云南省100例异常血红蛋白E患者的血液学和基因型分析

目的 分析云南省异常血红蛋白E(hemoglobin E,Hb E)杂合子及Hb E合并地中海贫血(简称地贫)病例的血液学表型和基因型特征。方法 对100例高效液相色谱分析提示为Hb E异常血红蛋白携带病例进行血细胞分析,并用Gap-PCR和PCR-寡核苷酸探针反向斑点杂交法检测α-和β-珠蛋白基因常见突变类型。结果 100例疑似Hb E携带的病例,经基因诊断全部检出β-珠蛋白链CD26突变(HBB：c.79G>A),其中Hb E杂合子90例,Hb E合并αα/-α3.7突变7例,Hb E合并αα/--SEA突变2例,1例为Hb E合并-α3.7/-α3.7。Hb E杂合子血液学表型分析结果：Hb A2(26.02±3.64) %,Hb F (1.35±1.25)%,平均红细胞体积(78.83±4.68) fl,平均红细胞血红蛋白含量(26±1.54) pg,平均血红蛋白浓度(329.65±10.73) g/L,血红蛋白(141.08±16.53) g/L;Hb E复合α地贫时,α地贫基因的突变类型不同,血液学表型结果不同。结论 云南省Hb E及Hb E合并α地贫的发生率较高,高...     

β地中海贫血复合血红蛋白E25例的临床观察

为了观察β地中海贫血复合血红蛋白Ｅ的临床表现和诊断，本文报告了此病２５ 例，男性１５ 例，女性１０ 例，年龄１３０岁，平均１３－７ 岁，壮族１４ 例，汉族１０ 例，京族１ 例，肝脾肿大各２２ 例。血红蛋白２６１００ｇ／Ｌ，平均５９ｇ／Ｌ，红细胞（０－８４－１）×１０１２／Ｌ，平均２－６８×１０１２／Ｌ，网织红细胞０－０３０－２８，平均０－２３，血红蛋白Ｅ加血红蛋白Ａ２０－１９０－９，平均０－６２，其中５ 例做了基因分析，ＣＤ７１－７２／ＨｂＥ４ 例，ＣＤ４１－４２／ＨｂＥ１ 例。其临床表现与重型β地中海贫血及中间型β地中海贫血相似。     

异常血红蛋白Bushwick临床和分子特征一例报道分析

目的报道1例异常血红蛋白Bushwick杂合子病例的临床和分子特征。方法对1例异常血红蛋白Bushwick病例的临床表现进行分析,并用分子生物学方法检测其分子基础。结果异常血红蛋白Bushwick病例表现为轻度黄疸和血尿的间歇性发作,其分子基础为β-珠蛋白第74位甘氨酸突变为缬氨酸,生成不稳定血红蛋白。结论对临床慢性溶血病例应注意不稳定血红蛋白的可能。     

云南省乙型肝炎病毒基因型和血清型的流行状况分析

目的了解云南省人群中流行的乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus,HBV）基因型和血清型分布情况。方法从参加健康体检的人群中筛查HBsAg阳性的血清标本,利用巢式PCR扩增HBVS基因片段,并对扩增产物进行序列测定,从GenBank中查获A～I基因型共27株HBV参考序列,构建HBVS基因系统发生树,以此确定其样本的基因型及血清型,并对结果进行统计分析。结果从2216名体检人员血清标本中筛查出39份HBsAg阳性的样本,HBV的s基因序列分型结果表明有4种基因型：c型占76．9％,B型占15．4％;D型占5．1％;I型占2．5％。血清分型结果为：adw2型占71．8％;adrq‘型占17．9％;ayr型占10．3％。所有adw2血清型标本均为c基因型。HBsAg、HBeAg双阳性标本中75％为c基因型／adw2血清亚型。结论云南省HBV感染人群中HBV基因型的分布以C型为主,血清型以adw2型为主。     

云南省乙型肝炎病毒基因型和血清型的流行状况分析

目的 了解云南省人群中流行的乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)基因型和血清型分布情况.方法 从参加健康体检的人群中筛查HBsAg阳性的血清标本,利用巢式PCR扩增HBV S基因片段,并对扩增产物进行序列测定.从GenBank中查获A～I基因型共27株HBV参考序列,构建HBV S基因系统发生树,以此确定其样本的基因型及血清型,并对结果进行统计分析.结果 从2216名体检人员血清标本中筛查出 39份HBsAg阳性的样本,HBV的S基因序列分型结果表明有4种基因型:C型占76.9%,B型占15.4%;D型占5.1%;I型占2.5%.血清分型结果为:adw2型占71.8%;adrq+型占17.9%;ayt型占10.3%.所有adw2血清型标本均为C基因型.HBsAg、HBeAg双阳性标本中75%为C基因型/adw2血清亚型.结论 云南省HBV感染人群中HBV基因型的分布以C型为主,血清型以adw2型为主.     

云南省乙型肝炎病毒基因型和血清型的流行状况分析

目的 了解云南省人群中流行的乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)基因型和血清型分布情况.方法 从参加健康体检的人群中筛查HBsAg阳性的血清标本,利用巢式PCR扩增HBV S基因片段,并对扩增产物进行序列测定.从GenBank中查获A～I基因型共27株HBV参考序列,构建HBV S基因系统发生树,以此确定其样本的基因型及血清型,并对结果进行统计分析.结果 从2216名体检人员血清标本中筛查出 39份HBsAg阳性的样本,HBV的S基因序列分型结果表明有4种基因型:C型占76.9%,B型占15.4%;D型占5.1%;I型占2.5%.血清分型结果为:adw2型占71.8%;adrq+型占17.9%;ayt型占10.3%.所有adw2血清型标本均为C基因型.HBsAg、HBeAg双阳性标本中75%为C基因型/adw2血清亚型.结论 云南省HBV感染人群中HBV基因型的分布以C型为主,血清型以adw2型为主.     

广东地区血红蛋白H病基因型分析及高危胎儿基因诊断

为了解广东地区血红蛋白Ｈ病基因型的分布特点及各基因型频率，对广东地区１０５例血红蛋白Ｈ（ＨｂＨ）病患者采用α珠蛋白基因探针－限制性内切酶谱直接分析法，进行了基因型分析，检出非缺失型ＨｂＨ病１４例（１３．３％）；缺失型ＨｂＨ病９１例（８６．７％）．其中右缺失型５９例，占缺失型ＨｂＨ６４．８％；左缺失型３２型，占３５．２％。对１７例ＨｂＨ病高危胎儿进行了产前基因诊断，结果有５例为α地贫２杂合子，３例ＨｂＨ病，５例α地贫１杂合于或正常，１例ＨｂＢａｒｔ＇ｓ水肿胎，其余３例由于双亲一方为非缺失型α地贫，故对胎儿的基因型不能作出准确判断。还对缺失型和非缺失型ＨｂＨ病的血红蛋白和血红蛋白Ｈ的相对含量进行了比较，结果显示非缺失型ＨｂＨ病的血红蛋白含量显著低于缺失型ＨｂＨ病（Ｐ＜０．００１），而血红蛋白Ｈ相对含量则显著高于缺失型ＨｂＨ病（Ｐ＜０．００５）．为高危胎儿的产前诊断提供了依据。     

武汉市新分离2株乙型脑炎病毒E基因分型及序列分析

目的 对2009年武汉市新分离的2株乙型脑炎（简称乙脑）病毒进行基因分型和序列分析,了解本地乙脑病毒株的分子生物学特性。方法 将2009年从三带喙库蚊中分离的两株乙型脑炎病毒用RT-PCR法扩增E基因,将其进行测序,并用DNAstar and MegAlign软件与其他基因型代表株进行比对。结果 16组样品检出两株阳性（WHJX9-09、WHJX10-09）,这两株阳性均属于GI型。两株新分离JEV之间的核苷酸和氨基酸同源性分别为98.9％和100％。同目前在武汉市使用的疫苗株SA-14-14-2相比,核苷酸同源性分别为87.4％、87.9％,氨基酸同源性为96.9％。共有15个氨基酸发生变异分布在3个不同结构域,中和位点没有变异但是神经毒力位点仍然存在。结论 武汉市本地新分离乙脑病毒基因型为GI型,不同于1988年在武汉检出的GⅢ型的基因型,和疫苗株SA-14-14-2相比,其神经毒力并没有减弱,但疫苗产生的抗体对新出现的GI型乙脑病毒仍有中和作用。因此提高乙脑疫苗的接种率并配合防蚊灭蚊措施对控制乙脑疫情依然至关重要。同时有必要对本市蚊虫及乙脑患者进行长期的病原学监测工作,为乙脑预测预警体系的建立提供科学依据。     

载脂蛋白E不同基因型胆囊结石患者的血脂水平分析

为了解载脂蛋白Ｅ不同基因型胆囊结石患者的血脂水平，应用ＰＣＲ技术研究了８７例胆囊结石患者和５０例正常人的ＡｐｏＥ基因型，另测定参加者空腹血脂。结果发现：Ｅ２／３基因型的胆囊结石患者血清ＴＧ、ＶＬＤＬ－Ｃ水平显著升高，ＬＤＬ－Ｃ水平显著降低。Ｅ３／３基因型胆囊结石患者ＨＤＬ－Ｃ、ＨＤＬ２－Ｃ、ＨＤＬ３－Ｃ水平显著下降。Ｅ３／４基因型胆囊结石患者ＶＬＤＬ－Ｃ轻度降低，ＬＤＬ－Ｃ轻度升高。结果提示：同一ＡｐｏＥ基因型胆囊结石患者血脂异常较正常人突出，不同基因型的胆囊结石患者血脂异常的特征各不相同。为研究胆囊结石病发病机理提供了资料。     

血红蛋白Constant Spring的表型与基因型分析

目的 分析血红蛋白Constant Spring(hemoglobin Constant Spring,HbCS)携带者基因型和表现型的关系,探讨HbCS对血液学指标的影响规律.方法 检测HbCS携带者的血常规和血红蛋白电泳.采用跨越断裂点-PCR、反向点杂交方法确认α-、β-地中海贫血(以下简称地贫)突变.结果 HbCS合并--SEA/αα或HbQS表现为HbH病的特征,与αCSα/-α或HbCS杂合子比较,差异有显著的统计学意义.αCSα/-α与HbCS杂合子对表型的影响较小.HbCS合并β地中海贫血,其血液学表型表现为β地贫的特征.上述各型变异阳性病例中,仅有57.6%的样品血红蛋白电泳检测为阳性结果.结论 HbCS杂合子与其它类型地贫突变合并存在时,不同基因型组合可出现较大差异的表型变化.另外,对此类复合地贫仅用血红蛋白电泳较易漏诊和误诊,对其确诊需要依赖基因型分析.     

血红蛋白抗大鼠大肠埃希菌阴道感染研究

目的:探讨血红蛋白在大鼠体内是否具有抗菌抑炎作用。方法:构建大鼠阴道感染模型后随机设立实验组和对照组,阴道给予血红蛋白后观察子宫宫颈阴道脏器指数,并采用组织病理切片检测血红蛋白治疗前后各组指标变化。结果:子宫宫颈阴道脏器指数经统计学分析示血红蛋白组、模型对照组间无差异(P0.05),基质对照组与前两组比均有显著性差异(P0.05),基质对照组的脏器指数增加明显。结论:血红蛋白能减轻大鼠大肠埃希菌阴道感染炎症病变程度。     

Phenotypic and genotypic spectrum of Turkish patients with isovaleric acidemia

We aim to investigate the genetic basis of isovaleryl-CoA dehydrogenase (IVD) gene mutations and genotype–phenotype correlations in Turkish patients. Accordingly, bi-directional sequencing was performed to screen 26 patients with isovaleric acidemia (IVA). Nine novels (c.145delC, c.234 + 3G > C, c.506_507insT, p.Glu85Gln, p.Met147Val, p.Ala268Val, p.Ile287Met, p.Gly346Asp and p.Arg382Trp) and six previously reported (c.456 + 2T > C, p.Arg21His, p.Arg21Pro, p.Arg363Cys, p.Arg363His p.Glu379Lys) pathogenic mutations were identified. Pathogenicity of the novel mutations was supported using computational programs. No clear genotype–phenotype correlation could be determined. One of the cases with the novel c.234 + 3G > C mutation has portoseptal liver fibrosis, the clinical condition that was first reported for IVA. This study is the first comprehensive report from Turkey related to IVA genetics that provides information about the high number of disease-causing novel mutations.     

云南省虫媒病毒的分离鉴定

目的了解云南省部分地区虫媒病毒的存在及流行情况。方法2002年和2004年从云南省5个县市采集蚊虫,经研磨、细胞接种分离病毒,通过实时荧光PCR、免疫荧光试验等方法进行鉴定,并对病毒的分子生物学特性进行分析。结果采集到4810只蚊虫,分离到12株致BHK细胞病变的病毒,经实时荧光PCR、免疫荧光试验等鉴定为乙脑病毒。新分离病毒DL0437属于基因Ⅲ型乙脑病毒。结论2002年和2004年在云南5个县市采集4810只蚊虫中分离到12株乙脑病毒,是近年来在云南省首次分离到基因Ⅲ型乙脑病毒。     

Molecular evidence for potential transovarial transmission of Jingmen tick virus in Haemaphysalis longicornis fed on cattle from Yunnan Province,China

Jingmen tick virus (JMTV) is a novel tick-borne virus first identified from Jingmen city, Hubei Province of China in 2010. It has been proved that JMTV can cause human diseases and is widely distributed both inside and outside of China. However, the survival mode and transmission characteristics of JMTV still need further research, particularly in terms of transovarial transmission. In this study, an investigation was conducted to explore the presence of JMTV from engorged female ticks to their offspring. All engorged female adult ticks were collected from domestic cattle and allowed to lay eggs in appropriate humidity and temperature conditions. Maternal ticks, eggs and larvae were screened for JMTV RNA through real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) and nested PCR methods. The results revealed the positive rate of 10.53% (10/95) in engorged ticks, 9.09% (2/22) in eggs and 8% (4/50) in larvae pools, respectively. Phylogenetic analysis confirmed that sequences from eggs and larvae had closer relationship with those isolates from maternal engorged ticks with more than 99.7% homology and JMTV manifested with evolutional conservatism. Our study has identified for the first time that JMTV could be transmitted from mother generation to offspring of Haemaphysalis Longicornis. Nonetheless, the efficiency of transovarial transmission in JMTV and the significance of ticks as amplification hosts still need to be further illustrated.     

Rectal temperature and prostaglandin E2 increase in cerebrospinal fluid of conscious rabbits after intracerebroventricular injection of hemoglobin

 Fever accompanies subarachnoid hemorrhage (SAH) in the majority of patients. In a previous study, hemoglobin (Hb) was shown to catalyze in vitro, under aerobic conditions, the conversion of arachidonic acid to prostaglandin E₂ (PGE₂) and prostaglandin F_2α. The aim of the present work was to assess whether this pathway also operates in vivo and to provide a mechanism to explain post-SAH fever. To this end, PGE₂ concentration was determined in cerebrospinal fluid (CSF) of conscious rabbits chronically cannulated in the lateral ventricle and cisterna magna, following intracerebroventricular (i.c.v.) injection of 10 μg or 100 μg of commercial rabbit bicrystallized Hb as a model of SAH. Before i.c.v. injection, Hb solutions were filtered on a polimixin-B column to remove substantially, by over 90%, endotoxin-like substances. Results show that in nine rabbits injection of 10 μg Hb did not significantly modify body temperature or significantly alter CSF PGE₂ content. On the contrary, in nine rabbits, injection of 100 μg Hb produced a significant increase in core temperature which was accompanied by a significant increase in CSF PGE₂. When data related to these two parameters from the 9 control and 18 Hb-treated rabbits were analyzed as a single group, a linear, positive, and highly significant correlation was found. These findings indicate that, once Hb is released into the subarachnoid space during SAH, it enhances CSF PGE₂ content and elicits hyperthermia, thus offering an explanation for the fever that is an aggravating condition in most SAH patients. Received: 4 September 1998 / Accepted: 20 December 1998     

载脂蛋白E基因多态性与2型糖尿病的关系

目的:探讨载脂蛋白E基因型与2型糖尿病的易感性。方法:应用multi-ARMS快速分型法对316例T2DM患者、512例健康对照人群的ApoE基因第4外显子112位Cys/Arg和158位Arg/Cys进行检测;随机抽取分型标本进行DNA测序法验证。结果:ε2/2、ε2/3、ε3/3、ε4/2、ε4/3、ε4/4基因型在二组中的频率分布为:0.6%,5.7%,72.8%,1.9%,14.9%,4.1%(T2DM组);0.6%,9.4%,70.1%,1.8%,17.0%,1.2%(对照组)。二组间差异有显著性统计学意义(χ2=11.45,P<0.05),T2DM组ε4/4基因型频率明显高于对照组(4.11%VS1.17%)。结论:ApoEε4/4基因型可能与T2DM的易感性有关。     

冠心病危重病人红细胞流变特性和血红蛋白结构的研究

目的: 研究冠心病危重病人红细胞流变特性和血红蛋白结构的变化。方法: 利用动、静态图像分析技术和紫外-可见光谱技术,对pH 7.4生理环境下冠心病危重病人和健康人的红细胞和离体血红蛋白进行测定。结果: (1)冠心病危重病人的青龄、老龄红细胞的形态大小参数与健康人不同,冠心病危重病人的青龄、老龄红细胞的接触面积、周长、长轴和短轴比健康人小,形状归化因子比健康人大。(2)冠心病危重病人的青龄、老龄红细胞的弯曲弹性模量比健康人大。(3)冠心病危重病人血红蛋白的吸收光谱与健康人一致,吸收峰的位置相同,吸收峰的吸收值没有明显差异。结论: 冠心病危重病人青龄、老龄红细胞的形态结构均不同程度向球形过渡,变形能力比健康人下降,但其血红蛋白结构未呈现与健康人不同的变化。     

戊型肝炎病毒摩洛哥株非编码区基因序列鉴定及基因型分型

目的　检测戊型肝炎病毒 (HEV)摩洛哥株非编码区 (UTR)序列 ,探讨HEV非编码区序列能否作为其基因型分型的依据。方法　使用基于RNA连接酶的cDNA末端快速扩增法 (RLM RACE)扩增HEV摩洛哥株 5′和 3′端片段并测序。所得序列使用LASERGENE和PHYLIP软件包与其他 2 9株HEV序列比较。结果　只有基于甲基化帽子结构的RLM RACE扩增出了 5′端片段。HEV摩洛哥株 5′端UTR有 2 6个核苷酸 ,3′端polyA之前有 6 5个核苷酸。基于 3′端UTR序列的进化树与基于全基因序列的进化树不全相同。HEV 3′端至少需要 10 0个左右核苷酸长的序列才可进行HEV基因型分型。结论　HEV摩洛哥株 5′端有甲基化帽子结构。HEV 3′端UTR序列不能完全代替全基因组序列进行基因型分型。部分序列替代全基因组进行基因型分型时需要考虑其部位和长度因素。     

云南大理猪戊型肝炎病毒分子流行病学调查

目的：了解云南大理农村的猪群中戊型肝炎病毒（ hepatitis E virus, HEV）感染情况,为HEV的防控提供理论依据。方法利用逆转录巢式聚合酶链反应（ RT?nested PCR）技术,对所采集大理41份猪粪便样品进行HEVORF2基因部分片段扩增,经琼脂糖凝胶电泳后对目的条带进行回收纯化及克隆测序,序列利用DNAStar和MEGA4．0软件进行同源性比较和进化树构建。结果 RT?nested PCR方法扩增出348 bp目的基因序列,系统进化树显示该病毒属于基因4型h亚型HEV。此次实验共检测41份猪粪便样品,其中23份为阳性,阳性率为56．10％。结论大理猪群存在较高的HEV感染率,存在HEV跨种间感染人的风险,应该加强防控以免HEV爆发流行。