实时荧光定量PCR与1,3-β-D葡聚糖试验在儿童肺部真菌感染中的诊断意义

目的探讨实时荧光定量PCR与1,3-β-D葡聚糖试验(G试验)在儿童侵袭性肺部真菌感染诊断中的价值。方法对拟诊肺部真菌感染的31例患儿,取咽部吸出物做真菌培养、涂片,真菌、白色念珠菌PCR检测,取全血做G试验,比较检测的准确性。结果研究组31例中,白色念珠菌PCR检测阳性12例,G试验阳性15例。对照组11例标本PCR检测、G试验均阴性。PCR与G试验一致性检验结果显示两组间一致性中等(Kappa=0.512),研究组与对照组检测阳性率比较有统计学差异(P<0.05)。结论实时荧光定量PCR检测可用于儿童侵袭性肺部真菌感染的早期诊断,与G试验联合应用可提高诊断的敏感性。     

实时荧光定量PCR在手足口病原体检测中的应用探讨

目的：：对手足口病患儿施行病原体检测时运用荧光定量PCR实时测定法（FQ-PCR法）的效果及有关情况探析。方法：以2016年5月-7月因疑似感染手足口病进入本院施行病原体测定的患儿127例为评估对象,依据年龄段情况将其划分成A组（年龄不超3岁者）77例、B组（年龄间于3-6岁间者）50例,运用FQ-PCR法对疑似患儿的疱疹液、咽拭子实施相应指标值的测定;并以ELISA法对患儿血清展开检测,经比对两法的检出率数据情况,系统评估FQ-PCR医疗检测效果。结果：127例患儿咽拭子样本、疱疹液样本在FQ-PCR法测定下,EV检测有101例显阳性,占79.53%;当中A组有67例,占87.01%,B组有34例,占68.00%。A组患儿阳性检出率超出B组,差异明显（P＜0.05）。咽拭子样本检出阳性率是69.60%,疱疹液样本检出阳性率是81.97%。FQ-PCR法检出EV71阳性病例超出ELISA法,差异显著（P＜0.05）,检出COXA16阳性病例和ELISA法较接近,没有较大差异（P＞0.05）。结论：FQ-PCR 法践行于HFMD病原体测定及评估中,能强化病原学指标监控力度,以辅助当地HFMD疫情预测、防范工作的有效进行。     

实时荧光定量检验在结核病患者诊断中的应用价值

目的:探讨实时荧光定量检验在结核病诊断中的应用价值.方法:选择2015年7月—2016年7月我院收治的结核病患者72例为研究对象,比较分析实时荧光定量检验与涂片抗酸染色法的检查结果.结果:涂片抗酸染色法检测阳性例数为27例,占比37.5%;实时荧光定量检验检测阳性例数为58例,占比80.6%;实时荧光定量检验阳性检测率明显高于涂片抗酸染色法阳性检测率(P<0.05).结论:实时荧光定量检验肺结核病的诊断效率高于涂片抗酸染色法,值得在结核病诊断中应用及推广.     

实时荧光定量PCR技术在食品检验中的应用

实时荧光定量PCR(real-time quantitativepolymerase chain reaction,RQ-PCR)又称荧光定量PCR,1994年由日本科学家Higuchi提出。当时因为想实时地看到PCR反应的整个过程,就在普通PCR仪的基础上配备了一个激发和检测的装置,在PCR反应的退火或延伸阶段检测掺入到双链核酸中EB的含     

CT在肺部真菌感染中的临床诊断价值

目的 分析肺部真菌感染CT影像学表现的特征,为该病的早期诊断提供理论依据.方法 选择2009年1月-2012年6月在医院收治的肺部真菌感染患者39例,所有患者均行X线胸部正侧位检查和胸部CT平扫,观察患者肺内病灶的形态影像学特征,并比较分析其与病原学检查结果.结果 肺部真菌感染患者中通过X线检查的阳性率为10.26％,CT检出率为74.36％,CT检出率明显高于X线检出率,两者比较差异有统计学意义(P＜0.01);病原菌检查结果分别为肺隐球酵母菌病9例,占23.08％,肺曲霉菌病16例,占41.03％,假丝酵母菌病11例,占28.21％,胸部CT影像学表现为结节或肿块影14例占35.90％;晕征9例占23.08％,空洞13例占33.33％,其中洞内球征4例占10.26％,新月征7例占17.95％,渗出性病变8例占20.51％,肺气腔实变4例占10.26％.结论 肺真菌感染表现多种多样,CT检查的特征性表现对提示和尽早治疗肺部真菌感染具有良好的临床参考价值.     

全自动实时荧光定量PCR系统在肺结核诊断和药敏试验检测中的应用价值

为了评估全自动实时荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)(GeneXpert MTB/RIF)系统在肺结核诊断和药敏试验检测中的应用价值。本研究收集2015年1~12月在鹤壁市传染病医院就诊的245例疑似肺结核患者的合格痰样本215份,每份样本同时进行痰涂片镜检、培养和药敏试验以及GeneXpert MTB/RIF系统检测结核菌核酸和药敏试验检测。采用SPSS 17.0软件对数据进行统计分析,率的比较采用χ~2检验,P0.05为差异有统计学意义。结果显示,GeneXpert MTB/RIF系统阳性检出率为34.88%,以培养为"金标准",GeneXpert MTB/RIF系统的敏感性为88.06%,特异性为90.44%。GeneXpert MTB/RIF系统结果报告时间平均为2.5h,GeneXpert MTB/RIF检测出6例利福平耐药。GeneXpert MTB/RIF系统是一种简单、快速和准确的肺结核快速诊断检测方法,具有较高的临床应用价值。     

实时荧光定量PCR方法在布鲁氏菌病诊断中应用

目的:评价实时荧光定量PCR法在布鲁菌病中的诊断价值。方法:对296例确诊的布鲁菌病患者和30例健康对照者的血液标本进行SAT、RT-PCR、BC法检测,对急性布鲁菌病组和慢性布鲁菌病组观察并分析RT-PCR检测的性能以及与SAT、BC的符合程度。结果:RT-PCR法对急性期布病组敏感性为76.4%,与SAT、BC的kappa值分别为0.62、0.64,有较好的一致性;RT-PCR法对慢性期布病组其敏感性为27.5%,与SAT、BC的检测结果有很大差别,kappa值仅为0.09、0.08。结论:RT-PCR检测灵敏度介于SAT、BC之间。血清学试验仍然是布鲁氏菌筛查的最好的方法,RT-PCR法仅能作为布鲁菌病诊断的一个补充。     

实时荧光定量PCR技术进展

实时荧光定量PCR(real_time quantitative PCR)技术是一种新型的核酸定量检测、分析技术,它通过在PCR扩增反应过程中加入荧光物质,使得对反应过程的实时监控成为可能。它具有实时监测、定量准确、灵敏度高、反应速度快、重复性好及PCR反应后不需电泳检测等优点,已逐步成为分子生物学研究中的重要工具。     

实时荧光定量PCR在流感病毒核酸检测中的应用

目的探讨实时荧光定量PCR在流感病毒核酸检测中的应用效果。方法选取2009年9月—2013年12月在我州采集的流感样病例咽拭子2489件进行分析,采用实时荧光定量PCR对流感病毒核酸进行检测,观察检测阳性率和阳性样本的类型,以分析流感的流行趋势。结果 2009年9月—2013年12月共检出流感病毒核酸阳性676件,检测阳性率为27.16%;其中甲型H1N1病毒472件,占69.82%;季节性甲3亚型病毒126件,占7.54%;季节性甲1型病毒21件,占3.11%;乙型病毒6件,占0.89%;各类型流感病毒发生率之间差异具有统计学意义（P〈0.05）。每年6-9月甲型H1N1病毒流感呈上升趋势,在10-11月达到高峰期;6-9月以季节性甲3亚型病毒为主要流行病株,10-11月甲型H1N1病毒成为主要流行病株。结论实时荧光定量PCR是一种科学有效的检测方法,可对流感病毒核酸进行快速、准确的检测,分析流感病毒的流行规律,有效预防突发公共卫生事件的发生。     

实时荧光定量PCR在神经梅毒检测中的应用

目的探讨脑脊液实时荧光定量PCR对于神经梅毒的诊断价值。方法对大连市皮肤病医院2011年1月-2016年1月155例疑似神经梅毒患者的临床资料及脑脊液等进行综合分析,同时用实时荧光定量PCR、TP-ELISA、VDRL法检测所有待测者脑脊液;比较分析检测结果的敏感度与特异度。结果共诊断31例神经梅毒患者(1例待观察最终确诊),TP-ELISA检测神经梅毒的敏感度与特异度分别为96.88%和38.71%,实时荧光定量PCR检测神经梅毒的敏感度与特异度分别为64.52%和100.00%,VDRL检测神经梅毒的敏感度与特异度分别为93.55%和100.00%。结论脑脊液实时荧光定量PCR虽然具有高敏感度、高特异度等优点,但对脑脊液标本要求较高,是否可作为神经梅毒的临床诊断标准有待进一步研究。     

实时荧光定量PCR在流感病毒核酸检测中的应用

目的通过对2009年6—11月北京怀柔地区流行性感冒(流感)病原学监测数据的分析,了解北京市怀柔区甲型H1N1型流感的流行趋势,为该地区甲型H1N1流感的防治提供科学依据。方法依据《全国流感监测实施方案》、《甲型H1N1流感病毒实验室检测技术方案》、《甲型H1N1流感监测方案(第二版)》、7500Fast型实时荧光定量PCR的SDS软件操作。结果2009年6—11月共采集流感样病例咽拭子1780件,检出流感病毒核酸阳性507件,阳性率为28.48%。阳性样本中,季节性甲3亚型92件,占18.15%;季节性甲1亚型8件,占1.58%;乙型4件,占0.79%;甲型H1N1型395件,占77.91%。结论2009年6—9月,甲型H1N1型流感的流行趋势为上升状态,但期间季节性甲3亚型仍为主要流行毒株。10—11月,甲型H1N1型流感的上升趋势达到高峰期,甲型H1N1流感病毒为流感流行主要毒株。     

实时荧光定量PCR技术在食品检测中的应用

阐述了实时荧光定量技术的原理、特点以及在食品微生物检测、研究和转基因食品检测方面的应用情况，并提出了目前存在的问题。     

实时荧光定量PCR在食品致病菌检测中的应用

随着经济的全球化,食品安全已经越来越受到人们的关注,而微生物污染已成为食品安全的首要问题。食品致病菌是引发食物中毒和食源性疾病暴发的重要因素。传统的检测方法必须经过细菌的分离、培养与鉴定,不但耗时耗力而且不适于大量样品同时检测,不能满足食物中毒和食源性疾病暴发时的检测需要。近年来随着P C R检测技术的快速发展,其在微生物检测中的应用也越来越广泛,实时荧光定量PCR作为PCR检测方法中的一种,因其具有较强的特异性和灵敏度并且还有检测速度快、准确性高等优点,在检测食品微生物的应用中有较强优势。本文介绍实时荧光定量PCR技术在金黄色葡萄球菌、沙门菌、志贺菌、单核细胞增生李斯特菌、大肠埃希菌等几种常见食源性致病菌检测中的应用。     

实时荧光定量PCR技术快速检测儿童腹泻病原体

目的应用实时荧光定量PCR法,开展快速检测儿童感染性腹泻标本的病原体,为儿童感染性腹泻的临床诊断提供病原学依据。方法采用实时荧光定量PCR方法,采集本医院就诊腹泻儿童粪便标本,对该600例儿童感染性腹泻标本进行腹泻病原体的检测。检测的病原体有诺瓦克病毒、轮状病毒、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球、菌痢疾杆菌、沙门菌,并对检测结果进行评价分析。结果 600例儿童感染性腹泻标本实时荧光定量PCR检测,共检出病原体核酸阳性标本240份,总检出病原体核酸阳性率为40.0%。结论实时荧光定量PCR法具有准确性好、灵敏度高、检测快速等优点,是一种理想的儿童感染性腹泻病原体快速检测的方法。     

实时荧光定量PCR在流感病毒核酸检测中的应用

目的探讨在流感病毒核酸检测中,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)这种检测方法的应用效果,通过对哨点医院2014年6月-2016年6月所采集的1 553份流感样病例咽拭子的分析,了解流感病毒的流行趋势,为预防流感提供科学依据。方法选取2014年6月-2016年6月天津市第四中心医院送至北辰区疾病预防控制中心检测的1 553份流感样病例咽拭子,采用Real-time PCR的方法进行核酸检测,分析所选取标本的阳性率以及阳性标本的类型,了解流感病毒的流行趋势。结果在2014年6月-2016年6月送至该中心检测的1 553份咽拭子中,共检出阳性标本299份,检测阳性率为19.25%;甲型病毒183份,占61.20%;乙型病毒116份,占38.80%,各类型流感病毒阳性率之间差异具有统计学意义(P0.05)。结论 Real-time PCR可以快速有效地对流感病毒核酸进行检测,为分析流行趋势、预防流感提供科学有效的依据。     

荧光定量PCR在肺炎支原体感染早期诊断中的价值探索

目的:探讨荧光定量PCR检测肺炎支原体(MP)-DNA早期诊断MP感染的价值.方法:选取2018年10月至2019年11月本院187例确诊为肺炎疾病的患儿,分别采用荧光定量PCR检测MP-DNA和酶联免疫吸附法检测血清免疫球蛋白M(MP-IgM).观察两种检查方法不同时间检测阳性率,两种方法及联合检测对不同年龄段患儿的...     

实时荧光定量PCR室内质控方法的探讨

目的探讨能应用于监测实时荧光定量PCR室内质控的方法。方法用Taqman实时荧光定量PCR法检测2009年3～4月的血清HBV-DNA,计算每天的阳性质控结果、标准曲线的斜率、截距和相关系数(r)及相关结果的增值(x-)、标准差(s)和变异系数(cv)。结果 2009年3月份阳性质控的血清结果对数的x-、s和cv分别为3.193、0.182和5.700%;斜率的x-、s和cv分别为0.274、0.015和5.470%;截距的x-、s和cv分别为12.735、0.352和2.760%;相关系数的x-、s和cv分别为0.997、0.004和0.400%。2009年4月份阳性质控的x-、s和cv分别为3.251、0.213和6.550%;斜率的x-、s和cv分别为0.274、0.016和5.840%;截距的x-、s和cv分别为12.768、0.379和2.970%;相关系数的-x、s和cv分别为0.995、0.005和0.500%。结论 Taqman实时荧光定量PCR法检测HBV-DNA实验中,可同时使用阳性质控品的增值、斜率和截距作为监测手段实施室内控制,以便更好地为临床提供准确可靠的结果。     

旋转式荧光定量PCR在临床应用中的价值

目的：探讨旋转式荧光定量PCR仪在检测临床标本中的应用价值。方法：通过旋转荧光定量-PCR技术鉴定1132株临床分离株,进行结核分枝杆菌的菌种鉴定和定量分析,同时进行抗酸染色和培养法。结果：总阳性检出率为48.64%,其中菌阳检出率为96.56%（253/262）,阴性符合率为77.85%（369/474）,菌种鉴定特异性实验符合率为100%。结论：旋转氏荧光定量PCR仪改进后更加快速、敏感,与其配套使用的试剂特异性强,是在检测结核分枝杆菌复合群的同时,又能进行非结核分枝杆菌鉴定辅助诊断的好方法。