宫颈鳞癌患者血浆微小RNA-424-5p的表达及其临床意义和靶基因的预测

目的探讨血浆微小RNA(miR)-424-5p在宫颈鳞癌中的表达情况及其与临床病理特征的关系并预测其可能的靶基因。方法收集200例宫颈鳞癌患者及100名健康女性的血浆样本,采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)测定血浆miR-424-5p水平,分析血浆miR-424-5p水平与宫颈鳞癌临床病理因素的关系,并通过生物信息学分析,预测miR-424-5p可能的靶基因。结果宫颈鳞癌患者血浆miR-424-5p相对表达水平低于健康对照组(P=0.023);血浆miR-424-5p相对表达水平与宫颈鳞癌的临床分期有关(P<0.05);而与及肿瘤分化程度、淋巴结转移、年龄、绝经状况无相关性(P>0.05)。通过生物信息学分析,miR-424-5p预测的靶基因多数与细胞周期因子有关。结论 miR-424-5p有可能通过调节细胞周期因子在宫颈癌发生、发展中起作用。     

miR-9-5p在乳腺癌组织中的表达与生物信息学分析

目的 探讨miR-9-5p在乳腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系,预测miR-9-5p靶基因并分析其在乳腺癌进展中的作用。方法 通过实时荧光定量PCR检测83例乳腺癌和癌旁正常组织中miR-9-5p的相对表达量。分析miR-9-5p表达水平与乳腺癌患者临床病理特征的关系。使用生物信息学方法预测miR-9-5p的靶基因并筛选关键节点基因,并对靶基因进行富集分析。结果 miR-9-5p在乳腺癌组织中的表达高于癌旁正常组织[1.45(0.41,4.72)vs 1.01(0.35,3.68),P<0.01],其表达水平与乳腺癌组织学级别、肿瘤大小、雌激素受体状态、孕激素受体状态、Ki67增殖指数和分子分型有关(P<0.05),与年龄、肿瘤部位、TNM分期、淋巴结转移情况和人表皮生长因子受体2状态无关(P>0.05)。miR-9-5p在80.95%(17/21)的三阴性乳腺癌、32.56%(14/43)的管腔型乳腺癌呈高表达,差异具有统计学意义(P<0.05)。生物信息学方法预测的靶基因有138个,并筛选出SIRT1、BCL6、FOXP1等关键节点基因。miR-9-...     

血清miR-30e-5p、NGAL在造影剂致急性肾损伤大鼠中的表达及其意义

目的 观察血清miR-30e-5p、中性粒细胞明胶酶相关的脂蛋白(NGAL)在造影剂致急性肾损伤(CI-AKI)大鼠血清中的表达,并探讨其意义。方法 将72只雄性SD大鼠随机分为正常组和模型组,每组36只。所有大鼠禁食水12 h后,模型组给予腹腔注射10 mg·kg^-1呋塞米注射液,尾静脉注射10 mL·kg^-1 76%复方泛影葡胺注射液;正常组给予腹腔及尾静脉各注射10 mL·kg^-1 0.9%NaCl。用试剂盒检测血清肌酸酐(SCr)和NGAL的含量,用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-30e-5p的表达水平。结果 模型组4 h的SCr表达量为(130.55±9.57)μmol·L^-1,而后逐渐升高,8 h达到高峰,48 h的SCr表达量较0 h升高≥26.5μmol·L^-1,表明大鼠造模成功。模型组4 h的血清NGAL表达量为(21.31±1.63)ng·mL^-1,较0 h升高,无明显峰值。与正常组相比,模型组血清NGAL值均明显升高,差异均有统计...     

急性氯化汞中毒后mmu-miR-429-5p靶向调控Aqp1致肾损伤的研究

目的 本研究通过小鼠急性氯化汞(Mercury dichloride,HgCl2)中毒模型,研究肾水通道蛋白-1(Aquaporin-1,Aqp1)及mmu-miR-429-5p的表达变化,从而探究其可能发挥作用的分子机制,为急性HgCl2中毒后的临床治疗提供更多的靶点以及为司法鉴定提供更多思路.方法 全自动生化分析仪...     

miR-21-5p在急性有机磷农药中毒患者血清中的表达意义及与CK-MB、AMS水平的相关性分析

目的探究miR-21-5p在急性有机磷农药中毒患者血清中的表达意义及与肌酸磷化脢-同功脢MB(CK-MB)、血清淀粉酶(AMS)水平的相关性。方法选择2018年9月至2019年12月在我院救治的60例急性有机磷农药中毒患者作为中毒组,50例正常体检者作为对照组。入院后采取患者静脉血3 ml,qPCR检测急性有机磷农药中毒患者血清miR-21-5p表达水平,ELISA法检测急性有机磷农药中毒患者血清CK-MB、AMS水平。分析两组间血清miR-21-5p表达水平的差异及其与CK-MB、AMS水平的相关性。结果qRT-PCR结果显示,中毒组血清miR-21-5p相对表达量为1.48±0.36,明显高于对照组的1.05±0.31,差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA结果显示,中毒组血清CK-MB和AMS相对表达量明显高于对照组的相对表达量,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清miR-21-5p与CK-MB和AMS水平呈正相关性(P<0.05)。血清miR-21-5p的表达与患者是否有呼吸衰竭和胰腺炎有关(P<0.05)。结论miR-21-5p在急性有机磷农药中毒患者血清中的表达显著升高且与CK-MB、AMS水平呈正相关。     

miR-21-5p对乳腺癌多西他赛耐药细胞株存活的影响及其机制研究

目的观察miR-21-5p表达对乳腺癌多西他赛(Doc)耐药细胞株存活率的影响并探讨其机制。方法建立Doc耐药的HCC1937/Doc稳转细胞株,给予转染miR-21-5p mimics、miR-21-5p inhibitor、control mimics及control inhibitor,以MTT试验检测不同浓度梯度Doc处理的HCC1937及HCC1937/Doc细胞生存率,计算ICD_(50)。qRT-PCR检测control mimics或inhibitor对照组、阴性对照组(NC)及HCC1937/Doc组miR-21-5p表达。qRT-PCR及Western blot分别检测HCC1937/Doc及HCC1937细胞,以及给予miR-21-5p mimics、miR-21-5p inhibitor转染HCC1937/Doc细胞PDCD4 miRNA及蛋白表达。结果 miR-21-5p mimic转染HCC1937/Doc细胞,Doc的ICD_(50)(1.98±0.16)μmol/L高于NC组(0.78±0.06)μmol/L及control mimics组(1.08±0.17)μmol/L(F=77.54,P<0.001)。miR-21-5p inhibitor转染HCC1937/Doc细胞,Doc的ICD_(50)(46.32±7.85)μmol/L明显低于NC组(110.54±7.92)μmol/L及control inhibitor组(109.41±9.57)μmol/L(F=202.4,P<0.001)。在HCC1937/Doc细胞中,PDCD4 mRNA及蛋白表达明显低于NC组(t=6.254,P=0.003;t=5.942,P=0.004);给予miR-21-5p mimic转染HCC1937/Doc细胞,PDCD4 mRNA及蛋白表达明显低于NC组(t=6.583,P=0.003;t=10.57,P=0.001)。给予miR-21-5p inhibitor转染HCC1937/Doc细胞,PDCD4 mRNA及蛋白表达明显高于NC组(t=4.242,P=0.013;t=4.611,P=0.009)。结论下调miR-21-5p表达通过上调PDCD4表达改善乳腺癌细胞的多西他赛耐药性。     

顺铂诱导急性肾损伤关键基因的筛选和调控网络的构建

目的　通过生物信息学鉴定顺铂诱导的急性肾损伤中的关键基因和通路,为急性肾损伤的治疗提供潜在靶点。方法　数据提取时间：建库至2021年3月1日。我们先从基因表达综合数据库（GEO）下载了GSE106993和GSE153625数据集,并使用R语言筛选出差异基因,再采用基因本体论（GO）富集分析和京都基因与基因组大百科全书数据库（KEGG）分析鉴定共同差异基因的主要功能,接着使用STRING数据库对共同的差异基因构建互作网络,并用Cytoscape筛选出关键基因。然后运用TransmiR v2.0数据库和miRWalk 2.0数据库构建转录因子（TF）/微小RNA（miRNA）/信使RNA（mRNA）调控网络。最后通过ETMC数据库筛选出靶向关键基因的中草药。结果　我们发现在顺铂诱导的急性肾损伤模型中上调基因有817个,下调基因有769个。肿瘤坏死因子信号通路、P53信号通路、代谢信号通路均是顺铂诱导的急性肾损伤的重要通路。通过蛋白互作网路,我们鉴定出8个关键基因（TrP53、EGF、Stat3、Jun、Casp3、Cdh1、Ptgs2、CAT）。并且构建了TF/miRNA/mRNA调控网络,TF 2个,miRNA 4个,mRNA 214个。ETMC数据库分析结果显示桑叶和半夏可用于顺铂诱导的急性肾损伤的治疗。结论　本研究通过生物信息学分析筛选出顺铂诱导的急性肾损伤中的8个关键基因和3个重要信号通路,为顺铂诱导急性肾损伤的治疗提供靶点。桑叶和半夏两味中药有望成为治疗急性肾损伤的中草药。     

lncRNAVIM-AS1靶向miR-126-5p调控肺癌细胞放射敏感性分子机制研究

目的 研究lncRNA VIM-AS1对肺癌A549细胞放射敏感性的影响和潜在的分子机制.方法 qRT-PCR检测lncRNA VIM-AS1和miR-126-5p在正常肺上皮细胞BEAS-2B及肺癌细胞A549、SPC A1和HCI-H596中的表达水平,克隆形成实验测定不同放射剂量(0、2、4、6、8 Gy)处理后...     

p21基因对肝癌细胞的生物学影响

目的探讨逆转录病毒介导的p21基因对肝癌Hep3B细胞的杀伤作用。方法通过脂质体将有p21基因的逆转录病毒载体MMLV-p21转染肝癌Hep3B细胞系,并用G418筛选。试验分为转p21基因的Hep3B-P21组及相同遗传背景及培养过程的两对照组肝癌Hep3B系细胞组、转Hep3B-MMLV组3组。采用RT-PCR检测实验组p21基因的表达;应用流式细胞计数分别分析3组细胞周期;MTT法检测细胞增殖并比较细胞抑制率。结果野生p21基因阻止Hep3B系细胞进入S期,停滞在G1期,Hep3B-P21组细胞增殖比两对照组明显受到抑制（P〈0.05）。结论逆转录病毒介导p21基因可有效抑制肝癌Hep3B系细胞的增殖并诱导肝癌细胞的凋亡。     

MicroRNA-501-5p在乳腺癌中的作用

目的 探讨microRNA-501-5p(miR-501-5p)在乳腺癌中的作用。方法 选取2020年3月至2021年3月牡丹江市肿瘤医院收治的40例初次诊断为乳腺癌的患者为乳腺癌组,选取同期在牡丹江医学院附属红旗医院体检的40名体检者为健康对照组,收集两组患者的血清,运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-501-5p的表达水平;运用免疫组化技术检测LAMTOR5在组织中的表达情况;绘制ROC曲线分析血清miR-501-5p、癌胚抗原（CEA）、糖类抗原153(CA153)、糖类抗原125(CA125)诊断乳腺癌的价值。结果 乳腺癌组织中miR-501-5p的表达水平为（1.12±0.23）,高于癌旁组织的（0.96±0.15）,差异有统计学意义（P<0.05）。乳腺癌组患者血清中miR-501-5p的表达水平为（0.96±0.67）,高于健康对照组的（0.88±0.12）,差异有统计学意义（P<0.05）。miR-501-5p在淋巴结转移、TNM分期Ⅲ、Ⅳ期患者中的表达水平高于未发生淋巴结转移、TNM分期Ⅰ、Ⅱ期患者,差异有统计学意义（P<0.05）...     

HOXA10基因与p21基因在子宫内膜癌中表达的相关性

目的探讨子宫内膜癌中同源盒基因A10(HOXA10)及p21基因表达的相关性。方法提取子宫内膜癌及正常子宫内膜的mRNA及总蛋白,使用RT-PCR检测HOXA10及p21基因表达,Western blot检测HOXA10蛋白表达,分析HOXA10及p21基因表达相关性。结果HOXA10及p21基因在子宫内膜癌中表达下调,两者之间表达具有正相关。HOXA10蛋白随着肿瘤等级上升表达呈下降趋势。结论子宫内膜癌中HOXA10、p21基因的低表达可能参与子宫内膜癌的进展。     

lncRNA FGD5-AS1靶向miR-524-5p调控前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制研究

目的 探讨lncRNA FGD5-AS1对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制。方法 培养正常人前列腺上皮细胞P69及前列腺癌细胞系LNCaP、DU145、PC-3;qRT-PCR检测lncRNA FGD5-AS1和miR-524-5p的表达水平;将LNCaP细胞分为si-lncRNA FGD5-AS1组、si-NC组、miR-524-5p组、miR-NC组、anti-miR-524-5p+si-lncRNA FGD5-AS1组、anti-miR-NC+si-lncRNA FGD5-AS1组;CCK-8检测细胞活性;克隆形成实验检测细胞克隆数;Transwell检测细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告实验检测lncRNA FGD5-AS1和miR-524-5p的靶向关系。结果 与正常人前列腺上皮细胞P69相比,前列腺癌细胞系LNCaP、DU145、PC-3中lncRNA FGD5-AS1表达水平升高,miR-524-5p表达水平降低(P<0.05)。干扰lncRNA FGD5-AS1表达或miR-524-5p过表达后,细胞活性降低,细胞克隆数、迁移和侵袭数量减少(P<0....     

miR-328-5p对乳腺癌细胞的调控机制研究

目的 探究miR-328-5p对乳腺癌细胞的调控机制。方法 选取乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231及正常乳腺上皮细胞系MCF10A,据不同转染方法分为Control组、miR-NC组、miR-328-5p mimic组及转染miR-328-5p mimic+整合素α5(ITGA5)组,采用RT-PCR检测乳腺癌细胞系内miR-328-5p、ITGA5 mRNA,采用CCK-8法检测乳腺癌细胞MCF-7增殖情况,采用Annexin-FITC/PI双染法流式细胞术检测乳腺癌细胞MCF-7凋亡情况,采用Western blot法检测ITGA5、PI3K、AKT、p-PI3K和p-AKT蛋白表达水平。结果 乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231中miR-328-5p mRNA含量显著低于正常乳腺上皮细胞系MCF10A,而ITGA5 mRNA含量显著高于正常乳腺上皮细胞系MCF10A(P<0.05)。miR-328-5p mimic组miR-328-5p mRNA含量显著高于Control组和miR-NC组(P<0.05)。miR-328-5p转染后ITGA5荧光素酶...     

人类miR-425靶基因预测及生物信息学特征分析

目的 采用生物信息学工具分析人类miR-425(has-miR-425)的转录调控、靶基因功能和蛋白-蛋白互作,为研究其在细胞调控过程中的作用提供理论依据.方法 应用miRBase、UCSC Genome Browser等数据库,分析has-miR-425在不同物种的序列情况,以及在基因组上下游10kb以内的CpG岛分布情况、转录起始位置(TSS)、转录因子结合位置(TFBS)等;选择TargetScan、PicTar、MiRanda三种计算方法预测has-miR-425的靶基因,取三个预测结果 的交集靶基因分别进行注释描述和富集分析.采用STRING软件对交集靶基因进行蛋白与蛋白互作网络分析.结果 has-miR-425序列在人、大鼠、猕猴、黑猩猩之间呈现高度保守性;has-miR-425可能具有独立的启动子.共预测到319个潜在的靶基因,这些靶基因主要参与蛋白去磷酸化、细胞氮化合物反应、氮化合物反应等生物学过程;主要分子功能为酶结合、转移酶活性、金属离子结合等;主要细胞组成为:膜结合细胞器、细胞内膜有界细胞器、细胞核等.蛋白-蛋白互作分析显示靶基因中PAFAH1B1与DYNC1I2、MAP2K6与ZAK之间的关联度最高.结论 通过对has-miR-425转录调控元件、靶基因的分析,为has-miR-425在细胞调控中的功能与调控机制提供了重要的理论依据.     

白细胞介素-32在大鼠急性肾损伤后的表达及意义

目的:探讨白细胞介素(IL)-32在缺血所致大鼠急性肾损伤后的表达及意义。方法:将40只雄性SD大鼠随机分为对照组和急性肾损伤组(AKI组),每组20只,采用夹闭双侧肾蒂的方法制备缺血性急性肾损伤大鼠模型。自动生化分析仪测定血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)水平,酶联免疫吸附试验检测大鼠血清IL-32、尿液中肾损伤分子(KIM)-1的表达。结果:术后5、7d,AKI组的SCr水平均较对照组显著升高(P0.05);术后3、5、7d,AKI组血清IL-32、尿KIM-1水平均较对照组显著升高(P0.05);术后7d,AKI组血清IL-32、尿KIM-1水平与肾小管损伤评分正相关;AKI组术后BUN水平在术后有一过性升高。结论:IL-32在大鼠急性肾损伤后高表达,且水平与肾损伤程度正相关,可作为AKI早期诊断的生物学标志物。     

长链非编码RNA母系表达基因8靶向微小RNA-497-5p调控血管瘤血管内皮细胞的增殖和凋亡

目的 探讨长链非编码RNA母系表达基因8(MEG8)靶向微小RNA(miR)-497-5p对血管瘤血管内皮细胞的增殖和凋亡的影响.方法 实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测河南中医药大学第一附属医院2017年1月至2018年6月收集的52例血管瘤组织和与其对应的瘤旁正常皮肤组织中MEG8和miR-497...     

乳腺癌组织p21WAF1基因多态性及其与预后的关系

目的探讨乳腺癌组织p21^WAF1 DNA多态性及其与预后的关系。方法采用聚合酶链反应单链构象多态性技术(PCR-SSCP)和免疫组化S-P法检测100例乳腺癌组织p21^WAF1 DNA多态性和蛋白表达，并根据随访结果行预后分析。结果100％(18／18例)的具有p21^WAF1 DNA多态性的乳腺癌组织p21^WAF1蛋白表达阳性，39％(32/82)的无p21^WAF1 DNA多态性乳腺癌组织蛋白表达阳性，p21^WAF1 DNA多态性组明显高于无多态性组(X^2=21．95，P＜0．01)；p21^WAF1 DNA多态性与p21^WAF1蛋白表达呈正相关(rs=0．576，P＜0．01)。单因素预后分析显示p21^WAF1 DNA多态性组生存期低于无多态性组(X^2=6．02，P＜0．01)。结论乳腺癌p21^WAF1 DNA多态性可能是造成乳腺癌患者生存期缩短的一个重要因素。     

lncRNA TMPO-AS1靶向miR-1224-5p调控肝癌细胞的增殖和凋亡

目的 研究长链非编码RNA(lncRNA)TMPO antisense RNA 1(TMPO-AS1)与微小RNA(miRNA)-1224-5p的靶向关系及对肝癌细胞的增殖和凋亡的影响.方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定lncRNA TMPO-AS1和miR-1224-5p在肝癌组织中的表达.生物信息学预测...