高效液相色谱法测定人血清中异环磷酰胺的血药浓度

目的建立人血清中异环磷酰胺的HPLC测定法.方法取血清1.0 ml,以环磷酰胺为内标,用氯仿提取,在60 ℃水浴条件下氮气挥干,残渣用100 μl流动相复溶,进样25 μl.在Hypersil-C4色谱柱 (4.6 mm×250 mm,5 μm),以乙腈-水 ( 35∶65,v/v) 为流动相,流速为1.0 ml/min;检测波长200 nm.结果本方法在10～200 μg/ml 范围内线性良好,相关系数r=0.999 4 ( n=5).检测限为5 μg/ml .高、中、低三种浓度的绝对和相对回收率分别为 84.32%～88.14% , 95.00%～98.10%,日内和日间RSD分别为0.74%～2.21%, 1.60%～2.40%.结论 本方法灵敏、特异、简便,可用于临床异环磷酰胺血药浓度检测.     

HPLC法测定血清中异环磷酰胺浓度方法的改进

目的:建立以改进的高效液相色谱法测定血清中异环磷酰胺浓度的方法。方法:以环磷酰胺为内标,血清样品用C18固相萃取小柱处理后在室温条件下进样测定,其中色谱柱为Zorbox-ODS C18,流动相为乙腈-水(25∶75),流速为1.0mL·min-1,检测波长为200nm。结果:异环磷酰胺血药浓度在2.5~200μg·mL-1范围内线性良好(r=0.999 9);最低检测限为0.5μg·mL-1(S/N=3);日内、日间RSD均<5%;高、中、低3种浓度的提取回收率在89.3%~93.6%范围内。另用氯仿处理血样作为比较,其提取回收率仅为77.6%~82.3%。结论:用C18固相萃取小柱处理血样的回收率高,样品处理简单、快捷、准确、无污染,可用于异环磷酰胺血药浓度监测及临床药动学研究。     

HPLC法测定头孢哌酮的血药浓度

用ＨＰＬＣ法测定头孢哌酮血药浓度。药物浓度（Ｃ）在４．３２￣４１０．３μｇ／ｍｌ范围内，与药物、内标峰面积比呈良好线性关系，Ｃ＝－６６．５５４８＋２９４．７３５５ Ａ０／Ａｉ，ｒ＝０．９９９７（ｎ＝８）。方法平均回收率为１００．１５％，日内及日间ＲＳＤ均小于５％。本方法简便、快速、准确、可用于头孢哌酮的临床药动学研究。     

HPLC法测定双嘧达莫血药浓度

目的:建立测定血清中双嘧达莫浓度的高效液相色谱法.方法:选用Waterssymmetry shield TM RP 18 色谱柱(150mm×3.9mm,5μm),甲醇-0.02mol·L -1 醋酸铵(醋酸调pH至5.0)(75∶25)作流动相,流速1.0mL·min -1 ,室温,以阿普唑仑作内标物,检测波长292nm.结果:在0.1～8.0μg·L -1 范围内,双嘧达莫血药浓度与峰面积比(双嘧达莫与内标物阿普唑仑的峰面积之比)的线性关系良好,r=0.9998(n=7),平均回收率为99.65%～101.4%,日内RSD≤2.6%(n=3),日间RSD≤4.9%(n=5).结论:本法简便、快捷、灵敏、选择性高,适用于生物样品中双嘧达莫的常规分析.     

人血清中甲氨蝶呤血药浓度的HPLC法测定及其应用

目的建立HPLC法测定人血清中甲氨蝶呤(MTX)的浓度并应用于临床。方法采用HPLC法,血清用70%高氯酸沉淀蛋白后,旋涡混匀2 min,离心10 min,取上清液进行分析。色谱柱ZORBAX XDB C18,柱温30℃,流动相:乙腈-H2O(30∶70),流速1.0 m L·min-1,检测波长225 nm。结果血清中MTX保留时间为4.92 min,内标保留时间为9.42 min,最低检测浓度为0.03 mg·L-1,样品稳定性较好。相对回收率为100.15%~102.62%,日内、日间RSD≤10%。结论本法检测MTX血浓度简单、快速、灵敏。通过对大剂量MTX化疗的白血病患儿的血药浓度进行常规检测,可掌握甲酰四氢叶酸钙解救剂量,以提高疗效,减少不良反应的发生。     

HPLC法测定依那普利的血药浓度

目的建立高效液相色谱法测定马来酸依那普利的血药浓度。方法采用SpherisorbC18柱(2 5 0mm× 4 6mm ,5 μm) ,流动相 :乙腈 -甲醇 -水 -磷酸 -三乙胺 (V∶V∶V∶V∶V =5 0∶2 3 0∶2 75∶0 3∶0 1 ) ,流速 :0 9mL·min-1,检测波长 2 1 5nm。结果马来酸依那普利的血药浓度在 1 0～3 0 0 μg·L-1内 ,与其峰面积有良好的线性关系 (r=0 9942 )。方法回收率为 1 0 1 1 % ,日内精密度小于 5 5 % ,日间精密度小于 5 4%。结论该方法可用于马来酸依那普利的药代动力学及生物利用度研究。用此法测定了家犬口服国产依那普利片后的血药浓度并计算了药代动力学参数     

HPLC法测定盐酸二甲双胍的血药浓度

目的 :用HPLC测定血浆中盐酸二甲双胍。方法 :采用LichrospherC1 8柱 ( 4.6× 2 5 0mm ,5 μm)为色谱柱、3mmol/L十二烷基磺酸钠水溶液 (含 0 .5 %三乙胺 ,滤过后调 pH =4) -乙腈 ( 3 5 /65 )为流动相 ;流速为 1ml/min ,检测波长为 2 3 2nm。结果 :标准曲线的线形范围为 0 .0 5～ 4μg/ml(r=0 .9997,n =7) ,最低检测浓度为 5 0ng/ml,低、中、高 3种浓度的日内和日间变异分别为 5 .2 4% ,2 .41 % ,1 .3 0 % (n =5 )和 8.0 4% ,4.65 % ,4.3 4% (n =5 ) ,相对回收率分别为 96.1 7% ,94.0 3 %和 1 0 4.2 2 % ,绝对回收率分别为 ( 85 .47± 5 .1 4) % ,( 92 .0 3± 2 .3 4) % ,( 92 .63± 2 .0 3 ) %。结论 :本方法简便、快速、准确、专一性好 ,可用于盐酸二甲双胍的血药浓度测定     

HPLC法测定卡马西平血药浓度

目的建立反相高效液相色谱法测定人血清中卡马西平(CBZ)血药浓度的方法学。方法血清用乙酸乙酯提取,选择地西泮(Diazepam)为内标,采用Symmetry C18(250mm×4.6mm,5μm)分析柱,流动相为乙腈-水(70:30),检测波长为285nm,流速0.8m L·min-1,柱温35℃。用高效液相色谱法测定CBZ血药浓度。结果 CBZ和内标地西泮的保留时间分别为4.2min,6.3min,分离效果良好,CBZ的血药浓度在1.25~40μg·m L-1范围内呈现良好的线性关系(R=0.9998),平均回收率97.6%,日内RSD<5%。结论本法快速、简便、准确,适合临床常规监测需要。     

高效液相色谱法测定人血浆中莫西沙星浓度

目的：建立以高效液相色谱（HPLC）法测定人血浆中莫西沙星浓度的方法,并对样品进行测定。方法：色谱柱为KromasilC18（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为：1%三乙胺（磷酸调pH至4.8）-乙腈（80∶20,V∶V）,流速为1.0 mL.min-1,以环丙沙星为内标、紫外检测波长为296 nm进行测定。结果：莫西沙星浓度在0.025～5.0μm.mL-1范围内线性关系良好（r=0.999 7）;其低、中、高3种浓度（0.05、0.5、2.5μg.mL-1）的绝对回收率分别为67.11%、79.71%、78.04%,相对回收率分别为99.26%、96.88%、101.82%,日内精密度（RSD）值分别为4.06%、3.15%、1.33%,日间RSD值分别为7.24%、1.79%、3.32%。结论：本方法操作简单、快速、准确,灵敏度高,检测浓度低,试验成本低,可以用于盐酸莫西沙星的临床药动学研究及临床特殊人群的血药浓度测定。     

HPLC-UV法同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和双氢可待因的浓度

目的:建立同时测定人血浆中对乙酰氨基酚和双氢可待因浓度的方法。方法:血浆经乙酸乙酯、正己烷萃取后,采用高效液相色谱-紫外法进行测定,其中色谱柱为ZorbaxXDB-C18,流动相为乙腈-0.1%三氟乙酸(TFA)-水(12∶40∶48),流速为1.0mL·min-1,检测波长为230nm(0～5.0min)和210nm(5.0～6.2min)。结果:对乙酰氨基酚、双氢可待因血药浓度分别在0.10～20.00mg·L-1(r=0.9997)、2.5～150.0μg·L-1(r=0.9994)范围内线性关系良好,定量下限分别为0.1mg·L-1、2.5μg·L-1;低、中、高3种浓度的相对回收率分别为(100.38±2.19)%、(98.59±1.71)%、(100.30±0.83)%以及(97.52±3.33)%、(97.42±3.13)%、(99.60±2.98)%;日内RSD分别为1.65%～2.24%和2.73%～5.02%,日间RSD分别为1.57%～1.97%和3.80%～5.21%。结论:本方法准确可靠、简便快速,适用于人血浆中对乙酰氨基酚和双氢可待因浓度的同时测定。     

LC-MS/MS法测定人血清中石杉碱甲的浓度

目的:建立以高效液相色谱串联质谱电喷雾检测(LC-MS/MS)法的方法测定人血清中石杉碱甲浓度。方法:以可乐定为内标,待测血清样品经乙酸乙酯液-液萃取,有机相吹干,流动相复溶后进样,色谱柱为Phenomenex Luna CN柱,流动相为甲醇∶0.08%甲酸水溶液(含0.2%乙酸铵)=46∶54。ESI离子源正离子方式检测,选择反应监测(SRM),用于定量的离子分别为石杉碱甲m/z:母离子243.2,子离子210.9,碰撞能30V;内标可乐定m/z:母离子229.9,子离子212.9,碰撞能32V;扫描时间为0.5s。结果:血清中内源性物质不干扰石杉碱甲的检测,石杉碱甲血药浓度在0.08～8ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9930～0.9960);日内、日间RSD均<15%,低、中、高浓度的平均提取回收率分别为69.9%、63.7%、63.7%。结论:该法操作快速、灵敏、简单、准确,介质用量少,符合生物样品检测要求,可用于临床药动学研究中大批量血样的处理。     

UPLC-MS法测定人血浆中阿奇霉素的浓度

目的:建立测定人血浆中阿奇霉素浓度的方法。方法:采用直接沉淀法处理血浆后以超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS)法进样测定。色谱柱为Waters Acquity UPLC BEH C18流动相为乙腈-10 mmo·lmL-1甲酸铵水溶液(66∶34),流速为0.2 mL·min-1;正离子多离子反应监测(MRM)扫描分析,离子通道分别为m/z 748.36→591.10(阿奇霉素)、m/z 837.34→158.06(罗红霉素)。结果:阿奇霉素血药浓度在2～1 000 ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.999 5),定量下限为2 ng·mL-1平均方法回收率为102.6%～108.0%,平均提取回收率为93.2%～102.2%,日内、日间RSD均<8%。结论:本方法简便、快速、可靠、特异性强、灵敏度高,可用于阿奇霉素的药动学研究。     

HPLC法测定人血浆中替米沙坦的浓度

目的:建立测定人血浆中替米沙坦浓度的方法。方法:采用高效液相色谱法,以地西泮为内标,无水乙醚为萃取溶剂进行m测i定n-,1,色检谱测柱波为长H为yp2e2r8sinlmC,18柱,流温动为相室为温甲。醇结-磷果酸:替盐米缓沙冲坦液血(0药.0浓1m度o在l.L0-.111N5H54～H27P.O394,2用μgH.3mPOL4-调1范p围H至内约线性3.0关)=系7良0:3好0(,流r=速0.为9919.08)m,L最.低定量浓度为0.1155μg.mL-1;高、中、低3种浓度的方法回收率为96.73%～103.55%;日内、日间RSD分别为2.12%～7.33%和2.98%～7.86%。结论:本方法灵敏度、准确度及回收率均能达到人体血药浓度测定的要求,也可用于临床人体药动学的研究。     

RP-HPLC法测定人血浆中帕瑞昔布的浓度

目的:建立测定人血浆中帕瑞昔布的方法。方法:采用反相高效液相色谱法,血浆以无水乙醚提取后进样测定,色谱柱为KromasilC18,流动相为乙腈-水(92:8),内标为布洛芬,流速为1.0mL·min-1,检测波长为209nm,最小进样间隔为30min。结果:帕瑞昔布血药浓度在73.69～442.16μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9992);方法回收率为97.26%～99.24%,提取回收率为79.27%～80.51%,日内和日间RSD均≤2.10%。结论:本方法简便、快速、准确、重复性好,可以满足帕瑞昔布血药浓度的测定要求。     

反相高效液相色谱法测定人血浆中佐匹克隆的浓度

目的：建立高效液相色谱法测定血浆中佐匹克隆浓度。方法：采用Eurospher 100—5 C18色谱柱（200mm×4．6mm,5μm）;流动相：0．02mol·L^-1磷酸二氢钾（含0．2％三乙胺,pH=4．0）-甲醇（38：62）;流速：1．0ml·min^-1;柱温：3092;激发波长：315nm,发射波长：385nm。结果：血浆佐匹克隆在2．0～200．0ng·ml^-1浓度范围内线性关系良好（r=0．9995）。低、中、高3种浓度绝对回收率分别为92．64％,92．97％,94．66％,日内、日间RSD均小于10％。结论：本法可用于佐匹克隆血浆中浓度的测定以及药物动力学研究。     

胶束电动毛细管色谱法测定人血浆中茶碱的浓度

目的:建立以胶束电动毛细管色谱法测定人血浆中茶碱浓度的方法。方法:血浆样品不用任何前处理直接进样测定,采用未涂层石英毛细管(有效长度21cm),其中阴极缓冲液(A液)为15mmol.L-1的硼砂(pH10),运行缓冲液(B液)为内含200mmol.L-1十二烷基硫酸钠(SDS)的A液,压力进样,分离电压为12kV,紫外检测波长为280nm,外标峰面积法定量。结果:平均每个样品测定11min;茶碱血药浓度在1.25～40μg.mL-1范围内线性关系良好,最低检测限为0.5μg.mL-1;平均方法回收率为90.33%(RSD=2.51%);日内、日间RSD分别为2.34%～3.36%、2.03%～6.51%。结论:本方法方便、快捷、灵敏,适用于茶碱的治疗药物监测。     

HPLC法测定人血浆中5-氟尿嘧啶的浓度

目的：建立测定人血浆中5-氟尿嘧啶（5-FU）浓度的方法。方法：血浆采用乙酸乙酯二次提取处理后以高效液相色谱法进样测定,其中,色谱柱为Ultimate C18,流动相为10mmol·L-1 KH2PO4溶液,流速为1．0mL·min-1,检测波长为265nm,柱温为40℃。结果：5-Fu血药浓度在0．48-61．4μg·mL。范围内线性关系良好（r=0．9998）,最低检测浓度样品在为0．48μg·mL-1,日内和日间RSD分别为5．12％～9．98％、5．28％～10．95％（n=5）,高、中、低3种浓度的方法回收率均高于85％。样品在室温放置、冷冻保存、反复冻融条件下稳定性良好。结论：该方法具有操作简便可靠、准确、稳定性高等特点,适用于人血浆中5-Fu浓度的测定。     

高效液相色谱法测定人体血浆中甲氨蝶呤浓度的改进

目的 改进高效液相色谱（HPLC）法测定人体血浆中甲氨蝶呤浓度的方法.方法 观察HPLC法测定人体血浆中甲氨蝶呤浓度常规方法和改进方法对色谱峰和出峰时间的影响.常规方法以Symmetryshield RD 18柱（150 mm ×3.9 mm,5.0 μm）为色谱柱,流动相为磷酸盐缓冲液（pH =7.2）-甲醇（88∶12）,流速为1.0 mL/min,柱温为35℃,Waters486型可变波长检测器,检测波长为302 nm;改进方法流动相改为磷酸盐缓冲液（pH =7.2）-乙腈（88∶12）,其他均与常规方法相同.结果 两种方法比较,改进方法色谱峰杂质峰少,分离度好,且较常规方法出峰时间缩短（P＜0.05）.结论 改进方法准确可靠,杂质峰少,分离度好,检测时间短,更适用于甲氨蝶呤的血药浓度监测.