细菌脂多糖对小鼠生长发育和骨骼发育的影响

目的:研究细菌脂多糖(LPS)对小鼠宫内胎儿死亡(IUFD)、生长发育迟缓(IUGR)和骨骼发育迟缓的影响。方法:LPS低中高组小鼠于妊娠d15-17分别腹腔注射不同剂量LPS(25μg/kg、50μg/kg、75μg/kg),LPS+2-苯叔丁基硝酮(PBN,活性氧ROS拮抗剂)组在LPS(75μg/kg)处理前30min和后3h经腹腔各给予100mg/kg的PBN,对照组给予等容量生理盐水。孕鼠于妊娠d18处死。另给药1d时取LPS高剂量组LPS+PBN组和对照组于LPS处理后6h处死孕鼠。结果:①小鼠妊娠d15-17给予LPS后,中高剂量组平均每窝死胎数明显高于对照组,活胎体重、身长和尾长下降,并呈明显的剂量-效应关系;LPS高剂量导致IUGR和骨骼发育迟缓;PBN处理明显抑制LPS对胎儿的作用。②LPS使母肝、胎肝和胎盘组织脂质过氧化,GSH含量显著降低。PBN显著抑制LPS的这些作用。结论:母鼠妊娠晚期接触LPS引起IUFD、IUGR和骨骼发育迟缓,ROS至少部分参与了LPS的引起IUFD、IUGR和骨骼发育迟缓。     

脂多糖诱导的非特异性炎症对大鼠睾丸功能的影响

目的:探讨脂多糖(LPS)诱导的非特异性炎症对大鼠睾丸功能的影响。方法:利用磁分离均相酶联免疫技术、免疫组织化学、原位杂交方法分别检测血清睾酮(T)、黄体生成素(LH)水平以及生精上皮内增殖细胞核抗原(PCNA)、雄激素结合蛋白(ABP)mRNA的表达。结果:与对照组相比实验组血清T升高、ABPmRNA表达增多(P<0.05)以及生精上皮PCNA表达明显减低(P<0.05),而血清LH变化无显著差异(P>0.05)。结论:睾丸炎症时间质细胞、支持细胞功能改变,致使睾丸局部生精微环境发生变化,可能导致生精障碍。     

N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脂多糖诱导的小鼠感染性早产的影响

目的:初步探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)预防感染性早产的作用机制。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化方法检测脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的感染性早产小鼠模型(模型组)胎盘NF-κBp65、TNF-αmRNA和蛋白的表达,以及NAC干预后(NAC预防组和NAC治疗组)早产率、NF-κBp65和TNF-α的表达变化,并以正常孕鼠作对照。结果:对照组孕鼠无早产的发生,而模型组全部早产,组间比较有显著性差异(P<0.01);对照组NF-κBp65、TNF-α有少量表达,模型组则都显著升高(P<0.05);NAC预防组与模型组比,NF-κBp65和TNF-α表达明显减少(P<0.05),且早产率也明显下降(P<0.05);NAC治疗组与模型组相比无统计学差异。结论:NAC可降低感染性早产小鼠胎盘NF-κBp65和TNF-α的表达,对于感染性早产有保护作用。     

小鼠早产模型的研究进展

早产是世界范围内导致5岁以下儿童死亡的首要原因,同时早产会增加儿童神经功能发育障碍和成年后患慢性疾病的风险,因此探讨早产发生机制对儿童健康具有重要意义。早产(PTB)是一个多因素导致的综合征,具体发生机制尚不清楚。由于伦理学的限制,基于人类的早产实验研究困难,因此采用动物模型来验证临床观察假说十分重要。自上世纪九十年代起,小鼠成为研究早产的主要动物,本文综述了几种常用的建立小鼠早产模型的方法,包括激素模型、感染模型、炎症模型等,并对其效率和优缺点进行了比较分析,为早产的基础和临床研究提供一定的参考依据。     

褪黑素对新生儿脐带血单个核细胞产生细胞因子的影响

目的 探讨褪黑素(melatonin,MLT)对新生儿脐带血单个核细胞(cord blood mononuclear cells,CBMC)产生细胞因子的影响. 方法 体外培养10例健康足月新生儿CBMC,取10例健康成人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)作正常对照,不同浓度MLT(50 pg/ml～50 ng/ml)作为刺激物与CBMC或PBMC共培养,测定培养上清中IL-β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、IFN-γ及TNF-α水平. 结果 500 pg/ml MLT可刺激CBMC产生较高水平的IL-2[(12.18±7.31)pg/ml]、IL-6[(2091.08±968.58)pg/ml]、IL-8[(2779.04±1168.49)pg/ml]、IL-12[(15.29±6.88)pg/ml]及IFN-γ[(52.22 17.77)pg/ml],与对照组[分别为(6.99±4.94)pg/ml、(1017.06±452.60)pg/ml、(1293.33±791.34)pg/ml、(6.84±2.26)pg/ml、(22.24±10.38)pg/ml]相比,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组[(175.63±62.10)pg/ml]相比,不同浓度MLT(50 ng/ml、5 ng/ml、500 pg/ml、50 pg/ml)均可降低CBMC培养上清中TNF-α水平,分别为(24.87±11.21)pg/ml、(18.14±9.44)pg/ml、(31.38±15.28)pg/ml和(28.18±17.35)pg/ml,差异均有统计学意义(P<0.05).5 ng/ml MLT可诱导PBMC产生IL-2、IL-12及IFN-γ,抑制TNF-α的分泌,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).比较各自最佳效应浓度的MLT对CBMC(MLT最佳效应浓度为500 pg/ml)和PBMC(MLT最佳效应浓度为5 ng/ml)释放细胞因子IL-2、IL-12、IFN-γ的诱导作用及对TNF-α的抑制作用,除TNF-α外,差异均有统计学意义(P<0.01). 结论 MLT不但可调节PBMC细胞因子的释放,也可调节CBMC细胞因子的释放,且MLT对CBMC分泌细胞因子IL-12、IFN-γ等的调节作用强于其对PBMC的作用.因此,MLT有可能提高新生儿的免疫功能,为临床应用提供了实验依据.     

细胞间粘附分子-1在小鼠早孕期子宫内膜的表达规律及调节的研究

为研究细胞间粘附分子 1 (ICAM 1 )在孕早期的作用 ,本文观察了孕早期小鼠子宫内膜 ICAM 1蛋白水平的表达规律及细胞因子 L IF、IL 1、GM CSF和 IL 6对孕 d 4子宫内膜 ICAM 1表达的调节。方法 :1 .收集孕 1～ 8d小鼠子宫内膜 ;2 .将孕鼠随机分为实验组和对照组 ,在孕 d2～ 4分别腹腔注射不同的细胞因子或 PBS,d4收集子宫内膜。采用 Western blot方法测定子宫内膜 ICAM 1的蛋白表达水平。结果显示 :ICAM1呈时序性表达 ,孕 d1表达量较低 ,d2开始升高 ,到 d4达高峰 ,此后缓慢下降。L IF、IL1 β、IL 6、GM CSF对子宫内膜 ICAM 1的表达有促进作用。结论 :ICAM 1在围着床期表达水平较高 ,可能参与了胚胎着床。细胞因子 L IF、IL 1、IL 6和 GM CSF对其表达有促进作用。     

来曲唑和克罗米酚对小鼠着床期子宫内膜容受性的影响

目的:探讨来曲唑和克罗米酚对小鼠着床期胞饮泡和白血病抑制因子(LIF)表达的影响。方法:将30只小鼠随机分为3组:来曲唑(LE)组(n=10)、克罗米酚(CC)组(n=10)及对照组(n=10)。促排卵后妊娠d4．5取小鼠子宫,采用扫描电镜观察3组子宫内膜胞饮突的变化以及免疫组化技术检测子宫内膜LIF的表达强弱。结果:在3组妊娠天数一致的情况下,LE组中无论是子宫内膜胞饮突,还是LIF的表达,均与对照组相似。而CC组的表达显著弱于前二组。结论:与CC促排卵相比,LE不影响小鼠着床期子宫内膜超微结构和相关基因LIF的表达,然而CC组子宫的容受性呈现一定的抑制性。     

丝瓜络对高血脂症小鼠睾丸增殖细胞核抗原表达的影响

目的:探讨丝瓜络(Retinervus luffae fructus,RLF)对高血脂症小鼠睾丸增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达的影响.方法:24只雄性昆明小鼠随机分为3组,每组8只.对照组(A组):给予基础饲料;高脂+丝瓜络组(B组):在给予的高脂饲料中添加体积分数10％丝瓜络粉;丝瓜络组(C组):给予基础饲料中添加体积分数10％丝瓜络粉.光学显微镜下观察睾丸生精上皮的组织学改变,应用免疫组织化学法检测睾丸PCNA的表达,比较3组的曲细精管异常率和睾丸精原细胞PCNA阳性细胞率.结果:与A组比较,B和C组的异常曲细精管率和睾丸精原细胞PCNA阳性细胞率无统计学差异(P＞0.05).结论:丝瓜络对高血脂症小鼠睾丸精原细胞PCNA的表达没有明显的影响.     

孔雀石绿对小鼠睾丸超微结构的影响

目的:观察孔雀石绿(malachite green,MG)对小鼠睾丸细胞超微结构的损伤。方法:32只雄性成年BALB/c小鼠随机均分为4组,MG浓度设为:0mg/L(对照组,A组)、100mg/L(B组)、400mg/L(C组)和800mg/L(D组)。连续灌胃给药30d,A组以等量生理盐水代替MG。应用透射电镜观察睾丸超微结构的改变。结果:B组睾丸超微结构与A组的基本相似。C组曲细精管基膜多见皱褶,支持细胞和精原细胞的胞浆空泡化及核固缩较常见。D组曲细精管基膜多呈波浪式皱褶,支持细胞和精原细胞的胞浆空泡化程度加重,核固缩明显甚至降解,管腔中多见畸形精子,间质细胞空泡化、脂滴增多。结论:MG染毒可导致大鼠睾丸曲细精管基膜、支持细胞、精原细胞、精子和间质细胞等发生超微结构的改变,剂量增加时病理改变加重。     

抗苗勒氏管激素(AMH)对离体人卵巢黄素化颗粒细胞干细胞因子(SCF)表达负调控的研究

目的:研究人卵巢黄素化颗粒细胞中抗苗勒氏管激素(AMH)对干细胞因子(SCF)表达的影响。方法:收集15例年龄<35岁因男方因素行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)患者的卵巢颗粒细胞,经原代培养,加入不同浓度基因重组人抗苗勒氏管激素(rhAMH),分别于培养的第4日与第6日采用实时定量PCR(RT-PCR)和免疫组织化学检测空白对照组与各实验组SCFmRNA及蛋白的表达。结果:RT-PCR和免疫组织化学均证实人卵巢黄素化颗粒细胞在不同浓度rhAMH干预后,SCFmRNA及蛋白的表达显著减少(P<0.05),其中15 ng/ml rhAMH抑制作用最明显;实验组第4日与第6日颗粒细胞表达SCFmRNA及蛋白无明显差异(P>0.05)。结论:AMH可有效抑制人卵巢黄素化颗粒细胞SCF mRNA及蛋白的表达。     

羊水栓塞的发病机制及诊治进展

目前认为羊水栓塞是白三烯、前列腺素、血栓素等物质进入母血循环引起的"妊娠过敏样综合征”.因而,促使肺支气管痉挛、血小板聚集、血管内凝血,主要表现为左心功能障碍导致的肺动脉压轻到中度增高.除临床症状、体征外,早期诊断依靠中心静脉及肺动脉插管吸出物中找到胎儿鳞状上皮细胞或碎屑及右心导管插入术获得血流动力学资料,免疫组化测定肺循环中的ET-1浓度及母亲血清中的sialy1Tn抗原的水平.羊水栓塞的确切诊断,主要是尸检发现肺血管内有胎儿细胞成分.羊水栓塞的治疗,主要是改善低氧血症,防止ARDS发生,保护心肌,抢救休克,保持心输出量及纠正血管内凝血.     

In vivo evidence of inflammasome activation during spontaneous labor at term

Objective: Upon inflammasome activation, the adaptor protein of the inflammasome ASC (apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD) forms intracellular specks, which can be released into the extracellular space. The objectives of this study were to investigate whether (1) extracellular ASC is present in the amniotic fluid of women who delivered at term; (2) amniotic fluid ASC concentrations are greater in women who underwent spontaneous labor at term than in those who delivered at term in the absence of labor; and (3) amniotic epithelial and mesenchymal cells can form intracellular ASC specks in vitro.

Methods: This retrospective cross-sectional study included amniotic fluid samples from 41 women who delivered at term in the absence of labor (n?=?24) or underwent spontaneous labor at term (n?=?17). Amniotic epithelial and mesenchymal cells were also isolated from the chorioamniotic membranes obtained from a separate group of women who delivered at term (n?=?3), in which ASC speck formation was assessed by confocal microscopy. Monocytes from healthy individuals were used as positive controls for ASC speck formation (n?=?3).

Results: (1) The adaptor protein of the inflammasome ASC is detectable in the amniotic fluid of women who delivered at term; (2) amniotic fluid ASC concentration was higher in women who underwent spontaneous labor at term than in those who delivered at term without labor; and (3) amniotic epithelial and mesenchymal cells are capable of forming ASC specks and/or filaments in vitro.

Conclusion: Amniotic fluid ASC concentrations are increased in women who undergo spontaneous labor at term. Amniotic epithelial and mesenchymal cells are capable of forming ASC specks, suggesting that these cells are a source of extracellular ASC in the amniotic fluid. These findings provide in vivo evidence that there is inflammasome activation in the amniotic cavity during the physiological process of labor at term.