人原发性肝癌及癌旁肝组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原的基因表达

用cDNA-mRNA原位核酸杂交技术检测了2例正常人肝及12例原发性肝癌及癌旁肝组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原的基因表达,结果发现8例原发性肝细胞癌组织中多种细胞,包括瘤细胞都有胶原基因的表达,证实人原发性肝癌组织中不仅间质细胞而且肿瘤细胞也参与胶原的合成。胶原基因的过度表达可能与细胞的活跃增生有关。     

原位杂交法检测慢性肝病组织Ⅰ,Ⅲ型胶原mRNA

目的:研究慢性肝病组织Ⅰ,Ⅲ型胶原的基因表达,探讨在不同病理状态下肝组织胶原的细胞来源。方法:采用同位素标记的探针DNA-mRNA原位杂交方法,榆测Ⅰ,Ⅲ型胶原mRNA。结果:正常肝组织未见杂交信号,慢性肝病组织(包括慢性持续性肝炎、慢性活动性肝炎、肝硬化、活动性肝硬化)中成纤维细胞、窦周细胞、中央静脉内皮细胞均见Ⅰ,Ⅲ型mRNA杂交信号,肝细胞未见阳性信号。结论:在生理和病理条件下肝细胞均不参与Ⅰ,Ⅲ型胶原合成,在慢性肝病条件下,间质细胞是肝脏胶原的主要来源。     

慢性肝病患者肝组织中Ⅲ型胶原的免疫组化及原位杂交研究

用免疫组化及原位分子杂交技术研究了慢性肝病患者肝组织中Ⅲ型胶原的蛋白及基因表达。非活动性肝病时只有基因表达而无胶原合成，而活动性肝病时胶原蛋白及基因均有表达，它们表达增强与肝病活动有关，胶原主要来源于间质细胞，其合成的调控主要在转录后水平。     

Annexin Ⅱ在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的研究钙磷脂结合蛋白Ⅱ(AnnexinⅡ)在肝细胞癌中的表达及意义。方法采用Western印迹方法检测18例肝癌及相应瘤旁组织中AnnexinⅡ蛋白的表达情况,免疫组织化学方法分析AnnexinⅡ在79对肝细胞癌及瘤旁组织,8例正常肝组织中的表达。结果 Western印迹显示AnnexinⅡ在肝细胞癌组织及相应瘤旁组织中均有表达,而癌组织中表达阳性率高于相应瘤旁组织(P<0.05)。免疫组织化学显示AnnexinⅡ在肝细胞癌中的表达阳性率高于相应瘤旁组织及正常肝组织(P<0.05)。结论 AnnexinⅡ在肝细胞癌中高表达,在瘤旁组织及正常肝组织表达较少,对肝细胞癌具有诊断价值。     

人原发性肝癌组织中PⅢP的免疫组化研究

用免疫组化方法对67例人原发性肝癌及癌旁肝组织PⅢP进行研究,结果发现癌旁肝组织仅在活动性肝病时成纤维细胞及窦周细胞染色阳性,肝癌细胞染色较强。PⅢP的表达与肿瘤生物学特征密切相关。作者认为肝癌细胞PⅢP的高合成能力与肿瘤细胞本身特征或基因表达有关,可能是肝癌细胞所具有的肿瘤生物学特征之一。     

Caveolin-1在肝细胞癌中的表达及其意义

目的研究Caveolin-1mRNA在肝癌组织、癌旁肝组织及正常肝组织中的表达情况,及其与肝细胞癌发生发展的关系。方法收集广西医科大学肿瘤医院肝细胞癌患者手术切除的肝癌组织、癌旁肝组织各60例,正常肝组织10例。用RT—PCR方法分析Caveolin-1mRNA在3种不同组织的表达差异。结果Caveolin-1mRNA在肝癌组织、癌旁肝组织、正常肝脏组织中的相对表达量分别为0．197±0．116、0．142±0．087、0．457±0．094（P〈0．01）。结论Caveolin-1与肝细胞癌的发生、发展有密切的关系,在肝细胞癌的形成过程中可能起抑制作用。     

CyclinD1、CyclinE、CDK6在原发性肝细胞癌中的表达

探讨细胞周期调控因子CyclinD1、CyclinE、CDK6在原发性肝细胞癌中的表达及意义。应用免疫组织化学、原位分子杂交和细胞图象分析技术检测原发性肝细胞癌组织及其对应的癌旁肝组织(各20例)、正常肝组织(5例)中CyclinD1、CyclinE和CDK6mRNA表达情况。结果显示:CyclinD1、CyclinE和CDK6mRNA在肝细胞癌组织中呈阳性表达,阳性率分别为70%、75%和25%,正常肝组织呈阴性表达;肝细胞癌组织中CyclinD1和CyclinE的阳性表达与癌旁肝组织、正常肝组织相比,差异均有显著性意义(P<0.05);CyclinD1和CyclinE的过表达在肝细胞癌的发生和发展中起着重要作用。     

Caveolin-1和Caspase-3蛋白在肝细胞癌中的表达及意义

目的研究Caveolin．1和Caspase-3蛋白在肝细胞癌中的表达及意义。方法采用免疫组织化学检测30例肝细胞癌,相应癌旁及10例正常肝组织中Caveolin-1和Caspase-3蛋白的表达。结果（1）Caveolin-1在正常肝组织、癌旁肝组织、肝细胞癌组织中的阳性表达率分别为90％、13．33％、10％。Caspase-3在正常肝组织、癌旁肝组织、肝细胞癌组织中阳性表达率分别为90％、70％、40％。Caveolin．1和Caspase-3在不同性质组织间的表达,差异均有统计学意义（P〈0．05）;（2）Caveolin-1与Caspase-3的表迭在肝细胞癌中无明显相关性（r=0．181,P=0．337）。结论Caveolin-1与Caspase-3在肝细胞癌组织中表达均呈下降,但两者间无明显相关性,提示在肝细胞癌中,Caveolin-1的异常与Caspase-3细胞凋亡紊乱无关。     

肝癌组织中HIF-1α蛋白的表达与多药耐药蛋白相关性研究

目的：探讨肝癌组织中乏氧诱导因子-1α（HIF-1α）蛋白的表达与多药耐药蛋白（multi-drug resistance protein,MRP）的关系。方法收集78例原发性肝细胞癌患者肝组织和对应癌旁正常肝组织的石蜡标本,采用免疫组织化学 SP法检测原发性肝细胞癌组织及其癌旁正常肝组织中 HIF-1α和 MRP 蛋白的表达情况。结果 HIF-1α和MRP蛋白在肝癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁正常肝组织（P〈0.05）。病理分级（Ⅲ-Ⅳ级）、TNM 分期（Ⅲ-Ⅳ期）、有门静脉癌栓、有淋巴结转移的肝癌组织中 HIF-1α的阳性表达率明显增高（P〈0.05）;病理分级（Ⅲ-Ⅳ级）、有淋巴结转移的肝癌组织中 MRP的阳性表达率明显增高（P〈0.05）。78份肝癌组织中,HIF-1α和 MRP 的表达之间呈正相关（r=0.524,P〈0.05）。结论 HIF-1α和 MRP过表达可能在肝癌的恶性增殖、分化及淋巴结转移过程中发挥重要作用,且两者在肝癌组织中的表达可能具有协同作用。     

人肝癌组织特异性GGTmRNA亚型表达的研究

目的　探讨γ-谷氨酰转移酶 ( GGT) m RNA亚型转化与肝癌发生的关系。方法　采用 RT-PCR方法检测正常肝组织、良性肝病肝组织、肝癌组织、癌旁组织、远癌组织及肝转移癌癌周组织中三种 GGTm RNA亚型 ( F、H、P亚型 )的表达情况。结果　正常肝组织主要的 GGTm RNA类型为 F亚型 ,良性肝病及肝转移癌癌周组织亦以 F亚型为主 ;肝癌组织、癌旁组织及远癌组织 H亚型的阳性率显著高于正常肝脏及良性肝病肝组织 ( P<0 .0 5) ;肝癌组织 F亚型阳性率明显低于正常及良性肝病肝组织 ( P<0 .0 5)。结论　 GGTm RNA亚型转化与肝癌发生有密切关系 ;GGT基因检测为判断肝细胞癌变的灵敏方法     

肝癌患者肝脏不同部位组织TSPO免疫组化研究

[目的]探讨肝癌患者肝脏不同部位组织18KD转运蛋白(TSPO)表达水平。[方法]按自身配对法收取原发性肝癌患者肝脏癌变组织、癌旁组织和正常组织标本,免疫组化ABC方法对TSPO染色,观察肝组织TSPO表达特点,并采用IPP6.0软件对免疫组化切片进行光密度分析,检测累积光密度值(IOD)对TSPO表达量进行量化分析。[结果]TSPO在不同部位组织中均有表达,呈棕黄色,定位于胞浆和细胞核,间质细胞、肝细胞和癌细胞均可见TSPO表达,癌旁组织和癌变组织TSPO着色明显。量化分析结果显示癌旁组织TSPO表达量最高,癌变组织次之,正常组织最少,3者之间比较差异均有统计学意义(P<0.01)。[结论]TSPO在癌旁组织、癌变组织、正常组织中表达差异十分显著,提示TSPO可以作为药物治疗肝脏肿瘤的新靶点。     

LZTS1蛋白在肝组织及HepG2细胞中的表达

目的探讨LZTS1蛋白在正常肝、肝细胞癌组织及癌旁慢性肝纤维化、肝硬化组织中的表达,以及在人肝癌细胞系HepG2中的表达。方法选择我院正常人肝组织、原发性肝细胞癌和癌旁慢性肝纤维化、肝硬化组织标本共50例,采用免疫组化方法检测不同肝组织样本中LZTS1蛋白,光镜下观察LZTSI阳性细胞表达定位和分布,按表达面积和表达强度半定量计分。同时培养HepG2人肝癌细胞系,免疫印迹和细胞免疫组化方法检测HepG2细胞中内源性LZTS1的表达,并以正常肝细胞L02为对照。SPSS统计分析各组间的表达差异。结果LZTSI蛋白在正常胆管上皮胞浆中表达。肝细胞包膜和胞浆中均表达,且阳性细胞呈规律性分布。LZTS1蛋白在肝细胞癌组织中14／20例（70％）表达强阳性,5／20例（25％）中等表达;癌旁肝硬化结节中10／17例（58．8％）强阳性表达,6／17（35．3％）例中等阳性表达;慢性肝纤维化组织中1／3（33．3％）例弱阳性,2／3例（66．7％）中等阳性。20例HCC组织中有17例为HBV—HCC,其中13例（76．5％）LZTSI蛋白呈强阳性表达。结论LZTS1蛋白主要表达于正常胆管上皮和肝细胞胞浆,且在肝腺泡中呈规律性分布。在肝癌、肝硬化组织和HepG2细胞中表达增高。     

C／EBP在肝癌组织及其癌旁组织的表达和意义

Ｃ／ＥＢＰ是近年发现的一种真核细胞转录调控因子，与细胞分化状态有关，Ｃ／ＥＢＰ主要存在于分化成熟的组织细胞中，在分化不良的细胞存在较少或检测不到。本文采用兔抗Ｃ／ＥＢＰ多肽抗体，经免疫组化ＡＢＣ染色，对３１例原发性肝细胞癌（２６例带癌旁肝组织）和２６例原发性肝内胆管细胞癌（１５例带癌旁肝组织）及１５例正常肝组织的表达情况进行了分析，结果发现Ｃ／ＥＢＰ抗原在３１例原发性肝细胞癌中阳性表达８例（２５．８％），２６例原发性肝内胆管细胞癌中阳性反应１０例（３８．５％），而４１例相应癌旁、１５例正常肝组织全部呈阳性反应。本试验中原发性肝细胞癌和原发性肝内胆管细胞癌组织Ｃ／ＥＢＰ阳性表达率低于相应的癌旁组织及正常肝组织，前者与后者差异显著（ｐ＜０．０５）。     

诱生型一氧化合酶在肝癌中表达的意义

为证实诱生型一氧化氮合酶（iNOS）在肝癌发生、发展中的作用,采用免疫组化方法对50例原发性肝细胞癌（HCC）及癌旁组织（PCHT）中的iNOS表达情况进行了检测。结果显示,iNOS位于肝细胞细胞浆／膜中,在HCC中的表达强度变化较大,在PCHT中呈强表达;正常肝组织中呈弱表达;淋巴细胞中无表达。证实iNOS的异常表达可导致HCC患者体内NO生成异常及机体对癌细胞的免疫异常。提示提高体内NO合成,可望提高HCC患者的抗癌能力。     

肝癌相关基因表达的荧光定量PCR检测及分子诊断指数的建立

目的:研究肝细胞癌相关基因表达,建立肝癌分子诊断指数,以期能更准确的诊断肝癌.方法:采用实时荧光定量PCR检测40例肝细胞癌患者癌组织和配对的癌旁2 cm及手术切缘组织、10例肝硬化组织、10例正常肝脏组织中11个基因的表达,以管家基因G3PDH为对照,2-ΔΔCT法计算目的基因相对表达量,挑选出特异性好且与正常肝、肝...     

甘露糖受体在肝细胞癌中的表达及意义

目的:观察甘露糖受体(mannose receptor,M R)在肝细胞癌组织/肝癌细胞系中的表达,探讨其与肝细胞癌发生、发展及恶性程度的关系.方法:应用免疫组织化学检测50例肝细胞癌组织及癌旁组织、10例正常肝组织中MR的表达,免疫荧光法、Western blot法检测肝癌细胞系、肝细胞系中MR的表达.结果:免疫组织化学染色:肝细胞癌组织中M R的表达水平明显高于癌旁组织及正常肝组织(86%vs 76%,30%,P0.05).免疫荧光:MR在肝癌细胞系BEL-7402、Hep G2和人肝细胞系HL-7702中均有表达.在肝癌细胞系BEL-7402、Hep G2上有很强的MR表达,在肝细胞系HL-7702上MR的表达分布明显较少.Western blot法:MR在肝癌细胞系Hep G2、BEL-7402和人肝细胞系HL-7702上均有表达,肝癌细胞BEL-7402中MR的表达水平明显高于肝癌细胞Hep G2(P0.01)、肝细胞HL-7702(P0.01).结论:MR在肝细胞癌组织/肝癌细胞系中高表达提示可能与肝细胞癌的发生、发展及恶性程度密切相关.     

CCT亚基γ在人肝细胞癌组织中的表达及意义

目的:探讨CCT亚基γ在人肝细胞癌组织中的表达和意义.方法:用免疫组织化学一步法检测35例肝癌及癌旁组织、12例正常肝组织中的CCT亚基γ表达.结果:CCT亚基γ在肝癌组织的阳性表达率为88.57%(31/35),在癌旁组织中的阳性表达率为62.86%(22/35),在正常肝组织中的阳性表达率为41.67%(5/12).CCT亚基γ在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织和正常肝组织,具有显著性差异(P<0.05).CCT亚基γ的表达与肝癌患者年龄、乙肝表面抗原、有无门静脉癌栓、AFP水平、肿瘤直径及临床分期均不相关(P>0.05),但CCT亚基γ的过度表达与肝癌患者肿瘤细胞分化程度相关(P<0.05),肿瘤细胞分化程度越低,CCT亚基γ的表达越高.结论:CCT亚基γ在人肝细胞癌组织中表达增高可能与肝细胞的癌变有关.     

趋化因子配体18在肝细胞癌中的表达及其对临床病理特征和预后的影响

目的探讨趋化因子配体18(CCL18)在肝细胞癌中的表达及其对临床病理特征和预后的影响。方法选取40例肝细胞癌患者作为研究对象,选取肝细胞癌旁肝组织标本和因良性肝占位行手术切除的正常肝组织标本各40份作为对照。应用免疫组织化学法检测CCL18在肝细胞癌及正常肝组织中的表达,比较CCL18在各组中的阳性表达率。分析肝细胞癌组织中CCL18的阳性表达与临床病理特征的关系,应用Kaplan-Meier法分析CCL18表达对肝细胞癌预后的影响。结果 CCL18在肝细胞癌组织中的阳性表达率为72.5%(29/40),在癌旁肝组织中的阳性表达率为7.5%(3/40),在正常肝组织中的阳性表达率为5.0%(2/40),肝癌组织中CCL18的阳性表达率显著高于正常肝组织和癌旁肝组织(χ2=9.251,P0.05)。随着病理分化程度的降低CCL18的阳性表达率显著增高,有病灶转移的患者中CCL18阳性表达率显著高于无病灶转移的患者。CCL18阳性的肝细胞癌患者的无进展生存期和总生存期显著短于CCL18阴性的肝细胞癌患者。结论 CCL18在肝细胞癌组织中的阳性表达显著增强,且影响患者的预后,CCL18阴性表达的肝细胞癌患者具有更长的生存期。     

SOCS3在肝细胞癌组织中的表达及意义

目的：观察细胞周期蛋白SOCS3在肝细胞癌组织中的表达,并探讨其表达与患者预后的关系。方法分别应用免疫组化法和Western blot法检测50例肝细胞癌组织、癌旁组织术后病理标本及17例正常肝组织新鲜标本中SOCS3的表达,分析SOCS3表达与肝细胞癌患者临床特征及生存期的关系。结果 SOCS3在肝细胞癌组织、癌旁组织中低表达,在正常肝组织中表达较高（P＜0．05）;SOCS3同肿瘤分化程度、肿瘤大小有关（P均＜0．05）,同AFP水平及有无肝炎无关（P均＞0．05）;其阳性表达患者比阴性表达患者生存期较长（P＜0．05）。结论 SOCS3在肝细胞癌组织中低表达,其表达同病理分化程度、肿瘤大小及患者生存期相关。     

HBsAg及AFP在肝细胞癌组织中的表达及其相关性

目的进一步探讨HBV感染在肝细胞癌（HCC）发病中的作用。方法选择40份HCC、癌旁肝组织标本及6份正常肝组织标本,用免疫组化SP法检测其HBsAg与甲胎蛋白（AFP）表达。结果正常肝组织中HBsAg及AFP表达均为阴性;HCC和癌旁肝组织中HBsAg及AFP表达阳性率分别为70%、90%（P〈0.05）,HCC和癌旁肝组织AFP表达阳性率分别为87.5%、82.5%（P〉0.05）;HCC及癌旁肝组织中HBsAg阳性者AFP表达阳性率明显高于HBsAg阴性者（P〈0.05）。结论 HBV感染可能通过诱发肝细胞产生AFP参与HCC发病,具体机制有待进一步研究。