎症抑制作用可能是通过抑制NF-κB 通路来实现。     

清热益气中药对2型糖尿病小鼠胰岛细胞凋亡及炎症因子表达的影响

目的探讨清热益气中药对2型糖尿病小鼠胰岛细胞凋亡及炎症因子表达的影响。方法随机分为对照组、模型组、格列美脲组、清热益气低剂量组、清热益气高剂量组,每组10只。对照组给予等剂量生理盐水灌胃;模型组于造模后给予等剂量生理盐水灌胃;格列美脲组于造模后给予格列美脲4 g/(kg·d)灌胃,1次/d;清热益气低剂量组于造模后按生药4 g/(kg·d)灌胃,1次/d;清热益气高剂量组于造模后按生药12 g/(kg·d)灌胃,1次/d,每组灌胃4周,每次灌胃量均为5 mL。结果与模型组比较,格列美脲组、清热益气低剂量组、清热益气高剂量组空腹血糖降低(P 0.05);清热益气高剂量组空腹血糖低于格列美脲组、清热益气低剂量组(P 0.05)。与模型组比较,格列美脲组、清热益气低剂量组、清热益气高剂量组INS降低而ISI升高(P 0.05);清热益气高剂量组INS低于格列美脲组、清热益气低剂量组,而ISI高于格列美脲组、清热益气低剂量组(P 0.05)。与模型组比较,格列美脲组、清热益气低剂量组、清热益气高剂量组CRP、TNF-α和IL-6含量降低(P 0.05);清热益气高剂量组CRP、TNF-α和IL-6含量低于格列美脲组、清热益气低剂量组(P 0.05)。结论清热益气中药可降低2型糖尿病小鼠空腹血糖、胰岛素,增加胰岛素敏感指数,降低炎症因子CRP、TNF-α和IL-6表达,具有重要研究意义。     

养阴润目丸对干眼症大鼠结膜上皮细胞IL-1β、ICAM-1、p-p38MAPK的影响

目的:探讨养阴润目丸对干眼症大鼠结膜上皮细胞白介素-1β(IL-1β)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、磷酸化-丝裂原活化蛋白激酶p38抗体(p-p38MAPK)的影响。方法:将健康雄性SD大鼠60只随机分成正常组、假手术组、养阴润目丸组、新泪然组、模型组,分别用A、B、C、D、E组表示,每组12只。A组不作处理;B组只切开阴囊,不切除睾丸;C、D、E 3组切除睾丸及附睾制备干眼症大鼠模型。造模成功7d后,各组分别给药治疗。采用Western blot方法观察给药3个月后干眼症大鼠结膜上皮细胞IL-1β、ICAM-1、p-p38MAPK的表达。结果:A、B组结膜上皮细胞中IL-1β、ICAM-1、pp38MAPK蛋白含量低,即无阳性表达,而C、D、E组结膜上皮细胞中IL-1β、ICAM-1、p-p38MAPK蛋白含量较多,呈阳性表达;C、D组结膜上皮细胞中IL-1β、ICAM-1、p-p38MAPK蛋白含量明显低于E组(P0.01);C、D组两组间差异不显著(P0.05)。结论:养阴润目丸能够下调干眼症大鼠结膜上皮细胞中IL-1β、ICAM-1、p-p38MAPK蛋白含量;干眼症的发病机制与炎症及p38MAPK信号通路相关。     

糖肾清2号对糖尿病肾病模型小鼠免疫炎性分子的调节作用

目的探讨糖肾清2号抑制糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)小鼠免疫炎性损伤的分子机制。方法将30只健康雄性KK-Ay小鼠,予高脂饲料诱导3周制备DN模型,随机分为模型组、缬沙坦组、糖肾清2号大、中、小剂量组,每组6只,另设6只C57BL/6J小鼠为正常组,正常组及模型组予去离子水0.1mL/(10g·d)灌胃;缬沙坦组给予缬沙坦13.33mg/(kg·d)灌胃;糖肾清2号大、中、小剂量组分别按含生药量40.66,20.33,10.17g/(kg·d)剂量灌胃。各组小鼠1次/d灌胃,连续干预12周。采用RT-PCR技术检测肾脏组织IL-1β、iNOS、MCP-1mRNA转录水平。Western blot技术、免疫组化测定肾脏组织iNOS蛋白表达水平。ELISA法检测血清IL-1β、MCP-1蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组IL-1β、MCP-1、iNOS mRNA转录及蛋白表达水平显著上调(P0.01,P0.05)。与模型组比较,缬沙坦组、中药各组IL-1β、MCP-1mRNA转录及蛋白表达水平显著下调(P0.01,P0.05);缬沙坦组、中药大剂量组iNOS mRNA转录水平及蛋白表达水平显著下调(P0.01,P0.05),中药中剂量组iNOS mRNA转录水平显著下调(P0.01)。与中药小剂量组比较,中药大剂量组iNOS mRNA转录水平及蛋白表达水平显著下调(P0.01,P0.05),中药中剂量组iNOS mRNA转录水平显著下调(P0.01)。结论糖肾清2号改善DN肾组织免疫炎性损伤的分子机制可能与抑制IL-1β、iNOS、MCP-1的生物活性有关。     

精草润目液治疗大鼠干眼模型的实验观察

目的探讨精草润目液对干眼大鼠模型角膜上皮和泪液分泌量的影响,为精草润目液的临床使用提供实验依据。方法清洁级SD雌雄各半大鼠60只随机分为两组,分别制作角膜上皮损伤干眼模型和泪液分泌低下干眼模型,造模成功后将各模型大鼠再随机分为空白对照组(予自制滴眼液溶剂)、阳性药物对照组(角膜上皮损伤干眼模型予0.5%羧甲基纤维素钠滴眼液,泪液分泌低下干眼模型予0.2%卡波姆滴眼液)以及精草润目液低、中、高剂量组。角膜上皮损伤模型大鼠以角膜上皮损伤评分为观察指标,泪液分泌低下模型大鼠以泪液分泌量为观察指标,均于治疗7、14、21 d时比较不同干预组的指标差异。结果在角膜上皮损伤干眼模型大鼠,治疗21 d后,高剂量组的角膜损伤评分明显低于阳性药物治疗组(P0.05)。在泪液分泌低下干眼模型大鼠,治疗21 d后,高、中剂量组泪液分泌量明显高于阳性药物对照组(P0.05),而低剂量组的泪液分泌量各时间点始终低于阳性药物对照组(P0.05)。结论精草润目液能明显增加大鼠干眼模型的泪液分泌量,并减轻角膜上皮损伤,药物疗效与药物的浓度及治疗时间相关。     

双白半水提浸膏对环磷酰胺致免疫功能低下小鼠免疫功能的影响

目的:观察双白半水提浸膏对环磷酰胺致免疫功能低下小鼠免疫功能的影响。方法:将60只小鼠随机分为空白组、模型组、对照组、给药高剂量组、给药中剂量组和给药低剂量组,每组各10只。除正常组外,其余各组连续3 d采用腹腔注射环磷酰胺制备免疫功能低下动物模型。造模成功后,空白组及模型组给予蒸馏水10 mL·(kg·d)~(-1),灌胃,每日1次;对照组给予盐酸左旋咪唑10 mL·(kg·d)~(-1),给药低剂量组给予双白半水提浸膏10 mL·(kg·d)~(-1)、给药中剂量组给予双白半水提浸膏20 mL·(kg·d)~(-1)、给药高剂量组给予双白半水提浸膏40 mL·(kg·d)~(-1),灌胃,每日1次,连续15 d。采用碳粒廓清法检测小鼠巨噬细胞能力,用称质量法测定小鼠免疫器官指数,用放免法检测小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)含量。结果:与模型组比较,给药组碳粒廓清率、胸腺、脾脏指数、TNF-α和IL-1β明显升高,差异均有统计学意义(P0.05);与给药低剂量组比较,给药高剂量组、给药中剂量组碳粒廓清率胸腺、脾脏指数、TNF-α和IL-1β升高明显,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:双白半水提浸膏能明显改善免疫抑制小鼠的免疫功能。     

红藤虎杖复方免煎剂对急性痛风性关节炎模型小鼠细胞因子表达的影响

目的观察红藤虎杖复方免煎剂对急性痛风性关节炎模型小鼠细胞因子的表达,并探讨其可能作用机制。方法将KM雌雄性小鼠各36只,称重后随机分成空白组、模型组、阳性组和中药高、中、低剂量组,正常饲养1周后,连续灌胃5 d,第6天在小鼠踝关节注射尿酸钠诱导急性痛风性关节炎模型。测定足趾容积、HE染色观察滑膜组织病理形态,以及ELISA法检测IL-1β、TGF-β1、TNF-α、IL-1、IL-8、IL-1Ra在踝关节滑膜组织中的表达。结果与空白组比较,模型组右足趾容积明显增加;IL-1、IL-1β、IL-8、TNF-α水平均显著增高(P<0.01);IL-1Ra、TGF-β1较空白组增高(P<0.05)。与模型组比较,阳性组、中药高、中剂量组右足趾容积明显降低;IL-1、IL-1β、IL-8、TNF-α水平均显著性降低(P<0.01);TGF-β1、IL-1Ra水平均显著性增高(P<0.01)。与阳性组比较,中药高剂量组IL-1显著降低((P<0.01);中药高、中剂量组IL-1β、TNF-α较阳性组降低(P<0.05);中药高、中剂量组IL-8、IL-1Ra、TGF-β1与阳性组比较无显著性差异(P>0.05);HE染色观察显示高剂量组滑膜组织炎症浸润改善明显。结论红藤虎杖复方免煎剂能治疗小鼠急性痛风性关节炎,其作用机制可能与MSU诱导的促炎细胞因子及抗炎细胞因子的产生有关,且高剂量效佳。     

桔梗总皂苷通过抑制IRG-1对呼吸道合胞病毒肺炎小鼠治疗作用的研究

目的:探讨桔梗总皂苷通过抑制免疫反应基因1 (IRG-1)对呼吸道合胞病毒(RSV)肺炎小鼠的治疗作用。方法:将60只小鼠分为对照组、模型组、利巴韦林组和桔梗总皂苷低、中、高剂量组,每组10只。除对照组外,其余各组制备RSV肺炎小鼠模型。模型制备后第2天利巴韦林组按0.150 g/(kg·d)的剂量给予利巴韦林灌胃,桔梗总皂苷低、中、高剂量组依次按照0.014 g/(kg·d)、0.028 g/(kg·d)、0.056 g/(kg·d)的剂量给予桔梗总皂苷灌胃,对照组、模型组给予等体积生理盐水。连续给药5天,计算小鼠肺指数,进行病理学检查,检测支气管肺泡灌洗液中白细胞介素-6 (IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、活性氧(ROS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及血清中IRG-1 mRNA的含量。结果:对照组小鼠肺组织未见明显异常;模型组小鼠肺组织见肺泡壁增厚,支气管和细支气管周围有大量淋巴细胞浸润,腔内有大量脱落炎细胞及渗出物,存在肺实变表现;利巴韦林组小鼠肺组织病理改变与对照组接近;桔梗总皂苷各剂量组小鼠肺泡壁部分增厚,肺泡内炎症细胞渗出较模型组轻,呈剂量依赖性。与对照组比较,模型组小鼠肺指数、IL-6、IL-1β、TNF-α、ROS含量及血清中IRG-1 mRNA相对表达量均显著增高(P<0.05)。与模型组比较,利巴韦林组和桔梗总皂苷低、中、高剂量组小鼠肺指数、IL-6、IL-1β、TNF-α、ROS含量及血清中IRG-1 mRNA相对表达量均显著降低(P<0.05)。与利巴韦林组比较,桔梗总皂苷各剂量组小鼠肺指数、IL-6、IL-1β、TNF-α、ROS含量及血清中IRG-1 mRNA相对表达量均增高,除桔梗总皂苷高剂量组肺指数及TNF-α外,差异均有统讨学意义(P<0.05)。结论:桔梗总皂苷能改善RSV感染所致的小鼠肺炎炎症反应,其机制可能与抑制IRG-1的表达有关。     

生姜油对佐剂性关节炎小鼠血清IL-1 β和IL-4的影响

目的观察生姜油对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)小鼠血清IL-1β和IL-4的影响。方法将小鼠随机分成5组,即正常对照组、AA模型组、生姜油高剂量组(1.0ml·kg-1)、生姜油低剂量组(0.5ml·kg-1)、地塞米松组(1.0ml·kg-1),然后除正常对照组外,每只小鼠右后足跖皮下注射弗氏完全佐剂(FCA)制备AA小鼠模型。致炎后第8天起开始ig给药,1次/d,连续14d。分别在致炎后第8,12,16,20天测量小鼠足肿胀度,并于第21天处死小鼠,ELISA法测血清中IL-1β和IL-4。结果生姜油1.0,0.5ml·kg-1均能明显减轻小鼠足肿胀(P<0.01或P<0.05),生姜油1.0ml·kg-1可显著降低AA小鼠血清IL-1β(P<0.05),但对IL-4无明显的影响。结论生姜油对AA有抑制作用,其抗炎机制之一可能是降低血清IL-1β水平。     

养阴益气活血方药对干燥综合征NOD小鼠血清及颌下腺TNF-α,IL-1β表达的影响

目的:观察养阴益气活血方药对于燥综合征(Sjogren's syndrome,SS),non-obese diabetic (NOD)小鼠血清及颌下腺组织肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)表达的影响.方法:32只NOD小鼠随机分为模型组、中药组、羟氯喹组、中西药组,每组8只Balb/C小鼠作为正常对照(正常组).中药组每天按100 g·kg-1灌胃养阴益气活血煎剂0.4 mL,羟氯喹组每天按照60mg·kg-1剂量灌胃羟氯喹0.4 mL;中西药组每天灌胃中药养阴益气活血煎剂(50g·kg-1)+羟氯喹(60 mg·kg-1)0.4 mL.实验进行8周后股动脉取血,处死小鼠,解剖摘取颌下腺组织,酶联免疫法检测血清TNF-α,IL-1β水平,免疫组织化学法检测颌下腺组织TNF-α,IL-1β蛋白的表达.结果:模型组NOD小鼠血清和颌下腺组织TNF-α,IL-1β水平均明显高于其他各组(P＜0.05).正常组血清TNF-α水平均低于其他各组,但与中药组无统计学意义;中药组、中西药组血清IL-1β水平低于羟氯喹组(P＜0.05),与正常组无明显差异.中药组、中西药组TNF-α蛋白表达与正常组无明显差异,而中西药组明显低于羟氯喹组(P＜0.05).中西药组IL-1β表达与正常组无明显差异.结论:养阴益气活血煎剂能下调干燥综合征NOD小鼠血清和颌下腺TNF-α,IL-1β水平,养阴益气活血煎剂可能通过调节Th1/Th2细胞因子水平,来改善颌下腺病理损害,达到治疗SS的作用.     

秦皮滴眼液对大鼠干眼模型角膜上皮损害和眼表炎症的疗效观察及机理研究

目的评价秦皮滴眼液对单纯环境因素诱导的大鼠干眼模型角膜上皮损害和眼表炎症的疗效及可能机理。方法将60只4～6周龄健康雌性Balb/c大鼠随机分为正常对照组、干眼模型组和秦皮治疗组3组,每组20只。利用温控-湿控调节系统调控环境中的温度、相对湿度制备干眼大鼠模型。正常对照组大鼠饲养于自然环境中,不予任何处理;干眼模型组大鼠饲养于温控模型房中,仅造模不予治疗;秦皮治疗组大鼠饲养于温控模型房中,造模并予以秦皮滴眼液治疗。3组大鼠分别于实验开始前和置于温控-湿控调节系统后第7 d、14 d、2l d、28 d行酚红棉线试验进行造模评估、泪液蕨样变试验、角膜苏木精-伊红染色法(HE)染色、结膜过碘酸-雪夫染色法(PAS)染色、免疫荧光染色法检测CD4+T细胞的数量。结果 (1)酚红棉线试验:14 d时干眼模型组泪液分泌较正常对照组开始减少(F=2.811,P=0.092);秦皮治疗组在21 d、28 d时与干眼模型组比较泪液分泌均有增加(F21 d=9.988,P21 d=0.002;F28 d=27.769,P28 d=0.000)。(2)泪液蕨样变试验:28 d时,干眼模型组造模大鼠泪液蕨类结晶排列明显稀疏断裂,甚至消失;秦皮治疗组在各时间点泪液蕨类结晶形态均较干眼模型组大鼠排列规则;(3)角膜HE染色:28 d时,干眼模型组大鼠角膜上皮细胞出现增生,上皮明显增厚;秦皮治疗组结构较为良好,厚度未见明显变化;(4)结膜PAS染色:28 d时,干眼模型组大鼠结膜杯状细胞数量较正常对照组减少;秦皮治疗组结膜杯状细胞数量多于干眼模型组(F=53.598,P=0.000);(5)CD4+T细胞数量:28 d时,干眼模型组大鼠结膜CD4+T细胞数量较正常对照组增多;秦皮治疗组结膜CD4+T细胞数量少于干眼模型组(F=88.229,P=0.000)。结论秦皮滴眼液可以减轻大鼠角膜CD4+T细胞浸润情况,从而抑制由于干眼引起的角膜上皮的病变和眼表炎症。     

耳聋左慈丸对老年肾虚耳聋小鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6表达影响随机平行对照研究

[目的]耳聋左慈丸干预老年肾虚耳聋小鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6。[方法]选SD大鼠60只,按随机数字表法随机分为3组,空白组,模型组、中药组,20只/组。腹腔注射氢化可的松造模,空白组、模型组:造模后5d给予生理盐水灌胃0.5 m L/只·d-1;中药组:造模后5d,按照鼠-人的折算剂量分别以不同药物灌胃,耳聋左慈丸汤剂按照中药水煎液制备,浓缩至0.3g/m L,0.5m L/只,灌胃22d。观测ABR听力,血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平。[结果]ABR听力,血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平改善中药组优于空白组、模型组。[结论]耳聋左慈丸可改善老年肾虚耳聋小鼠一般状态、降低ABR阈值、抑制TNF-α、IL-6、IL-1β表达。     

补肾解毒方影响辐射小鼠TLR4信号通路下游炎性因子表达的机制研究

目的:观察补肾解毒方对~(60)Coγ射线辐射后小鼠TLR4(Toll like receptor-4)信号转导通路下游相关炎性因子表达的影响并探讨其作用机制。方法:将背景为C57BL/10J的小鼠(TLR4~(+/+))完全随机分为TLR4~(+/+)空白对照组、TLR4~(+/+)辐射模型组、TLR4~(+/+)中药组,同等背景下TLR4基因敲除小鼠(TLR4~(-/-))完全随机分为TLR4~(-/-)空白对照组、TLR4~(-/-)辐射模型组、TLR4~(-/-)中药组。除TLR4~(+/+)空白对照组、TLR4~(-/-)空白对照组外,其余四组小鼠均一次性接受~(60)Coγ射线6Gy剂量的全身照射,观察存活情况;记录各组小鼠辐射后第1、14、30天脾脏IL-6、IL-10、IL-17、IL-18、IFN-γ、TGF-β1的数值。结果:TLR4~(+/+)辐射模型组小鼠的脾脏IL-6、IL-17、IL-18、IFN-γ在辐射后第1d、第14d与空白对照组相比均有不同程度的增加,而TLR4~(+/+)辐射模型组小鼠的IL-10和TGF-β1与空白对照组相比则有明显减少。TLR4~(+/+)中药组小鼠的IL-6和IL-10在辐射后第1d均较模型组明显恢复,IL-17、IL-18在第14d部分恢复,TGF-β1在第14d明显恢复。TLR4~(-/-)辐射模型组小鼠的各炎性细胞因子相对空白对照组亦有不同程度的变化,但TLR4~(-/-)中药组小鼠的炎性细胞因子表达相对辐射模型组无明显统计学意义。结论:补肾解毒方通过TLR4信号途径能显著减轻核辐射损伤,影响各炎性细胞因子的表达。     

搜风祛痰中药对动脉粥样硬化ApoE基因敲除小鼠IL-1β及IL-18的影响

目的 探究搜风祛痰中药对动脉粥样硬化的治疗机制。方法 将完成造模程序的ApoE基因敲除小鼠随机分为5大组别,包括模型组,中药低、中、高剂量组和西药组;空白对照组选用C57BL/6小鼠。对照组和模型组予生理盐水灌胃,中药组和西药组分别予不同剂量的搜风祛痰中药及阿托伐他汀干预。HE染色观察斑块面积,Western Blot法检测IL-1β及IL-18水平。结果 模型组较对照组斑块面积增大,且IL-1β以及IL-18指标均有一定的提高(P<0.05);中药各组及西药组较模型组斑块面积缩小,且IL-1β以及IL-18指标均有一定的降低(P<0.05);中药高剂量组与西药组IL-1β及IL-18指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论搜风祛痰中药可以实现IL-1β及IL-18的下调效果,缩小斑块面积,这或许为其治疗动脉粥样硬化的机制之一。     

白藜芦醇对溃疡性结肠炎小鼠肠黏膜细胞因子表达的影响

目的探讨白藜芦醇(Resveratro)l对溃疡性结肠炎(UC)治疗的可能机制。方法采用葡聚糖硫酸钠(Dextran sulfate Sodium,DSS)制作UC小鼠模型,小鼠随机分4成组:正常对照(NC)组、模型(MD)组、低剂量(RLD)、高剂量(RHD)白藜芦醇治疗组。造模7d同时给予干预治疗,停用造模药物并后续治疗7d。记录分析疾病活动指数(DAI),14d后处死小鼠,取结肠行HE染色;利用实时荧光定量RT-PCR法检测IL-10、TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA的表达,ELISA法测小鼠肠黏膜IL-10、TNF-α、IL-6和IL-1β蛋白水平。结果低、高剂量白藜芦醇治疗组小鼠第5～14天DAI明显低于模型组(P0.05);模型组IL-10表达明显低于正常组(P0.05),其TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA和蛋白表达则高于正常组(P0.05);低、高剂量白藜芦醇治疗组结肠IL-10mR-NA表达和蛋白水平明显高于模型组(P0.05),其TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA和蛋白水平则低于模型组(P0.05);高剂量白藜芦醇治疗组IL-10mRNA表达和蛋白水平明显高于低剂量组(P0.05),其TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA和蛋白水平则低于低剂量组(P0.05)。结论白藜芦醇可以提高抗炎细胞因子IL-10的水平并降低致炎细胞因子TNF-α、IL-6和IL-1β的水平,通过抗炎和降低肠道过度的免疫反应,对UC发挥治疗作用。     

芦丁对溃疡性结肠炎小鼠的干预作用及NLRP3炎症小体的影响

目的观察芦丁对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎小鼠的干预作用。探讨其对NLRP3炎症小体信号分子活化的影响。方法将60只SPF级C57BL/6J小鼠随机分为6组,每组10只。除空白组外,其余组均采用葡聚糖硫酸钠诱导建立溃疡性结肠炎模型,美沙拉嗪组同时给予美沙拉嗪缓释颗粒灌胃,芦丁高、中、低剂量组分别给予100 mg/(kg·d)、50 mg/(kg·d)、25 mg/(kg·d)芦丁溶液灌胃,空白组、模型组以等体积l%羧甲基纤维素钠溶液灌胃,均连续5 d。灌胃结束后,比较各组疾病活动度(DAI)评分、组织学评分,采用酶联免疫吸附法测定小鼠血清和结肠组织中白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)水平,采用qRT-PCR法检测结肠组织中NLRP3、IL-1βmRNA表达量,采用Western blot法检测结肠组织中NLRP3、Cleaved caspase-1、Cleaved IL-1β蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组小鼠DAI评分、组织学评分,血清及结肠组织中IL-1β和IL-18水平,结肠组织中NLRP3 mRNA表达量、IL-1βmRNA表达量和NLRP3、Cleaved caspase-1、Cleaved IL-1β蛋白表达水平均明显升高(P均<0.05);与模型组比较,芦丁高、中剂量组和美沙拉嗪组上述指标均明显降低(P均<0.05),且芦丁高剂量组血清及结肠组织中IL-1β和IL-18水平,结肠组织中NLRP3 mRNA表达量、IL-1βmRNA表达量和NLRP3、Cleaved caspase-1、Cleaved IL-1β蛋白表达水平均明显低于美沙拉嗪组(P均<0.05)。结论芦丁可明显改善溃疡性结肠炎小鼠临床症状,抑制黏膜炎症损伤,其作用机制可能与抑制NLRP3炎症小体的活化有关。     

柔毛淫羊藿对去卵巢小鼠骨密度、破骨细胞和IL-1β的影响

目的:探讨单味中药柔毛淫羊藿( EPM)对去卵巢小鼠骨密度、破骨细胞和白介素-1β(IL-1β)的影响.方法:切除雌性小鼠双侧卵巢制备骨质疏松动物模型,随机分为模型组、己烯雌酚( DES,2 mg·kg-1)组及EPM水煎浸膏高、中、低剂量( 200,100,50 mg·kg-1)组,另设正常对照组.术后45 d开始给予相应药物,1次/d,60d后检测小鼠骨组织骨密度、破骨细胞数和骨组织中IL-1β.结果:模型组动物呈现明显的骨质疏松表现;给药组动物骨密度增加;EPM高、中、低剂量骨组织破骨细胞数分别为(1.9±1.0),(0.9±0.6),(0.8±0.4)个,明显低于模型组(3.4±1.6)个,(P ＜0.05或P＜0.01);EPM高、中、低剂量骨组织IL-1β阳性细胞数分别为(11.6±2.1),(12.4±2.2),(16.4±2.7)个,明显低于模型组(20.6±3.2)个(P＜0.01).结论:EPM能增加去卵巢骨质疏松症小鼠的骨密度、降低破骨细胞数和IL-1β的表达.     

麇鹿角醇提液对正常小鼠IL-2和IFN-γ的影响

目的:观察麋鹿角醇提液对正常小鼠细胞因子白介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)的影响.方法:30只ICR小鼠随机分成3组:正常组、麇鹿角醇提液低剂量组(2 g·kg~(-1)·d~(-1))、高剂量组(4 g·kg~(-1)·d~(-1)),灌胃给药,连续7 d.采用ELISA法检测血清中细胞因子IL-2,IFN-γ的浓度,RT-PCR法检测脾淋巴细胞IL-2,IFN-γ mRNA的表达.结果:麋鹿角醇提液高剂量组小鼠血清中IL-2和IFN-γ的浓度升高,脾淋巴细胞IL-2,IFN-γ mRNA的表达增强.结论:麋鹿角醇提液能促进正常小鼠细胞因子IL-2,IFN-γ的分泌与表达,增强其细胞免疫功能.