4—乙酰胺苯基维甲酸酯抑制肿瘤细胞侵袭重组基底膜及其作用机理

目的研究新维甲类化合物４－乙酰胺苯基维甲酸酯（４－ＡＰＲ）对Ｂ１６－Ｆ１０小鼠黑色素瘤细胞侵袭能力的抑制作用,探讨其作用机理。方法癌细胞侵袭能力用重组基底膜侵袭试验衡量;ＰＡＧＥ底物酶谱方法检测Ⅳ型胶原酶活性;斑点杂交检测ＣＮＥ－２Ｚ细胞ＴＩＭＰ－１ｍＲＮＡ表达;以细胞生长曲线评价药物对Ｂ１６－Ｆ１０细胞的生长抑制作用。结果在１０－５ｍｏｌ／Ｌ和１０－６ｍｏｌ／Ｌ时,４－ＡＰＲ对Ｂ１６－Ｆ１０小鼠黑色素瘤细胞侵袭重组基底膜的抑制率分别为５４．２％和４１．９％,对ＣＮＥ－２Ｚ细胞培养上清中的Ⅳ型胶原酶活性有降低作用。此外,４－ＡＰＲ可抑制Ｂ１６－Ｆ１０细胞与ＬＮ、ＦＮ和Ｍａｔｒｉｇｅｌ的粘附,诱导ＣＮＥ－２Ｚ细胞ＴＩＭＰ－１ｍＲＮＡ表达。结论４－ＡＰＲ抑制Ｂ１６－Ｆ１０细胞侵袭重组基底膜。４－ＡＰＲ的抗侵袭活性与抑制肿瘤细胞的粘附,降低肿瘤细胞培养上清中Ⅳ型胶原酶的活性和（或）诱导肿瘤细胞ＴＩＭＰ－１ｍＲＮＡ表达等有关。     

三氧化二砷诱导肝癌细胞凋亡的初步研究

目的：研究三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）对肝癌细胞株Ｂｅｌ－７４０２的抑制增殖效应及凋亡诱导作用。方法：采用ＭＴＴ法检测药物对细胞的抑制作用、相差显微镜和电镜观察细胞形态变化、琼脂糖凝胶电泳测定ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ、流式细胞术检测细胞周期变化。结果：各浓度Ａｓ２Ｏ３组（０．２５～１６μｍｏｌ／Ｌ）均可抑制肝癌细胞增殖,且抑制率具有浓度和时间依赖性,同作用时间呈直线相关,其中浓度组为１０μｍｏｌ／Ｌ）均可抑制肝癌细胞增殖,且抑制率具有浓度和时间依赖性,同作用时间呈直线相关,其中浓度组为１０μｍｏｌ／Ｌ抑制率最大,９６ｈ时达８３．８９％,２μｍｏｌ／Ｌ Ａｓ２Ｏ３以抑制肝癌细胞的增殖为主,但在形态及生化方面未见凋亡改变;１０μｍｏｌ／Ｌ Ａｓ２Ｏ３作用１０ｈ可见形态学变化,４８ｈ可见ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ出现。流式细胞检查     

反义c—fos,c—jum对CNE—2Z细胞增殖及PCK—α表达的影响

为探讨反义ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ对ＣＮＥ－２Ｚ细胞生长的影响及ＰＫＣ－α表达的关系。本研究联合应用反义ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｊｕｎ寡核苷酸作用于ＣＮＥ－２Ｚ细胞，ＭＴＴ法检测细胞生长指数，流式细胞仪（ＦＣＭ）检测细胞ＰＫＣ－α表达。结果显示，ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ反义寡核苷酸在Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ（ＩＰ）冒险氏有效浓度１．７×１０＾－６μｇ／ｍｌ作用下，对ＣＮＥ－２Ｚ细胞抑制作用随浓度增大而增强，最低有     

三氧化二砷对多发性骨髓瘤细胞的影响

目的：了解多发性骨髓瘤细胞对Ａｓ２Ｏ３的反应及其可能机制。方法：使用多发性骨髓瘤细胞系ＲＰ－ＭＩ８２２６和Ｕ２６６细胞作为体外模型。细胞凋亡经细胞形态学、流式细胞仪和ＤＮＡ凝胶电泳判定通过测定细胞内荧光染料Ｒｈｏｄａｍｉｎｅ１２３的染色强度分析线粒体跨膜电位（△Ψｍ），并采用蛋白印迹分析蛋白剪切情况。结果：不同浓度的Ａｓ２Ｏ３对ＲＰＭＩ８２２６和Ｕ２２６细胞产生不同的效应：０．１～０．５ｍｏｌ／Ｌ的Ａｓ２Ｏ３抑制其增殖，２．０ｕｍｏｌ／Ｌ的Ａｓ２Ｏ３浓度的Ａｓ２Ｏ３诱导其凋亡，而１．０ｕｍｏｌ／Ｌ的Ａｓ２Ｏ３在抑制细胞增殖的同时轻度诱导细胞凋亡。Ａｓ２Ｏ３诱导的ＭＭ细胞凋亡伴随线粒体△Ψｍ下降的ｃｓａｐａｓｅ－３的活化。结论：Ａｓ２Ｏ３具有一个相对较广的诱导凋亡效应谱，而线粒体△Ψｍ破坏是Ａｓ２Ｏ３诱导细胞凋亡     

全反式维甲酸对阿糖胞苷诱导HL—60细胞凋亡的影响

目的：探讨ＨＬ－６０细胞经全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）作用后对化疗药物阿糖胞苷（ＡＲＡ－ｃ）诱导凋亡敏感性的变化。方法：应用光镜检查凋亡细胞形态,ＤＮＡ电泳检查梯状条带及流式细胞周期分布、凋亡细胞率和ｂｃｌ－２蛋白表达的阳性细胞率和相对荧光强度（ＭＦＩ）。结果：ＡＴＲＡ０．３ｍｇ／Ｌ作用ＨＬ－６０细胞７２ｈ后,Ｓ期细胞显著减少至３２．９％（Ｐ〈０．０５）,Ｇ０／Ｇ１期细胞明显增加到５８．５％（Ｐ〈０．０５）,ｂｃｌ－２阳性细胞率和ＭＦＩ分别下降至１８％和０．６３（Ｐ〈０．０５）;Ａｒａ－Ｃ１．５ｍｇ／Ｌ作用ＨＬ－６０细胞４ｈ,凋亡细胞率为５５．１％,ＤＮＡ电泳风明显的梯状条带。当ＨＬ－６０细胞经ＡＴＲＡ０．３ｍｇ／Ｌ作用７２ｈ手中Ａｒａ－Ｃ１．５ｍｇ／Ｌ继续培养４ｈ,细胞凋亡率明显减少至３４．４％（Ｐ〈０．０５）,     

视黄酸对BALB／C小鼠骨髓瘤细胞增殖及6s DNA聚合酶的抑制作用

本研究以终浓度３３．３μｍｏｌ／Ｌ的视黄酸和６．７μｍｏｌ／Ｌ的阿糖胞苷与ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠骨髓瘤细胞株培养７２小时，结果细胞增殖抑制率分别为４５．３％和６１．４％。以［３Ｈ］－ｄＴＴＰ参入法测定ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠骨髓瘤细胞核纯化的６ＳＤＮＡ聚合酶活性，发现体外反应系统中加入终浓度为２μｍｏｌ／Ｌ，４μｍｏｌ／Ｌ，６μｍｏｌ／Ｌ，８μｍｏｌ／Ｌ，１０μｍｏｌ／Ｌ的视黄酸，６ｓＤＮＡ聚合酶活性的抑制率分     

神经生长因子（NGF）对H2O2诱导胶质瘤A—172细胞凋亡的抑制效应及其机制

目的：研究神经生长因子（ＮＧＦ）对氧化氢（Ｈ２Ｏ２）诱导神经胶质瘤细胞凋亡的抑制作用及其机制。方法：抑制细胞增殖的检测采用ＭＴＴ法,吖啶橙（ＡＯ）染色荧光显微观察细胞的形态学变化,ＤＮＡ琼脂糖电泳检测ＤＮＡ断裂,二硫硝基苯甲酸（ＤＴＮＢ）法检测细胞内不原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）水平的变化。结果：１００～８００μｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２Ｏ２明显抑制Ａ－１７２细胞增殖,２００μｍｏｌ／Ｌ Ｈ２Ｏ２作用１２小时后形     

鼻咽癌细胞潜在性倍增时间的流式细胞计量术研究

目的研究目前文献中常用的计算方法和５－溴脱氧尿苷（ＢｒｄＵ）标记方法对不同生长状态肿瘤细胞潜在性倍增时间（Ｔｐｏｔ）检测结果的影响。方法应用ＢｒｄＵ／ＤＮＡ双参数流式细胞分析和相对运动法对鼻咽癌细胞株ＣＮＥ进行研究。结果ＢｒｄＵ标记浓度１０～１００μｍｏｌ／Ｌ、标记时间５～３０ｍｉｎ和相对运动时间１．５～８．５ｈ对Ｔｐｏｔ检测结果无显著影响（Ｐ＜０．０５）；平台期ＣＮＥ细胞未能被ＢｒｄＵ标记，而指数生长期ＣＮＥ细胞和平台期ＣＮＥ细胞换新鲜培养液后ＢｒｄＵ标记指数分别为４８．８％和３３．６％。结论本方法适宜于今后的临床应用，有助于解释临床上肿瘤加速再增殖发生的时间问题。     

Cryptophycin诱导肾癌细胞凋亡的研究

目的 探讨诱导肾癌细胞凋亡的新方法及其机制。方法 采用ＨＥ滩色、荧光染色、琼脂糖电池等方法，分别对Ｃｒｙｔｏｐｈｙｃｉｎ（ＣＰＰ）不同的药物浓度（０，１，５，１０，５０ｐｍｏｌ／Ｌ）和不同增减时间段（４～２４ｈ）所诱导的凋亡细胞形态、出现时间和密度比例进行观察和比较。结果 在光镜下能观察到ＣＰＰ诱导的肾癌细胞凋亡的典型形态，用ＡＯ／ＥＢ荧光染色能区分出４种不同细胞，ＤＮＡ电泳证实有ＤＮＡ裂解的现象     

EBV-BHRF1基因阳性与阴性细胞株对3种诱导凋亡因素抵抗性差异的研究

目的观察ＥＢＶ┐ＢＨＲＦ１基因阳性（ＳＵＮＥ┐１、Ｒａｊｉ和Ｂ９５┐８）与阴性（Ｋ５６２、ＹＡＣ）细胞株对３种诱导细胞凋亡（ａｐｏｐ┐ｔｏｓｉｓ）因素（无血清培养４８小时，４３℃作用１０分钟或２×１０－６ｍｏｌ／Ｌ地塞米松作用２４小时）的抵抗力差异。方法ＰＣＲ扩增ＥＢＶ┐ＢＨＲＦ１基因片段诱导后经电镜及电泳ＤＮＡ检测细胞凋亡。结果分别从Ｂ９５┐８、Ｒａｊｉ及人低分化鼻咽癌细胞株（ＳＵＮＥ┐１）ＤＮＡ中扩增出ＥＢ病毒的ＢＨＲＦ１全基因片段，而Ｋ５６２、ＹＡＣ细胞株则不含该基因片段。分别经上述３种方法处理后，前３种细胞株的形态及ＤＮＡ电泳行为未发生明显改变，而后２种细胞株则出现典型的细胞凋亡特征，即细胞核凝缩，细胞膜及细胞器基本保持完整；ＤＮＡ电泳出现梯形（Ｌａｄｄｅｒ）条带。结论初步揭示ＢＨＲＦ１基因产物在抑制上述因素所诱导的细胞凋亡方面起着重要作用     

两株鼻咽癌细胞中TPK,PKC的活性研究

目的：研究ＣＮＥ－１和ＣＮＥ－２Ｚ细胞浆中ＰＫＣ、ＴＰＫ及胞膜ＴＰＫ活性，及槲皮素对它们的影响；方法：常规培养ＣＮＥ－１、ＣＮＥ－２Ｚ和淋巴细胞，用特异底物法、特异激活剂法分别测定其ＴＰＫ、ＰＫＣ活性，两两比较用ｔ检验；结果：ＣＮＥ－１细胞胞浆ＰＫＣ、ＴＰＫ均明显高于脐带血淋巴细胞（Ｐ＜０．０１），而胞膜ＴＰＫ无明显变化；ＣＮＥ－２Ｚ细胞胞浆ＰＫＣ却明显低于淋巴细胞（Ｐ＜０．０１），胞浆、胞膜ＴＰＫ活性均明显增高（Ｐ＜０．０１）。槲皮素（１００μｍｏｌ／Ｌ）使ＣＮＥ－２Ｚ细胞中胞膜ＴＰＫ明显的增高（Ｐ＜０．０１），而对其胞浆ＰＫＣ、ＴＰＫ均无明显影响；该浓度下的槲皮素也能使ＣＮＥ－１细胞中胞膜ＴＰＫ活性明显升高（Ｐ＜０．０１），但强烈抑制其胞浆ＴＰＫ活性（Ｐ＜０．０１），而对其胞浆ＰＫＣ也没有明显影响；结论：胞浆、胞膜ＴＰＫ和胞浆ＰＫＣ可能与鼻咽癌细胞株的分化程度有关     

辐射诱导鼻咽癌细胞系凋亡及其相关基因的研究

目的Ｘ线诱导人鼻咽癌细胞系ＣＮＥ和ＣＮＥ－２凋亡及其相关基因的研究。方法应用ＤＮＡ荧光染料Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２、免疫组化、ＲＴ－ＰＣＲ、ＤＮＡ杂交等方法进行观察和检验。结果一定剂量照射后,ＣＮＥ凋亡指数与时间、剂量有相关性,ＣＮＥ和ＣＮＥ－２两种细胞系存在明显不同的凋亡反应。免疫组化方法检测,ＣＮＥ的ｂｃｌ－２蛋白呈强阳性,而ＣＮＥ－２为阴性;进一步采用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测,发现ＣＮＥ－２存在ｐ５３ｍＲＮＡ扩增产物,而ＣＮＥ却不存在。ＣＮＥ和ＣＮＥ－２的ｐ５３及ｂｃｌ－２基因的ＤＮＡ杂交结果均为阳性,但ＣＮＥ细胞ｐ５３基因的２．８ｋｂ片段较５．６ｋｂ片段明显减弱,说明在ＣＮＥ中存在ｐ５３基因的部分缺失。结论人鼻咽癌细胞系的凋亡指数有时间、剂量相关性;ＣＮＥ、ＣＮＥ－２两种细胞系的凋亡指数有明显差异,可能与ＣＮＥ中抗凋亡基因ｂｃｌ－２的过度表达及ｐ５３基因部分缺失密切相关。     

卵巢癌细胞系BRCA1蛋白表达的雌激素调控

目的：观察不同浓度雌激素对卵巢癌细胞系乳腺癌／卵巢癌易感基因（ＢＲＣＡ１）蛋白表达的影响。方法：采用免疫组化及计算机图象分析方法，检测体外不同浓度（１０＾－９ｍｏｌ／Ｌ￣１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ）的１７－β雌二醇（Ｅ２）对卵巢癌ＯＶＣＡＲ３和ＳＫＯＶ３细胞系ＢＲＣＡ１蛋白表达的影响。结论：雌激素能够诱导卵巢癌ＯＶＣＡＲ３和ＳＫＯＶ３细胞系ＭＲＣＡ１蛋白的表达，可通过该方法探索治疗卵巢癌的新途径。     

氧化苦参碱对肿瘤诱导血管内皮细胞增殖的抑制作用

目的 探讨氧化苦参碱（Ｏｘｙ）对肺癌和胃癌细胞诱导血管内皮细胞（ＶＥＣ）增殖的抑制作用。方法 用ＭＴＴ法检测不同浓度Ｏｘｙ对ＶＥＣ、人肺腺癌ＳＰＣ－Ａ－１细胞、人低分化胃癌ＭＫＮ－４５细胞增殖及ＳＰＣ－Ａ－１和ＭＫＮ－４５细胞诱导ＶＥＣ增殖的抑制。结果 Ｏｘｙ浓度为２．５～１０ｍｇ／ｍｌ时,对ＶＥＣ增殖的抑制率为４．６％～３６．４％;Ｏｘｙ浓度为０．１５６～１０ｍｇ／ｍｌ时,对肺癌ＳＰＣ－Ａ－１和     

若干植物生长调节剂衍生物对 DNA 多聚酶及肿瘤生长的抑制作用

目的：为了在体外培养的肿瘤细胞中证实一组有生物活性载体：磺胺（ＳＵ）、９－氨基吖啶（ＡＣＤ）、异烟肼（ＩＮＨ）的植物生长调节剂４－氯（Ｍ）、２，４－二氯（Ｄ）或２，４，５－三氯（Ｔ）的萘氧乙酸、２，３，５－三氯苯甲酸（ＴＢ）、α－萘乙酸（ＮＡＡ）的衍生物对小鼠艾氏腹水癌细胞ＤＮＡ多聚酶（ＤＰ）的抑制作用，并筛选出抑酶力最强的化合物。方法：参照Ｋ．Ｏｎｏ法分离、纯化并检测ＤＰ活性。ＭＴＴ法测定对体外培养肿瘤细胞的ＩＣ５０。结果：１１个植物生长调节剂中５个化合物在１００μｇ／ｍｌ浓度下对ＤＰ粗酶抑制作用大于５０％，抑制率分别是Ａ８４０３（２，４－Ｄ－ＡＣＤ）７８．５±５．５％，Ａ８８４５（２，４，５－Ｔ－ＳＭＺ）７５．８±１６．０％，Ａ８６０１（ＮＡＡ－ＳＮ）７４．５±６．０％，Ａ８８７４（２，４，５－Ｔ－ＩＮＨ）７３．４±２．９％，Ａ８８７３（４Ｍ－ＩＮＨ）７１．０±１２．１％。其中Ａ８４０３（９－２，４－二氯苯氧乙酸氨基吖啶，２，４－Ｄ－ＡＣＤ）抑制ＤＰ能力最强。对ＤＰα的ＩＣ５０为３．４１４２μｇ／ｍｌ，对ＤＰβ的ＩＣ５０为３．７５２３μｇ／ｍｌ。Ａ８４０３对体外培养的低分化鼻咽癌ＣＮＥ－２细胞及ＨｅＬａ     

rhTNF－α对昆明种小鼠艾氏腹水癌细胞杀伤作用的研究

昆明种小鼠腹腔接肿艾氏腹水癌细胞，３天后腹腔注射重组肿瘤坏死因子（ｒｈＴＮＦ－α），隔日１次，共４次。用药后第７日两剂量组小鼠腹水癌细胞平均浓度分别为１．３±０．２×１０（１０）／Ｌ、１．６±０．２×１０（１０）／Ｌ，比对照组２．５±０．４×１０（１０）／Ｌ大幅度降低（Ｐ＜０．０１）。苔盼兰染色结果两实验组腹水中瘤细胞平均死亡率分别为４６±６．１％、４３±５．６％，比对照组１９±３．７％显著升高（Ｐ＜０．０１）。用药小鼠平均存活时间分别为２３±３．２天、１９±３．３天，比对照组１３±３．６天有所延长。提示ｒｈＴＮＦ－α对艾氏腹水瘤细胞有杀伤作用。     

博安霉素诱导人鼻咽癌细胞凋亡作用

目的：探讨博安霉素（博苯霉素Ａ６）抗人鼻咽癌作用的机理。方法：应用荧光显微镜、流式细胞仪及琼脂糖凝胶电泳等方法检测博安霉素诱导人鼻咽癌ＳＵＮＥ－１细胞凋亡的作用。结果：当博安霉素浓度为５０μｇ／ｍｌ，作用于ＳＵＮＥ－１细胞１０小时，荧光显微镜下ＳＮＵＥＬ０１细胞出现典型的ＤＮＡ梯状条带。结论：博安霉素具有体外诱导鼻咽癌细胞凋亡的作用，而诱导凋亡为其抗肿瘤作用的机制之一。     

阿糖胞苷及VM26体外诱导原代培养急性非淋巴细胞白血病细胞凋亡

目的　探讨Ａｒａ－Ｃ及ＶＭ２６治疗白血病的机制。方法　应用细胞形态学检查、二苯胺法ＤＮＡ片段化定量及ＤＮＡ 凝胶电泳方法研究阿糖胞苷（Ａｒａ－Ｃ）、ＶＭ２６诱导原代培养的急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）细胞凋亡结果　原代培养的ＡＮＬＬ细胞体外孵育２４ ｈ,空白组细胞ＤＮＡ 片段率仅为（１５．１±３．３）％ ,加Ａｒａ－Ｃ５０ μｇ／Ｌ组和ＶＭ２６ １０ ｍ ｇ／Ｌ,ＤＮＡ片段率均显著增高,分别达（４１．８±１９．１）％ 和（４６．８±１８．７）％ （Ｐ＜ ０．０１,ｎ＝ １１）。两种药物诱导ＤＮＡ片段化均呈剂量和时间依赖性。光镜下见两种药物均诱导ＡＮＬＬ细胞出现典型的细胞凋亡形态改变。ＤＮＡ 电泳显示典型的ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ。结论　Ａｒａ－Ｃ及ＶＭ２６ 能诱导ＡＮＬＬ细胞出现凋亡,诱导白血病细胞凋亡可能是其抗白血病作用的主要机制之一。     

茶多酚对人羊膜上皮细胞FL形成B（a）P－DNA加成物的影响

应用３２Ｐ后标记法检测人羊膜上皮细胞（ＦＬ）经不同浓度茶多酚（２５μｇ／ｍｌ，５０μｇ／ｍｌ和１００μｇ／ｍｌ，终浓度，下同）和β－萘黄酮（２×ｌ０－５ｍｏｌ／Ｌ）所形成的Ｂ（ａ）Ｐ－ＤＮＡ加成物，观察茶多酚化学预防作用。结果表明，茶多酚不仅可以抑制β－萘黄酮对ＦＬ细胞细胞色素Ｐ４５０同功酶的活性的诱导，减少Ｂ（ａ）Ｐ－ＤＮＡ加成物的形成；也可抑制经β－萘黄酮诱导后的ＦＬ细胞形成Ｂ（ａ）Ｐ－ＤＮＡ加成物，而且该抑制效应与茶多酚剂量一致。茶多酚的化学预防作用可能与其影响细胞色素Ｐ４５０同功酶的表达调节以及抑制其活性有关。     

三氧化二砷诱导人类B细胞性淋巴瘤细胞凋亡及机制探讨

目的 研究Ａｓ２Ｏ３在体外对人类Ｂ淋巴瘤细胞株ＭＢＣ－１细胞增殖的影响，并探讨其作用机制。方法 采用细胞形态学，ＤＮＡ凝胶电泳，流式细胞术等多参数观察。结果 （１）（０．５～２）ｍＭ／Ｌ，Ａｓ２Ｏ３对ＭＢＣ－１细胞有增殖抑制作用，并呈时间和剂量相关，（２）证实诱导细胞凋亡是Ａｓ２Ｏ３增殖抑制作用的主要机制之一；（３）Ａｓ２Ｏ３能够上调ＭＢＣ－１细胞ｐ５３的蛋白表达，结论Ａｓ２Ｏ３能有效地通过诱导人