凝集生长毛乳头细胞膜联蛋白A2的表达特性研究

目的 探讨膜联蛋白A2在毛乳头细胞（DPC）凝集生长中的表达特点。 方法 反转录PCR和Western印迹方法分别在基因和蛋白水平研究膜联蛋白A2在DPC凝集和非凝集生长状态下的表达特点。结果 在DPC凝集性生长状态下,膜联蛋白A2 mRNA表达水平显著高于非凝集生长状态,差异有统计学意义（0.50 ± 0.15比0.35 ± 0.19,t = 8.26,P < 0.05）。在蛋白质水平,膜联蛋白A2表现为相对分子质量为40 000的膜联蛋白A2异构体和分子质量为36 000的膜联蛋白A2两种形式,前者在凝集与非凝集生长的DPC均高表达,后者在凝集生长的DPC表达,在非凝集生长的DPC则不表达。 结论 膜联蛋白A2可能与DPC的凝集生长密切相关。     

脉冲可调染料激光对正常皮肤及血管瘤补体的激活

脉冲可调染料激光(PTDL)主要引起血管内的血红蛋白凝集及组织坏死.为确定PTDL是否能够激活正常皮肤及老年性血管瘤内的补体,作者应用免疫荧光技术研究了补体在血管的沉积情况.     

精子凝集抗体所致男性不育症的中医辨证论治

精子凝集是最普通的精子自身抗体，是造成男性不育的原因之一，笔者依据祖国医学理论时精．予凝集的病因病枳进行了初探并提出了自己的观点，对临床表现进行了概括，分成四型辨证论治，有肾阳不足精子凝集证；肾阴亏损精予凝集证；肝经湿热精子凝集证和肝气郁结精子凝集证。每型对主证、治则、方药和其它疗法作了说明，对自己研制的处方、药物细减、药量进行了介绍，以供同行参考。     

精子凝集抗体所致男性不育症的中医辨证论治

抗精子抗体所致自身免疫反应，可影响生育，在临床实践中已经认识到它的重要性，目前已被广泛重视。其中精子凝集是最普通的精于自身抗体。据报道在男性不育症中约占4-7％有精子凝集，已确认男性不育原因之一。当男性的血液和精浆中存在着精于凝集抗体时，精子会发生头对头、尾对尾或混合凝集现象，即精子凝集抗体。抗精子抗体的滴度越高，精于发生凝集和致使游动精子停止运动的现象越严重。     

毛乳头细胞凝集性生长差异表达基因的筛选及分析

目的 筛选和分析毛乳头细胞凝集性生长状态下差异表达基因。方法 分别提取凝集性生长和非凝集性生长状态下毛乳头细胞中的总RNA,应用SMARTcDNA合成技术和抑制性消减杂交技术分离毛乳头细胞凝集性生长差异表达基因的cDNA片段,并构建消减cDNA文库,通过PCR筛选、cDNA斑点杂交验证、测序和同源性检索对差异表达基因进行分析。结果 成功地构建了毛乳头细胞凝集性生长差异表达cDNA文库。通过对毛乳头细胞凝集性生长状态差异表达基因文库的筛选、克隆,证实毛乳头在体外凝集性生长状态下可以特异表达与细胞同源凝集、生长调控、分化发育及信号转导相关的基因,包括已知基因(如加帽蛋白、palladin,VEGF)、造血干细胞分化相关基因(HSPC011、HSPC016)及1条新基因。结论 毛乳头细胞凝集性生长差异表达基因消减cDNA文库的构建,为进一步筛选和克隆毛乳头细胞凝集性生长相关基因奠定了基础。在凝集性生长状态下,多种基因可能协同作用,参与毛乳头细胞生长调控和功能发挥。     

体外长期培养人毛乳头细胞生长特性

目的：观察人毛乳头细胞体外长期培养的生长特性，为深入阐明毛乳头细胞凝集性生长的分子机制打下基础。方法：采用二步酶消化法分离毛乳头后，于DMEM培养基中培养，观察长期传代培养中毛乳头细胞生长方式的改变，并用计数法绘制不同传代水平细胞的生长曲线。结果：培养中的毛乳头细胞多呈梭形，细胞在融合前出现多层凝集性生长的细胞团，并具有周期性，凝集性生长状态下毛乳头细胞增殖速度加快；凝集性生长随着传代次数增加而减弱，表现为凝集性生长的细胞团数目减少、体积变小。结论：体外培养的人毛乳头细胞具有周期性凝集性生长的特性，凝集性生长的特性可能与其功能密切相关。     

HSPC016基因在凝集性生长人毛乳头细胞的表达

目的 确定造血干细胞相关基因HSPC016的表达与毛乳头细胞凝集性生长的关系。方法 对凝集性生长的人毛乳头细胞、非凝集性生长的人毛乳头细胞和人真皮成纤维细胞分别进行细胞内mRNA原位杂交;用RT-PCR从以上3组细胞总RNA扩增HSPC016基因。结果 原位杂交发现HSPC016基因在凝集性生长的人毛乳头细胞表达,而在非凝集性生长的人毛乳头细胞和人真皮成纤维细胞均不表达;RT-PCR可以从凝集性生长的人毛乳头细胞RNA中扩增到约200bp目的片段,而不能从非凝集性生长人毛乳头细胞和人真皮成纤维细胞中扩增到相应目的片段。结论 HSPC016基因在凝集性生长的人毛乳头细胞特异性表达,可能与毛乳头细胞的分化和功能状态有关。     

梅毒患者血清对HIV明胶颗粒凝集试验的影响

目的了解梅毒患者血清对艾滋病病毒(HIV)明胶颗粒凝集试验(PA)的影响。方法收集用甲苯胺红不加热试剂(TRUST)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试剂(TPPA)确认为梅毒的患者血清225份和性病门诊非梅毒人群血清95份,同时用艾滋病病毒(HIV)明胶颗粒凝集试剂(PA)和两种不同厂家的酶联免疫吸附试剂(ELISA)筛查其艾滋病病毒抗体。结果第1次检测的225份梅毒患者血清中,37份HIV1/2-PA致敏颗粒和非致敏颗粒都凝集;10份HIV1/2-PA非致敏颗粒凝集,致敏颗粒孔未凝集;5份致敏颗粒凝集,呈弱阳性,非致敏颗粒未凝集,其它173份血清HIV1/2-PA检测结果都为阴性。对52份标本进行第2次复检,5份第1次检测致敏颗粒凝集的标本结果均为阴性,非致敏颗粒未凝集;其他标本检测结果与第1次一致。两种ELISA试剂检测结果均为阴性。对照组95份标本HIV1/2抗体检测结果均为阴性。结论梅毒患者血清用PA法检测HIV抗体时有干扰现象。     

凝集性生长和非凝集性生长人毛乳头细胞线粒体的结构及膜电位比较

目的比较凝集性生长和非凝集性生长人毛囊毛乳头细胞(DPC)的线粒体数量、分布、结构和功能特点。方法采用二步酶消化法分离人毛囊毛乳头后,体外培养DPC。利用还原型线粒体特异性荧光探针MitoTrackerRedCM-H2Xros,结合激光扫描共聚焦显微镜和透射电镜观察两种不同生长状态DPC线粒体的分布、数量及结构特征;利用四氯四乙基苯并咪唑基羰花青碘化物(JC-1)检测线粒体膜电位。结果体外培养DPC生长良好;与非凝集性生长DPC相比,凝集性生长DPC线粒体数量较多,整个胞浆内可见,且集中分布在粗面内质网附近,线粒体外形较不规则,嵴较发达,线粒体膜电位明显较高。结论凝集性生长DPC和非凝集性生长DPC的线粒体数量、分布、结构和功能不同,说明两者在能量消耗、细胞代谢及蛋白质合成功能方面存在差异。     

乳胶凝集免疫比浊法检测梅毒抗体试剂的临床应用

目的:对比乳胶凝集免疫比浊法(3TP法)与梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)检测梅毒抗体的效果。方法:对TPPA法检测的血清标本共291例(阳性191例,阴性100例),均采用乳胶凝集免疫比浊法进行平行检测,对检测结果进行统计学分析。结果:291例标本的检测结果提示,乳胶凝集免疫比浊法与TPPA具有极好的一致性(Kappa=0.977,P<0.01)。结论:乳胶凝集免疫比浊法具有高灵敏度、高特异性的特点,适用于自动生化分析仪,操作简便又快速,值得临床推广。     

乳胶凝集法检测脑脊液中新生隐球菌抗原

新生隐球菌是引起隐球菌性脑膜炎的主要病原真菌.传统的检测方法是墨汁染色和真菌培养,两者的阳性率仅有50%左右.自1993年初,我们运用法国生物梅里埃(Biomerieux)公司生产的乳胶凝集(LA)试剂盒(Slidex.Crypto-kit)检测隐球菌抗原,取得了满意效果,现报告如下.     

凝集生长毛乳头细胞分泌性蛋白组的初步分析

【摘要】 目的 了解毛乳头细胞在凝集生长状态下分泌性蛋白组的表达。 方法 以凝集和非凝集生长的毛乳头细胞为研究对象,分别制备分泌性蛋白质,以双向凝胶电泳技术和PDQuest软件分析二者之间的蛋白图谱的差异,通过基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱（MLDI-TOF-MS）鉴定表达差异的蛋白质,通过蛋白质数据库NCBInr检索分析。 结果 建立了重复性好、分辨率高的双向电泳图谱;在凝集生长和非凝集生长的毛乳头细胞分泌性蛋白质中分别检测到（1 134 ± 52）个和（1 078 ± 36）个蛋白点,大多匹配。按照差异量在5倍以上的标准,二者存在差异蛋白质28个,经过MLDI-TOF-MS质谱鉴定出10种差异表达蛋白点,其中8种蛋白质表达上调,分别为Rho GDP分离抑制剂1、细丝蛋白A、胱抑素C、纤维连接蛋白、亲环素A、前胶原C端蛋白酶增强子、组织金属蛋白酶抑制剂、组织金属蛋白酶-2抑制剂。2种蛋白质表达下调,为神经肽h3和基质金属蛋白酶-3金属蛋白酶组织抑制剂-1复合物复合物。 结论 凝集生长和非凝集生长毛乳头细胞差异蛋白主要涉及信号通路、细胞增殖与分化、细胞外基质合成及降解等功能。     

T细胞因子4基因在毛囊毛乳头细胞中的表达

目的 探讨T细胞因子4（TCF4）基因在毛囊毛乳头细胞中的表达。方法 对斑秃患者和正常人头皮组织进行原位杂交检测;对凝集性生长和非凝集性生长的人毛乳头细胞分别进行细胞免疫化学检测和用RT-PCR方法从上述两种细胞的总RNA扩增TCF4基因。结果 组织内mRNA原位杂交证实,TCF4基因在正常头皮组织毛囊毛乳头细胞表达,而在斑秃组织毛囊的毛乳头细胞不表达。细胞免疫化学和RT-PCR发现,TCF4基因在凝集性生长期毛乳头细胞中表达,而在非凝集性生长期毛乳头细胞不表达。结论 TCF4基因在生长期毛乳头细胞中表达,毛囊周期性生长与wnt信号有关。     

凝集素在皮肤病学中的应用

一、概述凝集素(Lectin)又称血凝素(Hemagglutinin),是存在于植物特别是豆科植物种子和某些动物细胞内的一类蛋白质.其发现已近一百年.目前发现的凝集素已约一千种.凝集素的作用包括:凝集细胞,促细胞分裂,激活免疫系统.某些凝集     

阴道念珠菌几种常用检验方法的比较

目的评价几种检验方法诊断阴道念珠菌病的价值。方法同时用盐水湿片法、革兰染色法、乳胶凝集法和SDA及CHROM培养法对临床拟诊的181例阴道分泌物检测进行比较。结果革兰染色法与湿片法比较P<0.05;染色法与凝集法、CHROM法比较P<0.01;凝集法与SDA法以及SDA法与CHROM法比较P>0.05。结论革兰染色法检测念珠菌具有快速、简便、检出率高等特点,如有条件进行念珠菌的培养是非常必要的。     

宫颈炎症感染不同微生物检验方法的效果及其对并发宫颈病变的诊断价值研究

目的探讨宫颈炎症感染不同微生物检验方法的效果及其对并发宫颈病变的诊断价值。方法选取2015年1月至2018年12月三亚市中医院诊治的116例宫颈炎症感染患者为研究对象。取患者适量宫颈分泌物,分别采用培养法、镜检法和凝集法进行检测,对每种方法的检测结果进行统计分析,比较不同检测方法检出宫颈感染的致病菌、阳性率、假菌丝、菌丝、菌孢子比例,并对各种检测方法对于宫颈病变的诊断结果进行探讨。结果培养法、镜检法和凝集法检测宫颈炎症感染阳性率分别为88.8%(103/116)、74.1%(86/116)、69.8%(81/116),培养法检测阳性率显著高于镜检法、凝集法,其差异具有统计学意义(P0.05)。培养法检测假菌丝、菌丝、菌孢子的阳性率均高于镜检法、凝集法,其差异具有统计学意义(P0.05)。3种检测方法中,培养法检测患者中的宫颈病变发生率高于镜检法、凝集法,其差异具有统计学意义(P0.05)。结论培养法、镜检法和凝集法等均可以用于宫颈炎症感染的诊断检查,其中培养法检测的阳性率高于其他检测方法,并对患者并发宫颈病变有一定的预测价值。     

毛乳头细胞分泌性蛋白质组的制备

毛乳头是毛囊的真皮部分,凝集性生长为其特性之一,有诱导毛囊形成和再生的能力［1］。研究证实,凝集性生长的毛乳头细胞（dermal papillae cell,DPC）分泌大量蛋白样因子,形成网络,共同调节其他DPC、外根鞘细胞、内皮细胞和角质形成细胞的增殖［２－３］;这些分泌性蛋白质通过自分泌、旁分泌等途径发挥作用,全面系统研究分泌性蛋白有助于全面认识、分析和解释毛乳头细胞的凝集性生长特性……     

淋球菌外膜Porin Ⅰ蛋白多价抗血清的制备及其临床应用初探

目的制备淋球菌外膜GST-PⅠ融合蛋白多价抗血清,并探讨该多价抗血清与临床泌尿生殖道分泌物标本的结合情况。方法重组的淋球菌外膜GST-PⅠ融合蛋白免疫家兔,获得多价抗血清;并用双向免疫扩散法鉴定家兔多价抗血清的效价。家兔多价抗血清与临床泌尿生殖道分泌物标本的结合采用试管凝集法,出现棉絮状沉淀则为阳性;并把同一标本的试管凝集法结果与淋球菌培养结果相比较,观察两者的阳性符合率。同时以生理盐水和非淋菌性尿道炎患者的泌尿生殖道分泌物标本作为对照。结果成功免疫家兔并获得了PI蛋白多价抗血清,经鉴定多价抗血清的效价达1:8;淋球菌培养阳性的35例分泌物标本中,试管凝集法阳性23例,两方法结果符合率为65.71%。而对照组试管凝集法结果均为阴性。结论淋球菌外膜PI蛋白不仅具有一定的免疫原性,而且其免疫家兔产生的多价抗血清与淋病患者的分泌物标本有良好的结合率,特异性高。有望经纯化、标记后得到一种新的简单快速的淋病诊断试剂盒。     

淋球菌外膜Porin I蛋白多价抗血清的制备及其临床应用初探

目的 制备淋球菌外膜GST-PI融合蛋白多价抗血清,并探讨该多价抗血清与临床泌尿生殖道分泌物标本的结合情况.方法 重组的淋球菌外膜GST-PI融合蛋白免疫家兔,获得多价抗血清;并用双向免疫扩散法鉴定家兔多价抗血清的效价.家兔多价抗血清与临床泌尿生殖道分泌物标本的结合采用试管凝集法,出现棉絮状沉淀则为阳性;并把同一标本的试管凝集法结果与淋球菌培养结果相比较,观察两者的阳性符合率.同时以生理盐水和非淋菌性尿道炎患者的泌尿生殖道分泌物标本作为对照.结果 成功免疫家兔并获得了PI蛋白多价抗血清,经鉴定多价抗血清的效价达1：8;淋球菌培养阳性的35例分泌物标本中,试管凝集法阳性23例,两方法结果符合率为65.71%.而对照组试管凝集法结果均为阴性.结论 淋球菌外膜PI蛋白不仅具有一定的免疫原性,而且其免疫家兔产生的多价抗血清与淋病患者的分泌物标本有良好的结合率,特异性高.有望经纯化、标记后得到一种新的简单快速的淋病诊断试剂盒.     

皮肤冷冻的实验研究

使用液氮喷洒法、封闭式冷探杆接触法和我们最近研制的浸冷式冷探杆接触法进行了家兔皮肤冷冻实验.冷冻过程中利用热电偶温度传感器以及精密测温装置对不同皮层进行了温度测量,绘出了上述3种冷冻方法引起的不同皮肤层的降温速度,冷冻深度和回温情况,指出液氮喷洒和法浸冷式冷探杆接触法的降温速度比封闭式要快得多.在液氮喷洒法冷冻下皮肤的降温曲线出现激烈的起伏,并呈一个陡峭的回温一再降温变化过程,其变化幅度可达100多度,对此现象作了初步讨论:回温曲线提示家兔皮肤冰球的溶解温度不是一个唯一确定的温度点.而是一个小温区,约为-2.5℃~0℃之间.