7/8肾切除构建Ⅳ型心肾综合征模型

目的:探讨7/8肾切除制备稳定的Ⅳ型心肾综合征模型的可行性。方法:(1)采用7/8肾切除手术制备Sprague Dawley大鼠慢性肾脏病模型,测定血压、血清肌酐、血尿素氮及肌酐清除率,Masson染色观察肾组织纤维化情况。(2)通过心脏超声观察肾切除术后1、3、5周的心脏形态变化。(3)心肌组织进行麦胚芽凝集素染色、Masson染色及心肌肥厚指标表达测定。结果:7/8肾切除后第5周,大鼠出现血压明显升高、血清肌酐及尿素氮升高,肌酐清除率降低,同时血清磷及成纤维细胞因子23升高;肾组织形态学上表现为间质纤维化。心脏表现为左心室心肌壁增厚、质量指数增加;心肌肥厚指标心房钠尿肽及脑尿钠肽上调;心肌细胞横截面积增大、心肌组织呈现结构紊乱和间质纤维化。结论:Sprague Dawley大鼠7/8肾切除术后第5周成功制备稳定的Ⅳ型心肾综合征模型。     

3/4肾切除大鼠心脏病变及三芪口服液的调控作用

目的探讨3/4肾切除大鼠的心脏病变及三芪口服液干预的疗效。方法建立3/4肾切除大鼠并发早期心肾综合征模型,用三芪口服液治疗,并以缬沙坦作为对照组。检测血肌酐(Scr),观察心脏形态及病理变化,探讨三芪口服液的干预作用;结果模型组与空白组比较,血肌酐升高(P<0.01)、左心室/全心重(LVw/Hw)、LVw/体重(Bw)、Hw/Bw上升(P<0.01,P<0.05,P<0.05)。三芪组与模型组比较,血肌酐、LVw/Hw、LVw/Bw均较模型组减低(P<0.05,P<0.01,P<0.05),与缬沙坦组比较差异无统计学差异(P>0.05)。心肌苏木素-伊红(HE)、Masson染色方面,模型组出现心肌细胞肥大,排列不均匀,相同切片做Masson染色后,纤维排列疏松、紊乱,部分间质有蓝色胶原沉积;三芪组、缬沙坦组与模型组比较,心肌细胞肥大及排列不均匀明显改善,未见明显心肌间质胶原沉积。结论 3/4肾切除大鼠模型是早期心肾综合征的良好模型,三芪口服液可降低模型大鼠Scr水平,改善肾功能,并且能降低LVw/Hw、LVw/Bw,改善左心室重构及心肌纤维化。     

漏芦对慢性肾功能不全大鼠保护机制的研究

目的 观察漏芦对慢性肾功能不全大鼠肾功能及肾组织TGF-β1和CTGF表达的影响.方法 采用改良肾脏5/6切除术建立大鼠慢性肾功能不全模型,随机分为正常对照组(C组),非治疗组(NT组)和漏芦治疗组(RR组).RR组每天予以漏芦(15 g/kg)灌胃.治疗4 w后,检测各组大鼠的24 h尿蛋白定量、血尿素氮、血肌酐及肾硬化指数,通过免疫组化及蛋白印迹观察肾组织TGF-β1和CTGF的表达.结果 NT组大鼠的24 h尿蛋白定量、血尿素氮、血肌酐及肾脏硬化指数较C组明显增加(P＜0.01),而RR组大鼠24 h尿蛋白定量、血尿素氮、血肌酐及肾脏硬化指数较NT组减少(P＜0.05).NT组大鼠肾组织TGF-β1、CTGF表达较C组明显增加(P＜0.01),RR组肾组织TGF-β1、CTGF表达较NT组减弱(P＜0.05).结论 漏芦可降低慢性肾功能不全大鼠24 h尿蛋白、血尿素氮、肌酐水平,减轻肾组织硬化,抑制肾组织TGF-β1和CTGF表达.漏芦对慢性肾功能不全的保护机制可能与降低肾脏TGF-β1和CTGF表达有关.     

外泌体miR-155调控p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路影响心肾综合征大鼠的心肾细胞凋亡

目的:基于外泌体miR-155调控p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路影响心肾综合征(CRS)大鼠的心肾细胞凋亡探讨CRS的发病机制。方法:SD大鼠分为空白组、造模3周组、造模4周组、造模5周组、造模6周组,每组10只,以生理盐水或阿霉素腹腔注射造模。心脏超声检测心功能,ELISA法检测血清氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、肾损伤分子1,全自动生化仪检测血清肌酐、尿素氮,EXOQuick试剂盒提取血浆外泌体,用ELISA试剂盒对血浆外泌体定量检测,RT-PCR法检测心肾组织p38MAPK mRNA、心肾组织miR-155、外泌体miR-155的表达,Western-Blot法检测心肾组织p38MAPK及磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)的表达,HE染色观察组织形态学改变,TUNEL法检测心肾细胞凋亡率。结果:造模后各组大鼠心肾功能降低;与空白组比较,造模4周组、5周组心脏p-p38MAPK表达增高(P0.05),6周组p-p38MAPK表达增高(P0.01);造模4周组、5周组、6周组肾脏p-p38MAPK表达增高(P0.01);造模3周组、4周组、5周组、6周组心脏、肾脏细胞凋亡率增高(P0.01);造模4周组、5周组、6周组血浆外泌体含量降低(P0.01);造模3周组、4周组、5周组、6周组外泌体miR-155表达降低,心肾组织miR-155表达降低(P0.01)。结论:p-p38 MAPK在CRS大鼠心肾细胞凋亡中起着关键作用,且外泌体miR-155可能对其有着调控作用。     

复方交泰汤对心肾综合征模型大鼠心功能的影响

目的观察交通心肾法代表方复方交泰汤对心肾综合征模型大鼠心功能的影响。方法清洁级6周龄雄性SD大鼠70只,分为模型组(20只)、奥美沙坦酯组(20只)、复方交泰汤组(20只)、对照组(10只)。单侧肾脏切除联合冠状动脉结扎法复制心肾综合征大鼠模型,奥美沙坦酯组灌服奥美沙坦酯,复方交泰汤组灌服复方交泰汤,对照组及模型组灌服等量生理盐水。周期为8周。观察大鼠治疗后心功能指标B型钠尿肽(BNP)、左室收缩末内径(LVESD)、左室舒张末内径(LVEDD)、左室短轴缩短率(LVFS)和左室射血分数(LVEF)的变化,及对左室肌球蛋白α-MHC、β-MHCmRNA表达的影响。结果治疗后奥美沙坦酯组与复方交泰汤组BNP水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后模型组LVEDD高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);奥美沙坦酯组与复方交泰汤组LVEDD低于模型组,复方交泰汤组LVEF高于奥美沙坦酯组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后奥美沙坦酯组与复方交泰汤组LVFS高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后复方交泰汤组大鼠心肌α-MHCmRNA表达未见明显增加,β-MHCmRNA表达降低。结论复方交泰汤能够改善心肾综合征模型大鼠心脏结构,降低血清BNP水平,进而改善心脏功能。     

解聚复肾宁对糖尿病大鼠肾组织基质金属蛋白酶-9、金属蛋白酶组织抑制剂-1表达的影响

目的观察解聚复肾宁(JJFSN)对糖尿病(DM)大鼠肾组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)表达及肾脏保护作用机制。方法建立STZ诱导的DM SD大鼠模型,将成模DM大鼠随机分成4组:模型组、JJFSN组、厄贝沙坦组、JJFSN+厄贝沙坦组,同时设正常对照组。各组大鼠采用相应的干预措施处理12 w。检测各组大鼠第12周时肾重/体重、血糖、尿素氮、血肌酐、尿白蛋白排泄率(UAER),免疫组化法检测肾组织MMP-9、TIMP-1表达,透射电镜观察肾脏超微结构。结果模型组肾脏超微结构改变明显,血糖、UAER、尿素氮、血肌酐、肾重/体重显著增高。模型组大鼠肾组织TIMP-1的表达较正常对照组明显上调(P<0.01),JJFSN组、厄贝沙坦组、JJFSN+厄贝沙坦组肾组织TIMP-1表达明显下调(P<0.01),但仍高于正常对照组(P<0.01),JJFSN+厄贝沙坦组下调最明显(P<0.01)。DM模型组大鼠肾组织MMP-9的表达较正常对照组明显下调(P<0.01),解聚复肾宁组、厄贝沙坦组、解聚复肾宁+厄贝沙坦组肾组织MMP-9表达明显上调(P<0.01),但仍低于正常对照组(P<0.01),解聚复肾宁+厄贝沙坦组上调最明显(P<0.01)。结论 MMP-9、TIMP-l的表达变化与肾小球细胞外基质(ECM)降解减少相关,可能促进了糖尿病肾病(DN)的发生,JJFSN可能通过干预这种表达变化,减缓DN的发生和发展。     

氧化应激在血糖波动加速GK大鼠糖尿病肾病发病过程中的作用

目的评价氧化应激(OS)在血糖波动加速DN发病过程中的作用。方法 16只雄性GK大鼠随机分为持续高血糖(MS)组与血糖波动(MF)组,另选择8只雄性Wistar大鼠作为正常对照(NC)组。MF组每日错时腹腔注射葡萄糖及皮下注射胰岛素造成血糖波动模型,MS组每日错时腹腔注射葡萄糖造成持续高血糖模型,NC组每日错时腹腔注射等剂量生理盐水,连续6周。每日观察大鼠的一般体征,第6周末检测全日9个时间点的血糖。麻醉处死大鼠,心脏采血,检测血肌酐(Scr)、血尿酸(SUA)、TC、TG等指标的含量;取双侧肾脏,称重,计算肾脏指数;检测肾组织与肾组织线粒体中OS水平,包括丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量;HE染色,光镜下观察大鼠肾脏病理变化。结果与NC组相比,MS组与MF组体重增长速度减慢,肾脏指数、Scr、SUA、TC、TG、肾组织与肾组织线粒体中MDA升高(P0.05或P0.01),肾组织与肾组织线粒体中SOD与GSH-Px降低(P0.05或P0.01),肾脏病理改变严重;与MS组相比,MF组肾脏指数、Scr、SUA、TC、肾组织与肾组织线粒体中MDA、SOD、GSH-Px等指标及肾脏病理上的变化更明显(P0.05或P0.01)。结论 OS水平在糖尿病大鼠肾组织与肾组织线粒体中增强,其在血糖波动加速DN发病过程中发挥重要作用。     

心复康口服液对心力衰竭大心功能及心肌中链酰基辅酶A脱氢酶基因表达的影响

目的 观察心复康口服液对心肌梗死后心力衰竭大鼠血流动力学、心功能及梗死周围心肌中链酰基辅酶A脱氢酶基因表达的影响.方法 采用结扎SD大鼠左冠状动脉前降支致心肌梗死后心力衰竭大鼠模型,用心复康口服液于术后24 h灌胃给药至6周,以卡托普利作为阳性对照药.给药4周后观察大鼠心脏功能、血流动力学及梗死周围心肌中链酰基辅酶A脱氢酶基因表达的变化.结果 模型组与假手术对照组比较,左心室舒张末压升高,左心室收缩压、心排血量、左心室内压最大上升速率、左心室内压最大下降速率均显著降低,梗死周围心肌中链酰基辅酶A脱氢酶基因表达下调(P＜0.01).与模型组比较,心复康口服液和卡托普利皆可显著降低心梗后心衰大鼠左心室舒张末压(P＜0.05),升高左心室收缩压、心排血量、左心室内压最大上升速率、左心室内压最大下降速率(P＜0.05或P＜0.01);梗死周围心肌中链酰基辅酶A脱氢酶基因表达上调(P＜0.01).结论 心复康口服液可改善心肌梗死后心力衰竭模型大鼠心脏功能,并可上调心肌中链酰基辅酶A脱氢酶基因表达.     

左旋精氨酸对急性心肌梗死大鼠血管新生的影响及心肌保护作用

【目的】 观察左旋精氨酸干预对急性心肌梗死（AMI）大鼠心肌梗死边缘区血管新生的影响及其心肌保护作用。【方法】 冠状动脉结扎法建立大鼠AMI模型,30只SD雄性大鼠被随机分为三组：假手术组,生理盐水对照组及左旋精氨酸干预组。在冠状动脉结扎后4周,超声心动图测量大鼠心脏左室舒张末内径（LVEDD）、左室收缩末内径（LVESD）、左室射血分数（LVEF）、左室短缩分数（LVFS）,Masson染色测定梗死面积,ELISA法检测各组大鼠血浆脑钠尿肽（BNP）水平;采用免疫组织化学技术检测大鼠心肌梗死边缘区CD31阳性的内皮细胞数量及 -SMA阳性平滑肌细胞数量,以评估新生血管情况,Western blot检测梗死边缘区内皮型一氧化氮合成酶（eNOS）及胶原-1蛋白含量。【结果】 冠状动脉结扎后4周,与对照组相比,左旋精氨酸干预组LVEF、LVFS明显升高,而LVEDD及LVESD降低（P<0.01）,且梗死面积明显缩小（P<0.01）,血浆BNP水平亦较低（P<0.01）,而梗死边缘区CD31阳性的内皮细胞及 -SMA阳性平滑肌细胞密度则高于对照组（P<0.01）,梗死周围区eNOS蛋白水平高于对照组,而胶原-1蛋白含量则低于对照组（P<0.01）。【结论】 左旋精氨酸干预可促进AMI大鼠梗死心肌边缘区毛细血管及小动脉新生,减少胶原-1蛋白含量,促进eNOS的表达,并可达到改善左心收缩功能、降低血浆BNP水平、缩小梗死面积的心肌保护作用。     

内皮祖细胞移植治疗大鼠急性心肌梗死的实验研究

目的探讨大鼠内皮祖细胞(EPCs)移植于梗死心肌的增殖分化情况及对心功能的影响。方法分离培养大鼠EPCs,免疫荧光法检测其CD34+、CD133+和Flk-1+的表达。将SD大鼠冠状动脉左前降支结扎制造急性心肌梗死模型后,在梗死心肌处植入DAPI标记的EPCs(实验组)或M 199培养液(对照组)。移植后1周及4周,心脏超声检查心功能,并对梗死区心肌组织进行移植细胞形态学检查及毛细血管密度测定,逆转录聚合酶链反应及酶联免疫吸附测定梗死周边区血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果培养获得EPCs,其表型为CD34+、CD133+和Flk-1+。植入梗死区的EPCs可以分化为血管内皮细胞,实验组梗死心肌处血管密度较对照组明显增高(P<0.01),并且VEGF基因及蛋白表达在移植后1周均较对照组明显增高(P<0.01)。移植后4周,实验组大鼠左心室射血分数及左心室短轴缩短率较对照组明显提高(P<0.01);而移植后1周,两组大鼠超声检测心功能各指标变化不明显。结论同种异体EPCs移植到梗死心肌大鼠缺血心肌能分化为毛细血管内皮细胞,促进梗死后心肌血管新生,改善心功能。     

黄葵对慢性肾功能不全大鼠保护机制的研究

目的 观察黄葵对慢性肾功能不全大鼠肾功能及肾组织转化生长因子(TGF)-β1和smad7表达的影响.方法 采用腺嘌呤法建立大鼠慢性肾功能不全模型,随机分为正常组、非治疗组和治疗组,治疗组予以黄葵(2 g/kg)每日1次灌胃.治疗4 w后,检测各组大鼠的24 h尿蛋白定量、血尿素氮、血肌酐及肾小球硬化指数,通过免疫组化及蛋白印迹观察肾组织TGF-β1和smad7的表达. 结果 非治疗组大鼠的24 h尿蛋白定量、血尿素氮、血肌酐较正常组明显增加(P＜0.01),而治疗组大鼠24 h尿蛋白定量、血尿素氮、血肌酐较非治疗组减少(P＜0.05).非治疗组大鼠肾组织TGF-β1、smad7表达较正常组明显增加(P＜0.01),治疗组肾组织TGF-β1、smad7表达较非治疗组减弱(P＜0.05).结论 黄葵胶囊可降低慢性肾功能不全大鼠24 h尿蛋白、血尿素氮、肌酐水平,抑制肾组织TGF-β1和smad7表达.黄葵胶囊对慢性肾功能不全的保护机制可能与降低肾脏TGF-β1和smad7表达有关.     

温阳益心方对大鼠心肌梗死模型心肌梗死面积及梗死边缘区血管密度的影响

目的 研究温阳益心方对实验性心肌梗死大鼠心脏的促血管新生作用.方法 利用SD大鼠冠状动脉结扎法造成急性心肌梗死(AMI)模型,观察温阳益心方对AMI大鼠心肌梗死面积及梗死边缘区心肌微血管密度的变化.结果 温阳益心方大、小剂量组与模型组梗死面积比较,均有统计学意义(P<0.01),且有一定的剂量依赖性;温阳益心方大、小剂量组与假手术组相比较,其心肌梗死边缘区的平均血管面密度(MVD)均明显增多(P<0.05),且大、小剂量组比较亦有统计学意义(P<0.05).结论 温阳益心方对实验性心肌梗死大鼠的心脏有促血管新生作用.     

心脏离体灌流装置观察细胞移植对心脏功能的影响

目的观察胚胎心肌细胞移植到大鼠急性心肌梗死区后对大鼠心脏功能的影响及其存活情况。方法100只成年大鼠随机分成2组。移植组开胸结扎大鼠冠状动脉后在梗死区内注射培养的胚胎心肌细胞悬液;对照组结扎冠状动脉后在与移植组相同的部位注射等量的细胞培养液。各组分别在移植后的48h、72h、1周、2周收集心脏标本,HE染色及抗5鄄溴脱氧尿核苷(5鄄BrdU)免疫组化染色。Langendorff心脏离体灌流装置测定移植术后第2周各组大鼠的心脏功能。结果移植组大鼠心脏左室收缩峰压(LVSP)、左室内压最大上升与下降速率( dp/dtmax,-dp/dtmax)与对照组相比明显升高,差异有非常显著意义(P<0.01),左室舒张期末压(LVEDP)明显降低,与对照组相比差异也有非常显著意义(P<0.01)。在移植组心肌梗死区内可以看到存活的胚胎心肌细胞,对照组未发现。结论胚胎心肌细胞移植能够改善大鼠的心脏功能,并且可以在大鼠的心肌梗死区内存活及分化。     

苦荞麦提取物对糖尿病模型大鼠肾脏的保护作用及机制

目的观察苦荞麦提取物对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病模型大鼠肾脏的保护作用及机制。方法采用STZ诱导建立糖尿病大鼠模型,于第3周开始分别给予苦荞麦高、中、低(200,100,50 mg·kg~(-1)·d~(-1))剂量和氨基胍(100 mg·kg~(-1)·d~(-1))灌胃治疗,共治疗12 w。采用CRE-EN试剂盒检测血清肌酐含量;采用考马斯亮蓝法检测尿蛋白含量;用公式法计算内生肌酐清除率;采用免疫印迹法测定肾脏组织中羧甲基赖氨酸(CML)的蛋白表达水平。结果与模型组相比,苦荞麦各剂量组和氨基胍组糖尿病大鼠主要代谢症状多饮、多食、多尿、体重下降得到明显改善(P0.01),并且各治疗组大鼠内生肌酐清除率升高,血肌酐和尿蛋白水平下降(P0.01)。与正常组比较,模型组肾脏组织CML的蛋白表达水平显著升高,苦荞麦各剂量组及氨基胍组肾脏组织中CML的蛋白表达水平降低,以氨基胍组降低明显(P0.01)。结论苦荞麦的提取物能够提高内生肌酐清除率并降低血肌酐和尿蛋白水平,降低肾组织CML的表达水平,从而改善糖尿病模型大鼠肾脏功能。     

丹参对单侧输尿管结扎模型大鼠肾脏的保护作用

目的探讨丹参对单侧输尿管结扎(UUO)模型大鼠肾脏保护作用,初步探讨其抗肾间质纤维的机制。方法应用UUO致肾间质纤维化大鼠模型,SD雄性大鼠120只随机分为空白组,模型组,丹参组(高、中、低剂量),吡格列酮组,每组20只,从模型建立前48 h开始灌胃,分别于造模后第7、14、21天,观察大鼠一般状态,检测各组大鼠体质量,24 h尿蛋白定量,血清肌酐水平,留取梗阻侧肾脏行HE、Masson染色,观察肾组织病理结构变化。结果模型组大鼠在各个时间点均出现一般状态减退,体质量下降,丹参干预后一般状态及体质量均有显著改善;在各个时间点24 h尿蛋白定量结果无明显差异,但UUO模型组大鼠血肌酐值增高,在造模第7天时,其肾组织可见肾小管上皮细胞变性、间质炎性细胞浸润、纤维组织增生等病理变化,丹参各剂量组与UUO模型组大鼠相比较血肌酐值下降明显,肾脏病理改变均有不同程度的改善,其中以丹参高剂量组改善最为明显。结论丹参对肾间质纤维化模型大鼠具有一定的保护作用,其抗肾间质纤维化的作用机制与降低血肌酐,改善大鼠一般状态,减轻肾脏病理损伤有关。     

慢性缺血性心力衰竭模型制备方法的对比研究

目的探讨冷冻左心室前壁与结扎前降支两种方法诱导大鼠心肌梗死后制作慢性心力衰竭模型的对比研究。方法选择8～10周龄SD健康大鼠120只,随机分为冷冻组(50只),结扎组(50只)、假手术组(20只)。手术后4周行心电图、心功能检查,取心脏组织行TTC、HE染色并观察其死亡率。结果手术后4周冷冻组大鼠死亡率为32%低于结扎组48%。与假手术组比较,冷冻组、结扎组大鼠心电图显示为心肌梗死,LVEF、左心室短轴缩短率明显降低,左心室舒张末直径明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),冷冻组和结扎组大鼠心肌切片、TTC染色可见100%梗死区;梗死区HE染色主要为瘢痕组织,假手术组未见心肌梗死。结论冷冻法诱导的心力衰竭模型在心功能、心肌梗死面积等方面等同于结扎法,且死亡率明显减低,冷冻左心室前壁诱导大鼠心肌梗死后慢性心力衰竭模型较结扎法更好。     

桑叶黄酮和多糖对糖尿病大鼠血清肿瘤坏死因子-α、C反应蛋白含量及肾功能的影响

目的研究桑叶黄酮和多糖对糖尿病(DM)大鼠血清肿瘤坏死因子(TNF)-α和C反应蛋白(CRP)含量及肾功能的影响。方法 SD大鼠用高脂高糖饲料加小剂量链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型。将SD大鼠随机分为正常组、模型组、桑叶黄酮治疗组、桑叶多糖治疗组。检测血糖、血尿素氮、血肌酐、检测24 h尿蛋白定量、计算肾指数;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠血清中的CRP和TNF-α的含量。结果1模型组大鼠血糖、肾指数、24 h尿蛋白定量、血尿素氮和血肌酐与正常组大鼠比较均明显升高(P0.01),而桑叶黄酮治疗组和桑叶多糖治疗组明显低于模型组(P0.01)。2模型组大鼠血清中CRP和TNF-α的含量明显高于正常组(P0.01),而桑叶黄酮治疗组和桑叶多糖治疗组低于模型组(P0.05或P0.01)。3桑叶黄酮和桑叶多糖可减轻肾脏病理变化。结论桑叶黄酮和多糖可能通过下调糖尿病大鼠血清中TNF-α和CRP的含量,改善炎症反应,从而对肾脏起到保护作用。     

糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化逆转可能性的研究

目的 动态观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏素(E-cadherin)在糖尿病(DM)大鼠肾组织中的表达,探讨糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏纤维化逆转的可能性.方法 选择SD大鼠随机分为正常对照组、DM组和胰岛素治疗组,链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠DM.正常对照组和DM组按病程分为2、4、8、12、16、20和24 w组,胰岛素治疗组从第13周起用胰岛素控制血糖至正常水平,分为16、20和24 w组.检测各组血糖、24 h尿蛋白、血肌酐(Scr)和肾脏指数(RI);PAS染色光镜观察肾脏病理改变;免疫组化检测肾皮质α-SMA和纤连蛋白(FN)的表达;Western印迹检测肾皮质α-SMA和E-cadherin蛋白表达量;RT-PCR检测肾皮质α-SMA和FN mRNA水平.结果 DM组大鼠血糖、24 h尿蛋白、Scr、RI均较正常对照组明显升高(P＜0.05,P＜0.01),胰岛素治疗组上述指标均较DM组显著降低(P＜0.05,P＜0.01).正常大鼠α-SMA只在血管壁表达,DM组2 w开始有少量间质细胞胞浆内有阳性染色,随病程进展间质细胞阳性染色增多;8 w时肾小球系膜细胞胞浆内见阳性表达;从16 w开始在DM大鼠肾小管上皮细胞可见α-SMA蛋白阳性表达,胰岛素治疗组未见表达;DM组肾皮质α-SMA和FN蛋白与mRNA表达水平较正常对照组显著增多(P＜0.01),胰岛素治疗组则显著低于DM组(P＜0.01);DM组E-cadherin蛋白的表达水平较正常对照组显著降低(P＜0.01),而胰岛素治疗组显著高于DM组(P＜0.01).结论 控制血糖可使DN大鼠肾脏一定程度的纤维化逆转,其机制可能与肾脏固有细胞表型转变被抑制或反转有关.     

雷公藤对糖尿病大鼠肾皮质GLUT-1 mRNA表达的影响及其意义

目的 探讨雷公藤对糖尿病(DM)大鼠肾脏GLUT-1 mRNA 表达的影响及其意义.方法 采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射法建立DM动物模型.将46只3月龄160～190 g大鼠(雌雄各半)随机分为正常对照组,DM模型组,雷公藤组(6.7mg·kg-1·d-1) .第4、8、12周末各组处死4只大鼠并收集标本,记录体重、右肾重、检测血糖、血尿素氮、肌酐、24 h尿蛋白定量.用RT-PCR方法检测肾皮质GLUT-1 mRNA表达水平.肾组织行HE、PAS染色.结果 ①与正常对照组相比,DM模型组大鼠造模成功后血糖明显增高(P＜0.01),但24 h尿蛋白排泄量无明显增高(P＞0.05);4 w时体重、肾重指数、尿素氮、肌酐、24 h尿蛋白排泄量、肾皮质GLUT-1 mRNA表达均明显增加(P均＜0.01),12 w时增加更加显著.与DM模型组相比,雷公藤组8 w时血糖、尿素氮、肌酐降低(P均＜0.05),24 h尿蛋白排泄量和肾皮质GLUT-1 mRNA表达量均明显下降(P均＜0.01);12 w时体重增加(P＜0.05),肾重指数才明显下降(P＜0.01).②肾组织HE、PAS染色病理学观察:DM模型组光镜下肾小球肥大,系膜细胞增生,系膜基质弥漫性或结节性增多,肾小球、肾小管基底膜增厚,而雷公藤组这些病理改变明显减轻.结论 雷公藤能明显减少DM大鼠尿蛋白排泄量,抑制肾脏肥大、减轻肾脏的纤维化硬化程度.其机制可能是下调GLUT-1 mRNA的表达量及功能活性,最终延缓DN的发展.     

急性心肌梗死时G-CSF的抗心肌重构及对心功能改善的实验研究

目的探讨急性心肌梗死（AM I）时动员剂粒细胞集落刺激因子（G ranu locyte colony-stimu lating factor,G-CSF）抗心肌重构和功能保护作用。方法日本大耳白兔40只,随机分成两组,每组20只,均结扎冠状动脉前降支建立心肌梗死模型,动员剂组于模型建立后1 h给予G-CSF皮下注射连续7 d,对照组系建立心肌梗死模型后仅注射生理盐水。术前、术后24 h及术后4周做心脏超声检测心功能,4周后处死动物,取出心脏行组织病理学分析,测定两组梗死面积的大小、毛细血管密度以及观察纤维化的情况。结果动员剂组心功能各项指标在术后4周时均较对照组有明显的改善。HE染色显示对照组心肌纤维排列紊乱不规则,而动员剂组排列有序,梗死灶较对照组明显减小,且毛细血管密度也显著增加。胶原纤维明显少于对照组。结论急性心肌梗死时给予G-CSF可有效增加梗死区及周围毛细血管密度,缩小梗死面积,稳定心脏结构及显著改善心功能。