地尔硫䓬对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤影响的研究

目的探讨地尔硫䓬对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及其机制。 方法33只大鼠随机分为3组：正常对照组（N组）、缺血再灌注组（I-R组）、地尔硫䓬＋缺血再灌注组（D/I-R组）。N组持续灌流K-H液150 min;I-R组K-H液稳定灌流30 min后,结扎前降支30 min,继以K-H液再灌注90 min;D/I-R组给予地尔硫䓬（5 μmo/L）再灌注15 min,继以K-H液再灌流75 min。记录并分析各组大鼠左心室发展压、左心室内压力最大上升/下降速率（±dp/dtmax）、再灌注心律失常评分、心肌梗死面积以及各组左心室心尖组织的线粒体乙醛脱氢酶2（ALDH2）、Bcl-2以及Bax的mRNA基因与蛋白表达水平。 结果（1）左心室发展压D/I-R组再灌注30 min与45 min比I-R组压力明显升高［（92.68±5.09）mmHg vs（75.77±5.33）mmHg;（90.39±4.29）mmHg vs（72.34±7.49）mmHg;1 mmHg=0.133 kPa］,差异均具有统计学意义（F=72.81、51.92,P均=0.001）。（2）±dp/dtmax D/I-R组再灌注30 min与45 min时均比I-R组升高［＋dp/dtmax：（2885.45±286.47）mmHg vs （2063.64±105.57）mmHg;（2712.73±236.52）mmHg vs（2053.64±92.33）mmHg;-dp/dtmax：（2214.55±104.63）mmHg vs （1710.91±217.97）mmHg;（2119.09±84.43）mmHg vs（1544.55±207.72）mmHg］,差异均具有统计学意义（F=64.22、70.55、69.77、54.64,P均=0.001）。（3）N组仅有室性期前收缩的发生,未发生心室颤动、室性心动过速;D/I-R组出现室性期前收缩的个数较N组增加,差异具有统计学意义（P=0.001）;I-R组室性心动过速发生率高于D/I-R组,心室颤动时程与室性心动过速时程均较D/I-R组增加,差异具有统计学意义（P=0.013、0.049、0.001）;再灌注心律失常评分I-R组评分［5（3,6）,57.36］高于D/I-R组［3（1,4）,34.77］,差异具有统计学意义（P=0.001）。（4）心肌梗死面积I-R组高于D/I-R组［（55.51±1.43）% vs （17.01±1.13）%］,差异具有统计学意义（P<0.01）。（5）I-R组线粒体ALDH2表达明显减少。D/I-R组线粒体ALDH2表达与I-R组比较减少,但差异无统计学意义（P=0.11）,Bcl-2、Bax的表达均增加,D/I-R组Bcl-2/Bax的比值较I-R组增大（0.44 vs 0.22）,差异具有统计学意义（P=0.001）。 结论地尔硫䓬处理后能够减少缺血再灌注损伤。其保护作用机制之一可能是通过上调Bcl-2下调Bax的基因和蛋白表达,减少心肌细胞的凋亡,但其并不是通过上调线粒体ALDH2的基因与蛋白来实现。     

吗啡延迟预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤细胞色素C氧化酶的影响

[目的]探讨吗啡延迟预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护机制.[方法]40只大鼠随机分成4组：假手术组（C组）、缺血再灌注组（I/R组）、吗啡预处理组（M组）,吗啡预处理＋阿片类受体阻断剂组（N组）,每组10只.C组仅行左冠脉套线而不阻断150 min;I/R组行左冠脉阻断30 min,再灌注120 min;M组静注吗啡0.3mg/kg,24 h后处理同I/R组;N组在静注吗啡前10 min,静注阿片类受体阻断剂纳洛酮6mg/kg,其余处理同I/R组.再灌注120min后,免疫印记法测心肌细胞色素C氧化酶（cytochrome c oxidase,CcO）表达水平,同时测心梗面积.[结果]与C组相比,I/R组、M组和N组CcO表达水平均降低;与I/R组比,M组CcO表达水平增高,心肌梗死面积减少,且差异有显著性（P＜0.05）.[结论]吗啡延迟预处理对心肌缺血再灌注损伤的保护作用可能与促进心肌CcO表达有关.     

依布硒啉对大鼠心肌缺血再灌注损伤后磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B信号通路的影响

目的探讨依布硒啉预处理对大鼠心肌缺血再灌注后磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B（P13K/Akt）信号及其内质网应激的影响。 方法将30只大鼠分成对照组,缺血再灌注组及依布硒啉组,每组10只。对照组大鼠冠状动脉左室支左心耳下缘约0.5 cm处只穿线,不结扎,常规腹腔注射生理盐水2 ml;缺血再灌注组大鼠缺血再灌注前30 min腹腔注射生理盐水2 ml;依布硒啉组大鼠缺血再灌注前30 min腹腔注射依布硒啉溶液5 mg/kg。每组各取8只大鼠,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组血清炎症因子高迁移率族蛋白1（HMGB1）、丙二醛、超氧化物歧化酶（SOD）、天冬氨酸转氨酶（AST）及乳酸脱氢酶（LDH）的表达,Tunel法检测缺血心肌细胞凋亡指数,Western-blotting检测各组心肌心肌葡萄糖调节蛋白78（GRP78）蛋白表达及P13K/Akt通路磷酸化水平。 结果三组大鼠间HMGB1、丙二醛、SOD、AST及LDH水平比较,差异均有统计学意义（F = 63.755、73.023、99.220、110.439、120.557,P均< 0.05）,进一步比较发现,缺血再灌注组及依布硒啉组的HMGB1[（9.2 ± 2.7）、（5.5 ± 1.1）、（2.2 ± 0.3）U/L]、丙二醛[（7.2 ± 0.4）、（5.6 ± 0.7）、（4.1 ± 0.9）μmol/L]、AST [（1 011 ± 226）、（813 ± 82）、（671 ± 60）U/L]及LDH [（2 783 ± 674）、（2 043 ± 489）、（1 528 ± 524）U/L]水平较对照组均明显升高,SOD水平[（249 ± 28）、（149 ± 10）、（172 ± 17）kU/L]较对照组明显降低（P均< 0.05）。三组大鼠间的凋亡指数（F = 139.942,P < 0.001）、GRP78蛋白表达（F = 177.846,P < 0.001）及P13K/Akt磷酸化水平（F = 86.286,P < 0.001）比较差异均存在统计学意义,进一步比较发现,缺血再灌注组和依布硒啉组凋亡指数[（38.1 ± 4.6）、（25.4 ± 3.9）、（8.2 ± 1.5）%]明显高于对照组,且I/R组更高（P均< 0.05）。 结论依布硒啉预处理可以抑制大鼠内质网应激,可能与调节P13K/Akt信号通路磷酸化水平有关。     

缺血再灌注损伤诱导大鼠心肌细胞凋亡的实验研究

目的：探讨大鼠心肌缺血再灌注后不同时相心肌细胞凋亡情况及其与缺血再灌注的关系，并进一步探讨心肌细胞凋亡在心肌缺血再灌注损伤中的可能作用。方法：64只SD大鼠随机分为5组：对照组（假手术45min、105min、165min、225min，各时间点n=8），心肌缺血45min组（I15min,n=8），心肌缺血45min后再灌注1h、2h、3h组（I／R1h、I／R2h、I／R3h，各时间点n=8），分别在各时点处死大鼠取材。应用DNA琼脂糖凝胶电泳分析与透射电镜的检测心肌细胞凋亡的改变。结果：DNA琼脂糖电泳分析显示，I／R2h组、I／R3h组出现凋亡特征性“梯状电泳带”而对照组、L45min组及I／R1h组均未见凋亡带谱。透射电镜检测显示，对照组、L45min组、I／R1h组均未见到凋亡的心肌细胞，I／R2h组、I／R3h组心肌细胞染色质凝聚、边集、核膜完整，显示出典型的凋亡特征。结论：心肌缺血再灌注可导致心肌细胞凋亡，心肌细胞凋亡因缺血再灌注不同时相而变化；心肌细胞凋亡在大鼠心肌缺血再灌注损伤的病理生理过程中起重要作用；大鼠心肌缺血后再灌注可促发或加速心肌细胞凋亡。     

Ser473-Akt磷酸化介导阿托伐他汀保护大鼠脑缺血再灌注损伤

目的探讨Akt之Ser473位点(Ser473-Akt)磷酸化在阿托伐他汀保护大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用。方法 40只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分成正常组(n=10)、假手术组(n=10)、缺血再灌注(I/R)组(n=10)和干预组(n=10)。采用线栓法制作大鼠脑缺血2 h再灌注72 h模型。正常组和假手术组不做任何处理,I/R组仅生理盐水灌胃,干预组在再灌注后大鼠苏醒时、24 h、48 h分别予生理盐水配制的阿托伐他汀10 mg/kg灌胃。72 h时处死所有大鼠,留取脑标本分别行HE染色及TUNEL染色,Western blotting检测脑前额叶皮质Akt及其Ser473-Akt表达。结果缺血再灌注72 h后,干预组神经细胞形态学变化较I/R组减轻;干预组凋亡阳性细胞数显著少于I/R组(t=-6.014,P0.001);I/R组前额叶皮质Ser473-Akt较正常组和假手术组显著增加(t20.327,P0.001),而干预组明显高于I/R组(t=3.649,P=0.007)。结论 Ser473-Akt磷酸化在阿托伐他汀的神经细胞保护中起重要作用,通过抑制凋亡减轻大鼠脑缺血再灌注损伤。     

吗啡后处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

目的探讨吗啡后处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响。方法32只雄性SD大鼠随机分为4组,假手术组（S组）：进腹后仅分离肝十二指肠韧带,不阻断肝门血管;缺血再灌注组（I/R组）：进行30 min的缺血及60 min的再灌注;缺血后处理组（IPO组）：缺血30 min时,进行30 s再灌/30 s再闭的3次循环,再全面恢复血液灌注;吗啡处理组（MPC组）：肝脏缺血30 min时,鞘内注射吗啡10μg/kg,后松开动脉夹全面恢复血液灌注60 min。各组于再灌注60 min时检测大鼠血清肝病酶学、超氧化物歧化酶（SOD）与丙二醛（MDA）的含量。结果 IPO组和 MPC组大鼠谷丙转氨酶（ALT）与谷草转氨酶（AST）含量均明显低于 I/R 组,且差异有显著性（P ＜0.01）;IPO组和 MPC 组血清中 SOD 的活性明显高于 I/R 组（P ＜0.01）;MDA 的含量显著低于 I/R 组（P ＜0.01）。结论吗啡后处理具有类似缺血后处理的肝脏保护作用,其机制部分可能与通过减少氧自由基的生成,增强肝脏的抗氧化能力有关。     

2型糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤转录因子E2相关因子2/血红素氧合酶1信号通路的表达及白藜芦醇的干预研究

目的探讨白藜芦醇在糖尿病心肌缺血再灌注（I/R）损伤中对转录因子E2相关因子2（Nrf2）/血红素氧合酶1（HO-1）信号通路的影响。 方法将2型糖尿病模型制备成功的60只大鼠分成假手术组、I/R组、白藜芦醇（R）组、白藜芦醇+ EX527（RE）组,每组各15只。采用结扎左冠状动脉前降支30 min、恢复灌注120 min的方法制备心肌I/R损伤模型。R组及RE组大鼠于术前7 d连续腹腔注射白藜芦醇15 mg/kg,假手术组及I/R组大鼠腹腔注射等容量的等渗NaCl溶液,RE组大鼠于缺血前15 min尾静脉注射EX527 1 μg/kg。于再灌注120 min末,采用酶联免疫吸附测定法检测血清乳酸脱氢酶（LDH）及肌酸激酶同工酶（CK-MB）。随后处死大鼠取心肌组织,采用苏木素-伊红（HE）染色观察心肌病理学变化,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑法检测心肌梗死面积百分比,并检测心肌组织丙二醛含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性。采用Western-blotting法检测各组大鼠心肌沉默信息调节因子1（SIRT1）、Nrf2及HO-1蛋白表达水平。 结果HE染色可见,假手术组大鼠心肌细胞轻度断裂、水肿,少量炎症细胞浸润;I/R组大鼠心肌纤维排列杂乱,心肌间质充血水肿伴大量炎症细胞浸润;R组大鼠心肌组织结构相对整齐,偶见核固缩;RE组大鼠心肌纤维排列杂乱,核固缩现象明显,炎症细胞浸润明显。假手术组大鼠无心肌梗死发生,I/R组大鼠心肌梗死面积占比为（51 ± 6）%,R组大鼠占比为（37 ± 4）%,RE组大鼠占比为（41 ± 3）%,各组间比较差异有统计学意义（F = 160.703,P < 0.001）,R组及RE组大鼠心肌梗死的占比面积均显著小于I/R组大鼠,且R组大鼠心肌梗死面积的占比更小（P均<0.05）。各组大鼠血清LDH、CK-MB、丙二醛、SOD、SIRT1、Nrf2及HO-1表达水平比较,差异均有统计学意义（F = 144.101、158.545、53.682、99.273、50.121、59.153、143.702,P均< 0.001）。进一步两两比较发现,与假手术组比较,I/R组、R组、RE组大鼠的LDH、CK-MB及丙二醛含量均显著升高,SOD活性、SIRT1、Nrf2及HO-1蛋白表达水平均显著降低（P均<0.05）;与I/R组比较,R组及RE组大鼠的LDH、CK-MB及丙二醛含量均显著降低,SOD活性、SIRT1、Nrf2及HO-1蛋白表达水平均显著升高,且LDH、CK-MB及丙二醛含量在R组大鼠更低,SOD活性、SIRT1、Nrf2及HO-1蛋白表达水平在R组大鼠更高（P均<0.05）。 结论白藜芦醇可通过促进SIRT1激活Nrf2/HO-1信号通路来减轻2型糖尿病大鼠心肌的氧化应激反应及心肌I/R损伤。     

脓毒性休克致急性肾损伤患者的危险因素分析

目的研究脓毒性休克患者急性肾损伤（AKI）的发生率及病死率,并寻找其危险因素。 方法回顾性研究2015年6月至2016年6月北京大学人民医院急诊科及重症监护室符合脓毒性休克诊断标准的294例患者,根据是否发生AKI,将294例患者分为AKI组（194例）及非AKI组（100例）。比较两组患者的一般资料,采用Logistic回归分析脓毒性休克致AKI患者的危险因素。 结果本研究中脓毒性休克患者AKI的发生率为66.0%（194 / 294）。AKI组患者院内病死率较非AKI组显著升高（70.6% vs. 22.0%,χ² = 26.327,P < 0.001）。AKI组及非AKI组患者年龄[60（43,73）岁vs. 43（28,67）岁,Z = 2.095,P = 0.036]、平均动脉压[（60 ± 14）mmHg vs.（67 ± 16）mmHg,t = 2.175,P = 0.032]、心率[（124 ± 23）次/ min vs.（112 ± 23）次/ min,t = 2.369,P = 0.020]、氧合指数[（166 ± 113）mmHg vs.（254 ± 150）mmHg,t = 2.820,P = 0.003]、乳酸[（4.6 ± 3.0）mmol / L vs.（2.5 ± 1.9）mmol / L,t = 3.026,P = 0.006]、序贯器官衰竭估计（SOFA）评分[（13 ± 4）分vs.（8 ± 4）分,t = 4.936,P < 0.001]、室性及室上性心律失常（32.5% vs. 8.0%,χ² = 4.334,P = 0.037）、C反应蛋白[（210 ± 104）mg / L vs.（145 ± 71）mg / L,t = 2.923,P = 0.005]、天门冬氨酸氨基转移酶[92（41,345）U / L vs. 36（18,65）U / L,Z = 3.794,P < 0.001]、血肌酐[（239 ± 164）μmol / L vs.（71 ± 22）μmol / L,t = 5.729,P < 0.001]、血尿素氮[（26 ± 16）mol / L vs.（10 ± 8）mol / L,t = 5.212,P < 0.001]、肾小球滤过率[（38 ± 29）mL·min^-1·1.73 m^-2 vs.（101 ± 28）mL·min^-1·1.73 m^-2,t = 9.944,P < 0.001]、肌钙蛋白I [0.39（0.08,1.60）μg / L vs. 0.05（0.01,0.20）μg / L,Z = 3.437,P = 0.001]、D-二聚体[3 538（1 348,9 310）μg / L vs. 2 333（653,4 169）μg / L,Z = 2.458,P = 0.049]、去甲肾上腺素（66.0% vs. 39.0%,χ² = 1.309,P = 0.007）、日呋塞米最大使用剂量[40（20,98）mg vs. 10（0,20）mg,Z = 3.992,P < 0.001]、机械通气（59.8% vs. 25.0%,χ² = 0.145,P = 0.001）、血液净化（12.9% vs. 0%,χ² = 76.945,P = 0.030）及深静脉置管（67.5% vs. 47.0%,χ² = 4.400,P = 0.041）等比较,差异均有统计学意义。将上述指标纳入Logistic回归分析,结果显示,平均动脉压[OR = 1.035,95%CI（0.997,1.075）,P = 0.032]、乳酸[OR = 1.065,95%CI（0.982,1.102）,P = 0.028]、SOFA评分[OR = 1.232,95%CI（1.013,1.455）,P = 0.049]、机械通气[OR = 1.942,95%CI（1.461,4.191）,P = 0.036]、日呋塞米最大剂量[OR = 1.123,95%CI（0.884,1.793）,P = 0.013]是脓毒症致AKI的危险因素。 结论平均动脉压、乳酸、SOFA评分、机械通气及日呋塞米最大剂量的检测有助于临床早期识别脓毒性休克发生AKI的高危患者,从而早期采取预防措施。     

急性呼吸窘迫综合征患者早期应用气道压力释放通气的疗效

目的探讨早期应用气道压力释放通气（APRV）对急性呼吸窘迫综合征（ARDS）患者的临床疗效。 方法将2017年9月至2019年6月收住在兰州大学第一医院ICU的71例ARDS患者分为APRV组（36例）和小潮气量（LTV）组（35例）。APRV组患者起初给予容量辅助控制通气模式,测量气道平台压后转为APRV模式;LTV组患者接受LTV通气,目标潮气量设置为6~8 mL/kg,依据ARDSnet协议调节呼气末正压（PEEP）水平、潮气量和呼吸频率。记录两组患者的一般资料,比较其机械通气第1天和第7天呼吸机参数、呼吸力学指标、血气功能指标、循环功能指标及预后情况;绘制Kaplan-Meier生存曲线,比较两组患者28 d生存情况。 结果机械通气第7天,APRV组和LTV组患者吸入氧浓度（FiO₂）[（47 ± 5）% vs.（66 ± 5）%,t = 3.746,P < 0.001]、呼吸频率[（24 ± 4）次/min vs.（18 ± 4）次/min,t = 3.453,P < 0.001]、PEEP[（5.6 ± 2.3）cmH₂O vs.（10.8 ± 4.4）cmH₂O,t = 3.011,P < 0.001]、气道峰压[23.9（18.5,29.6）cmH₂O vs. 25.1（11.3,31.8）cmH₂O,H = 2.736,P = 0.014]、气道平台压[22.2（18.7,24.3）cmH₂O vs. 19.6（17.2,22.4）cmH₂O,H = 2.154,P = 0.023]、平均气道压[23.8（22.1,24.3）cmH₂O vs. 15.4（13.9,19.4）cmH₂O,H = 2.814,P = 0.018]、肺顺应性[52.7（37.4,62.3）mL/cmH₂O vs. 41.8（31.5,57.6）mL/cmH₂O,H = 2.008,P = 0.034]、动脉血氧分压（PaO₂）[（89 ± 7）mmHg vs.（72 ± 7）mmHg,t = 2.324,P < 0.001]、PaO₂/FiO₂ [（201 ± 15）mmHg vs.（140 ± 12）mmHg,t = 2.743,P < 0.001]、动脉血氧饱和度（SaO₂）[（95.4 ± 2.1）% vs.（92.3 ± 1.8）%,t = 2.658,P < 0.001]、心率[（99 ± 9）次/min vs.（108 ± 9）次/min,t = 2.733,P = 0.014]及平均动脉压[（84 ± 11）mmHg vs.（74 ± 13）mmHg,t = 3.012,P = 0.011]比较,差异均有统计学意义。APRV组ARDS患者机械通气时间[（9.6 ± 2.2）d vs.（11.9 ± 2.9）d,t = 3.687,P < 0.001]、住ICU时间[（11.3 ± 3.1）d vs.（13.2 ± 2.7）d,t = 2.722,P = 0.008]、住院时间[（13.9 ± 2.5）d vs.（16.2 ± 2.4）d,t = 3.924,P = 0.004]均较LTV组显著缩短,拔管成功率[80.6%（29/36）vs. 54.3%（19/35）,χ² = 5.592,P = 0.018]显著升高,肺复张[5.6%（2/36）vs. 48.6%（17/35）,χ² = 16.753,P < 0.001]、俯卧位通气[11.1%（4/36）vs. 34.3%（12/35）,χ² = 5.460,P = 0.019]、气胸发生率[8.3%（3/36）vs. 28.6%（10/35）,χ² = 4.860,P = 0.028]及28 d住院病死率[13.9%（5/36）vs. 34.3%（12/35）,χ² = 4.054,P = 0.044]均显著降低。Kaplan-Meier生存曲线结果显示,APRV组ARDS患者生存情况显著优于LTV组（χ² = 4.118,P = 0.015）。 结论与LTV组比较,早期应用APRV可显著改善ARDS患者的氧合功能和呼吸系统顺应性,提高拔管成功率,降低气胸发生率,并减少机械通气时间和住院时间。     

缺血后处理归糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响

目的探讨缺血后处理（I-Post）对糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注（I/R）损伤的影响。 方法采用链脲佐菌（STZ）腹腔注射方式建立糖尿病大鼠模型，将制模成功的糖尿病大鼠随机分为4组，即空白对照组、假手术组、缺血再灌注组（I/R组）及缺血后处理组（I-Post组）。I/R组及I-Post组均通过线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞（MCAO）模型，并且I-Post组于大脑中动脉阻塞90 min后，反复进行3次短暂再灌注干预（灌注15 s后缺血15 s）；假手术组手术步骤同上，但不插入线栓；空白对照组不给予任何处理。于缺血90 min、再灌注6 h后对所有大鼠进行神经功能评分（NDS）、脑梗死体积测定、观察脑组织神经细胞形态学变化及计数TUNEL阳性凋亡细胞数量。 结果I-Post组与I/R组比较，其神经功能评分组间差异无统计学意义（P&rt;0.05），I-Post组大鼠脑梗死体积及凋亡细胞数量均较I/R组明显减小（P＜0.05）。 结论I-Post处理能抑制糖尿病脑缺血大鼠神经细胞凋亡，减轻局灶性I/R损伤。     

Compared effects of inhibition and exogenous administration of hydrogen sulphide in ischaemia-reperfusion injury

Introduction

Haemorrhagic shock is associated with an inflammatory response consecutive to ischaemia-reperfusion (I/R) that leads to cardiovascular failure and organ injury. The role of and the timing of administration of hydrogen sulphide (H₂S) remain uncertain. Vascular effects of H₂S are mainly mediated through K⁺_ATP-channel activation. Herein, we compared the effects of D,L-propargylglycine (PAG), an inhibitor of H₂S production, as well as sodium hydrosulphide (NaHS), an H₂S donor, on haemodynamics, vascular reactivity and cellular pathways in a rat model of I/R. We also compared the haemodynamic effects of NaHS administered before and 10 minutes after reperfusion.

Methods

Mechanically ventilated and instrumented rats were bled during 60 minutes in order to maintain mean arterial pressure at 40 ± 2 mmHg. Ten minutes prior to retransfusion, rats randomly received either an intravenous bolus of NaHS (0.2 mg/kg) or vehicle (0.9% NaCl) or PAG (50 mg/kg). PNU, a pore-forming receptor inhibitor of K⁺_ATP channels, was used to assess the role of K⁺_ATP channels.

Results

Shock and I/R induced a decrease in mean arterial pressure, lactic acidosis and ex vivo vascular hyporeactivity, which were attenuated by NaHS administered before reperfusion and PNU but not by PAG and NaHS administered 10 minutes after reperfusion. NaHS also prevented aortic inducible nitric oxide synthase expression and nitric oxide production while increasing Akt and endothelial nitric oxide synthase phosphorylation. NaHS reduced JNK activity and p-P38/P38 activation, suggesting a decrease in endothelial cell activation without variation in ERK phosphorylation. PNU + NaHS increased mean arterial pressure when compared with NaHS or PNU alone, suggesting a dual effect of NaHS on vascular reactivity.

Conclusion

NaHS when given before reperfusion protects against the effects of haemorrhage-induced I/R by acting primarily through a decrease in both proinflammatory cytokines and inducible nitric oxide synthase expression and an upregulation of the Akt/endothelial nitric oxide synthase pathway.Keywords: hydrogen sulphide, inflammation mediators, therapeutic use, shock, hemorrhagic/drug therapy, haemodynamics/drug effects     

洗涤回收式自体输血对膝关节、髋关节置换术患者血栓弹力图及免疫功能的影响

目的探讨洗涤回收式自体输血对膝关节、髋关节置换术患者血栓弹力图及免疫功能的影响。 方法选取2019年1月至12月甘肃省中医院骨科收治的膝关节、髋关节置换术中出血400~1 000 ml,回收输血量400~600 ml的患者186例为观察组,并选择同期只接受异体输血的患者162例为对照组。对两组患者输血前与输血后1 d、5 d的血红蛋白(Hb)、红细胞计数(RBC)、红细胞比容(HCT)、血小板(PLT)、血栓弹力图[包括凝血反应时间(R)、最大振幅(MA)、血凝块形成时间(K)、凝固角度(α)]及细胞免疫功能(包括CD3⁺CD4⁺T细胞、CD3⁺CD8⁺T细胞、CD16⁺CD56⁺NK细胞)水平进行检测并比较。 结果输血后1 d,观察组Hb(112.57±14.32)g/L、HCT(34.10±3.32)%、RBC(3.12±0.53)×10¹²/L、PLT(125±31)×10⁹/L与对照组Hb(108.35±12.84)g/L、HCT(33.52±3.04)%、RBC(2.91±0.42)×10¹²/L、PLT(123±40)×10⁹/L比较,均差异无统计学意义(t＝0.36,1.21,1.37,1.94;均P>0.05);输血后5 d,观察组Hb(122.52±13.70)g/L、HCT(40.12±3.80)%、RBC(3.91±0.45)×10¹²/L、PLT(135±39)×10⁹/L与对照组Hb(118.31±13.91)g/L、HCT(35.50±3.70)%、RBC(3.14±0.61)×10¹²/L、PLT(127±31)×10⁹/L比较,均差异有统计学意义(t＝7.01,5.58,5.72,7.61;均P<0.05)。输血后1 d,观察组R(5.97±0.31)min、MA(56.73±2.24)mm、K(2.57±0.10)min、α(59.88±1.73)°与对照组R(6.07±0.30)min、MA(57.68±1.78)mm、K(2.70±0.52)min、α(61.12±3.09)°比较,均差异无统计学意义(t＝2.02,0.90,0.66,0.99;均P>0.05)。输血后5 d,观察组R(6.62±0.59)min、MA(63.81±0.86)mm、K(2.95±0.19)min、α(61.12±2.36)°与对照组R(6.82±1.21)min、MA(62.99±1.88)mm、K(2.82±0.18)min、α(60.50±2.07)°比较,均差异无统计学意义(t＝1.70,1.04,1.33,0.56;均P>0.05)。流式细胞分析表明,输血后1 d,观察组患者CD3⁺CD4⁺T细胞的水平(33.66±2.10)高于对照组(29.88±1.97),差异有统计学意义(t＝3.72,P<0.01);输血后5 d,观察组CD3⁺CD4⁺T细胞(35.92±0.79)、CD3⁺CD8⁺T细胞(21.82±1.61)、CD16⁺CD56⁺NK细胞(1.68±0.14)水平均高于对照组(29.83±2.11、20.53±2.71、1.03±0.13),均差异有统计学意义(t＝7.66,6.57,9.58;均P<0.01)。 结论与异体输血比较,洗涤回收式自体输血不影响膝关节置换、髋关节置换患者血栓弹力图R、MA、K、α,可以提高患者的细胞免疫功能。     

A study of factors governing fluid filtration in the diabetic foot

Abstract. The effect of lowering the foot on the factors governing fluid filtration in the foot were studied in 12 male insulin-dependent diabetic subjects and 10 controls. Toe skin blood flow, measured by laser Doppler flowmetry, was significantly higher during dependency in the diabetic group. In the control subjects, the colloid osmotic pressure of venous blood sampled from the foot rose to 47·7 mmHg (range 45·1–53·8) after 50 min of foot dependency. In the diabetic group, colloid osmotic pressure failed to rise to the same extent (median 36·7 mmHg; range 28·6–43·0; P < 0·001). Capillary pressure, measured directly by the Landis microinjection technique, was significantly higher in the diabetic group (85·3±1·7 ( n = 6) vs. 92·2±4·6 cm H₂O ( n = 6); P < 0·007), as was foot swelling rate determined by mercury strain gauge plethysmography (0·069±0·022 vs. 0·099±0·025 ml min^-1 100ml^-1; P < 0·02). These results suggest an impairment of the oedema-preventing mechanisms in diabetic subjects which may contribute to the risks of ulceration in the diabetic foot.     

依达拉奉对大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡的影响

目的：观察依达拉奉对心肌缺血／再灌注后心肌细胞凋亡的影响。方法：选择30只健康SD大鼠，采用结扎冠状动脉左前降支后再通的方法复制心肌缺血再灌注的动物模型，随机分为假手术组（n=10）、缺血／再灌注（I／R）组（n=10）和药物（依达拉秦）组（n=10）。检测各组3h后心肌组织的超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的含量。并用免疫组化法测定局部凋亡相关因子Bcl-2、Fas的表达，比较各组间差异。结果：与假手术组比较，I／R组中反映氧化损伤程度的MDA明显升高（P〈0．01），抗氧化酶SOD则明显减少（P〈0．01），Fas含量升高（P〈0、01），Bcl-2含量明显减少（P〈0、01）；药物组较I／R组MDA含量明显减少（P〈0．01），SOD活性显著增加（P〈0．01），Fas含量明显降低（P〈0，05），Bcl-2含量明显增加（P〈0．01）。结论：依达拉奉具有抗心肌缺血再灌注损伤作用，其机制可能是通过调节Bcl-2和Fas介导的细胞凋亡而实现     

电刺激小脑顶核与局灶性脑缺血再灌注时钙蛋白酶活性的关系

目的观察电刺激小脑顶核(FN)对局灶性脑缺血再灌注后钙蛋白酶活性的影响,以阐明电刺激FN在脑缺血再灌注中的神经保护作用机制。方法健康雄性Wistar大鼠,共120只,体质量250～300g。随机分入假手术组(PO)、FN电刺激假手术组(PO-FN)、缺血/再灌注组(I/R)及缺血/再灌注-FN刺激组(I/R-FN),后两组又分为再灌注1,3,6,12及24h组,每组10只。建立大鼠小脑FN电刺激及局灶性脑缺血再灌注模型,应用Western印迹半定量钙蛋白酶介导的150RU胞衬蛋白降解产物含量(可表示钙蛋白酶活性)及尼氏体染色进行神经元数量及形态分级评分,观察电刺激FN对缺血再灌注不同时间后,再灌注区钙蛋白酶活性及神经元损害程度的影响。结果再灌注1～3h,I/R组钙蛋白酶活性较I/R-FN组增高更显著犤分别由(6310±360),(4660±310)/μg总蛋白增高至(7060±290),(6240±310)/μg总蛋白,t=7.776,P=0.000及t=4.267,P=0.003〗。再灌注6～24h,I/R组钙蛋白酶活性不断增高,较FN-I/R组相应时点相比差异有极显著意义(各组P=0.000)。I/R组从再灌注1h(2.1±0.2)开始,神经元形态数量评分迅速增加,并随着再灌注时间延长,评分不断增高,至再灌注24h(4.0±0.0)达最高。I/R-FN组再灌注1～3h,神经元形态数量评分轻度增加,其后趋于稳定。至再灌注24h,神经元皱缩加重,神     

缺血后处理对脑缺血再灌注损伤后ERK1/2和Akt磷酸化及神经细胞凋亡的影响

目的:观察缺血后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后ERK1/2和Akt及神经细胞凋亡的影响。方法:成年健康SD大鼠72只,随机分为假手术(sham)组、缺血再灌注(I/R)组、缺血后处理(Postcond)组各24只,应用线栓法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)再灌注模型。分别于再灌注10min、30min、6h、24h后留取大脑皮质。Western blot检测再灌注10min、30min、6h后ERK1/2和Akt活性变化;原位末端标记(TUNEL)检测再灌注后24h神经细胞凋亡。结果:Postcond组再灌注10min、30min、6h后ERK1/2和Akt活性高于I/R组(P<0.05);脑缺血再灌注24h后,Postcond组与I/R组比较,TUNEL阳性细胞减少(P<0.05)。结论:缺血后处理可提高大鼠脑缺血再灌注后皮质内ERK1/2和Akt活性,减少神经细胞凋亡。     

经鼻高流量氧疗在高原地区慢性阻塞性肺疾病急性加重合并呼吸衰竭患者中的应用

目的探讨经鼻高流量氧疗（HFNC）在高原地区慢性阻塞性肺疾病急性加重（AECOPD）合并呼吸衰竭患者中的使用效果。 方法回顾性分析青海省人民医院重症医学科收住的40例AECOPD合并呼吸衰竭患者,根据治疗方式不同分为治疗组和对照组,每组各20例。两组患者根据病情需要给予控制感染、解除支气管、稀释痰液等对症治疗,治疗组在此基础上应用HFNC,对照组应用常规低流量氧疗。比较两组患者的一般资料、治疗前和治疗24 h后的呼吸频率、动脉血氧分压（PaO₂）、动脉血二氧化碳分压（PaCO₂）、pH值、痰液黏稠度、氧疗成功情况及不良反应发生情况。 结果治疗后,治疗组患者呼吸频率[（15.5 ± 1.6）次/min vs.（18.8 ± 1.6）次/min,t = 6.612,P = 0.001]和PaCO₂ [（49.4 ± 4.3）mmHg vs.（56.2 ± 4.6）mmHg,t = 4.848,P = 0.001]均较对照组显著降低,PaO₂ [（61.1 ± 2.8）mmHg vs.（57.4 ± 3.3）mmHg,t = 3.798,P = 0.001]和pH值[（7.38 ± 0.03）vs.（7.36 ± 0.03）,t = 2.108,P = 0.042]均较对照组显著升高;且治疗组患者治疗后呼吸频率[（15.5 ± 1.6）次/min vs.（23.1 ± 1.9）次/min,t = 23.194,P = 0.001]和PaCO₂ [（49.4 ± 4.3）mmHg vs.（62.2 ± 4.5）mmHg,t = 20.176,P = 0.001]均较同组治疗前显著降低,PaO₂ [（61.1 ± 2.8）mmHg vs.（45.5 ± 3.9）mmHg,t = 29.705,P = 0.001]和pH值[（7.38 ± 0.03）vs.（7.32 ± 0.03）,t = 6.325,P< 0.001]均较同组治疗前显著升高。对照组患者治疗前痰液黏稠度Ⅰ度4例、Ⅱ度8例、Ⅲ度8例,治疗后痰液黏稠度Ⅰ度5例、Ⅱ度7例、Ⅲ度8例;治疗组患者治疗前痰液黏稠度Ⅰ度3例、Ⅱ度8例、Ⅲ度9例,治疗后痰液黏稠度Ⅰ度10例、Ⅱ度8例、Ⅲ度2例。治疗后治疗组患者痰液黏稠度较对照组明显稀薄（H = 2.163,P = 0.031）,且治疗组患者治疗后痰液黏稠度较同组治疗前明显稀薄（H = 2.824,P = 0.005）。此外,治疗组患者HFNC氧疗成功情况较对照组显著升高（17/20 vs. 11/20,χ² = 4.286,P = 0.038）,而不良反应发生情况较对照组明显下降（5/20 vs. 12/20,χ² = 5.013,P = 0.025）。 结论HFNC对于高原地区AECOPD合并呼吸衰竭患者疗效显著,可显著改善患者的呼吸频率和血气情况,有效稀释痰液,降低痰液黏稠度,并能提高患者的舒适度,降低氧疗时的不良反应,减少无创通气使用,缩短住院天数。