HPV分型检测在筛查宫颈癌及癌前病变中的应用

目的研究HPV分型检测在筛查宫颈癌及癌前病变中的应用价值。方法选择宫颈癌患者和宫颈上皮内瘤变患者纳入研究的宫颈癌组和CIN组,选择宫颈活检正常者纳入对照组,检测宫颈活检组织中不同分型HPV的阳性率及DNA含量、抗凋亡分子和细胞周期分子的m RNA含量。结果 CIN组和宫颈癌组患者宫颈组织中HPV-16、18的阳性率以及DNA含量高于对照组(P0.05),宫颈癌组患者宫颈组织中HPV-16、18的阳性率以及DNA含量高于CIN组(P0.05);三组受试者宫颈组织中HPV-31、33、51、52、58的阳性率及DNA含量无差异(P0.05);CIN组和宫颈癌组患者宫颈组织中Bcl-2、Survivin、Cyclin D1、CDK1的m RNA含量高于对照组(P0.05),宫颈癌组Bcl-2、Survivin、Cyclin D1、CDK1明显高于CIN组(P0.05);HPV-16和HPV-18的DNA含量与Bcl-2、Survivin、Cyclin D1、CDK1的m RNA含量呈正相关(β=0.774~1.293,R=0.694~0.818,P0.05)。结论 HPV-16和HPV-18是造成宫颈癌及癌前病变的高危型HPV,会增加抗凋亡分子和细胞周期分子的表达。     

宫颈上皮内瘤样病变与人乳头瘤病毒感染的关系研究

目的：观察宫颈上皮内瘤样病变与人乳头瘤病毒感染的关系。方法选取妇科门诊就诊患者中经阴道镜下宫颈活检病理检查确诊为CIN的患者共263例,均对其检测HPV分型。HPV分型的检测采用PCR扩增、基因芯片探针杂交分型检测法。结果 HPV感染率随着CIN级别进展逐渐升高。CINⅠ级主要为LR-HPV感染;CINⅡ-Ⅲ主要为HR-HPV感染,尤其是HPV-16、18。HPV-16、18感染率在CINⅠ与CINⅡ、CINⅡ与CINⅢ之间差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论 HPV感染率随着CIN级别的增高而上升,HPV感染的基因型决定了CIN病变的级别,LR-HPV主要引起轻度鳞状上皮内病变,相当于CINⅠ级,HPV基因型主要为HPV-11、6。HR-HPV主要引起高度鳞状上皮内病变,相当于CINⅡ-Ⅲ,HPV基因型主要为HPV-16、18、58。因此,对有性生活的女性开展HPV分型检测,结合宫颈液基薄层细胞制片法(TCT)检查,发现阳性及时行阴道镜下宫颈活检,及时有效地发现宫颈上皮内瘤样病变(CIN)并进行干预治疗,能降低宫颈癌的发病率和死亡率。     

西安交通大学第一附属医院8581名妇女生殖道人乳头瘤病毒感染筛查

目的 调查陕西地区妇女生殖道人乳头瘤病毒(HPV)感染情况,了解本地区妇女生殖道HPV感染特征。方法 采用PCR+导流杂交技术检测2009年2月至2012年12月在西安交通大学第一附属医院妇科就诊的8581名陕西地区妇女生殖道HPV-DNA,必要时进行宫颈细胞学或组织学检查。结果 8581名陕西地区妇女中,生殖道HPV感染率为33.06%,高危型HPV(HR-HPV)感染率为30.08％,复合型别感染者占27.18%;最常见感染型别依次为HPV-16、HPV-52、HPV-58、HPV-6和HPV-18。HPV感染存在年龄差异,感染高峰年龄为25岁以下和51岁以上。HR-HPV感染者中宫颈组织学正常、轻度上皮内瘤变(CINⅠ)、中度上皮内瘤变(CINⅡ)、重度上皮内瘤变(CINⅢ)和宫颈癌(CC)组中,感染率分别为88.72%、97.48%、97.35%、95.88%和99.23%;常见致癌型别依次为HPV-16、HPV-18、HPV-58、HPV-52和HPV-33。HPV-16、18和58共同引起94.62%的宫颈癌。结论 陕西地区妇女生殖道HPV感染比较普遍,最常见的感染型别是HPV-16、HPV-52、HPV-58、HPV-6和HPV-18,常见致癌型别依次为HPV-16、HPV-18、HPV-58、HPV-52和HPV-33。HPV-16、18和58引起94.62%的宫颈癌。高危型HPV感染和宫颈病变显著相关,HR-HPV复合感染不是宫颈病变的危险因素。     

应用原位PCR技术检测宫颈癌和宫颈上皮内瘤变组织中人乳头瘤病毒DNA

目的：探讨原位PCR（isPCR)技术的敏感性及人乳头瘤病毒（HPV）与宫颈癌和宫颈上皮内瘤变（CIN）的关系。方法：采用isPR技术对66例宫颈癌和25例CIN组织中的人乳头瘤病毒（HPV）DNA进行检测。结果：52例宫颈癌检测到了HPV DNA（78．8％）,其中HPV16 DNA阳性45例（78．8％）,HPV18 DNA阳性10例（15．2％）,HPV16,18的DNA均阳性3例,HPV18 DNA阳性而HPV16 DNA阴性7例,CIN中HPV DNA阳性13例。结论：isPCR是一种敏感性高,特异性强的方法;宫颈癌和CIN的发生与HPV16和HPV18感染有密切关系。     

宫颈癌与癌前病变组织中HPV-16的整合感染状态

目的探讨宫颈癌及宫颈癌前病变中人类乳头瘤病毒16型（HPV-16）整合人宿主基因组的发生情况。方法选取252例宫
颈病变组织,其中宫颈癌48例,宫颈上皮内瘤样病变（CIN）204例,包括CINⅠ125例、CINⅡ46例、CINⅢ33例,另取因子宫肌
瘤行全子宫切除术的正常宫颈上皮20例为对照,采用重叠定量PCR检测HPV-16感染标本中病毒整合状态。结果宫颈癌中
HPV-16阳性感染31例,占宫颈癌患者总数的65.6%（31/ 48）,其中HPV-16整合感染18例,占HPV-16阳性宫颈癌患者的58.1%
（18/31）;在CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ中,HPV-16阳性感染率分别为19.2%（24/125）、34.8%（16/46）、42.4%（14/33）,整合感染率分别
为16.7%（4/24）、18.8%（3/16）、35.7%（5/14）;与不同级别CIN病变相比,宫颈癌患者的HPV-16整合感染率明显增加,差异具有
统计学意义。结论HPV-16整合感染状态与宫颈病变严重程度呈正相关,在HPV DNA检测基础上联合应用高危HPV感染状
态的检测有利于提高宫颈癌筛查的靶向性并早期预测宫颈病变的转归。
     

HPV16、HPV18感染在宫颈上皮内瘤样病变及宫颈癌中的检测分析

目的 通过检测宫颈上皮内瘤样病变及宫颈癌组织中HPV16、HPV18的感染情况,探讨其与宫颈癌及癌前病变的关系.方法 应用荧光定量PCR(FQ-PCR)技术对宫颈组织进行HPV DNA定性检测,以光镜下病理学诊断作为CIN分级标准.结果 268例宫颈组织中HPV16、HPV18的总检出率分别为44.78%(120/268)、8.96%(24/268),CINⅡ～Ⅲ级和宫颈鳞癌组织中HPV16的检出率明显高于HPV18(P＜0.05).HPV16或HPV18以单一型别感染为主,5例存在双重感染(P＜0.01).HPV16的检出率随CIN Ⅰ级、CIN Ⅱ～Ⅲ级和宫颈鳞癌病变程度的加重而显著增高(P＜0.05).HPV18在不同宫颈病变组织中的检出率无显著性差异.结论 HPV16感染可能与宫颈癌及其癌前病变的发生发展密切相关,其定性检测对宫颈癌可以起到一定的预测作用.     

高危型HPV-DNA染色体整合状态与宫颈上皮内瘤变及宫颈癌关系研究

目的研究高危型HPV—DNA染色体整合状态与宫颈上皮内瘤变及宫颈癌之间的关系。方法应用原位杂交和免疫组化方法检测95例宫颈上皮内瘤变（CINI、CINII、CINm级分别21,18,16例）及宫颈癌组织中HPV感染情况,观察阳性杂交病例中HPV-DNA染色体整合状态与宫颈上皮内瘤变及宫颈癌关系。结果免疫组化检测CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ级阳性率分别为14％,16．6％,37．5％,宫颈鳞癌阳性率46．6％（P〈0．05）;原位杂交检测CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ级阳性率分别为19％,27．7％,37．5％,宫颈鳞癌阳性率70％（P〈0．05）;在CINⅠ、CINⅡ级中HPV—DNA以染色体外游离状态存在,在CINⅢ级及宫颈鳞癌中出现HPV—DNA整合状态。结论HPV．DNA染色体整合状态与宫颈上皮内瘤变及宫颈癌有关,在一定程度上HPV—DNA染色体整合状态对宫颈上皮内瘤变的恶性转归具有提示意义。     

宫颈癌患者血液中人乳头瘤病毒检出率的临床意义

目的:探讨宫颈癌患者血液中人乳头瘤病毒(HPV)DNA检出率对宫颈癌的诊断及病情进展评价的临床意义。方法:应用巢式PCR检测48例宫颈癌,55例宫颈高度病变(HG),6例宫颈低度病变(LG),29例宫颈炎症患者血浆中HPV-16,18DNA。分析各组患者血中HPVDNA检出率的差异,以及检出率与宫颈癌临床分期的相关性。结果:血浆中HPVDNA在宫颈癌组、HG组、LG组及宫颈炎症组中的检出率分别为56.3%、41.8%、16.7%和37.9%,其中HPV-16分别为20.8%、5.5%、0.0%和6.9%;HPV-18分别为50.0%、38.2%、16.7%和31.0%。HPV-16和HPV-18均为阳性者8例,其中宫颈癌Ⅰ期3例,Ⅱ期4例,CINⅢ1例。在9例有淋巴结转移的患者中,6例血浆HPVDNA阳性。血浆HPVDNA在宫颈癌组中检出率高于其他3组,但无统计学差异。结论:宫颈癌患者血中HPV检出率高于CIN和宫颈炎症患者,并且在发生转移的宫颈癌患者中检出率更高,但血浆HPVDNA检出率与宫颈癌临床分期无关。宫颈癌患者血中HPV双重感染率较高。     

人巨细胞病毒协同人乳头瘤病毒16型诱导宫颈上皮细胞癌变的研究

目的：探讨宫颈癌的发生发展与人乳头瘤病毒(HPV)和人巨细胞病毒(HCMV)协同感染的关系。方法：本实验应用我室建立的HPV16永生化的人宫颈上皮细胞系，感染HCMV，观察细胞的生物学特性。结果：HCMV协同HPV16促进宫颈上皮细胞的恶性转化，在裸鼠中形成肿瘤。结论：HCMV可协同HPV16恶性转化宫颈上皮细胞，并对其协同机制进行了细胞和分子生物学的探讨。     

Bcl-2蛋白在宫颈癌变组织中的表达及其与人乳头瘤病毒感染的关联性

目的基于宫颈癌发病的病毒学原因,探讨Bcl-2基因在宫颈癌中的表达及其与人乳头瘤病毒感染的相关性。方法采用免疫组织化学法检测Bcl-2蛋白在30例宫颈上皮内瘤变(CIN)、20例宫颈癌及20例正常宫颈组织中的表达。采用PCR技术检测上述标本中HPV16/18DNA的表达。结果 Bcl-2蛋白在CIN中的表达率为40%,宫颈癌中为70%,正常宫颈中表达为5%。HPV16/18在上述组织中的表达率依次为50%、75%、5%。Bcl-2蛋白和HPV16/18DNA在正常宫颈组织、CIN及宫颈癌中的表达两两比较差异均具有统计学意义;Bcl-2蛋白在CINⅠ/Ⅱ及CINⅢ中的差异也具有统计学意义,但与宫颈癌病理类型及分化和临床分期无关。结论 Bcl-2及HPV16/18参与了宫颈癌的发生及发展,联合检查HPV16/18和Bcl-2有望为宫颈癌的临床早期诊断和治疗提供理论依据。     

HPV与CIN、宫颈癌的关系探讨

目的探讨人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染与宫颈上皮内瘤样病变(cervicalintraepithelial neoplasia,CIN)、宫颈癌发生之间的关系。方法回顾性分析1 500例已确诊CIN或宫颈癌的患者,采用聚合酶链反应(PCR)进行HPV分型,通过第2代杂交捕获试验法(HCⅡ)对比低危型HPV6/11和高危型HPV-16、18感染者的年龄和宫颈病变程度。结果年龄渐次升高,感染HPV几率愈高,感染高危型HPV-16、18阳性率与宫颈癌高发呈正相关。结论对妇女作HPV筛查对预防宫颈癌有重要意义。     

宫颈癌组织中人乳头状瘤病毒16型DNA序列的检测

应用DNA斑点分子杂交技术检测了54例宫颈癌组织中人乳头状瘤病毒16型DNA序列,并应用DNA Southern印迹杂交技术分析了部分斑点杂交阳性的标本。结果表明,50%的宫颈癌标本中HPV16DNA阳性,而在18例正常宫颈组织中未测到HPV16DNA序列;Southern印迹杂交发现HPV16DNA以整合状态存在。提示HPV16与宫颈癌的发生密切相关。     

人乳头瘤病毒16/18、Bcl-2和Survivin在宫颈癌组织中的表达

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)16/18、Bcl-2、Survivin在宫颈癌组织中的表达及意义。方法收集2010年4月至2012年7月湖北省肿瘤医院保存的宫颈癌组织标本80例、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)组织标本70例及正常宫颈组织标本32例,采用原位杂交法检测3种组织中HPV16/18和Survivin的表达,采用免疫组织化学方法检测Bcl-2表达,并分析其表达情况与宫颈癌临床病理特征的关系。结果 Survivin mRNA在宫颈正常组织、CIN及宫颈癌组织中的阳性表达率分别为6.25%、45.71%和77.50%,Bcl-2蛋白在宫颈正常组织、CIN及宫颈癌组织中的阳性表达率分别为3.13%、40.00%和71.25%,HPV16/18 DNA在宫颈正常组织、CIN及宫颈癌组织中的阳性表达率分别为3.13%、51.43%和83.75%,3种组织中Survivin mRNA、Bcl-2蛋白、HPV16/18 DNA阳性表达率比较差异均有统计学意义(P<0.01)。Survivin mRNA、Bcl-2蛋白及HPV16/18 DNA在CIN组织中的表达与CIN分级有相关性,Survivin mRNA、Bcl-2蛋白及HPV16/18 DNA在CINⅢ级中的阳性表达率显著高于CINⅠ、Ⅱ级(P<0.01)。Bcl-2蛋白的表达与宫颈癌组织分化程度及淋巴结转移有相关性(P<0.01),但与宫颈癌组织类型、临床分期及肿瘤生长类型无显著相关性(P>0.05)。Survivin mRNA、HPV16/18 DNA表达与宫颈癌的组织分化程度、临床分期及淋巴结转移有相关性(P<0.01,P<0.05),但与宫颈癌的组织类型及肿瘤生长类型无相关性(P>0.05)。结论 HPV16/18、Bcl-2和Survivin的高表达可能与宫颈癌的发生发展有关,HPV16/18、Bcl-2和Survivin的检测有助于宫颈癌的早期诊断、手术疗效评价及预后判断。     

450例宫颈活检组织中人乳头瘤病毒的分布特征

[目的]了解阴道镜检查患者的宫颈活检组织中HPV的感染率和亚型分布。[方法]对宫颈脱落细胞学异常的患者450例进行阴道镜下定位活检。活检组织同时行HPV基因分型和病理诊断,HPV基因分型采用斑点杂交方法进行。[结果]在450例宫颈活检患者中,其HPV感染率为65.3%。在HPV-DNA阳性患者中,检出率最高的HPV-16占36.7%,依次HPV-58为22.1%、HPV-18为18.7%、HPV-52为16.0%。在宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ中HPV-DNA阳性率分别为55.6%、69%、82.7%和88.9%。在宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ,CINⅢ组织中均检测到HPV-16、-58、-18和-52。[结论]本研究中的宫颈活检组织中不仅检测到HPV-16和-18,还检测到HPV-58和-52感染,后者的发现为开发宫颈癌多价复合型疫苗提供了事实依据。     

宫颈癌组织端粒酶表达与人乳头瘤病毒感染的相关性

目的 探讨宫颈癌组织中端粒酶活性表达与人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染的关系。方法 采用端粒重复序列扩增（telomere repeat amplification protocal，TRAP）-银染法对45例宫颈癌、30例慢性宫颈炎及20例正常宫颈组织的端粒酶活性进行检测。同时，采用多聚酶链反应（PCR）技术测定上述组织HPV、HPV-16型及HPV-18型的感染情况。结果 宫颈癌组织端粒酶阳性率、HPV和HPV-16检出率高于慢性宫颈炎和正常宫颈组织（P〈0．05）；宫颈癌组端粒酶表达与HPV感染（φ=0．44，P〈0．01）、HPV-16型感染（φ=0．36，P〈0．05）有关联性，与HPV-18型感染未发现关联性（P〉0．OS）。结论 端粒酶的表达、HPV感染包括HPV-16型感染与宫颈癌发生密切相关。     

宫颈上皮内瘤变Ⅲ级与宫颈癌患者及其配偶人乳头状瘤病毒16型和18型感染情况

目的探讨宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈癌患者及其配偶人乳头状瘤病毒(HPV)16型和18型的感染情况。方法收集59例CINⅢ级患者及41例宫颈癌患者的宫颈脱落细胞样本及其100例配偶尿道口脱落细胞样本。检测样本中HPV16型、HPV18型DNA的表达情况,比较CINⅢ级或宫颈癌患者及其配偶间HPV16型、HPV18型阳性率。结果 200例样本中,男性和女性HPV16型阳性率分别为41.0%和50.0%,HPV18型阳性率分别为20.0%和39.0%;宫颈癌组女性HPV16型和HPV18型阳性率均高于CIN组女性,宫颈癌组配偶(男性)HPV16型阳性率高于CIN组配偶(男性)(P<0.05)。100对夫妻间,HPV16型阳性36对(36.0%),HPV18型阳性12对(12.0%),双重感染阳性3对(3.0%);宫颈癌组夫妻HPV16型阳性率、HPV18型阳性率和共同感染率均高于CIN组夫妻(均P<0.05)。结论由HPV16感染引起的CIN或更易向宫颈癌发展,男性配偶在女性宫颈癌防治中有重要作用。     

宫颈癌及癌前病变中的HPV-16整合人宿主基因组的发生情况及其在宫颈癌筛查中的应用

目的:探讨人类乳头瘤病毒16型(HP V-16)在宫颈癌及宫颈癌前病变患者中与宿主基因组的整合情况.方法:选取宫颈癌变组织252例,其中48例为宫颈癌组织,204例为宫颈上皮内瘤样病变组织(CIN),其中包括125例CINⅠ,46例CINⅡ,33例CINⅢ作为研究组;另外选取20例因子宫肌瘤行全子宫切除术的正常宫颈上皮组织作为对照组.对各标本采用定量PCR检测法检测HPV-16病毒的整合状态.结果:与正常的宫颈上皮组织相比,宫颈病变组织均发生了HP V-16病毒感染且与宿主基因整合的情况.其中宫颈癌组织的整合率最高,而CIN组织中随着病变程度的加重HPV-16病毒的整合率也增高,差异有统计学意义(χ2=49.7359、12.6033,P均<0.01).结论:宫颈病变的严重程度可能与HP V-16的整合感染有关,在HP V DNA检测的基础上联合对高危HP V整合感染状态进行检测有利于提高宫颈癌筛查准确率并在早期预测宫颈病变的转归.     

不同人乳头状瘤病毒亚型负荷量与宫颈上皮内瘤变关系的初步研究

目的 探讨不同人乳头状瘤病毒(HPV)亚型负荷量与子宫颈上皮内瘤变(CIN)的关系.方法 分析2005年12月～2007年5月我院门诊因HPV检查阳性,行液基细胞学检查(LCT),阴道镜活检者156例.以第二代杂交捕获(HCⅡ)试验检测13种HPV-H,同时采用核酸分子快速杂交基因分型技术进行21种HPV-DNA亚型分析.结果 156例HPV亚型感染额度由高到低的前五位依次为HPV-16(31.43%)、58(17.14%)、18(7.62%)、33(5.71%)、31(4.49%),其余亚型所占比例均小于4.0%.HPV(16/58)的-DNA含量在子宫颈上皮内瘤变(CINⅠ～Ⅲ)明显高于子宫颈炎,差异有显著性(P＜0.05).HPV(16/58)的-DNA含量在不同级别的子宫颈上皮内瘤变(CINⅠ～Ⅲ)的HPV-DNA含量呈递增趋势,但差异无显著性(P＞0.05).结论 HPV-16、58、18、33与31型致癌性较强;HPV(162/58)的DNA含量随宫颈病变的严重程度而增加,可作为宫颈癌前病变及宫颈癌的筛查及病情追踪监测的一项客观指标.     

人乳头瘤病毒、癌基因与宫颈癌关系的研究

用HPV16,HPV18及C-Ha-ras-1,C-myc等多个探针,采用分子杂交技术检测了44例宫颈癌和17例正常宫颈组织。HPV-16-DNA,HPV-18-DNA及C-myc,C-Ha-ras-1癌基因的检出率分别为50%、6.8%及63.3%、68.2%,明显高于正常宫颈组织,提示这4种因素与宫颈癌的发生有关。C-myc癌基因阳性的宫颈癌活组织C-Ha-ras-1同时阳性者占86.7%(26/30),C-myc癌基因阳性宫颈癌活组织中,60%(18/30)HPV-DNA呈阳性,C-Ha-ras-1阳性者中57.1%(16/28)HPV-DNA呈阳性,说明HPV与C-Ha-ras-1及C-myc有关,HPV与癌基因在宫颈癌发生发展中有一定的作用。     

APC基因在宫颈癌及其癌前病变中的表达及相关性

目的:探讨APC基因在HPV16感染的宫颈癌及其癌前病变中的表达情况及相关性.方法:将接受手术的33例宫颈癌患者和28例宫颈上皮内瘤变(CINⅢ)患者分为宫颈癌组和CINⅢ组,同期手术的31例子宫肌瘤或子宫腺肌症患者作为对照组;3组患者术前均行宫颈细胞凯普导流杂交人乳头瘤病毒DNA(HPV DNA)检测HPV16,计算HPV16 DNA阳性表达率;RT-PCR及免疫组化方法检测APC mRNA及APC蛋白的表达,分析宫颈癌及CINⅢ组中HPV16 DNA阳性率与APC mRNA及蛋白表达的相关性.结果:宫颈癌组与CIN Ⅲ组的HPV16 DNA阳性率明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);宫颈癌组APC mRNA及蛋白的阳性表达率低于照组,差异有统计学意义(P ＜0.05);CINⅢ组APC mRNA表达率与对照组差异无统计学意义(P＞0.05);宫颈癌及CINⅢ组中HPV16 DNA阳性率与APC mRNA及蛋白的表达呈负相关性(r=-0.573,-0.616;r=-0.573,-0.654;P＜0.05).结论:APC基因与HPV16可能共同参与了宫颈由正常至CIN进而发展为宫鳞癌的恶性转变过程.