电针对慢性挤压伤大鼠坐骨神经病理形态学和背根神经节P2X3受体敏感性的影响

Objective: To explore the effect of electroacupuncture (EA) on the pathomorphology of the sciatic nerve and the role of P2X3 receptors in EA analgesia. Methods: The chronic constriction injury (CCI) model was adopted in this study. A total of 32 rats were randomly divided into four groups: sham CCI, CCI, CCI plus contralateral EA (CCI + conEA) and CCI plus ipsilateral EA (CCI + ipsEA). Mechanical withdrawal threshold (MWT) and thermal withdrawal latency (TWL) were measured. EA began at day 7 after the CCI operation and was applied to the Zusanli (ST 36) and Yanglingquan acupoints (GB 34). At day 14, the pathomorphologic changes of the operated sciatic nerve were demonstrated by hematoxylin and eosin staining. In addition, dorsal root ganglion (DRG) neurons isolated from rats were examined by electrophysiological recording to determine if the P2X3 receptor agonists, adenosine 5''-triphosphate disodium (ATP) and α,β-methylen-ATP (α,β-meATP) evoked inward currents. Results: Pain thresholds in the CCI group were obviously decreased post CCI surgery (P<0.01). In the EA groups, thermal and mechanical threshold values were increased after the last EA treatment (P<0.05, P<0.01). There was no significant difference in light microscopic examination among the four groups (P>0.05). Current amplitude after application of ATP and α,β-meATP in DRG neurons were much larger in the CCI group compared to those obtained in sham CCI (P<0.05). ATP and α, β-meATP invoked amplitudes in the CCI + EA groups were reduced. There was no significant difference between the CCI + conEA group and the CCI + ipsEA group (P>0.05). Conclusion : EA analgesia may be mediated by decreasing the response of P2X3 receptors to the agonists ATP and α,β-meATP in the DRG of rats with CCI. No pathological changes of the sciatic nerve of rats were observed after EA treatment.     

脊髓半切损伤后脊髓与大脑部分核团c-fos蛋白表达的实验研究

目的 :探索脊髓半切损伤后 ,脊髓、下丘脑室旁核 (PVN)和视上核 (SON)的c -fos蛋白表达的规律。方法 :将 5 6只大鼠随机分为脊髓损伤组 2 4只、假手术组 2 4只和正常组 6只 ,损伤组行左侧半脊髓横断术 ,损伤后 1,6,12 ,2 4h取脊髓、PVN和SON行冰冻切片 ,免疫组化法标记c -fos阳性细胞。结果 :脊髓半切损伤后 ,各时间点损伤侧脊髓灰质中有明显的c -fos阳性表达。PVN和SON在损伤后各时间点均有c -fos表达阳性细胞的增加 ,与假手术组、正常组比较 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。结论 :脊髓损伤后脊髓、PVN和SON可产生明显反应 ,PVN和SON以不同的反应特点影响着神经递质的改变。     

雌激素对雌性大鼠心内神经节细胞中ChAT表达的影响

目的探讨雌激素对大鼠心内神经节细胞中ChAT表达的影响。方法本实验建立了去卵巢和雌激素替代疗法动物模型 ,正常饮食饲养 2个月后处死大鼠 ,然后用免疫组化结合图象分析方法观察大鼠心内神经节细胞中ChAT的变化。结果去卵巢大鼠心内神经节细胞中ChAT的表达较正常对照组明显减弱 ,雌激素替代治疗组大鼠心内神经节中ChAT的表达与正常对照组相比无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,而较卵巢摘除组显著增高 ;OVX +TAM +E2组大鼠心内神经节中ChAT的表达较正常对照组显著减弱 ,但与OVX组无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论雌激素能上调大鼠心内神经节细胞中ChAT的表达     

运动联合阿仑膦酸钠片对去卵巢大鼠RANKL/OPG平衡及MAPK信号通路的影响

目的观察运动联合阿仑膦酸钠片(Aln)对去卵巢(OVX)大鼠核因子κB受体活化因子配体(RANKL)/骨保护素(OPG)表达及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响。方法 90只6月龄雌性SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、OVX组、Aln治疗组(OVX+Aln组)、运动治疗组(OVX+EX组)、Aln与运动联合治疗组(OVX+Aln+EX组),每组18只,后4组大鼠切除双侧卵巢。大鼠切除卵巢8周后,各治疗组大鼠分别进行1mg/(kg·d)Aln灌胃和(或)跑台运动干预。干预12周后采用双能X线骨密度仪检测大鼠左、右股骨骨密度(BMD),ELISA法检测大鼠血清RANKL、OPG含量,real-timePCR检测大鼠骨组织RANKL、OPGmRNA表达,蛋白质印迹分析法检测骨组织c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p38MAPK(p38)、细胞外调节激酶(ERK)的磷酸化水平及c-Fos表达。结果干预治疗12周后:(1)与sham组相比,OVX组大鼠左、右股骨BMD降低(P<0.05),血清RANKL含量增加、OPG含量降低、RANKL/OPG比值增大(P均<0.05),骨组织RANKLmRNA表达增加、OPGmRNA表达减少(P均<0.05)。(2)与OVX组相比,OVX+Aln组、OVX+EX组及OVX+Aln+EX组大鼠左、右股骨BMD均增加(P均<0.05),血清RANKL含量降低、OPG含量增加、RANKL/OPG比值减小(P均<0.05),骨组织RANKLmRNA表达减少、OPGmRNA表达增加(P均<0.05)。(3)与OVX+Aln组和OVX+EX组相比,OVX+Aln+EX组大鼠左、右股骨BMD,血清RANKL、OPG含量,骨组织RANKL、OPGmRNA表达差异有统计学意义(P均<0.05)。(4)与sham组相比,OVX组大鼠骨组织p-JNK、c-Fos表达增加(P均<0.05);OVX+Aln组、OVX+EX组及OVX+Aln+EX组与OVX组相比,大鼠骨组织p-JNK、c-Fos表达降低(P均<0.05),但3组间表达差异无统计学意义;p-p38、p-ERK在各组间的表达差异无统计学意义。结论运动联合Aln治疗能够提高OVX大鼠左、右股骨骨密度,其作用可能与调节RANKL/OPG平衡、抑制JNK磷酸化及c-Fos表达有关。     

电针上调食源性肥胖大鼠弓状核α-MSH的表达

目的：研究电针对食源性肥胖(diet-induced obesity，DIO)大鼠体重及摄食量的影响并探讨其中枢神经化学机制。方法：通过高能饲料喂养，建立DIO大鼠模型，分为：(1)2Hz电针组，(2)100Hz电针组，(3)束缚对照组，(4)DIO组，(5)肥胖抵抗(diet resistance，DR)组，(6)普通饲料对照组。电针参数：0．5、1.0、1．5mA各10min。穴位：双侧足三里和三阴交。每周电针3次。每日记录体重及摄食量，共4周。免疫组织化学方法观察下丘脑弓状核α-黑色素细胞刺激素(α-melanocyte-stimulating hotmone，α-MSH)免疫阳性细胞数变化。结果：与DR组和普通饲料对照组相比，DIO组的体重及摄食量增加，而α-MSH免疫阳性细胞数则明显降低。与束缚对照组和DIO组相比，2Hz电针组、100Hz电针组的体重和摄食量明显降低，弓状核内α-MSH免疫阳性细胞数明显增多。结论：高能食物饲养导致的肥胖可能与下丘脑弓状核α-MSH水平降低有关。电针治疗肥胖的机制之一，可能是通过刺激下丘脑弓状核前阿黑皮素(pro-opiomelanocortin．POMC)神经元释放α-MSH，抑制摄食，降低体重。     

缺血性脑损伤大鼠下丘脑c—fos基因表达及药物调控

目的：从分子水平探讨缺血性脑损伤的病理生理改变和渗麦注射液的保护作用,方法：将15只雄性wistar大鼠随机分为对照组,缺血组和治疗组,采用免疫组织化学方法观察了缺血性脑损伤时大鼠下丘脑视上核和室旁核内神经元c-fos基因的表达及参麦注射液的保护作用。结果：缺血性脑损伤时大鼠视上核和室旁核内神经元 - 基因的表达明显明显增多（P＜0．05）,而用参麦注射液后明显减少,但未减少至正常水平（P＜05）,结论：缺血性脑损伤时下丘脑中c-fos基因表达增多,而参麦注射液对缺血性脑损伤可能有一定治疗作用。     

大鼠下丘脑CCK与OT神经元的免疫组化检测

（１）目的 探讨缩胆囊素（ＣＣＫ）和缩宫素（ＯＴ）神经元在下丘脑的共存现象。（２）方法 采用相邻切片免疫组化方法,检测ＣＣＫ和ＯＴ样免疫活性物质（ＣＣＫ－ＩＲ,ＯＴ－ＩＲ）的分布。（３）结果 ＣＣＫ－ＩＲ广泛分布在下丘脑的视上核,室周核,视交叉上核,腹内侧核和弓状核等区域,由中等大小卵圆形细胞构成,室旁核末检测到ＣＣＫ－ＩＲ;ＯＴ－ＩＲ仅局限于室旁核和视上核,由大细胞构成。（４）结论 ＣＣＫ和ＯＴ     

人参皂甙对老龄大鼠下丘脑超微结构改变的影响

本实验在电镜下观察了老龄大鼠下丘脑弓状核（ＡｒｃｕａｔｅＮｕｃｌｅｕｓ，ＡＲＮ），视上核（ＳｕｐｒａｏｐｔｉｃＮｕｃｌｅｕｓ，ＳＯＮ），室旁核（ＰａｒａｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒＮｕｃｌｅｕｓ，ＰＶＮ）的改变及人参皂甙对其的影响。结果表明：老龄大鼠ＡＲＮ，ＰＶＮ，ＳＯＮ神经元脂褐素面积比青年组增多１０倍（Ｐ＜０．０１），而给药组脂褐素面积比老龄组减少５０％（Ｐ＜０．０１）．老龄组变性线粒体在ＡＲＮ、ＳＯＮ、ＰＶＮ分别为２７．２％、２８．９％、２９％；而给药组则分别为６．８％、７．２％、８．１％。同时还发现老龄组神经元内有各种细胞器变性及膜性结构的存在，而给药组这些改变都明显比老龄组有所减轻。实验证明人参皂甙确实能明显地延缓神经细胞衰老，并提示它具有稳定神经细胞生物膜系统的作用。     

大鼠严重创伤后早期下丘脑CRH的表达

目的 探讨在颅脑撞击伤应激反应中下丘脑表达和分泌促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）的变化规律及其反馈调节机制。方法 应用BIM－Ⅲ型多功能小型生物撞击机致伤，采用免疫组化和Western blot等技术进行检测下丘脑CRH的表达变化和分布规律。分组：对照组、撞击伤后15min、30min、1h、2h、6h、12h撞击伤组、撞击伤治疗组，治疗组用CRH1受体（CRH1R）特异性阻滞剂CP－154526处理。结果 正常情况下，CRH少量的表达于下丘脑室旁核和视上核，撞击伤后1h CRH表达明显增加，主要分布于室旁核和视上核，且表达呈逐渐增加的趋势，在2－6h时相点表达明显增加，6h后开始回落；用CP－154526治疗的大鼠，撞击伤后下丘脑CRH表达的增加明显减少。结论 在创伤性应激反应中，CRH对下丘脑合成和分泌CRH存在明显的调节作用，CRH通过与CRH1R的结合在其中可能起着关键的作用。     

去窦弓神经大鼠下丘脑室旁核和视上核FOS和NADPH-d共存分布

目的:探讨大鼠下丘脑室旁核和视上核神经元型一氧化氮合酶神经元是否参与中枢压力感受性反射通路.方法:应用Fos免疫组织化学结合还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH-d)组织化学双重染色的方法,观察去窦弓神经术(SAD)后2 h Fos和NADPH-d在室旁核和视上核内的分布情况.结果:SAD大鼠室旁核小细胞部、大细胞部和视上核内有大量Fos表达,并与NADPH-d部分共存;NADPH-d/Fos双标记阳性神经元的比例分别为6.8%、72.1%和47.1%.在假手术组和正常对照组大鼠上述核团内偶见Fos阳性神经元,未观察到NADPH-d/Fos双标记神经元.结论:下丘脑室旁核和视上核内的神经元型一氧化氮合酶神经元可被SAD特异性激活,提示其参与了中枢压力感受性反射通路所介导的心血管活动的中枢调节.     

下丘脑室旁核FKBP5在电针调节创伤应激后HPA轴中的作用

 目的   观察创伤应激后电针调节下丘脑-垂体-肾上腺(hypothalamic-pituitary-adrenal,HPA)轴的活性变化,并探讨下丘脑室旁核(paraventricular nucleus,PVN) FKBP5在其中的作用。方法   模拟脏器探查术建立创伤模型。60只SD雄性大鼠随机分为对照组、创伤1天组、创伤3天组、创伤7天组及电针干预组,每组12只。检测出创伤后应激高峰,给予电针作为干预,刺激双侧“三阴交”(SP-6)和“足三里”(ST-36)穴位,观察干预组与非干预组HPA轴的恢复情况。各组于相应时间点进行体温测量,免疫组化染色法检测下丘脑PVN c-fos和FOSB的表达,放射免疫分析法测定血清激素水平,Western blot检测FKBP5的表达。结果   创伤1天组与对照组相比,大鼠的体温水平明显升高［(37.90±0.21)℃ vs.(37.20±0.25)℃,P<0.05］,下丘脑PVN c-fos表达(1.00±0.16 vs.2.30±0.22,P<0.01)和FOSB表达(1.00±0.08 vs.2.00±0.33,P<0.001)明显升高;与创伤1天组比较,电针干预组大鼠血清促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)(33.80±4.88 vs.28.20±3.31,P<0.05)及CORT (338.39±29.51 vs.280.85±30.39,P<0.01)、下丘脑PVN FKBP5表达(3.30±0.47 vs.2.50±0.42,P<0.05)显著下降。结论   HPA轴活性在创伤后1天达到最高,电针能下调创伤后HPA轴活性,其可能通过FKBP5发挥作用。     

Effects of electroacupuncture on the pain threshold and the NMDA R1 mRNA in DRG on neuropathic pain rats

To observe the effect of multiple electroacupuncture (EA) on the pain threshold and theregulation of N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor in dorsal root ganglia (DRG) of neuropathicpain rats. Rats were prepared with a unilateral chronic constriction injury (CCI) to the sciatic nerve.EA was done in acupoints "Huan Tiao" and "Yang Ling Quan" for 30 min every day and the thermalthresholds were detected after EA at 3, 5, 7, 10, 14 days after operation. On day 14 after nerve in-jury, the in situ hybridization method was used to investigate the change of NMDA R1 mRNA inL4—L5 DRG. The thermal threshold reduced significantly from day 3 after operation in CCI rats.After multiple EA treatment, the ipsilateral thermal hyperalgesia relieved gradually and the thermalthreshold had no difference with control side after day 5(P>0. 05). From Day 7 after operation, thethermal threshold at each time point were significantly different compared with CCI group respective-ly(P>0.05). Moreover the EA had accumulative effect.     

去卵巢应激大鼠结肠组织5-羟色胺受体3表达及意义的探讨

目的: 研究不同卵巢激素水平对束缚应激刺激大鼠动物模型结肠组织5-羟色胺受体3(5-HT3R)的影响. 方法: 24只成年雌性SD大鼠,随机分为3组:假手术(Sham)组、去卵巢(OVX) 组、去卵巢加雌二醇(E2)和黄体酮(P)(OVX E2 P)组,每组8只. 4 wk后均予以束缚1 h应激刺激,观察大鼠排便和玻璃小球排出情况;并采用RT-PCR方法,检测3组大鼠结肠组织5-HT3R mRNA的表达. 结果: 去卵巢组较假手术组、去卵巢 雌二醇 黄体酮组大鼠排便量增加,玻璃小球排出时间缩短(P<0.01);去卵巢组与假手术组及去卵巢 雌二醇 黄体酮组比较,5-HT3R mRNA的表达明显增加(P<0.01);去卵巢 雌二醇 黄体酮组与假手术组比较,5-HT3R mRNA的表达减少(P<0.01). 结论: 卵巢激素在肠易激综合征(IBS)发病中对5-HT3R的调节方面有重要作用.     

Prevention of Osteopenia and Dyslipidemia in Rats after Ovariectomy with Combined Aspirin and Low-dose Diethylstilbestrol

Objective To study whether effect of aspirin plus low-dose diethylstilbestrol is more effective and safer than high diethylstilbestrol dose alone on prevention of ovariectomy-induced osteopenia and dyslipidemia.Methods Thirty-eight 4-month-old female SD rats were divided into baseline(BAS)group(n=6),sham operation group(n=8)and ovariectomy(OVX)group(n=24).The OVX group was further divided into vehicle treatment group(n=8),diethylstilbestrol(30 μg/kg·d)treatment group(OVX+D30 group,n=8),and aspirin(9 mg/kg·d)plus diethylstilbestrol(10 μg/kg·d)treatment group(OVX+A-D10 group,n=8).Their left tibiae were collected for the bone histomorphometric analysis in undecalcified sections.Left femurs were collected for the bone mineral density measurement.Results The body weight and serum cholesterol were increased,while uterine weight and cancellous bone mass were decreased in OVX rats compared with the SHAM group.Cancellous bone mass was significantly increased,while body weight and bone resorption parameters were decreased in both A-D10 and D30 treatment group compared with OVX group.The rats treated with A-D10 showed significantly increased in bone formation parameters and decreased in serum triglyceride compared with the D30-treated rats.Conclusion Aspirin plus low-dose diethylstilbestrol can effectively prevent osteopenia by reducing bone resorption,and is thus a better treatment modality for preventing dyslipidemia than high-dose diethylstilbestrol alone.     

雌、孕激素对去卵巢大鼠骨代谢及肾脏1,25-(OH)2D3受体mRNA表达的影响

目的:观察雌孕激素替代治疗对去卵巢大鼠骨组织计量学参数变化及大鼠肾脏1,25-(OH)2D3受体(VDR)mRNA 表达的影响,并探讨其可能的机制.方法:25只成年SD雌性大鼠,随机分为为5组,假手术组、单纯去势组以及去势 补充雌激素组、去势 补充孕激素组、去势 补充雌、孕激素组,每组5只.喂养3个半月后处死,取出肾脏,RT-PCR方法检测VDR mRNA的表达;取胫骨上段不脱钙骨制片,应用半自动图像数字化分析仪检测各组大鼠骨组织计量学参数.结果:与假手术组、雌激素及雌孕激素组相比,去卵巢大鼠松质骨骨量明显减少,伴有骨结构变差,骨形成和骨吸收的参数值增加(P<0.05);与去卵巢组相比,孕激素组大鼠无显著改变.去卵巢组大鼠肾脏VDR mRNA的相对表达量显著低于假手术组、雌激素组及雌孕激素组(P<0.05);而与孕激素组无显著差异.结论:雌激素能有效地抑制去卵巢大鼠的骨吸收和骨形成,降低骨转换,可能与促进去卵巢大鼠肾脏VDR mRNA的表达有关.     

雌、孕激素对去卵巢大鼠肝脏维生素D受体mRNA表达的影响

目的探讨雌、孕激素对去卵巢大鼠维生素D受体mRNA的影响。方法25只成年SD雌性大鼠,随机分为Sham组(假手术组)、OVX组(单纯去卵巢组)、OVX+E组(去卵巢+补充雌激素组)、OVX+P组(去卵巢+补充孕激素组)OVX+E+P组(去卵巢+补充雌、孕激素组),每组5只。喂养3个半月后处死,取肝脏检测1,25-二羟维生素D3受体mRNA。结果与去卵巢组比较:(1)雌激素对去卵巢大鼠肝脏1, 25-二羟维生素D3受体mRNA的表达有显著上调作用;(2)雌、孕激素联合用药组1, 25-二羟维生素D3受体mRNA的表达介于单用雌激素和孕激素之间;(3)孕激素对去卵巢大鼠肝脏1,25-二羟维生素D3受体mRNA的表达无显著上调。结论雌激素能促进去卵巢大鼠肝脏1, 25-二羟维生素D3受体的表达。     

雌、孕激素对去卵巢大鼠肝脏维生素D受体mRNA表达的影响

目的：探讨雌、孕激素对去卵巢大鼠维生素D受体mRNA的影响。方法：25只成年SD雌性大鼠，随机分为 Sham组（假手术组）、OVX组（单纯去卵巢组）、OVX＋E组（去卵巢＋补充 雌激素组）、OVX＋P组（去卵巢＋补充孕激素组）、OVX＋E＋P组（去卵巢＋补充雌、孕激素组），每组5只。喂养3个半月后处死，取肝脏检测1，2，5－二羟维生素D3受体mRNA结果:与去卵巢组比较 :(1)雌激素对去卵巢大鼠肝脏1,2,5-二羟维生素D3受体mRNA的表达有显著上调作用;(2)雌、孕激素联合用药组1，25－二羟维生素D3受体mRNA的表达介于单用雌激素和孕激素之间；（3）孕激素对去卵巢大鼠肝脏1，25－二羟维生素D3受体mRNA的表达无显著上调。结论：雌激素能促进去卵巢大鼠肝脏1，25－二羟维生素D3受体的表达。     

脊髓横断后下丘脑室旁核和视上核Fos表达的观察

目的:观察不同节段脊髓横断后引起下丘脑室旁核(PVN)、视上核(SON)Fos表达,以初步探讨急性脊髓损伤引起脑内心血管调节核团反应的机制。方法:脊髓C4、T4、T12横断术后3h,用免疫组织化学方法观察PVN、SON内Fos表达。结果:PVN内Fos阳性神经元数目在C4组最高,T4组次之,T12组最低;SON内,各组间Fos阳性神经元数目差异无显著性。结论:急性脊髓损伤可引起PVN、SON神经元产生特异性反应,但两者发生反应的机制不同。