同型半胱氨酸及胱硫醚β-合成酶基因多态性与2型糖尿病合并冠心病的关系

目的探讨我国北方汉族糖尿病（DM）合并冠心病（CHD）者同型半胱氨酸水平（Hey）及Hey代谢相关酶胱硫醚β-合成酶（CBS）的844ins68的基因多态性特点。方法检测104例2型DM合并CHD患者（DM合并CHD）、127例2型DM患者、61例CHD患者和91名健康对照者的Hey、叶酸、维生素B12、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）、载脂蛋白A-I（apoA—I）、载脂蛋白B（apoB）浓度。应用聚合酶链反应（PCR）分析CBS844ins68基因多态性。结果DM合并CHD组Hey水平明显高于DM组和对照组,叶酸、维生素B12水平明显低于DM组及对照组（P〈0．叭）。DM合并CHD组与CHD组Hcy、叶酸、维生素B12水平差异无统计学意义（P〉0．05）。DM组与对照组之问Hey、叶酸、维生素B12水平差异无统计学意义（P〉0．05）。4组CBS844ins68的基因型及等位基因频率差异均无统计学意义（P〉0．05）。Logistie回归分析显示高Hey水平、年龄、Tc是CHD发生的独立危险因素,0R值[95％可信区问（CI）]分别为2．117（1．081-4．145）、1．105（1．070～1．142）,1．023（1．005～1．042）（P均〈0．05）。CBS844ins68的OR值（95％CI）为1．254（0．229～6．867）（P〉0．05）：结论高Hey水平是我国北方汉族人2型DM合并CHD发生的独立危险因素。CBS844ins68基因多态性不是2型DM合并CHD的危险因素。     

同型半胱氨酸及胱硫醚β-合成酶基因多态性与2型糖尿病合并冠心病的关系

目的探讨我国北方汉族糖尿病(DM)合并冠心病(CHD)者同型半胱氨酸水平(Hcy)及Hcy代谢相关酶胱硫醚β-合成酶(CBS)的844ins68的基因多态性特点。方法检测104例2型DM合并CHD患者(DM合并CHD)、127例2型DM患者、61例CHD患者和91名健康对照者的Hcy、叶酸、维生素B12、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白A-I(apo A-I)、载脂蛋白B(apo B)浓度。应用聚合酶链反应(PCR)分析CBS 844ins68基因多态性。结果DM合并CHD组Hcy水平明显高于DM组和对照组,叶酸、维生素B12水平明显低于DM组及对照组(P<0.01)。DM合并CHD组与CHD组Hcy、叶酸、维生素B12水平差异无统计学意义(P>0.05)。DM组与对照组之间Hcy、叶酸、维生素B12水平差异无统计学意义(P>0.05)。4组CBS 844ins68的基因型及等位基因频率差异均无统计学意义(P>0.05)。Lo-gistic回归分析显示高Hcy水平、年龄、TC是CHD发生的独立危险因素,OR值[95%可信区间(CI...     

CBS基因多态性与中国人缺血性脑卒中关系的Meta分析

目的探讨中国汉族人群胱硫醚β合成酶（cystathionine β synthase,CBS）基因T833C、844ins68多态性与缺血性脑卒中发病的相关性。方法电子检索1999年1月～2009年2月CBM、CNKI、万方数据库、VIP及PubMed,收集有关中国人CBS基因T833C、844ins68多态性与缺血性脑卒中的病例-对照研究。评价纳入研究质量,提取有效数据,采用RevMan4.2软件进行Meta分析。结果共纳入4个研究CBS基因T833C多态性与缺血性脑卒中关系的病例对照研究。山东亚组中以TT型基因为参照,携带CT＋CC基因型个体发生缺血性脑卒中风险增高[OR=5.01,95%CI（2.63,9.53）,P〈0.00001];非山东亚组中携带CT＋CC基因型个体发生缺血性脑卒中的风险无明显增高[OR=0.95,95%CI（0.60,1.50）,P=0.82]。对844ins68多态性与缺血性脑卒中发病相关性的Meta分析结果表明,以DD基因为参照,携带DI、II基因型的个体发生缺血性脑卒中风险差异无统计学意义[OR=1.20,95%CI（0.72,1.99）,P=0.49]。结论中国汉族人群中CBST833C基因多态性可能与山东人缺血性脑卒中发病相关,增加山东人群患缺血性脑卒中的危险性,而与其他省份汉族人群缺血性脑卒中发病可能不相关;CBS844ins68多态性可能与中国汉族人群缺血性脑卒中发病不相关。     

胱硫醚β合酶(CBS)基因多态性与蒙古族人群原发性高血压及高血压合并脑梗死的关系

同型半胱氨酸（homocystelne,Hcy）是一种含硫氨基酸,是蛋氨酸循环的重要中间代谢产物。现有研究表明体内Hcy水平与冠状动脉疾病、脑血管疾病、外周血管疾病密切相关。但关于Hcy与高血压及高血压合并脑梗死的关系仍然存在分歧。体内Hcy血浓度的影响条件很多,如维生素水平,吸烟等多种生活习惯均可以造成的变化,其中遗传因素是一个非常重要的影响因素。     

醛固酮合成酶基因多态性与高血压性脑出血的相关性研究

目的研究醛固酮合成酶（CYP11B2）基因-344T／C多态性与高血压性脑出血的关系。方法应用多聚酶链-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）技术，检测高血压性脑出血组132例、高血压对照组146例和正常对照组329例患者CYP11B2—344Y／C基因的多态性。结果脑出血组TC基因型的频率显著高于正常对照组，分别为37．12％和27．96％，CC基因型的频率显著高于正常对照组和高血压对照组，分别为11．36％、6．69％和5．48％；脑出血组C等位基因的频率也显著高于正常对照组和高血压对照组，分别为29．92％、20．67％和20．21％。结论醛固酮合成酶基因-344T／C多态性与高血压性脑出血相关；C等位基因可能是中国人高血压性脑出血的一个遗传标志。     

青年缺血性脑卒中与健康对照组血浆胱硫醚β合成酶G919A基因突变的相关性

目的：分析同型半胱氨酸血症、同型半胱氨酸代谢关键酶胱硫醚β合成酶基因突变与青年缺血性脑卒中的关系。 方法：选择2003-04／2004—12吉林大学中日联谊医院住院青年脑梗死患者100例为病例组，均是发病2d内住院、年龄≤45岁者；对照组100例为同期来院体检的正常青年人。采用病例-对照分析方法，以高效液相色谱法测定受试者空腹及负荷后血浆同型半胱氨酸水平，采用聚合酶链-限制性内切酶片段长度多态性分析和扩增阻滞突变体系法，对所有受试者的胱硫醚β合成酶基因G919A位点进行检测。 结果：200例均进入结果分析。①病例组和对照组基因型分布和等位基因的频率比较：纯合15％／13％，杂合型33％／32％，野生型52％／55％；突变等位基因63％／58％，未突变等位基因137％／142％。差异均没有统计学意义（P〉0．05）。②血浆同型半胱氨酸浓度：纯合型为（17.36&;#177;4．18）μmol／L。杂合型为（16.52&;#177;3．27）μmol／L野生型为（8．72&;#177;2．26）μmol／L，胱硫醚β合成酶G919A各基因型间比较差异显著（P〈0．001），纯合子与杂合子，纯合子与野生型，杂合子与野生型间比较差异显著（P〈0．05）。 结论：①胱硫醚β合成酶G919A突变可导致血浆同型半胱氨酸浓度均明显增高。②胱硫醚β合成酶G919A基因突变与青年缺血性脑卒中发病无相关性。     

胱硫醚-β-合成酶/硫化氢在非酒精性脂肪肝中的变化及意义

目的：观察脂肪肝中CBS/H2S的变化及其意义。方法用高脂饮食喂养SD 大鼠,建立非酒精性脂肪性肝模型,6周后处死动物,测其血清中的硫化氢,肝酶和血脂变化情况。取肝脏进行病理检查,ELISA法检测肝脏CBS及亚甲基蓝法测H2S的含量。结果模型组血清中TG、TC较对照组明显增加[（2.28±0.51）vs（1.18±0.85）]、[（4.5±1.25）vs （1.61±0.33）],（P<0.05）、H2S明显减少[（16.12±7.21）vs（20.91±10.30）],（P<0.05）;S-腺苷蛋氨酸干预组血清中TG、TC较模型组明显好转[（1.31±0.62）vs（2.28±0.51）]、[（3.2±0.66）vs（4.5±1.25）],（P<0.05）、H2S明显增加[（32.3±3.52）vs（16.12±7.21）],（P<0.01）;羟基胺干预组血清中TG、TC、H2S较模型组显著减少[（3.87±2.63）vs（2.28±0.51）]、[（5.0±1.01）vs（4.5±1.25）]、[（10.3±1.63）vs（16.12±7.21）],（P<0.01）。模型中CBS含量较对照组明显减少[（1.92±0.31）vs（4.12±0.21）],（P<0.05）、过氧化脂质明显增加[（78.2±7.56）vs（28.2±11.9）],（P<0.05）;与模型组比较S-腺苷蛋氨酸干预组CBS含量增加,过氧化脂质减少[CBS ：（2.96±0.78）、过氧化脂质：（34.2±3.68）],羟基胺干预组则CBS减少（1.32±0.17）、过氧化脂质增加（90.13±16.0）。肝脏脂肪变性与硫化氢的量呈反比。结论细胞膜损伤导致CBS外泄可能是非酒精性脂肪肝硫化氢减少的主要原因之一;激活CBS增加硫化氢可以改善肝内脂肪积聚。     

青年缺血性脑卒中与健康对照组血浆胱硫醚β合成酶G919A基因突变的相关性

目的:分析同型半胱氨酸血症、同型半胱氨酸代谢关键酶胱硫醚β合成酶基因突变与青年缺血性脑卒中的关系。方法:选择2003-04/2004-12吉林大学中日联谊医院住院青年脑梗死患者100例为病例组,均是发病2d内住院、年龄≤45岁者;对照组100例为同期来院体检的正常青年人。采用病例-对照分析方法,以高效液相色谱法测定受试者空腹及负荷后血浆同型半胱氨酸水平,采用聚合酶链-限制性内切酶片段长度多态性分析和扩增阻滞突变体系法,对所有受试者的胱硫醚β合成酶基因G919A位点进行检测。结果:200例均进入结果分析。①病例组和对照组基因型分布和等位基因的频率比较:纯合15%/13%,杂合型33%/32%,野生型52%/55%;突变等位基因63%/58%,未突变等位基因137%/142%。差异均没有统计学意义(P>0.05)。②血浆同型半胱氨酸浓度:纯合型为(17.36±4.18)μmol/L,杂合型为(16.52±3.27)μmol/L,野生型为(8.72±2.26)μmol/L,胱硫醚β合成酶G919A各基因型间比较差异显著(P<0.001),纯合子与杂合子,纯合子与野生型,杂合子与野生型间比较差异显著(P<0.05)。结论:①胱硫醚β合成酶G919A突变可导致血浆同型半胱氨酸浓度均明显增高。②胱硫醚β合成酶G919A基因突变与青年缺血性脑卒中发病无相关性。     

醛固酮合成酶基因多态性与心血管疾病关系的研究进展

醛固酮是人体内最重要的盐皮质激素,除了调节体内水盐代谢,醛固酮可直接影响心血管系统。我们以前认为醛固酮合成酶(CYP11B2)基因-344C/T的多态性只影响CYP11B2基因的表达。而近几年研究发现,这一多态性不仅会影响各级醛固酮分泌和血压水平,而且在基因-344C/T等位基因与左心室扩大和可能增加个体患心肌梗死的危险都有紧密联系。     

蛋氨酸合成酶基因多态性的临床研究新进展

近几年研究证实,高同型半胱氨酸（Hcy）血症是栓塞和心血管疾病的一个独立危险因素,血浆中Hcy水平与经造影而证实的冠心病病死率之间有很强的相关性。蛋氨酸合成酶（MS）是催化Hcy复甲基为甲硫氨酸的主要合成酶[1]。若MS发生变异,可能就会引起Hcy的浓度的升高。本文就MS的结构、生理功能及其基因多态性在临床中的研究新进展作一综述。     

血浆同型半胱氨酸及亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与缺血性脑卒中的相关性研究

目的探讨血浆同型半胱氨酸(Hcy)及亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性与缺血性脑卒中的相关性。方法急性缺血性脑卒中患者148例为缺血性脑卒中组,同时健康体检者100例为对照组。患者入院后行血压、血糖、血脂等常规检查。清晨空腹取肘静脉血5 mL,EDTA抗凝后离心10 min,分离上层血浆,检测Hcy水平;中层白细胞4℃保存,3 d内行基因组DNA提取。结果缺血性脑卒中组患者血浆Hcy水平为(15.9±1.9)μmol/L,对照组血浆Hcy水平为(12.0±1.1)μmol/L,2组比较有显著差异。缺血性脑卒中组的高Hcy血症患者比率为39.3%,明显高于对照组中高Hcy血症患者比率(19.0%)。2组T/T纯合子组的血浆Hcy水平均明显高于非T/T纯合子组。结论缺血性脑卒中与高Hcy血症相关,MTH-FR基因对血浆Hcy水平影响显著。     

等位基因特异-荧光定量PCR检测胱硫醚-β-合成酶基因T833C/G919A点突变及其与糖尿病肾病的关联性初步观察

目的建立胱硫醚-β-合成酶（CBS）基因T833C、G919A点突变的等位基因特异-荧光定量PCR（TaqMan—ARMS）测定方法，探讨2型糖尿病肾病患者CBS基因T833C、Gg19A点突变率及与糖尿病肾病（DN）的相互关系。方法采用PCR时引物3’端错配扩增阻滞（ARMS）原理，结合荧光定量PCR技术（TaqMan探针），制备野生和突变质粒标准品，建立野生引物和突变引物2个反应体系，根据荧光定量PCR时野生引物循环阈值（Wct）与突变引物循环阈值（Mct）的比值△ct（△ct=Wct／Mct）及扩增有无指数增长期出现，建立点突变等位基因型的判定标准，并对94例DN患者（组1）和140例尿微量白蛋白正常的非糖尿病对照者（组2）的CBS基因T833C、Gg19A点突变进行检测。结果建立的TaqMan-ARMS方法检测T833C野生等位基因型的判定标准为Act〈0．72或Met〉40，杂合突变型为0．9〈Act〈1．10，纯合突变型为1．40〈Act或Wet〉40；G919A野生等位基因型判定标准为Act〈0．74或Mct〉40，杂合突变型为0．92〈Act〈1．03，纯合突变型为1．26〈Act或Wet〉40。T833C点突变TY、TC、CC3种基因型在DN组分布频率分别为98．94％、1．06％和0，组2中分别是99．29％、0．71％和0；两组人群833C等位基因频率分别为0．53％和0．36％，基因型和等位基因频率差异均无统计学意义。各组中未发现G919A等位基因杂合突变和纯合突变型。结论成功建立了测定CBS基因T833C、G919A点突变的TaqMan—ARMS方法，该方法准确、特异，适合高通量点突变的检测。本研究未观察到CBS基因T833C、G919A点突变为DN的遗传危险因素。     

N5,N10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因与缺血性脑卒中发病的关系

目的探讨N^5,N^10-亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因与缺血性脑卒中发病的关系。方法454例缺血性脑卒中患者按照TOAST（Trail of ORG 10172 in Acute Stroke Treatment）分型分为大动脉粥样硬化型（LAA）、心源性脑梗死型（CE）、小动脉阻塞型（SAA）、其他明确病因的中风型（SOE）和不明原因的中风型（SUE）；根据神经功能缺损评分分为轻、中．重型。应用聚合酶链反应（PCR）和变性高效液相色谱（DHPLC）技术筛查脑卒中组和334例无高血压病、冠心病、脑血管疾病、糖尿病、癌症、肾功能衰竭等疾病的患者或健康人（对照组）的MJ、HFR基因C677T的多态分布，详细记录卒中危险因素。结果脑卒中组CC、CT、TT基因型频率分别为51．8％、40．5％和7．7％，对照组分别为56.9％．38．3‰和4．8％，TT基因型和T等位基因与中、重型缺血性脑卒中、LAA和CE型缺血性脑卒中相关。吸烟、酗酒、伴糖尿病群体TT基因型和T等位基因频率显著高于对照组（P均〈0．10），CC基因型和C等位基因频率显著低于对照组（P均〈0．05），而非吸烟、非酗酒、不伴糖尿病群体的各基因型和等位基因频率与对照组比较差异无显著性。结论TT基因型，T等位基因是缺血性脑卒中的易患因子；MTHFR基因与吸烟、酗酒、糖尿病在缺血性脑卒中的发病过程中存在协同作用。     

血管紧张素I转换酶基因多态性与脑卒中关系

目的　探讨血管紧张素I转换酶 (ACE)基因多态性与脑卒中关系。方法　应用聚合酶链反应 (PCR)检测了92例脑卒中患者和 15 8例正常人的ACE基因型 ,并用Logistic回归筛选脑卒中的危险因素。结果　①脑卒中患者的甘油三脂 (TG)、高密度脂蛋白 (HDL)、总胆固醇 (TC)和载脂蛋白 (ApoAI、ApoB)水平与正常人相比 ,均无显著性差异 (P均 >0 .0 5 )。②ACE各基因型在不同性别、年龄间的分布以及在TG、HDL和ApoAI、ApoB等生化指标方面均未有显著性差异 (P均 >0 .0 5 )。③脑卒中患者DD基因型的频率 (2 8.2 6 % )显著高于正常对照组 (15 .19% ) (P <0 .0 5 )。结论　①ACE基因型与引起脑卒中的其他危险因素 :TG、HDL和ApoAI、ApoB等无关。②ACE基因DD型、年龄是脑卒中的重要危险因素。     

MS基因A2756G多态性位点与青年缺血性脑卒中相关性研究

目的 研究人体MS基因A2756G多态性与青年缺血性脑卒中的遗传相关性。方法 采用限制性内切酶片段长度多态性方法（PCR-RFLP），对98例脑卒中病人和116例健康人的MS2756多态性位点进行检测。结果病例组A等位基因纯合子（A／A）、杂合子（A／G）和G等位基因纯合子基因型（G／G）所占比例分别为77．55％，18．37％和4．08％。对照组A／A纯合子、A／G杂合子和G／G纯合子基因型比例分别为79.31％，15．52％和5．17％。两组无显著性差异（X^2=0．41，P〉0．05）。ORAA／GG=1．23；ORA／G=1．02。结论 汉族人群MSA2756G位点多态性与青年缺血性脑卒中无明显相关性。     

血管紧张素转换酶基因与缺血性脑卒中发病的关系

目的 探讨血管紧张素转换酶(ACE)基因与缺血性脑卒中(IS)发病的关系.方法 ①应用聚合酶链反应(PCR)和变性高效液相色谱技术筛查了454例IS患者(病例组)和334例非IS患者(对照组)ACE基因I/D多态性的分布,详细记录卒中危险因素.②选择40只SD大鼠制备低氧-窒息模型和单纯窒息模型,同时选择29只易卒中型自发性高血压大鼠(SHR-SP).检测血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平的变化.结果 病例组的DD、ID、II型的频率分别为22.5%、43.4%和34.1%,对照组为17.4%、45.5%和37.1%,ACE基因DD型与大动脉粥样硬化型IS相关.SHR-SP血浆AngⅡ水平[(164.49±34.58)ng/L]较正常SD大鼠[(150.92±24.92)ng/L]高,但差异无显著性(P＞0.05);窒息组和低氧-窒息组血浆AngⅡ水平分别为(382.84±62.75)ng/L和(295.90±55.07)ng/L,均显著高于正常SD大鼠水平(P均＜0.01).吸烟、酗酒群体内病例组以及伴糖尿病群体的DD型和D等位基因的相对风险率均高于相应对照组,而II型和I等位基因的相对风险率均低于相应对照组.结论 DD基因型是IS的易患因子;AngⅡ参与了低氧应激过程;ACE基因与吸烟、酗酒、糖尿病在IS的发病过程中存在协同作用.     

MTHFR基因C677T多态性与出血性脑卒中的关系

目的 了解亚甲基因氢叶酸还原酶（MTHFR）基因C667T多态性与中国人群出血性脑卒中发病之间的关系。方法 利用PCR和分子杂交技术对我国北方地区202例出血性脑卒中患者及190例无任何脑血管病变的对照者进行C677T多态性检测和分析。结果 C677T多态性发布符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律,出血性脑卒中患者677T等位基因频率显著高于对照组（64.60%vs51.84%）。同CC纯合子相比,TT纯合子发生出血性脑卒中的危险性分别为2.648(95%CI:1.507～4.654),特异归因危险性百分比为62.24%;同CT杂合子相比,TT纯合子发生出血性脑卒中的危险性为1.638(95%可信区间：1.045～2.566),发病率升高38.94%。结论 MTHFR基因C677T多态性可能是中国人群中出血性脑卒中发病的遗传学危险因素。     

整合素-α2和-β3基因多态性与缺血性脑卒中的相关性研究

目的探讨整合素-α2（ITGA2）基因C807T和整合素-β3（ITGB3）基因T176C多态性与缺血性脑卒中的关系及其对血脂、脂蛋白水平的影响。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）和DNA测序的方法检测265例缺血性脑卒中患者和280例对照组ITGA2和ITGB3的基因型;同时按常规方法测定血浆脂质、脂蛋白水平。结果缺血性脑卒中组总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白一胆固醇（LDL-C）水平明显高于对照组（P〈0．05）,ITGB3基因T176C多态性在缺血性脑卒中组和正常人群中的分布差异无显著性（P〉0．05）,而ITGA2基因C807T多态性在两组人群中的分布差异存在显著性（P〈0．05）,等位基因频率的相对风险分析发现,T等位基因携带者患缺血性脑卒中的风险是C等位基因的1．455倍（OR=1．455,95％CI：1．134—1．866）,携带T等位基因的缺血性脑卒中个体血浆TC水平显著高于不携带者（P〈0．05）。结论 ITGA2基因C807T多态性与缺血性脑卒中的发病具有相关性,其中T等位基因可能是缺血性脑卒中的遗传易感基因;ITGA2基因C807T多态性可能通过影响血脂水平而影响缺血性脑卒中的发生。     

Relationship between plasma HDL subclasses distribution and apoA-I gene polymorphisms

BACKGROUND: It is generally accepted that apolipoprotein (apo) A-I is the dominant structural apolipoprotein of HDL particles and different HDL subclasses have distinct but interrelated metabolic functions. HDL is known to directly affect the atherogenic process hence changes in HDL subclasses distribution may be related to the incidence and prevalence of atherosclerosis. METHODS: The ApoA-I contents (mg/l) of plasma HDL subclasses were determined by 2-dimensional gel electrophoresis coupled with immunodetection and apoA-I genotypes were assayed by PCR-RFLP in 307 Chinese subjects (169 males, 138 females). RESULTS: The G/G and C/C genotypes were the most frequent at -78 bp and +83 bp of apoA-I gene, respectively. There were no significant differences in the frequencies of rare A allele at -78 bp and rare T allele at +83 bp between males and females. Compared with the G/G carriers, G/A and A/A carriers had significantly higher plasma concentrations of TG, apoC-II, apoC-III, apoA-I contents of prebeta(1)-HDL, HDL(3a) and TG/HDL-C ratio. And in addition, A/A carriers had significantly lower apoA-I contents of HDL(2a) and HDL(2b). Females had increased plasma concentrations of apoA-I, HDL-C, apoA-I contents of HDL(2a) and HDL(2b) while decreased apoA-I contents of prebeta(1)-HDL, HDL(3b) and TG/HDL-C ratio as compared to males carrying the same genotype. No significant differences were demonstrated on the concentrations of plasma lipids, lipoproteins, apolipoproteins and apoA-I contents of plasma HDL subclasses between the C/C and C/T subjects. CONCLUSION: The G/A polymorphism at -78 bp of apoA-I gene was associated with changes of HDL subclasses distribution. There was a general shift towards smaller-sized HDL, which, in turn, indicated that reverse cholesterol transport (RCT) might be weakened and HDL maturation might be abnormal in the subjects with G/A mutation.