细胞凋亡及Bcl-2和Bax基因表达在脓毒症大鼠肾脏损伤中的作用

目的:探讨细胞凋亡及Bcl-2、Bax在脓毒症大鼠肾损伤中的作用。方法:大鼠分为正常组(n=6)、假手术组和脓毒症组(均n=24)。采用盲肠穿孔结扎术建立脓毒症模型。建模后3、6、12、24h测定血Cr、BUN,电镜观察肾组织超微结构,免疫组化法检测Bcl-2、Bax表达。结果:脓毒症组Cr、BUN较假手术组明显增高,随时间呈上升趋势;电镜下见肾小管上皮细胞凋亡;6h组Bax表达明显增加(0.485±0.011vs0.351±0.020;P<0.01),随病程延长,Bcl-2表达有所增加(P>0.05),Bcl-2/Bax比值降低(0.725±0.035vs0.991±0.060;P<0.01),随病程延长而下降。结论:脓毒症后Bax表达增强、抑制Bcl-2的表达,引起细胞凋亡及肾脏损伤。     

脓毒症大鼠脾脏淋巴细胞凋亡的实验研究

目的 观察脓毒症大鼠脾脏T、B淋巴细胞的数量变化及细胞凋亡情况,探讨脓毒症时免疫失衡的机制.方法 健康雄性Wistar大鼠80只,按随机数字表法分为假手术组(30只)、模型组(50只).采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症大鼠模型,于制模后6、12、24、48、96 h活杀动物取脾脏,行苏木素-伊红(HE)染色,光镜下观察脾脏组织病理变化;采用免疫组化法检测脾脏CD4~+、CD8~+T淋巴细胞和B淋巴细胞以及Bax、Bcl-2蛋白表达;采用原位末端缺刻标记法(TUNEL)检测脾脏细胞凋亡指数.结果 光镜下观察模型大鼠脾脏白髓逐渐萎缩,淋巴小结结构破坏.制模6、12、24、48、96 h,模型组大鼠脾脏CD4~+T淋巴细胞数、B淋巴细胞数、Bcl-2蛋白表达均较假手术组明显降低(P均<0.01),CD8~+T淋巴细胞数与假手术组比较差异无统计学意义(P均>0.05),细胞凋亡指数及Bax蛋白表达均较假手术组显著增加(P均<0.01).相关分析表明:Bcl-2蛋白表达与细胞凋亡指数呈负相关(r=0.659,P<0.01),而Bax蛋白表达与细胞凋亡指数呈正相关(r=0.522,P<0.01).结论 脓毒症早期免疫功能处于紊乱状态,表现为脾脏CD4~+T淋巴细胞数、B淋巴细胞数减少,细胞凋亡显著增加;Bax、Bcl-2在脓毒症脾细胞凋亡中发挥了关键作用.     

脓毒症大鼠肺组织中尿激酶型纤溶酶原激活剂受体的表达及其与肺损伤程度的相关性研究

目的探讨脓毒症大鼠肺组织中尿激酶型纤溶酶原激活剂受体（uPAR）表达变化及其与肺损伤的关系。 方法将48只雄性成年大鼠分为假手术组及脓毒症组,每组各24只大鼠。采用盲肠结扎穿孔术建立脓毒症损伤模型,假手术组大鼠只行开腹手术、不行结扎及穿孔,各组分别在术后6、12、24 h各取8只大鼠分批处死后收集肺泡灌洗液并留取肺脏。观察所有大鼠各时间点肺组织病理变化,测定肺组织干湿重比及肺泡灌洗液中蛋白变化,并采用免疫组织化学染色测定uPAR表达情况。 结果光镜下可见,假手术组大鼠肺组织肺泡结构完整,术后24 h只有少量炎症细胞浸润;脓毒症组大鼠肺泡腔内大量炎症细胞浸润,肺泡结构破坏,并以术后24 h最明显。两组大鼠各时间点肺组织干湿重比、肺泡灌洗液蛋白水平及uPAR表达比较,差异均有统计学意义（F = 32.000、97.770、72.780,P均< 0.001）。与假手术组相比,脓毒症组大鼠6、12、24 h肺组织干湿重比[（0.75 ± 0.03）vs.（0.78 ± 0.03）;（0.77 ± 0.04）vs.（0.83 ± 0.05）;（0.78 ± 0.04）vs.（0.89 ± 0.05）]、肺泡灌洗液蛋白水平[（79 ± 22）mg/L vs.（110 ± 40）mg/L;（79 ± 23）mg/L vs.（168 ± 36）mg/L;（94 ± 24）mg/L vs.（199 ± 56）mg/L]及uPAR表达[（2.2 ± 1.3）分vs.（4.6 ± 1.9）分;（2.3 ± 0.9）分vs.（6.4 ± 1.8）分;（2.4 ± 0.9）分vs.（7.0 ± 1.8）分]均明显升高（P均< 0.05）;且脓毒症组大鼠12、24 h亚组肺组织干湿重比、肺泡灌洗液蛋白水平均显著高于6 h亚组,而uPAR表达仅24 h亚组显著高于6 h亚组（P均< 0.05）。同时,肺组织中uPAR表达与肺组织干湿重比、肺泡灌洗液蛋白浓度均呈正相关（r = 0.618,P< 0.001;r = 0.652,P< 0.001）。 结论与假手术组相比,uPAR在脓毒症大鼠肺组织中表达明显增加,并且与肺损伤程度呈正相关。     

乌司他丁经p38MAPK通路对脓毒症大鼠急性肾损伤影响的研究

目的研究乌司他丁（UTI）经p38MAPK通路对脓毒症大鼠急性肾损伤（AKI）的影响。 方法采用脂多糖（LPS）诱导脓毒症AKI大鼠模型,将32只SD大鼠随机分为4组,空白对照组、脂多糖组（LPS组）、乌司他丁处理组（LPS+UTI组）、p38MAPK阻断剂干预组（LPS+SB组）,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测肾组织中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和转化生长因子（TGF-β1）的表达,采用蛋白质免疫印迹试验（Western Blotting）检测肾组织中磷酸化p38MAPK蛋白的表达,并在光镜和电镜下观察肾小球及肾小管的变化。 结果与空白对照组相比,LPS组光镜下肾小球充血肿胀,肾球囊扩张,近曲肾小管上皮细胞肿胀明显,细胞核淡染,部分出现核浓缩、破碎甚至溶解现象,肾间质充血、水肿、大量炎性细胞浸润;电镜下肾小球毛细血管内皮细胞窗孔消失或闭塞,基底膜部分断裂消失,足细胞足突广泛融合消失,近曲肾小管上皮细胞质内线粒体排列紊乱,结构模糊,高度肿胀,有空泡样现象;均提示脓毒症肾损伤严重,且肾组织TNF-α、TGF-β1和p38MAPK蛋白的表达明显升高。与LPS组相比,LPS+UTI组肾组织TNF-α、TGF-β1和p38MAPK蛋白的表达均较LPS组下降［TNF-α（pg/ml）：4915.00±267.06 vs 8836.00±739.51;TGF-β1（pg/ml）：257.71±23.88 vs 354.39±29.44;p-p38MAPK/β-actin：0.158±0.022 vs 0.300±0.044,均P＜0.05］,LPS+SB组肾组织中TNF-α、TGF-β1和p38MAPK蛋白的表达较LPS组均下降［TNF-α（pg/ml）：4856.75±167.23 vs 8836.00±739.51;TGF-β1（pg/ml）：249.56±23.42 vs 354.39±29.44;p-p38MAPK/β-actin：0.136±0.017 vs 0.300±0.044,均P＜0.05］,但LPS+UTI组与LPS+SB组差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论乌司他丁对脓毒症急性肾损伤有保护作用,且可能是通过抑制TGF-β1/p38MAPK信号转导通路来实现的。     

补阳还五汤对脓毒症大鼠脾细胞凋亡的实验研究

目的 通过观察脓毒症大鼠脾脏T、B淋巴细胞数量、细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的变化,探讨补阳还五汤对脓毒症大鼠免疫功能的影响及其作用机制.方法 按随机数字表法将180只雄性Wistar大鼠分为假手术组(30只)、模型组(50只)及补阳还五汤治疗组(50只)和防治组(50只).采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症大鼠模型.治疗组于术后30 min、防治组于术前3 d灌胃补阳还五汤浓缩液(含生药1 g/ml)15 ml/kg,每日1次.分别于术后6、12、24、48、96 h处死大鼠,观察各组动物脾脏形态学变化,脾T、B淋巴细胞,凋亡细胞,Bcl-2、Bax蛋白表达的变化.结果 光镜下观察CLP术后大鼠脾脏白髓逐渐萎缩,淋巴小结破坏,损伤的严重程度为模型组＞治疗组＞防治组.与假手术组比较,模型组术后各时间点CD4+T淋巴细胞、CD40 B淋巴细胞、Bcl-2蛋白表达明显降低,凋亡细胞、Bax蛋白表达明显增加,均于24 h达谷值或峰值[均为积分吸光度(A)值:CD4+T淋巴细胞:18.28±4.57比98.60±18.18;CD40 B淋巴细胞:26.96+6.26比104.87±30.97;Bcl-2蛋白表达:20.23±11.75比149.67±5.24;凋亡细胞:241.75±44.79比14.67±5.24;Bax蛋白表达:128.75±44.79比5.34±4.26,均P＜0.01];而CD8+淋巴细胞无明显变化.与模型组比较,补阳还五汤治疗组和防治组各时间点脾脏CD4+T淋巴细胞、CD40B淋巴细胞明显升高,凋亡细胞、Bax蛋白表达明显减少,而CD8+T淋巴细胞、Bcl-2蛋白表达无明显变化;防治组治疗效果优于治疗组(A值:CD4 +T淋巴细胞:94.12±15.45比72.37±8.00;CD40 B淋巴细胞:90.46±13.34比55.66±4.23;凋亡细胞:27.63±9.91比40.83±16.09;Bax蛋白表达:11.63±5.91比30.83±16.09,P＜0.05或P＜0.01);至96 h时各指标逐渐接近假手术组水平.细胞凋亡与Bax呈显著正相关(r=0.522,P=0.000),与Bcl-2呈显著负相关(r=-0.659,P=0.000).结论 补阳还五汤通过减少脾脏CD4+T淋巴细胞、B淋巴细胞凋亡,从而改善脓毒症时的免疫抑制;这可能与补阳还五汤减弱Bax对细胞凋亡的促进作用相关.     

高迁移率族蛋白B1 / Toll样受体4信号通路在脓毒症大鼠致急性肺损伤中的作用研究

目的探讨高迁移率族蛋白B1（HMGB1） / Toll样受体4（TLR4）信号通路对脓毒症导致的急性肺损伤大鼠的影响。 方法将60只清洁级雄性Sprague Dawley大鼠分为假手术组、脓毒症组和实验组,每组各20只。假手术组大鼠麻醉后开腹翻动肠道,随即关腹;脓毒症组和实验组行盲肠结扎穿孔（CLP）术后0.5 h于尾静脉分别注射等渗NaCl溶液（4 mL / kg）及抗HMGB1单克隆抗体（2 mg / kg）。各组分别取10只用于观察大鼠CLP建模后7 d存活情况,其余大鼠于造模后24 h处死并留取肺组织标本。计算各组大鼠的肺损伤Smith评分,并比较各组大鼠HMGB1和TLR4阳性蛋白在肺组织中的表达水平。采用酶联免疫吸附测定检测各组大鼠肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）、HMGB1和TLR4水平,计算每个巨噬细胞内微球蛋白数以比较各组大鼠肺泡巨噬细胞（AM）的吞噬功能,并采用Western-blotting法测定AM内HMGB1、TLR4蛋白表达水平。 结果假手术组大鼠建模后7 d全部存活,脓毒症组大鼠仅3只存活,实验组大鼠5只存活。各组大鼠间存活情况的比较,差异有统计学意义（ χ² = 10.833,P = 0.004）;且假手术组大鼠的存活情况明显优于脓毒症组与实验组大鼠（P均< 0.017）,而脓毒症组与实验组大鼠间存活情况比较,差异无统计学意义（P = 0.120）。假手术组、脓毒症组及实验组大鼠间肺组织损伤评分[（2.20 ± 0.27）、（8.20 ± 1.27）、（4.25 ± 2.21）分,F = 56.432,P < 0.001],肺组织HMGB1阳性蛋白[（10.4 ± 1.5）、（34.4 ± 5.0）、（26.6 ± 6.9）,F = 35.203,P = 0.003]、TLR4阳性蛋白[（10.6 ± 2.1）、（48.0 ± 5.8）、（38.2 ± 5.3）,F = 103.414,P = 0.002],BALF中TNF-α[（19 ± 4）、（45 ± 4）、（35 ± 4）μg / L,F = 2.749,P < 0.001]、IL-6[（56 ± 19）、（86 ± 15）、（70 ± 19）μg / L,F = 4.648,P = 0.001]、HMGB1[（41 ± 18）、（70 ± 15）、（56 ± 12）μg / L,F = 7.254,P = 0.002]、TLR4[（20.9 ± 1.8）、（51.2 ± 1.6）、（49.8 ± 2.6）μg / L,F = 3.978,P = 0.035],AM的吞噬功能[（21.8 ± 2.7）、（3.1 ± 1.9）、（12.6 ± 2.2）个,F = 32.821,P = 0.001]及AM中HMGB1蛋白[（11 ± 3）、（40 ± 15）、（24 ± 13）,F = 7.253,P < 0.001]、TLR4蛋白[（0.9 ± 0.4）、（1.2 ± 0.6）、（1.1 ± 0.4）,F = 3.984,P = 0.028]的比较,差异均有统计学意义。进一步两两比较发现,脓毒症组与实验组大鼠肺组织损伤评分,肺组织HMGB1阳性蛋白、TLR阳性蛋白表达水平,BALF中TNF-α、IL-6、HMGB1水平及AM中HMGB1蛋白表达水平均明显高于假手术组大鼠,且脓毒症组大鼠更高（P均< 0.05）;脓毒症组及实验组大鼠AM的吞噬功能均显著低于假手术组,且脓毒症组更低（P均< 0.05）;脓毒症组及实验组大鼠BALF中TLR4水平及AM中TLR4蛋白表达水平均显著高于假手术组（P均< 0.05）,但脓毒症组与实验组间上述指标的比较,差异均无统计学意义（P均> 0.05）。 结论通过抑制HMGB1 / TLR4信号通路可以缓解脓毒症致肺损伤大鼠肺组织的炎症损伤,抑制炎症介质过度释放,并增强AM的细胞吞噬功能。     

低分割模式腹部X线照射对大鼠肾放射生物学效应的影响

目的探讨低分割模式腹部X线照射对大鼠肾放射生物学效应的影响,为低分割模式在腹部照射的临床应用提供参考依据。方法 125只Wistar大鼠随机分为对照组、4 Gy组、6 Gy组、8 Gy组、12 Gy组,每组各25只。各照射组分别接受相应分割剂量的分次照射,测定大鼠放射结束后第2、4、6、8及10周肾脏系数、血尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）的变化。苏木精-伊红染色观察大鼠肾脏的形态学变化,免疫组织化学法检测凋亡蛋白Bcl-2及Bax的表达。结果各照射组均可观察到不同程度肾脏体积缩小,皮质比例减小,肾小球毛细血管袢增厚,血管腔扩大,肾小管上皮细胞间隙增大。各组间肾脏系数、Scr、BUN比较,差异有显著性（F=11.833～781.972,P均〈0.001）;不同时间点肾脏系数、Scr、BUN差异有显著性（F=20.857～264.692,P均〈0.001）;不同剂量和不同时间点之间的交互效应比较,差异有显著性（F=2.139～27.550,P均〈0.001）。各组间Bcl-2及Bax表达差异有显著性（F=211.607、116.577,P均〈0.001）,不同时间点Bcl-2及Bax表达差异有显著性（F=54.083、68.749,P均〈0.001）,不同剂量和不同时间对Bcl-2和Bax的交互效应差异均有统计学意义（F=5.032、4.385,P均〈0.001）。结论腹部低分割模式照射可造成大鼠肾脏的放射性损伤,损伤程度呈剂量和时间依赖性,其机制可能与促凋亡蛋白Bax高表达、抑制凋亡蛋白Bcl-2低表达引起细胞凋亡有关。     

核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性小体在脓毒症急性肾损伤大鼠肾脏组织的表达及其影响

目的探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白（NLRP3）炎性小体在脓毒症急性肾损伤（AKI）大鼠中的作用及其机制。 方法采用随机数字表法将18只雄性Wistar大鼠分为脂多糖（LPS）组、LPS +抑制剂组及阴性对照组3组,每组6只。LPS组大鼠给予腹腔内注射LPS（3.5 mg/kg）,LPS +抑制剂组大鼠腹腔内注射LPS（3.5 mg/kg）及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1（Caspase-1）抑制剂Belnacasan（VX-765,100 mg/kg）,而阴性对照组大鼠则给予腹腔内注射0.3 mL等渗NaCl溶液。比较3组大鼠建模前及建模后24 h血清肌酐水平变化,采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测3组大鼠建模24 h后血清白细胞介素1β（IL-1β）、IL-18及肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达水平,采用Western-blotting检测3组大鼠建模24 h后NLRP3及Caspase-1蛋白表达水平。 结果3组大鼠建模前后血清肌酐水平比较,差异有统计学意义（F = 146.910,P < 0.001）。进一步两两比较发现,建模后,LPS +抑制剂组及阴性对照组大鼠血清肌酐水平均较LPS组显著降低[（1.57 ± 0.20）、（0.54 ± 0.39）、（2.31 ± 0.24）mg/L],且阴性对照组大鼠血清肌酐水平较LPS +抑制剂组更低（P均< 0.05）;而LPS组[（2.31 ± 0.24）mg/L vs.（0.53 ± 0.16）mg/L]及LPS +抑制剂组[（1.57 ± 0.20）mg/L vs.（0.56 ± 0.08）mg/L]大鼠建模后血清肌酐水平均较建模前显著升高（P均< 0.05）。LPS组、LPS +抑制剂组及阴性对照组大鼠血清IL-1β [（9.33 ± 1.16）、（1.93 ± 0.30）、（1.88 ± 0.30）ng/L]、IL-18 [（23.8 ± 2.8）、（19.6 ± 1.5）（16.6 ± 1.2）ng/L]、TNF-α [（42.3 ± 2.1）、（23.9 ± 2.5）、（23.5 ± 1.3）ng/L]及NLRP3蛋白[（2.04 ± 0.25）、（2.04 ± 0.27）、（1.49 ± 0.28）]和Caspase-1蛋白[（0.62 ± 0.07）、（0.51 ± 0.09）、（0.50 ± 0.09）]表达水平比较,差异均有统计学意义（F = 217.015、20.590、168.766、8.723、3.905,P均< 0.05）。进一步两两比较发现,LPS +抑制剂组及阴性对照组大鼠血清IL-1β、IL-18、TNF-α表达水平均较LPS组大鼠显著降低,且阴性对照组大鼠IL-18表达水平较LPS +抑制剂组更低（P均< 0.05）。阴性对照组大鼠NLRP3蛋白表达水平均较LPS组及LPS +抑制剂组显著降低,LPS +抑制剂组及阴性对照组大鼠Caspase-1蛋白表达水平均较LPS组显著降低（P均< 0.05）。 结论大鼠发生脓毒症时,通过激活炎性小体NLRP3,进而通过Caspase-1通路造成急性肾损伤。     

N-乙酰半胱氨酸上调细胞FLICE抑制蛋白表达对脓毒症小鼠急性肾损伤的保护作用及其机制研究

目的研究N-乙酰半胱氨酸（NAC）上调细胞FLICE抑制蛋白（c-FLIP）表达对脓毒症小鼠急性肾损伤的作用。 方法将30只雄性BALB/c小鼠分为假手术组、脓毒症组和NAC组,每组各10只。采用盲肠结扎穿孔术法制备脓毒症小鼠模型,假手术组除不结扎穿刺盲肠外,其余手术步骤相同,NAC组小鼠术后15 min尾静脉注射NAC 100 mg/kg。造模成功后24 h取小鼠肾脏,光镜下观察肾脏组织病理变化;采用实时定量PCR（RT-PCR）法检测c-FLIP mRNA表达;采用Western-blotting法检测c-FLIP蛋白表达;复制上述实验观察96 h内小鼠的生存情况。 结果与假手术组相比,脓毒症组小鼠肾小球萎缩、肾小管上皮细胞变形、肾小管腔内可见大量肾细胞间质和碎片,而NAC组小鼠肾脏组织病变明显减轻。三组间肾脏组织病理学损伤评分、c-FLIP mRNA及蛋白表达比较,差异均有统计学意义（F = 101.400、31.720、20.330,P均< 0.05）。进一步两两比较发现,CLP组小鼠肾脏组织病理学损伤评分较假手术组显著升高（P < 0.001）,NAC组小鼠肾脏组织病理学损伤评分较CLP组显著降低（P < 0.001）。与假手术组相比,脓毒症组小鼠c-FLIP mRNA及蛋白表达均明显下降（P均< 0.05）,NAC组c-FLIP的蛋白表达有所降低（P < 0.05）;与脓毒症组相比,NAC组小鼠c-FLIP mRNA及蛋白表达均显著上升（P均< 0.05）。Kaplan-Meier生存曲线结果显示,三组小鼠生存情况比较,差异有统计学意义（χ²= 8.806,P= 0.012）。进一步两两比较发现,脓毒症组及NAC组小鼠的存活数量均较假手术组显著降低（P均< 0.017）,而NAC组小鼠存活数量较脓毒症组明显升高（P < 0.017）。 结论NAC通过上调c-FLIP表达对脓毒症小鼠的急性肾损伤具有显著的保护作用。     

烟酸对脓毒症小鼠急性胃肠道损伤的保护作用

目的评价烟酸对脓毒症小鼠胃肠道损伤的保护作用。 方法将36只健康雄性清洁级成年C57BL/6小鼠分为假手术组、盲肠结扎穿孔（CLP）组和CLP+烟酸组，每组12只。假手术组小鼠仅开腹后立即缝合处理，CLP组小鼠行CLP术，CLP+烟酸组小鼠CLP建模后10 min经腹腔注射烟酸（360 mg/kg），稀释至相同体积。造模后24 h眼球取血，查血清；通过检测血浆水平评价肠道损伤程度；检测血清白细胞介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、内毒素、二胺氧化酶（DAO）、D-乳酸含量，摘取其肠道用于组织病理学检查，光镜下观察小肠组织病理形态变化，并进行肠组织损伤分级即Chiu评分。 结果假手术组小鼠肠道解剖基本正常，肠管未见扩张，无充血、渗出，肠道无粘连；CLP组小鼠结扎端盲肠发黑，腹腔内脓性物渗出，肠管明显扩张；CLP+烟酸组小鼠炎症反应较CLP组减轻。病理结果显示，假手术组小鼠肠黏膜形态完整，绒毛结构清晰；CLP组小鼠肠黏膜结构紊乱，固有层及其血管暴露，上皮细胞脱落；CLP+烟酸组小鼠肠黏膜损伤程度减轻，部分绒毛脱落，间质及基地开始修复。假手术组、CLP组和CLP+烟酸组小鼠Chiu评分比较，差异有统计学意义[（0.75 ± 0.75）、（4.25 ± 0.75）、（2.67 ± 0.89）分，F = 57.469，P<0.001]，CLP组和CLP+烟酸组小鼠Chiu评分均较假手术组显著升高，且CLP组更高（P均<0.05）。3组小鼠血TNF-α、IL-1β、血内毒素、DAO和D-乳酸比较，差异均有统计学意义（F = 30.394、46.632、920.356、1 184.639、5.184，P均<0.05）。进一步两两比较发现，与假手术组比较，CLP组和CLP+烟酸组小鼠血TNF-α、IL-1β、血内毒素、DAO均显著升高，且CLP组更高（P均<0.05）；而CLP组小鼠D-乳酸较假手术组和CLP+烟酸组均有所升高（P均<0.05）。 结论烟酸可减轻脓毒症小鼠胃肠道损伤及炎症反应，具有保护作用。     

地尔硫䓬对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤影响的研究

目的探讨地尔硫䓬对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及其机制。 方法33只大鼠随机分为3组：正常对照组（N组）、缺血再灌注组（I-R组）、地尔硫䓬＋缺血再灌注组（D/I-R组）。N组持续灌流K-H液150 min;I-R组K-H液稳定灌流30 min后,结扎前降支30 min,继以K-H液再灌注90 min;D/I-R组给予地尔硫䓬（5 μmo/L）再灌注15 min,继以K-H液再灌流75 min。记录并分析各组大鼠左心室发展压、左心室内压力最大上升/下降速率（±dp/dtmax）、再灌注心律失常评分、心肌梗死面积以及各组左心室心尖组织的线粒体乙醛脱氢酶2（ALDH2）、Bcl-2以及Bax的mRNA基因与蛋白表达水平。 结果（1）左心室发展压D/I-R组再灌注30 min与45 min比I-R组压力明显升高［（92.68±5.09）mmHg vs（75.77±5.33）mmHg;（90.39±4.29）mmHg vs（72.34±7.49）mmHg;1 mmHg=0.133 kPa］,差异均具有统计学意义（F=72.81、51.92,P均=0.001）。（2）±dp/dtmax D/I-R组再灌注30 min与45 min时均比I-R组升高［＋dp/dtmax：（2885.45±286.47）mmHg vs （2063.64±105.57）mmHg;（2712.73±236.52）mmHg vs（2053.64±92.33）mmHg;-dp/dtmax：（2214.55±104.63）mmHg vs （1710.91±217.97）mmHg;（2119.09±84.43）mmHg vs（1544.55±207.72）mmHg］,差异均具有统计学意义（F=64.22、70.55、69.77、54.64,P均=0.001）。（3）N组仅有室性期前收缩的发生,未发生心室颤动、室性心动过速;D/I-R组出现室性期前收缩的个数较N组增加,差异具有统计学意义（P=0.001）;I-R组室性心动过速发生率高于D/I-R组,心室颤动时程与室性心动过速时程均较D/I-R组增加,差异具有统计学意义（P=0.013、0.049、0.001）;再灌注心律失常评分I-R组评分［5（3,6）,57.36］高于D/I-R组［3（1,4）,34.77］,差异具有统计学意义（P=0.001）。（4）心肌梗死面积I-R组高于D/I-R组［（55.51±1.43）% vs （17.01±1.13）%］,差异具有统计学意义（P<0.01）。（5）I-R组线粒体ALDH2表达明显减少。D/I-R组线粒体ALDH2表达与I-R组比较减少,但差异无统计学意义（P=0.11）,Bcl-2、Bax的表达均增加,D/I-R组Bcl-2/Bax的比值较I-R组增大（0.44 vs 0.22）,差异具有统计学意义（P=0.001）。 结论地尔硫䓬处理后能够减少缺血再灌注损伤。其保护作用机制之一可能是通过上调Bcl-2下调Bax的基因和蛋白表达,减少心肌细胞的凋亡,但其并不是通过上调线粒体ALDH2的基因与蛋白来实现。     

miRNA-224-5p通过TGF-β/Smad4信号通路调控甲状腺乳头状癌细胞凋亡

目的探讨miRNA-224-5p通过TGF-β/Smad4信号通路对甲状腺乳头状癌细胞凋亡的调控作用。 方法选取2015年7月至2017年11月新疆维吾尔自治区人民医院手术切除所得甲状腺乳头状癌组织及相应的癌旁组织冻存标本各60份。通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测60例甲状腺乳头状癌组织及60例癌旁组织中miRNA-224-5p的相对表达量,二者比较采用配对资料t检验。将miRNA-224-5p（miRNA-224-5p组）与miRNA-224-5p抑制剂（miRNA-224-5p抑制剂组）分别转染到甲状腺乳头状癌细胞株GLAG-66中,通过RT-PCR检测两组中GLAG-66细胞内miRNA-224-5p的相对表达量,应用流式细胞仪检测两组GLAG-66细胞转染48 h后凋亡率,应用Western blot实验检测两组GLAG-66细胞中Bcl-2、Bax、Cleaved-Caspase3、TGF-β1、Smad4蛋白的相对表达量,并采用两个独立样本t检验进行比较。 结果miRNA-224-5p在甲状腺乳头状癌组织中的相对表达量与癌旁组织比较明显升高,差异具有统计学意义［（4.175±0.523）vs（1.236±0.236）,t=9.675,P=0.001）］。miRNA-224-5p抑制剂组GLAG-66细胞中miRNA-224-5p的相对表达量与miRNA-224-5p组比较明显下降,差异具有统计学意义［（0.381±0.078）vs（1.000±0.023）,t=19.785,P<0.001）］。miRNA-224-5p抑制剂组GLAG-66细胞转染48 h后的凋亡率与miRNA-224-5p组比较明显增高,差异具有统计学意义［（18.66%±0.98%）vs（3.78%±0.36%）,t=17.561,P<0.001］。miRNA-224-5p抑制剂组和miRNA-224-5p组比较,GLAG-66细胞中Bcl-2、TGF-β1和Smad4蛋白的相对表达量明显降低,差异具有统计学意义［（0.197±0.008）vs（0.278±0.013）,t=8.259,P=0.001;（0.117±0.013）vs（0.227±0.012）,t=13.269,P<0.001;（0.268±0.012）vs（0.439±0.016）,t=9.897,P=0.001］;Bax、Cleaved-Caspase3蛋白的相对表达量明显升高,差异具有统计学意义［（0.286±0.011）vs（0.159±0.009）,t=12.569,P<0.001;（0.128±0.009）vs（0.083±0.010）,t=7.693,P=0.002］。 结论miRNA-224-5p在甲状腺乳头状癌组织中表达增高,下调miRNA-224-5p可以促进甲状腺乳头状癌细胞的凋亡,其作用机制可能与TGF-β/Smad4信号通路有关。     

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4阻断剂对糖尿病神经病变大鼠坐骨神经凋亡的影响

目的探讨糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠坐骨神经烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(Nox4)表达改变及Nox4阻断剂VAS2870对DPN大鼠坐骨神经凋亡的影响。 方法40只8周龄雄性SD大鼠,平均体重( 203.5±6.4)g,30只大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ),其中20只患糖尿病,余10只大鼠淘汰;其余大鼠腹腔注射等体积柠檬酸溶液作为对照组(n＝10)。8周后糖尿病大鼠建立DPN模型,采用随机数字表法将DPN大鼠分为2组,VAS2870组(n＝10,尾静脉注射VAS2870 1 mg/kg,每日1次,共7 d)和DPN组(n＝10,尾静脉注射等体积0.9%无菌NaCl溶液,每日1次,共7 d)。用PowerLab数据记录分析系统检测坐骨神经运动神经传导速度(MNCV)和感觉神经传导速度(SNCV),用荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)检测坐骨神经Nox4、半胱氨酸天冬酶-3(caspase-3)、B细胞淋巴瘤因子-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA表达,用蛋白印迹检测坐骨神经Nox4、caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达水平,采用单因素方差分析比较各组间的差异,用Tukey检验进行两两比较。 结果DPN大鼠坐骨神经MNCV[(41.21±7.36)m/s]及SNCV[(30.39±7.66)m/s]均低于VAS2870组[(49.14±8.67)m/s,(38.95±6.24)m/s],VAS2870对MNCV及SNCV的下降具有减轻作用(q＝3.58,4.53;均P<0.05)。DPN大鼠坐骨神经Nox4(4.72±0.42)、caspase-3(5.02±0.43)、Bax(5.63±0.82) mRNA(q＝7.02,6.40,7.65;均P<0.05)及蛋白水平(0.86±0.10,0.78±0.17,0.95±0.13,q＝7.83,9.15,6.87;均P<0.05)较对照组mRNA(5.79±0.53,6.90±0.79,7.39±0.67)及蛋白水平(0.59±0.13,0.45±0.14,0.64±0.14)表达上调,Bcl-2 mRNA(6.81±0.60,q＝6.31,P<0.05)及蛋白水平(0.44±0.12,q＝6.20,P<0.05)表达下调。VAS2870组Nox4、caspase-3、Bax mRNA(5.31±0.44,5.71±0.60,6.41±0.95)(q＝3.66,2.98,4.02,3.38;均P<0.05)及蛋白水平(0.72±0.13,0.60±0.18,0.79±0.15)(q＝4.24,5.78,3.83;均P<0.05)均低于DPN组,Bcl-2 mRNA(6.29±0.47)的及蛋白水平(0.56±0.12)表达均高于DPN组(q＝3.38,2.81;均P<0.05),VAS2870部分逆转了Nox4、caspase-3、Bax、Bcl-2 mRNA及蛋白的表达水平。 结论DPN大鼠坐骨神经Nox4表达水平增高,通过调节凋亡相关蛋白caspase-3、Bax及Bcl-2表达促进坐骨神经凋亡;Nox4阻断剂通过减轻坐骨神经凋亡发挥恢复DPN大鼠坐骨神经传导速度的作用。     

老年2型糖尿病患者肠道菌群多样性及其炎症因子与胰岛素抵抗的相关性研究

目的探讨老年2型糖尿病（T2DM）患者肠道菌群多样性及其炎症因子的变化与胰岛素抵抗的相关性。 方法选取80例老年T2DM患者作为T2DM组,另选取80例健康体检者作为对照组,检测两组患者肠道菌群拟杆菌、普雷沃氏菌、乳杆菌、双歧杆菌和肠杆菌数量。测定并计算两组患者的稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）,同时比较两组患者的白细胞介素6（IL-6）、IL-10、IL-22、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和干扰素γ（IFN-γ）水平。采用Pearson相关性分析老年T2DM患者肠道不同菌群与HOMA-IR相关性,肠道不同菌群与各炎症因子的相关性。 结果老年T2DM组的拟杆菌[（10.0 ± 0.3）logN/g vs.（8.1 ± 0.9）logN/g]和肠杆菌[（9.86 ± 0.27）logN/g vs.（7.05 ± 0.19）logN/g]的菌落数显著高于对照组（t = 3.162、3.016,P均< 0.05）,普雷沃氏菌[（7.22 ± 0.27）logN/g vs.（9.35 ± 0.39）logN/g]、乳杆菌[（5.12 ± 0.25）logN/g vs.（7.67 ± 0.43）logN/g]和双歧杆菌[（7.2 ± 0.4）logN/g vs.（11.0 ± 0.5）logN/g]的菌落数显著低于对照组（t = 5.230、4.163、7.115,P均< 0.05）。T2DM组的HOMA-IR[（6.4 ± 0.8）vs.（3.1 ± 0.4）]、IL-6[（154 ± 15）ng/L vs.（81 ± 10）ng/L]、IL-22[（628 ± 36）ng/L vs.（106 ± 11）ng/L]、TNF-α[（208 ± 23）ng/L vs.（118 ± 11）ng/L]和IFN-γ[（136 ± 15）ng/L vs.（76 ± 13）ng/L]的水平显著高于对照组（t = 7.156、3.167、5.026、3.557、2.134,P均< 0.05）,而IL-10[（127.7 ± 18.7）ng/L vs.（376.8 ± 1.8）ng/L]水平显著低于对照组（t = 2.272,P < 0.05）。相关性分析结果显示,普雷沃氏菌、肠杆菌与血浆HOMA-IR呈显著正相关（r =0.613、0.437,P均< 0.05）,拟杆菌、乳杆菌和双歧杆菌与HOMA-IR呈显著负相关（r = -0.617、-0.575、-0.616,P均< 0.05）。拟杆菌、普雷沃氏菌、乳杆菌和双歧杆菌数量与IL-6（r = -0.617、-0.526、-0.575、-0.616,P均< 0.05）、IL-22（r = -0.636、-0.587、-0.621、-0.573,P均< 0.05）、TNF-α（r = -0.593、-0.633、-0.476、-0.539,P均< 0.05）和IFN-γ（r = -0.475、-0.538、-0.602、-0.573,P均< 0.05）水平呈显著负相关性,与IL-10呈显著正相关性（r = 0.535、0.623、0.459、0.506,P均< 0.05）;肠杆菌与IL-6、IL-22、TNF-α和IFN-γ水平呈显著正相关性（r = 0.437、0.599、0.576、0.518,P均< 0.05）,与IL-10呈显著负相关性（r = -0.518,P < 0.05）。 结论老年T2DM患者肠道菌群与胰岛素抵抗具有相关性,推测其机制可能与炎症因子水平有关。     

银杏达莫注射液对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用机制研究

目的探讨银杏达莫注射液(Gin)对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用机制。 方法选取36只Wistar实验大鼠，按随机数字表法分为正常组(N组)、肝缺血再灌注模型组(M组)和银杏达莫注射液干预组(T组)，每组12只，M组、T组采用夹闭肝固有动脉1 h再灌注1 h的方法模拟大鼠肝缺血再灌注模型。T组造模前1周开始每日按3.6 ml/kg腹腔注射Gin，N、M组造模前1周开始每日注射同量生理盐水。采用苏木精-伊红(HE)染色检测肝组织细胞形态，Masson染色和天狼星红染色检测肝组织胶原纤维；免疫印迹(Western blot)检测肝组织B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)，Bcl-相关X蛋白(Bax)、Smad和蛋白激酶B(Akt)的蛋白表达水平；聚合酶链式反应(PCR)检测肝组织中Bax、Bcl-2、Smad和Akt mRNA表达水平；免疫组织化学检测肝组织中Bax、Bcl-2、白介素6(IL-6)和IL-10的表达情况，以及检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平。 结果HE染色显示，M组肝组织细胞损伤严重且炎症细胞多、细胞水肿明显；Masson和天狼星红染色表明，M组胶原纤维沉积较N组明显；3种染色结果均显示，T组肝组织炎性浸润、胶原纤维沉积程度均较M组轻。Western blot结果发现，以β-actin为内参，M组Bax、Bcl-2蛋白相对表达量(0.91±0.28，0.68±0.24)高于N组(0.22±0.19，0.23±0.12)(均P<0.01)，T组Bax蛋白相对表达量(0.48±0.11)低于M组(P<0.01)，Bcl-2蛋白相对表达量(0.89±0.25)高于M组(P<0.01)；以GAPDH为内参，M组Akt、Smad蛋白相对表达量(0.72±0.34，1.03±0.13)高于N组(0.17±0.09，0.57±0.26)(均P<0.01)，T组Akt蛋白相对表达量(1.47±0.89)高于M组(P<0.01)，Smad蛋白相对表达量(0.62±0.42)低于M组(P<0.01)。PCR结果显示，M组Bax、Bcl-2、Akt和Smad mRNA表达水平(0.76±0.03，0.55±0.06，0.96±0.09，1.58±0.16)均高于N组(0.29±0.04，0.36±0.05，0.64±0.06，0.53±0.14)(均P<0.01)，T组Bax和Smad mRNA表达水平(0.36±0.04，1.05±0.26)低于M组(均P<0.01)，Bcl-2和Akt mRNA表达水平(0.85±0.04，1.46±0.19)高于M组(均P<0.01)。免疫组织化学结果显示，M组Bax、Bcl-2、IL-6、IL-10阳性表达面积[(39.52±0.78)%，(4.62±0.94)%，(38.04±3.11)%，(6.48±1.14)%]均高于N组[(0.99±0.13)%，(0.96±0.12)%，(0.46±0.06)%，(0.47±0.17)%](均P<0.01)；T组Bax、IL-6阳性表达面积[(8.18±1.22)%，(6.05±0.92)%]低于M组(均P<0.01)，Bcl-2、IL-10阳性表达面积[(48.13±2.65)%，(31.91±4.86)%]高于M组(均P<0.01)。与N组SOD、MDA水平[(274.81±10.42)U/ml，(2.25±0.51)nmol/ml]相比，M组SOD水平[(113.24±8.52)U/ml]下降，MDA水平[(5.19±0.99)nmol/ml]升高(均P<0.01)。T组SOD水平[(221.51±6.25)U/ml]高于M组(P<0.01)，MDA水平[(3.91±0.86)nmol/ml]低于M组(P<0.01)。 结论银杏达莫注射液预处理可能通过PI3K/Akt和TGF-β/Smad信号通路介导的抑制细胞凋亡和纤维化发挥对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用。     

姜黄素上调线粒体融合蛋白2抑制脓毒症小鼠淋巴细胞凋亡的实验研究

目的 研究姜黄素抑制脓毒症小鼠淋巴细胞凋亡的作用与机制.方法 取45只清洁级BALB/c雄性小鼠,随机(随机数字法)分为3组,即假手术组(n=15),脓毒症组(n=15),姜黄素组(n=15),实验重复3次.脓毒症组行盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP),术前予等体积生理盐水灌胃1周;姜黄素组行CLP术,术前给予姜黄素200 mg/ (kg-d)灌胃1周;假手术组仅行开腹,不予以结扎、穿孔,术前等体积生理盐水灌胃1周.观察各组小鼠术后24h病死率,并处死存活小鼠,分离脾脏淋巴细胞.采用流式细胞术、TUNEL法检测淋巴细胞凋亡情况;流式细胞术检测线粒体膜电位水平;Western Blot检测线粒体融合蛋白2(Mitofusin2,Mfn2)、Bax、Bcl-2蛋白表达.数据采用SPSS 18.0软件进行分析,计数资料采用x2检验,计量资料组间比较采用单因素方差分析.结果 小鼠病死率采用x2检验,脓毒症组小鼠术后24h病死率为46.7％,较假手术组0.00％明显升高(x2 =27.391,P＜0.01),姜黄素组病死率较脓毒症组有所降低(40.0％ vs.46.7％,x2=6.429,P=0.01).脾淋巴细胞凋亡率比较采用单因素方差分析,3组比较,P＜0.01,差异具有统计学意义.进一步两两比较,脓毒症组脾淋巴细胞凋亡率为(17.1±1.67)％,较假手术组(9.43±1.06)％明显增高(P ＜0.001);姜黄素组淋巴细胞凋亡率(12.70±1.25)％较脓毒症组比较明显下降(P=0.012).脾淋巴细胞线粒体膜电位比较采用单因素方差分析,3组比较P＜0.01,差异具有统计学意义.进一步两两比较,脓毒症组线粒体膜电位降低率为(45.13±4.14)％,较假手术组(21.63±1.62)％明显升高(P＜0.01),姜黄素组线粒体膜电位降低率为(29.67±2.15)％,较脓毒症组明显降低(P=0.001).蛋白表达情况采用单因素方差分析,3组线粒体Bax蛋白(P＜0.01)、胞浆Bax蛋白(P＜0.01),差异具有统计学意义.进一步两两比较,与假手术组比较,脓毒症组线粒体Bax蛋白表达水平明显上调(P=0.001),而胞浆Bax蛋白表达水平明显降低(P＜0.01).经姜黄素预处理后线粒体Bax蛋白水平较脓毒症组明显降低(P=0.02),胞浆Bax蛋白表达水平明显升高(P＜0.01).3组细胞总Mfn2蛋白(P ＜0.001)、Bcl-2蛋白(P=0.001),差异具有统计学意义.进一步两两比较,与假手术组比较,脓毒症组Mfn2蛋白(P=0.015)、Bcl-2蛋白(P=0.01)表达水平明显降低,经姜黄素预处理后Mfn2蛋白(P=0.002)、Bcl-2蛋白(P =0.001)水平明显上调.结论 姜黄素能够上调Mfn2表达,促进线粒体融合进而抑制脓毒症小鼠脾淋巴细胞的凋亡.     

超声造影定量评价脓毒症急性肾损伤肾血流灌注及其参数与炎症因子的相关性

目的探讨超声造影定量评估脓毒症相关急性肾损伤（S-AKI）大鼠肾血流灌注及其参数对大鼠炎症反应的监测价值。 方法选取健康SD大鼠32只,平均分为模型组和对照组,模型组采用盲肠结扎穿孔术制作脓毒症大鼠,对照组仅开腹游离盲肠末端,不结扎穿孔,直接还纳关闭腹腔。于术后12 h、24 h两个时间点每组取8只大鼠行超声造影检查,并选取感兴趣区绘制时间强度曲线进行定量分析,下腔静脉取血检测血清肌酐（Scr）、尿素（Urea）、白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素10（IL-10）,留取肾标本进行病理检查。采用独立样本t检验和非参数检验（Mann-Whitney U）统计不同时间点两组各指标的差异,采用Spearman相关分析超声造影定量参数［造影剂到达时间（AT）、达峰时间（TTP）、上升斜率（AS）、峰值强度（PI）、降半时间（DT/2）、下降斜率（DS）、曲线下面积（AUC）］与炎症因子的相关性。 结果（1）模型组肾功能指标Scr、Urea、炎症因子指标IL-6、TNF-α、IL-10于两个时间点均显著高于对照组,差异均具有统计学意义（P均＜0.05）。（2）造影剂团注后2~4 s,肾血管快速增强,随后皮质、髓质依次显影,髓质、皮质依次消退。与对照组相比,模型组12 h肾皮质TTP增加［（10.47±1.25）s vs（8.30±1.53）s］,DS、PI减小［（-0.13±0.02）dB/s vs（-0.17±0.04）dB/s;（23.90±1.36）dB vs（27.26±1.88）dB］,髓质TTP、DT/2增加［（11.66±1.99）s vs（9.00±1.28）s;（62.49±4.56）s vs（52.15±7.70）s］,DS减小［（-0.13±0.02）dB/s vs（-0.17±0.03）dB/s］,差异均有统计学意义（t=-3.105、-3.121、4.102、-3.180、-3.268,-2.915,P=0.008、0.008、0.001、0.007、0.007、0.011）,模型组24 h肾皮质AS、DS增加［（0.99±0.17）dB/s vs（0.61±0.19）dB/s;（-0.23±0.03）dB/s vs（-0.15±0.04）dB/s］,DT/2、AUC减小［（42.41±3.03）s vs（61.07±6.52）s;（2477.89±113.37）dB·s vs（3024.93±253.81）dB·s］,髓质AS、DS、AT增加［（1.00±0.27）dB/s vs（0.66±0.17）dB/s;（-0.23±0.06）dB/s vs（-0.15±0.04）dB/s;（4.30±0.34）s vs（3.77±0.29）s］,DT/2、AUC减小［（42.73±7.02）s vs（59.64±9.23）s;（2335.75±189.77）dB·s vs（2689.72±285.45）dB·s］,差异具有统计学意义（t=-4.262、5.138、7.344、5.566、-3.061、3.108、-3.349、4.124、2.921,P=0.001、＜0.001、＜0.001、＜0.001、=0.008、=0.008、=0.005、=0.001、=0.011）。（3）肾皮质超声造影定量参数PI、AUC与血清IL-6、TNF-α、IL-10呈显著相关（r=-0.562、-0.398、-0.512;-0.540、-0.638、-0.430,P均＜0.05）。（4）肾病理切片行过碘酸雪夫染色显示,模型组大鼠肾出现肾小管轮廓不清、扩张、刷状缘脱落、肾小管上皮细胞扁平化、脱落表现,24 h模型组部分肾小管管型形成;对照组大鼠病理表现正常。 结论超声造影可以实时动态观察大鼠肾血流灌注过程,定量评价血流灌注水平,初步监测机体的炎症反应状态。     

连续性肾脏替代疗法叠加全血吸附改善脓毒性休克患者心肌抑制的疗效研究

目的探讨连续性肾脏替代疗法（CRRT）叠加全血吸附对脓毒性休克患者心肌抑制的改善效果。 方法选择2016年5月至2019年6月收治于绍兴市人民医院重症医学科、心脏指数（CI）< 3.0 L·min^-1·m^-2的60例脓毒性休克患者,按随机区组法分为对照组（30例）与试验组（30例）,两组患者按照脓毒症/脓毒性休克标准化操作程序治疗,试验组在标准治疗基础上加用CRRT +全血吸附,连续治疗3 d。所有入选病例均应用脉波指示剂连续心排出量监测进行血流动力学监测,记录并评价两组患者入组时及治疗后第3、5天的CI、中心静脉压（CVP）、血管外肺水指数（EVLWI）、日去甲肾上腺素剂量、日液体总量及急性病生理学和长期健康评价（APACHE）Ⅱ评分。 结果两组脓毒性休克患者在不同时间点CI、CVP、EVLWI、日去甲肾上腺素剂量、日液体总量和APACHEⅡ评分的比较,差异均有统计学意义（F = 12.543、10.213、12.840、9.765、10.821、19.466,P均< 0.05）。两组患者入组时上述各指标的比较,差异均无统计学意义（P均> 0.05）;治疗后CI均有不同程度改善,试验组第3、5天CI均高于对照组[（3.0 ± 1.7）L·min^-1·m^-2 vs.（2.6 ± 1.6）L·min^-1·m^-2,（3.2 ± 1.8）L·min^-1·m^-2 vs.（2.7 ± 1.8）L·min^-1·m^-2,P均< 0.05];两组患者的CVP治疗后均呈现下降趋势,且试验组第3、5天CVP值均显著低于对照组[（11.9 ± 5.9）cmH₂O vs.（13.5 ± 3.1）cmH₂O,（10.6 ± 3.7）cmH₂O vs.（12.6 ± 2.6）cmH₂O,P均< 0.05];两组患者EVLWI在治疗后第3、5天回落至正常水平,且治疗后第3天试验组EVLWI显著低于对照组[（9.8 ± 2.4）mL/kg vs.（11.4 ± 3.3）mL/kg,P < 0.05];治疗后第3、5天试验组日去甲肾上腺素剂量[（11.4 ± 3.4）mg vs.（18.9 ± 5.3）mg,（7.5 ± 2.1）mg vs.（13.2 ± 3.2）mg,P均< 0.05]和日液体总量[（2 954 ± 537）mL vs.（3 624 ± 453）mL,（2 446 ± 484）mL vs.（3 243 ± 675）mL,P均< 0.05]均少于对照组。两组患者APACHEⅡ评分治疗后呈下降趋势,试验组第3、5天APACHEⅡ评分均显著低于对照组[（13 ± 4）分vs.（18 ± 4）分,（11 ± 3）分vs.（13 ± 4）分,P均< 0.05]。 结论CRRT叠加全血吸附可在早期改善脓毒性休克患者心肌抑制状态,一定程度上改善患者预后。