模拟失重对心肌细胞间缝隙连接蛋白CX43表达及分布的影响

目的观察模拟失重大鼠心肌细胞间缝隙连接蛋白CX43表达量及分布的变化 ,探讨该状态下易于发生心律失常的部分机制。方法将成年雄性Wistar大鼠 1 6只 ,随机分为正常对照组及尾部悬吊 30°模拟失重 2周组 ,应用免疫组化、WesternBlot、电子透射电镜检测大鼠心肌组织间连接蛋白CX43的表达、分布变化及缝隙连接超微结构的改变。结果与对照组相比 ,模拟失重组CX43表达量明显减少 (P <0 .0 5 ) ,并出现分布紊乱 :横向侧缝连接占总连接比例增加 (P <0 .0 5 ) ,电镜扫描显示 ,部分缝隙连接间隙消失。结论模拟失重可引起大鼠心肌间CX43表达减少及分布紊乱 ,从而可能改变心肌细胞间传导速度及途径 ,易于出现传导阻滞及折返 ,诱发心律失常。     

尾吊大鼠心肌组织局部肾素-血管紧张素系统的表达变化

目的 观察模拟失重对大鼠心肌组织局部肾素-血管紧张素系统（renin-angiotensin system,RAS）主要成份基因和蛋白表达的影响。方法 采用尾吊模拟失重影响,应用反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）和western印迹分析技术分别检测心肌组织基因和蛋白表达。结果 尾吊1周后,心肌组织血管紧张素原（angiotensinogen,AGT）、血管紧张素转化酶（angiotensin converting enzyme,ACE）、血管紧张素ⅡⅠ型受体1a亚型（AT1a）和1b亚型（AT1b）的基因和蛋白表达均无明显变化。尾吊4周后,AGTmRNA表达及AGT蛋白高分子量条带表达均显著增加（P〈0．05）,AGT蛋白低分子量条带表达却无明显改变;AT1a的mRNA表达显著增高（P〈0．05）,但其蛋白表达却没有明显变化。结论 4周尾吊后,大鼠心肌组织局部RAS主要成份表达增强,可能与失重／模拟失重后心肌纤维化程度增高有关。     

模拟失重对大鼠心肌组织细胞因子基因表达谱的影响

目的 研究模拟失重对大鼠心肌组织中部分细胞因子基因表达谱的影响,探讨模拟失重条件下心脏结构/功能可能发生的变化机制.方法 将成年雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(Con)及尾部悬吊模拟失重组(SUS),应用包含96种基因的细胞因子基因芯片检测各组细胞因子表达水平,选取部分表达变化细胞基因,应用Real time-PCR给予验证.结果与Con组相比,模拟失重可导致心肌组织中17种细胞因子基因表达差异超出2倍,5种(IFNA4、IL-15、IL-1b、LT-b、FGF7)被上调,12种(IGF-1、IGF-II、FGF5、VEGF-D、VEGF-C、IFN r、IL-11、IL-12B、IL-13、IL-17、IL-18、CD40L)被下调.其中,生长因子呈现较普遍下调趋势,炎性类细胞因子表达水平变化不一.结论 模拟失重2 wk可导致心肌组织中细胞因子网络调控平衡偏移,促生长性、保护性细胞因子普遍下调,而致病性、炎性细胞因子部分明显上调,其可能是失重/模拟失重条件下心肌组织功能结构重塑的重要调控机制.     

模拟失重条件下大鼠心室肌Beclin-1和LC3的表达变化

目的探讨模拟失重大鼠心室肌自噬相关基因Beclin-1和微管相关蛋白轻链3(LC3)的表达变化。方法雄性SD大鼠12只,随机分为对照组和模拟失重组。模拟失重4周后取心室肌组织,采用RT-PCR和Western Blot方法测定Beclin-1和LC3 mRNA及蛋白表达的变化。结果与对照组相比,模拟失重4周后大鼠心室肌Beclin-1和LC3 mRNA及蛋白表达均显著增强(P0.05)。结论模拟失重可诱导大鼠心室肌自噬相关基因Beclin-1和LC3的高表达,提示模拟失重可能引起了心室肌自噬的激活。     

模拟失重大鼠腹主动脉内皮依赖性舒张反应变化与氧化应激水平有关

目的探讨模拟失重大鼠腹主动脉内皮依赖性舒张反应的变化与氧化应激水平的关系。方法采用3周尾吊大鼠模型模拟失重状态,通过血管环张力实验检测内皮依赖性血管舒张反应,蛋白印迹技术以及DHE荧光探针技术观察悬吊(SUS)大鼠和正常对照(Con)大鼠动脉血管NOX4、p22phox蛋白表达及氧化应激水平变化。结果尾吊3周后,大鼠腹主动脉内皮依赖性舒张反应减弱,NADPH氧化酶抑制剂Apocynin以及超氧化物歧化酶SOD能够部分恢复舒张反应。SUS组腹主动脉活性氧簇(ROS)水平较Con组增高(P<0.05);腹主动脉p22phox蛋白表达悬吊组较对照组增高(P<0.05);NOX4蛋白表达两组间无明显变化。结论氧化应激水平增高可能与模拟失重所致腹主动脉内皮依赖性舒张反应减弱有关。     

模拟失重大鼠动脉血管紧张素受体基因表达的研究

目的：探讨模拟失重下大鼠不同部位动脉血管紧张素受体mRNA表达是否发生变化。方法：大鼠被随机分为模拟失重组（SUS）与同步对照组（CON），采用尾部悬吊大鼠模型模拟失重影响。用逆转录-聚合酶链式反庆（RT-PCR）技术观察比较模拟失重下大鼠不同部位动脉血管紧张素两型受体基因表达的变化。结果：大鼠颈总动脉，腹主动脉及股动脉组织均有血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的AT1a，AT1b及AT2受体mRNA的表达；而基底动脉组织则只有AT1a和AT1bmRNA的表达。模拟失重4周大鼠颈总动脉、腹主动脉、股动脉及基底动脉组织AngⅡ的AT1a、AT1b和AT2受体mRNA的表达，较对照大鼠均无显著变化。结论：模拟失重引起大鼠动脉血管结构与功能的变化可能不是通过血管紧张素受体的变化实现的。     

模拟失重大鼠动脉组织血管紧张素原及血管紧张素Ⅱ1型受体蛋白表达的变化

目的 观察血管紧张素原(AGT)及血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1)蛋白表达改变是否参与模拟失重所致大鼠不同部位动脉血管的分化性适应过程。方法 以尾部悬吊大鼠模型模拟失重对动脉血管的影响。用Western印迹分析比较4周模拟失重(SUS)组与同步对照(CON)组大鼠基底动脉、颈总动脉、股动脉和肠系膜动脉组织AGT及AT1的蛋白表达变化。结果 与CON组相比，SUS组大鼠基底动脉组织AGT的表达显著增高(P＜0．05)，在颈总动脉组织呈增高趋势，而在股动脉与肠系膜动脉组织均呈降低趋势，但差别皆未达到显著水平。与CON组相比，SUS组大鼠基底动脉组织AT1的表达显著增高(P＜0．05)，在颈总动脉组织未见显著变化，而在股动脉和肠系膜动脉组织则均显著降低(P＜0．05)。结论 模拟失重可引起大鼠脑动脉与后身动脉血管组织的AGT和AT1蛋白表达发生增高与降低的分化性改变，提示血管组织的局部肾素—血管紧张素系统在失重引起的动脉血管分化性适应中可能发挥关键性的调控作用。     

心肌缝隙连接蛋白43在运动预处理不同保护时相表达变化的比较研究

目的:比较大鼠心肌缝隙连接蛋白43(Cx43)mRNA和蛋白在运动预处理(EP)早、晚期保护时相的表达变化。方法:SD大鼠32只随分为对照组(C组)、力竭运动组(EE组)、早期运动预处理+力竭运动组(EEP+EE组)和晚期运动预处理+力竭运动组(LEP+EE组)。在建立EP和EE动物模型基础上,用原位杂交和实时荧光定量PCR方法观察和检测心肌Cx43 mRNA表达,用免疫组织化学和Western免疫印迹方法观察和检测心肌Cx43蛋白表达。结果:与EE组相比,EEP+EE和LEP+EE组心肌Cx43 mRNA和蛋白水平显著升高。与EEP+EE组相比,LEP+EE组心肌Cx43原位杂交信号没有显著变化,Cx43 mRNA表达也没有显著性差异。与EEP+EE组相比,LEP+EE组心肌Cx43免疫阳性反应无明显变化,Cx43蛋白表达也没有显著性差异。结论:运动预处理早、晚期保护时相分别促进了心肌Cx43 mRNA和蛋白的表达,但在这两个保护时相之间,Cx43 mRNA和蛋白的表达没有明显差异,表明心肌Cx43在介导运动预处理早、晚期心肌保护效应中的表达变化规律和运动预处理早、晚期保护时相的变化具有同步性。     

模拟微重力效应对骨细胞Wnt/β-catenin通路的影响

目的探究模拟微重力效应对骨细胞Wnt/β-catenin信号通路活性的影响,以阐明微重力导致骨质丢失的发生机制。方法将骨细胞MLO-Y4分为两组:模拟微重力组和静置对照组。细胞旋转培养以模拟微重力效应,利用RT-PCR和Western blot法检测细胞Wnt/β-catenin信号通路相关组分的基因和蛋白表达水平。结果 RT-PCR结果显示,模拟微重力组的Cyclin D1和Lef-1 mRNA水平显著低于对照组(P0.05),CX43和抑制剂SOST的mRNA水平显著高于对照组(P0.05),而两组的Wnt3a、Lrp5和β-catenin的mRNA水平无显著性差异。Western blot结果显示,模拟微重力组的β-catenin和Cyclin D1的蛋白表达水平显著低于对照组(P0.05),Lef-1和抑制剂SOST蛋白质的表达水平显著高于对照组(P0.05),而两组Wnt3a、Lrp5/6和CX43的蛋白表达水平无显著性差异。结论模拟微重力效应下骨细胞中Wnt/β-catenin信号通路的活性有所下降。     

低压低氧环境对大鼠心肌肌球蛋白重链表达的影响

本研究拟建立模拟高原低压低氧大鼠模型,通过比较低压低氧组和正常对照组大鼠心肌肌球蛋白重链亚型蛋白表达的差异,初步探讨MHC亚型在高原低压低氧条件下的改变及其机制。清洁级SD大鼠20只,体重（180±20）g,将其随机分成2组：常氧组和模拟高原6000m低压低氧组,每组10只。记录各组大鼠心脏指数。制作各组心肌组织切片,常规HE染色观察心肌细胞形态改变。免疫荧光法检测各组心肌肌球蛋白重链α-MHC和β-MHC两种亚型蛋白的表达变化。结果常氧组和低压低氧组大鼠心脏指数差异不具有统计学意义（P＆gt;0.05）。HE染色可见低压低氧组大鼠心肌细胞水肿,心肌间质内小血管及毛细血管明显扩张充血。低压低氧组大鼠心肌中MHC蛋白质表达水平异常改变,即α-MHC蛋白表达量增高而β-MHC蛋白表达量下降。这一结果表明：模拟高原6000m高原低压低氧可致大鼠心肌细胞形态异常改变,同时可刺激心肌MHC亚型表达出现“由快到慢”的趋势,提示MHC表达异常参与了心脏重塑,可能是高原低压低氧致心力衰竭发生、发展的基础。     

睡眠剥夺对大鼠心肌超微结构损伤效应的研究

 目的 探讨睡眠剥夺(Sleep Deprivation,SD) 对大鼠心肌超微结构的影响.方法 实验大鼠随机分为睡眠剥夺2 d组(SD 2 d)、睡眠剥夺4 d组(SD 4 d)、睡眠剥夺6 d组(SD 6 d)、大平台对照组、正常对照组共5 组,利用"小平台水环境法"(flower pot)建立大鼠睡眠剥夺模型,采用光镜及透射电镜观察睡眠剥夺后心肌形态学改变.结果 睡眠剥夺后心肌细胞核染色质损伤 ,肌浆网、线粒体结构改变,部分心肌纤维溶解、坏死,闰盘结构破坏,心肌细胞脂质过氧化.心肌间质水肿、出血、炎性细胞浸润.结论 睡眠剥夺能够引起大鼠心肌显著的损伤性形态学改变.     

长期尾部悬吊大鼠心肌超微结构的变化(英文)

观察了尾部悬吊40d和120d大鼠心肌超微结构的变化。结果显示，40d悬吊大鼠心肌细胞浆内糖原增加；心肌毛细血管内皮细胞生成了许多凸出物伸向管腔内。这些改变与空间实验室及宇宙号生物卫星搭载航天大鼠心肌超微结构变化基本一致，而与以往在地面用应激程度严重的“禁动”模型所观察的变化有所不同。此外，我们还发现120d悬吊大鼠心肌细胞内脂褐素增加，这在以往航天及地面模拟研究中均未见报道，可能是长期失重或模拟失重下心肌超微结构变化的重要特点之一。上述形态学改变可归结为两方面的问题，即心肌糖酵解过程受到抑制和心肌组织的降解过程增强。从而支持长期模拟失重大鼠的心脏处于低动力状态的假说。     

模拟微重力对猕猴肺组织JNK／c－Jun和c－Fos信号通路的影响

目的：探讨模拟微重力对猕猴肺组织结构和JNK／c－Jun和c－Fos信号通路的影响。方法在特殊装置上采用猕猴头低位－10°模型模拟微重力,15只猕猴分为3组,每组5只：对照组（ A组）、模拟微重力组（ B组）、模拟微重力后恢复组（ C组）。 HE染色观察各组猕猴肺组织大体结构,Western blotting检测肺组织JNK、c －Jun、c－Fos及磷酸化表达水平。结果 HE显示,与A组相比,B组和C组猕猴肺组织可见肺泡间隔不同程度的增宽,部分肺泡融合,肺间质内可见炎细胞浸润。 C组病理改变较B组稍减轻。 Western blotting 结果提示,与A组相比,B组和C组JNK、c－Fos和p－c－Fos及p－c－Jun表达增多。结论长期处于微重力状态可引起猕猴肺组织损伤,肺组织中JNK、c－Fos磷酸化和c－Jun磷酸化表达增加,微重力激活JNK／c－Jun和c－Fos信号通路调控其下游特定基因的表达可能是肺损害的机制之一。     

模拟失重对大鼠脊髓小脑内γ-氨基丁酸免疫反应性的影响

目的 观察模拟失重对大鼠脊髓小脑中间区Ⅲ、Ⅳ小叶皮层和小脑间位核内γ-氨基丁酸(GABA)免疫反应性的影响.方法 将大鼠按随机配对原则分为2组:模拟失重14 d组及正常对照组,每组各10只.采用大鼠尾部悬吊法建立模拟失重模型,用免疫组织化学技术观察大鼠脊髓小脑中间区Ⅲ、Ⅳ小叶皮层和小脑间位核内GABA免疫阳性神经元数量.结果 正常大鼠脊髓小脑中间区Ⅲ、Ⅳ小叶皮层的3个细胞层内以及问位核均有GABA阳性神经元存在.模拟失重14 d后大鼠脊髓小脑中间区Ⅲ、Ⅳ小叶分子层内GABA阳性神经元数量明显减少(t=3.488,P<0.05),而浦肯野细胞层、颗粒层及间位核内GABA阳性神经元数量没有明显变化(P>0.05).结论 以上结果提示模拟失重后脊髓小脑中间区Ⅲ、Ⅳ小叶内神经环路的活动发生了改变,进一步证实了模拟失重可以导致肌肉本体感觉传人信息在高位中枢的分析整合过程中发生了变化.     

模拟失重对大鼠小肠黏膜紧密连接蛋白表达的影响

目的 研究尾吊模拟失重大鼠小肠黏膜紧密连接(TJ)蛋白的表达.方法 24只Wistar大鼠随机分为3组:对照组(Con),悬吊14 d组(TS-14d)和悬吊21 d组(TS-21 d).测定空肠Ti蛋白Occludin,Zonula Occludens-1(ZO-1)的免疫组化、实时荧光定量表达;透射电镜下观察TJ和...     

模拟微重力条件下植物细胞亚显微结构的研究

目的 研究微重力条件对植物生长发育中细胞亚显微结构的影响。方法 通过微重力仪连续改变方向来获得模拟微重力,对模拟微重力条件下生长的植物进行了细胞学、生理学实验。结果电镜观察表明：植物细胞在模拟微重力条件下与正常重力条件生长的相比,在细胞壁、叶绿体,线粒体等方面产生变异,细胞出现了壁质分离现象,部分细胞壁扭曲、收缩变形,部分叶绿体片层结构出现了弯曲、排列疏松,内含物溢出,部分线粒体出现了边缘模糊及嵴消失的情况,同时细胞内淀粉粒明显增多。结论 模拟微重力对植物的正常生长起到了一定协迫作用,使植物细胞发生了变异。