人脑胶质瘤中MAGE-D4和CANX mRNA的表达及其相关性分析

目的 探讨人脑胶质瘤中黑色素瘤相关抗原(MAGE)-D4和钙联蛋白(CANX)mRNA的表达水平,分析其相关性及临床意义.方法 应用基因表达谱交互式分析(GEPIA)数据库数据[胶质母细胞瘤(GBM)组织163例,低级别胶质瘤(LGG)组织518例,正常脑组织207例]分析MAGE-D4和CANX mRNA在人脑胶质瘤...     

人胶质瘤中HIF1A和MAGED4的表达及调控关系初探

目的 探讨缺氧诱导因子1A(HIF1A)和黑色素瘤相关抗原D4(MAGED4)在人胶质瘤中的表达情况,并分析HIF1A对MAGED4表达的影响。方法 通过基因表达谱交互式分析(GEPIA)数据库收集人胶质瘤组织样本数据681例,正常脑组织样本数据207例,比较其MAGED4 mRNA和HIF1A mRNA表达水平。通过中国胶质瘤基因组图谱(CGGA)数据库中下载693例胶质瘤患者的mRNA-seq＿693数据集及相应的临床信息,分析MAGED4 mRNA和HIF1A mRNA表达的相关性,以及二者与患者临床特征指标的关联性。应用氯化钴模拟体外缺氧环境,通过实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)和蛋白免疫印记(WB)实验探讨沉默胶质瘤细胞HIF1A表达对MAGED4表达变化的影响。结果 基于GEPIA数据库的分析结果显示,低级别胶质瘤(LGG)和胶质母细胞瘤(GBM)组织的HIF1A mRNA和MAGED4 mRNA水平均高于正常脑组织,差异有统计学意义(P <0.05)。基于CGGA数据库的分析结果显示,MAGED4 mRNA表达水平与HIF1A mRNA表达水平呈正相关(...     

脑胶质瘤中hTERT和PCNA的表达及意义

目的 探讨脑胶质瘤中人端粒酶逆转录酶（hTERT）和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达特征及其意义。方法 用原位杂交方法检测75例脑胶质瘤患者,和4例脑外伤患者脑组织标本中hTERT的表达;用免疫组化SABC法检测PCNA表达。结果 75例胶质瘤患者脑组织标本中hTERT阳性表达40例,4例正常脑外伤患者脑组织中hTERT表达均为阴性。hTERT表达与胶质瘤分级呈正相关。胶质瘤中PCNA阳性表达31例,其中hTERT阳性21例、阴性10例。hTERT阳性组与阴性组之间PCNA阳性细胞数差异有统计学意义（P〈0．01）。结论 hTERT阳性表达率与胶质瘤病理分级和PCNA阳性表达率呈正相关。hTERT可能通过影响PCNA的表达参与脑胶质细胞瘤的发生、发展过程。     

解旋酶RECQ1和细胞核相关抗原Ki-67在脑胶质瘤组织中的表达及相关性

目的分析解旋酶RECQ1和细胞核相关抗原Ki-67在脑胶质瘤组织中的表达及其相关性。方法选取该院神经外科收治的脑胶质瘤手术治疗患者80例,根据病理学分级分为Ⅰ~Ⅱ级44例,Ⅲ~Ⅳ级36例,另外选取正常脑组织20例,利用免疫组化法检测RECQ1、Ki-67的表达情况,计算RECQ1、Ki-67表达的相关性。结果 1RECQ1、Ki-67在正常脑组织中表达呈阴性,在胶质瘤组织表达呈阳性;RECQ1、Ki-67在Ⅰ~Ⅱ级胶质瘤组织中多为低表达,在Ⅲ~Ⅳ级胶质瘤组织中多为高表达;2RECQ1在正常脑组织中无表达,Ⅰ~Ⅱ级胶质瘤组织RECQ1表达率与Ⅲ~Ⅳ级胶质瘤组织比较明显降低(P0.05);3Ki-67在正常脑组织组织中无表达,Ⅰ~Ⅱ级胶质瘤组织RECQ1表达率为75%,与Ⅲ~Ⅳ级胶质瘤组织比较明显降低(P0.05);4胶质瘤组织中RECQ1和Ki-67表达均为阳性的有57例(71.3%),均为阴性的有14例(17.5%)。RECQ1阳性但Ki-67阴性的有4例(5%),RECQ1阴性但Ki-67阳性的有5例(6.2%),RECQ1和Ki-67表达呈正相关(r=0.768,P0.01)。结论 RECQ1和Ki-67的表达随着脑胶质瘤组织恶性程度的增高而升高,且两者正相关。     

脑胶质瘤组织中BDNF和TrkB表达及临床意义

目的探讨脑源性神经营养因子（BDNF）及其受体酪氨酸激酶B（TrkB）在人脑胶质瘤发生、发展中的作用。方法选择脑胶质瘤组织标本48份（胶质瘤组）,正常脑组织48份（正常组）,采用免疫组化法检测两组BD-NF和TrkB蛋白表达,RT-PCR法检测BDNF和TrkBmRNA相对表达量,并分析BDNF和TrkB蛋白、mRNA与脑胶质瘤临床病理参数的关系,采用Spearman等级相关分析法分析BDNF、TrkB蛋白和BDNF、TrkBmRNA的相关性。结果胶质瘤组及正常组BDNF蛋白阳性率分别为77．1％．41．7％,TrkB蛋白的阳性率分别为81．2％、54．2％,两组比较P均〈0．05;胶质瘤组及正常组BDNFmRNA的相对表达量分别为0．76±0．15、0．48±0．07,TrkBmRNA的相对表达量分别为0．82±0．09、0．53±0．10,两组比较P均〈0．05。BDNF和TrkB蛋白、mRNA与脑胶质瘤病理分级相关,而与性别、年龄无关。BDNF、TrkB蛋白和BDNF、TrkBmRNA呈正相关。结论BDNF和TrkB在胶质瘤的发生、发展过程中可能起重要作用。     

E-cadherin和PCNA在脑胶质瘤中的表达及关系

采用免疫组织化学方法检测51例脑胶质瘤患者术后存档的石蜡切片组织中上皮钙粘附素(E—cadherin)、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况。结果显示，74．51％(38／51)的脑胶质瘤患者E—cadherin表达减弱，25．49％(13／51)的患者E—cadherin表达正常；68．63％(35／51)的患者PCNA呈高表达，31．37％(16／51)的患者PCNA呈低表达。二者表达有相关性(P＜0．05)。认为E—cadherin表达正常对脑胶质瘤细胞增殖有抑制作用，E—cadherin的表达减弱后细胞增殖能力增加；E—cadherin对脑胶质瘤细胞增殖的抑制作用是不完全的。     

Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1 mRNA在神经胶质瘤中表达及临床意义

目的探讨Kelch样环氧氯丙烷(ECH)相关蛋白(Keap)1 mRNA在神经胶质瘤中的表达及意义。方法采用荧光实时定量RT-PCR方法检测43例神经胶质瘤组织和31例正常脑组织中Keap1 mRNA表达,分析与临床特征的相关性。结果神经胶质瘤组织中Keap1 mRNA表达量为(0.59±0.64),显著低于对照组(1.09±0.93;t=2.57,P=0.01)。高级别神经胶质瘤(Ⅲ和Ⅳ级)中Keap1 mRNA表达量为(0.37±0.32),显著低于低级别组(t=2.20,P=0.04)。Keap1 mRNA表达水平与神经胶质瘤患者年龄和性别无明显相关性。结论 Keap1 mRNA的表达下调可能与神经胶质瘤发病有关。     

脑胶质瘤组织中MCM5、Ki-67的表达及临床意义

目的探讨微小染色体维持蛋白5（MCM5）、细胞增殖相关核蛋白（Ki-67）在脑胶质瘤发生、发展中的意义。方法选择手术切除的脑胶质瘤组织44份（肿瘤组）和正常脑组织6份（正常组）,采用免疫组化法检测两组MCM5、Ki-67表达情况[以标记指数（LI）表示],用Spearman等级相关分析法分析两指标问及与肿瘤组临床病理特征的相关性。结果肿瘤组、正常组MCM5的LI分别为12．964-8．49、0,P〈0．05;Ki-67的u分别为10．09±7．07、0,P〈0．0．5。MCM5、Ki-67阳性表达与脑胶质瘤恶性程度密切相关;MCM5与Ki-67表达呈正相关,在不同分级肿瘤中MCM5表达均显著高于Ki-67。结论MCM5、Ki-67高表达在脑胶质瘤发生、发展中起重要作用;MCM5反映肿瘤细胞的增殖状态更为灵敏。     

老年脑胶质瘤患者血清miR-195水平及临床意义

目的探讨老年脑胶质瘤患者血清miR-195水平及临床意义。方法选择老年脑胶质瘤患者80例作为脑胶质瘤组,同期健康体检者80例作为对照组。采用实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定血清miR-195水平。结果脑胶质瘤组血清miR-195水平明显低于对照组(P0.05)。脑胶质瘤患者术后血清miR-195水平明显高于术前(P0.05)。脑胶质瘤患者血清miR-195水平与脑胶质瘤的病理分级有关(P0.05),与年龄、性别、原发灶直径无关(P0.05),病理分级Ⅲ～Ⅳ级患者血清miR-195水平明显低于Ⅰ～Ⅱ级患者(P0.05)。结论老年脑胶质瘤患者血清miR-195水平降低,血清miR-195水平与老年脑胶质瘤患者治疗效果、恶性程度有关,可作为临床治疗效果、恶性程度和预后评估的生物学标志物。     

YAP和TAZ在老年脑胶质瘤中的表达及临床意义

目的探讨Yes相关蛋白(YAP)和转录辅助激活蛋白(TAZ)在老年人脑胶质瘤组织中的表达及其与临床病理参数之间的相关性。方法收集52例手术切除的老年脑胶质瘤组织及12例正常脑组织,运用免疫组化技术检测YAP和TAZ蛋白表达情况,分析YAP和TAZ蛋白表达状态与脑胶质瘤组织学分级的相关性。结果脑胶质瘤组织中YAP蛋白的阳性表达率显著高于对应的正常脑组织;YAP蛋白高表达与高组织学分级(Ⅲ+Ⅳ)显著相关(P0.05);TAZ蛋白在脑胶质瘤组织中的阳性表达率显著高于正常脑组织(P0.05);TAZ蛋白高表达也与高组织学分级(Ⅲ+Ⅳ)显著相关(P0.05)。结论脑胶质瘤组织中YAP和TAZ高表达且与恶性临床病理参数相关,YAP和TAZ异常表达和核内蓄积可能是促进肿瘤进展的重要因素。     

人脑胶质瘤巢蛋白的表达及临床意义

采用间接免疫荧光染色法,应用流式细胞术检测35例标本中巢蛋白的含量,其中正常脑组织3例,1级7例,Ⅱ级9例,Ⅲ级7例,Ⅳ级6例。瘤周围组织3例,结果显示：巢蛋白的表达与胶质瘤的恶性程度密切相关,与性别,年龄,肿瘤部位,瘤体大小等因素无关,瘤周围组织巢蛋白的含量介于肿瘤组织与正常脑组织之间。认为巢蛋白的表达对胶质瘤的诊断有重要价值。     

骨肉瘤组织中RASSF1A、Cyclin D1蛋白表达及意义

目的探讨Ras相关区域家族1A（RASSF1A）、细胞周期素（Cyclin）D1蛋白在骨肉瘤发生、发展中的作用。方法采用免疫组化SP法检测RASSF1A、Cyclln D1蛋白在46例骨肉瘤组织（骨肉瘤组）及20例骨软骨瘤组织（对照组）中的表达。结果骨肉瘤组RASSF1A蛋白的阳性率（45．70％）显著低于对照组（95．00％）,P〈0．01.Cyclin D1蛋白的阳性率（63．00％）明显高于对照组（25．00％）,P〈0．01。RASSF1A、Cyclin D1表达呈负相关（r=-0．383,P=0．009）。骨肉瘤组低分化组织RASSF1A的阳性率明显高于高分化组织（P=0．009）。结论RASSF1A低表达与Cyclin D1高表达可促进骨肉瘤的发生发展,二者协同作用;二者联合检测能为骨肉瘤的早期临床诊断和治疗提供有利的生物学信息。     

肺癌组织中Atrogin-1基因mRNA表达及其临床意义

目的 研究肺癌组织中Atrogin-1基因mRNA表达及其与临床病理参数的关系.方法 用PCR技术和免疫组化技术检测60例肺癌患者癌组织和癌旁正常肺组织的Atrogin-1基因mRNA及其蛋白表达.结果 肺癌组织中Atrogin-1基因mRNA表达及Atrogin-1蛋白表达观显高于癌旁正常肺组织(P均<0.01).临床病理参数分析显示,Atrogin-1基因mRNA表达与结核病史、淋巴结转移、肿瘤体积、肿瘤分期、体质量下降和血清白蛋白有关(P均<0.05);Atrogin-1蛋白表达与淋巴结转移、家族史、肿瘤体积、肿瘤分期、体质量下降和血清白蛋白有关(P均<0.05).结论 Atrogin-1基因在肺癌发生发展中起重要作用,其对监测患者病情进展、转移潜能及估计预后有临床价值.     

燃煤污染型砷中毒患者DNA甲基转移酶1 mRNA的表达及临床意义

目的 了解DNA甲基转移酶1(DNMT1)Mrna在燃煤污染型地方性砷中毒(简称地砷病)患者中的转录及表达情况,探讨其在地砷病发生、发展乃至癌变中的作用.方法 2008年,在贵州省兴仁县交乐乡燃煤污染型地砷病病区,按"地方性砷中毒诊断标准"选择68例地砷病患者(轻度24例、中度28例,重度16例),其中有40例经过皮肤病理学诊断,分为一般病变组(20例)、癌前病变组(14例)及癌变组(6例).在距病区约12 km的非砷暴露村大果朵村.选择23例居民作为对照组.在知情同意的原则下,采集上述被调查者的外周血,采用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测血中DNMT1 Mrna的表达.另收集自愿接受手术治疗的61例地砷病患者皮肤组织标本(一般病变34例、痛前病变21例,癌变6例)和15例正常皮肤组织标本,采用免疫组织化学法检测地砷病患者皮肤及对照皮肤组织中DNMTl蛋白的表达.结果 轻、中、重度地砷病患者外周血DNMT1 Mrna表达分别为0.221 83±0.595 09、0.246 11±0.509 79和0.389 27±0.411 33,轻、中度患者的DNMT1 Mrna表达量明显低于对照组(0.695 95±0.463 98,P均<0.01);一般病变组、癌前病变组和癌变组患者外周血中DNMT1 Mrna表达分别为0.320 64±0.547 46、0.313 09±0.529 13和0.159 07±0.342 56,均低于对照组(0.695 95±0.463 98,P均<0.05).一般病变组、癌前病变组以及癌变组皮肤DNMT1蛋白阳性表达率分别为88.24%(30/34)、100.00%(21/21)和100.00%(6/6),与对照组[0(0/15)]比较表达增强(P均<0.01),并随患者皮肤损害程度加重而逐渐增强(r=0.740,P<0.01).结论 DNMT1参与了砷中毒的发生发展,其蛋白表达增强是砷中毒发生的早期事件,DNMT1有望成为砷中毒诊疗的新靶点.     

重症手足口病患儿血清免疫水平的变化情况及其临床意义研究

目的探讨重症手足口病患儿血清免疫水平的变化情况,并分析其临床意义。方法选择手足口病患儿85例根据病情分为重症组45例和普通组40例;另选择健康体检儿童30名为对照组。检测三组血清免疫球蛋白水平以及血清细胞因子水平,分析重症手足口病患儿血清免疫水平的变化情况以及临床意义。结果重症组及普通组患儿血清免疫球蛋白M(Ig M)、血清免疫球蛋白G(Ig G)以及血清免疫球蛋白A(Ig A)水平均显著低于对照组(P0.01);且重症组Ig M及Ig A水平也显著低于普通组(P0.01)。重症组及普通组患儿血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)水平均显著高于对照组(P0.01);且重症组IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-10水平也显著高于普通组(P0.01)。结论重症手足口病患儿血清细胞因子水平显著升高,说明病毒进入机体后引起了强烈的炎症反应以及抗炎反应;患儿免疫球蛋白水平下降,说明重症手足口病机体免疫功能存在紊乱。检测重症手足口病患儿血清免疫水平对临床的诊断与治疗有重要的意义。     

TLR4激动上调内皮细胞氧化低密度脂蛋白受体LOX-1表达

目的近年研究表明介导先天免疫反应的受体Toll样受体4(TLR4)参与了动脉硬化的发生发展。业已证明氧化低密度脂蛋白受体LOX-1介导内皮细胞活化和功能失调，激发炎症过程，在动脉粥样硬化的发生和发展中起着极为重要作用。本研究观察TLR4激动是否调节内皮细胞LOX-1表达。方法应用脂多糖(LPS)刺激体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)24h。采用RT—PCR和流式细胞术分别检测TLR4、LOX-1 mRNA和蛋白表达水平。为了观察转录因子NF—kB在调节LOX-1表达中的作用，应用NF-kB特异性抑制剂咖啡酸苯乙酯(CAPE)预处理细胞，然后以LPS刺激，检测LOX-1 mRNA和蛋白变化。结果LPS(10～1000ng／mL)上调HUVECs TLR4和LOX-1 mRNA表达，LPS(1000ng／mL)上调TLR4和LOX-1蛋白表达，CAPE(20μg／mL)可抑制LPS介导的LOX-1表达上调。结论TLR4／NF-kB信号途径可能通过上调内皮细胞LOX-1表达参与动脉粥样硬化的发生及发展。     

胃癌组织中KAl1、nm23及P53的表达及其临床意义

目的探讨正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及癌组织中KAI1、nm23及P53蛋白的表达.方法应用SP法免疫组化检测22例正常胃黏膜,65例不典型增生胃黏膜及74例胃癌组织中的KAI1、nm23及P53蛋白的表达.结果正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌组织中,KAI1和nm23阳性率呈降低趋势,组间差异性有统计学意义(x2=20.885,P＜0.001;x2=29.133,P＜0.05);P53蛋白阳性表达率呈增加趋势,组间差异性有统计学意义(x2=21.954,P＜0.001).Fisher精确概率检验显示在胃癌组中不同的浸润深度、有无淋巴结转移和脉管侵犯组内KAI1、nm23及P53组阳性表达率的差异性有统计学意义(x2=20.885,P＜0.001;x2=29.133,P＜0.05;x2=21.954,P＜0.001);而在年龄、性别组间的差异性无统计学意义.Spearman等级相关分析显示KAI1与nm23表达呈正相关(r=0.859,P＜0.05);KAI1与P53表达呈负相关(r=-0.859,P＜0.05),nm23与P53表达呈负相关(r=-0.874,P＜0.05).结论抑癌基因KAI1与nm23的缺失以及P53蛋白的过表达可能是胃癌发生、发展及浸润和转移的重要原因之一.     

MMP-9、TIMP-1在胰腺癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨胰腺癌患者组织中MMP-9、TIMP-1的表达及其相互关系,分析其与临床及转移预后的关系.方法:免疫组织化学SP法检测63例胰腺癌、11例慢性胰腺炎和6例正常胰腺组织中MMP-9、TIMP-1的表达.结果:胰腺癌组织中MMP-9表达明显高于慢性胰腺炎和正常胰腺组织(58.7% vs 18.1%,0.0%;均P<0.05).TIMP-1在胰腺癌的表达低于正常胰腺组织(46.0% vs 100.0%,P<0.05).MMP-9和TIMP-1在胰腺癌组织中的表达与性别、年龄、组织学分级无关,而与患者的淋巴结转移、远处转移情况有关(P<0.05).结论:MMP-9、TIMP-1在胰腺癌组织中的表达变化可能与胰腺癌转移相关.     

原发性胆囊癌组织中脆性组氨酸三联体基因和Ki-67的表达及临床意义

目的:探讨脆性组氨酸三联体(FHIT)基因和Ki-67抗原在原发性胆囊癌、胆囊腺瘤和慢性胆囊炎组织中的表达情况.方法:应用免疫组织化学S-P法,检测51例原发性胆囊癌、15例胆囊腺瘤和12例慢性胆囊炎组织中FHIT和Ki-67的表达情况,并分析其与胆囊癌临床病理因素的关系.结果:胆囊癌组中FHIT阳性率明显低于胆囊腺瘤和慢性胆囊炎组(47.1%vs66.7%,91.7%,P<0.01),而Ki-67阳性率明显高于胆囊腺瘤和慢性胆囊炎组(82.4%vs20.0%,0,P<0.01).FHIT表达缺失不仅与胆囊癌的高分级(18.8%vs56.5%,66.7%,P=0.02)、淋巴结或远处转移(33.3%vs66.7%,P=0.019)明显相关,而且与术后生存时间减少关系密切(31.2%vs77.8%,P=0.041).Ki-67表达与胆囊癌的高分级(58.3%vs87.0%,93.8%,P=0.039)和淋巴结或远处转移(33.3%vs66.7%,P=0.037)明显相关.FHIT与Ki-67表达呈负相关(r=-0.285,P=0.043).结论:FHIT基因是胆囊癌的一个候选抑癌基因.FHIT和Ki-67在胆囊癌的发生和演化中均起着重要作用,联合检测FHIT和Ki-67的表达情况有助于临床评估胆囊癌的生物学行为和判断预后.