6-羟基多巴胺诱发帕金森病大鼠模型的制作和评价

目的 向大鼠中脑黑质区注入6-羟基多巴胺(6-OHDA)建立帕金森病(PD)大鼠模型,并从行为学(ethology)及组织病理、生化角度对该模型进行评价.方法 将6-OHDA立体定向微量注入大鼠右侧中脑黑质(SN)区,观察阿朴吗啡(APO)诱发的大鼠旋转行为及黑质细胞形态学变化,测定脑组织液中儿茶酚胺类物质含量及黑质酪氨酸羟化酶的免疫活性.结果 120只大鼠中经APO诱导后有67只(占55.8%)持续转向健侧(旋转圈数＞7r/min),帕金森病大鼠模型复制成功.PD鼠注射侧黑质区多巴胺能神经元数量较对侧明显减少,体积缩小,结构欠清晰.注射侧脑组织液中多巴胺(DA)、3,4-二羟基苯酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)、5-羟色胺(5-HT)含量均低于对侧,注射侧黑质致密部酪氨酸羟化酶(TH)免疫阳性细胞较健侧明显减少.连续观察10个月,PD模型大鼠的异常旋转行为无自发性恢复.结论 用6-OHDA选择性损毁大鼠黑质多巴胺能神经元,可造成与PD患者相似的基本病理变化,建立起可靠而稳定的PD大鼠模型.     

雌激素对PD模型大鼠黑质纹状体通路的保护作用及其机制探讨

目的研究雌激素（Estrogen）对6-羟基多巴（6-OHDA）制备的去卵巢（OVX）帕金森病（PD）模型大鼠黑质纹状体通路的保护作用及其可能机制。方法应用6-OHDA两点注射单侧损毁内侧前脑束（MFB）制备OVXPD模型大鼠,侧脑室给予17-β雌二醇（17-βestradiol,1μg/5μl）,观察大鼠旋转行为、黑质酪氨酸羟化酶（TH）基因表达、黑质铁染色阳性细胞数量和纹状体内多巴胺（DA）及其代谢产物含量的变化。结果雌激素用药组可明显减少阿朴吗啡诱导的PD模型大鼠单侧旋转行为（P〈0.01）。在损毁侧黑质,雌激素用药组TH基因的表达较PD模型组明显增加（P〈0.01）;纹状体DA及其代谢产物亦较PD模型组显著升高（P〈0.01）。黑质铁染色阳性细胞数量较PD模型组明显减少（P〈0.01）。结论雌激素对PD模型大鼠黑质DA能神经元有明显的保护作用,其作用机制可能与降低铁负载有关。     

五子衍宗丸对帕金森病小鼠脑组织中神经营养因子及凋亡相关基因表达的影响

目的 观察五子衍宗丸对帕金森病(PD)小鼠脑内黑质纹状体神经营养因子分泌和脑组织中细胞凋亡相关基因表达的影响。方法 建立神经毒素MPTP诱导的PD小鼠模型，通过行为步态实验、爬杆实验及脑黑质纹状体区酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元的病理学检测，观察五子衍宗丸的治疗效果；采用免疫荧光、RT-qPCR和Western blotting法检测小鼠黑质纹状体中脑源性神经营养因子(BDNF)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、睫状神经营养因子(CNTF)及细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax、caspase-3、caspase-9表达水平的变化。结果 与PD模型组比较，五子衍宗丸治疗可明显减少PD小鼠四肢向前运动的平均摆动时间(P<0.05)和爬杆时间(P<0.001)，增高TH阳性细胞数和TH蛋白表达水平(P<0.05)；五子衍宗丸治疗后，PD小鼠黑质纹状体中BDNF、GDNF蛋白和CNTF及Bcl-2 mRNA表达水平明显增高(P<0.05)，而Bax、caspase-3和caspase-9表达水平明显降低(P<0.05)。结论 五子衍宗丸具有治疗PD的潜力，其...     

运动通过调节纹状体A2AR/D2DR表达改善帕金森病模型大鼠行为功能障碍

目的:揭示纹状体腺苷2A型受体(A2AR)、多巴胺Ⅱ型受体(D2DR)在运动干预改善帕金森病(PD)模型大鼠行为功能障碍中的作用。方法:选用雄性SD大鼠,随机分为假手术组(Control组,n=22)、假手术运动组(Control+Ex组,n=22)、帕金森组(PD组,n=38)和帕金森运动组(PD+Ex组,n=38)。注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)建立偏侧PD大鼠模型,术后24 h对运动组大鼠进行4周跑台运动干预(11 m/min,30 min/day,5 days/week),通过阿扑吗啡(APO)诱导旋转行为和黑质酪氨酸羟化酶(TH)表达鉴定PD大鼠模型可靠性。采用荧光定量PCR和免疫荧光技术检测纹状体A2AR和D2DR基因转录和蛋白表达;通过A2AR拮抗剂SCH联合D2DR激动剂QUIN干预进一步证实PD大鼠行为功能改善与纹状体A2AR-D2DR表达之间的相关性。结果:注射6-OHDA大鼠健侧旋转圈数与损毁侧旋转圈数差值>100 r/30 min,黑质TH表达较Control组降低(P<0.001),符合PD大鼠模型标准。4周跑台运动干预后,PD大鼠A2AR及D...     

知母皂苷对衰老大鼠脑乙酰胆碱受体的调节作用

目的：研究知母皂苷（SAaB)对衰老大鼠脑乙酰胆碱受体的影响。方法：采用放射受体配体结合实验,测定大鼠脑皮层M,N受体的密度及亲和力。结果：与正常成年大鼠比较,衰老大鼠脑皮层M受体的密度和亲和力我明显变化,而脑N受体的密度显减少;SAaB能剂量依赖性地增加衰老大鼠脑N受体的数目,对MC受体无明显影响。结论;SAaB对衰老大鼠脑N受体有上调作用。     

TH基因修饰的永生化神经干细胞移植对帕金森病大鼠行为和多巴胺代谢的影响

 目的 评价脑内移植酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase, TH)基因修饰的温度敏感型永生化神经干细胞(immortalized neural stem cells, iNSCs)的生物学稳定性和安全性,探讨TH基因表达对帕金森病(Parkinson's disease, PD)大鼠旋转行为和多巴胺代谢的影响. 方法 6-羟基多巴胺(6-OHDA)制备PD模型大鼠73只,随机分为3组.治疗组(36只,TG)脑内纹状体移植体外转染稳定表达TH基因的iNSCs株(RMN-TH),对照组(27只,CG)同部位植入未转染TH基因的RMN细胞株,余10只为模型组(MG).分别比较细胞移植后不同时间点实验大鼠肿瘤发生、排斥反应和阿扑吗啡(APO)诱导旋转行为、免疫组织化学染色观察TH表达;高效液相色谱电化学方法检测多巴胺(dopamine, DA)及其代谢产物3、4-二羟苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)水平. 结果移植细胞在受体大鼠纹状体内存活均超过6个月,并广泛迁移、稳定表达TH,而未诱发肿瘤和排斥反应.RMN-TH TG组的APO诱导旋转行为得到明显改善,移植后第8周与CG组、MG组比较,旋转圈数分别下降64.17%和61.54%(P＜0.01);TG组大鼠移植侧纹状体内TH表达显著高于健侧(P=0.0029)、CG组移植侧和MG组(P=0.0031).TG组纹状体DA及其代谢产物水平明显高于CG组和MG组(P=0.0027).与MG组比较,CG组大鼠旋转行为、TH表达,以及DA,DOPAC和HVA水平均无统计学差异.结论 TH基因修饰的iNSCs细胞株RMN-TH可以在PD大鼠纹状体内长时间安全存活并稳定表达TH,显著增加内源性DA及其代谢产物水平,有效改善模型大鼠PD症状.     

运动干预通过减缓纹状体多巴胺丢失改善帕金森病模型大鼠行为功能的研究

目的:探讨跑台运动干预对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)模型大鼠行为功能、纹状体多巴胺(dopamine,DA)含量的影响。方法:健康雄性SD大鼠,随机分为假手术安静组(Control组)、假手术运动组(Control+Ex组)、6-OHDA安静组(PD组)、6-OHDA运动组(PD+Ex组)。依据实验设计要求,PD和PD+Ex组右脑内侧前脑束(MFB)注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)建立偏侧PD大鼠模型,假手术组于相同位点注射等量生理盐水。在造模后的第7天颈部皮下注射阿朴吗啡(APO)进行旋转行为测试,评价PD模型的可靠性,不符合PD模型标准的大鼠剔除。运动组术后1周开始进行跑台训练,运动方案为11 m/min,30 min/day,5 days/week,共4周。采用旷场试验评价PD模型大鼠的自主活动能力;微透析-高效液相色谱电化学联用技术检测纹状体DA浓度;免疫组织化学检测纹状体酪氨酸羟化酶(TH)阳性纤维的表达。结果:PD和PD+Ex组移动距离较Control组显著降低(P<0.01);PD+Ex组第3、4周移动距离较PD组显著增加(P<0.01)。PD和PD+Ex组纹状体DA含量较Control组显著降低(P<0.01);但PD+Ex组第3、4周纹状体DA浓度较PD组显著升高(P<0.01)。结论:PD模型大鼠总移动距离与纹状体DA浓度之间存在高度正相关,且二者均随6-OHDA药物及运动干预持续时间延长出现"时序性"变化特征。运动干预通过减缓纹状体DA丢失改善PD模型大鼠自主行为功能,推测其机制可能与运动的神经保护作用减轻了6-OHDA神经毒素对DA能神经元的毒性损伤、促进其存活有关。     

帕金森病小鼠模型纹状体多巴胺转运蛋白~(125)I-β-CIT的放射自显影

目的　观察不同损毁程度帕金森病 (PD)小鼠模型的纹状体多巴胺转运蛋白 (DAT)功能变化 ,探讨12 5I 甲基 3β (4 碘苯基 )托烷 2 β 羧酸盐 (β CIT)DAT显像的价值。 方法　根据注射MPTP天数不同 ,分为 1,3,5和 7d模型组和对照组 ,静脉注射12 5I β CIT 148kBq 2h后行放射自显影。高效液相色谱 电化学法 (HPLC ECD)检测纹状体多巴胺 (DA)及其代谢产物含量。免疫组化酪氨酸羟化酶 (TH)染色观察黑质和纹状体的病理变化。结果　与对照组相比 ,MPTP损毁的各组PD小鼠模型的纹状体 /皮层放射性比值分别降低 2 0 % ,42 % ,45 %和 5 2 % ;纹状体DA含量分别降低 47% ,75 % ,95 %和 95 % ;免疫组化TH染色可见黑质TH阳性神经元数量随MPTP损毁程度的加重而进一步减少。结论　不同损毁程度的PD小鼠模型DAT功能变化与生化和病理改变相一致 ,β CITDAT功能显像有助于PD的早期诊断和病情监测     

重复+Gz暴露后大鼠心肌儿茶酚胺类物质含量的变化以及低G预适应和茶多酚的防护作用

目的观察重复+Gz暴露是否引起心肌组织儿茶酚胺类物质代谢异常以及低G预适应和天然抗氧化剂茶多酚(TP)的防护作用. 方法 32只雄性Wistar 大鼠随机分为4组(n=8) A组(对照组),仅受到+1 Gz 作用5 min; B组(+Gz应激组), +10 Gz峰值暴露30 s/次,重复5次/d,间隔为+1 Gz 1 min, 3 d/wk, 共3 wk; C组(低G预适应组), +Gz应激条件同B组,但+10 Gz 暴露前1 h 受到+2 Gz 作用5 min;D组(TP防护组),+Gz应激条件同B组,但+10 Gz 暴露前1 h灌胃给予茶多酚200 mg/kg.于末次+Gz暴露的次日上午将各组大鼠断头处死,迅速摘取心脏置液氮冷藏,用高效液相色谱电化学检测法测定各组大鼠心肌儿茶酚胺类物质含量, 包括去甲肾上腺素(NA),肾上腺素(AD),多巴胺(DA),5-羟色胺(5-HT).结果与A组相比,B组心肌AD水平显著升高(P<0.01),但NA,DA,5-HT含量无明显差别.与B组相比,C、D组心肌AD、5-HT含量明显降低,而D组DA水平显著升高.结论重复+10 Gz暴露引起大鼠心肌儿茶酚胺类物质代谢异常,主要是AD水平显著升高;低G预适应和天然抗氧化剂TP具有明显的防护作用.     

MRI对于恒河猴PD模型建立和治疗的评价

目的：应用MRI评价建立恒河猴帕金森病（PD）模型，以及在中脑黑质受损区进行细胞移植的疗效。材料与方法：选取6只恒河猴，雌性2只，雄性4只，体重6．0－8．5kg。经颈总动脉注射甲基－苯基－四氢吡啶（MPTP）建立PD模型，并行MRI模型。获取横断和冠状位T1WI和T2WI，以单侧注射MPTP的对侧脑组织作为正常对照。建立PD模型后，再对病例中脑黑质区进行细胞移植，并复查MRI。最后应用抗酪氨酸羟化酶免疫组化和Grino染色对猴脑组织切片进行病理检查。结果：MRI的T2WI显示注射MPTP侧中脑黑质缩小，内部有局灶性高信号。细胞移植前后的MPRI所见无显著性差异。免疫组化检查证实注射MPTP侧中脑多巴胺能神经元明显减少，Grino染色显示注射侧黑质内大量胶质细胞增生。经细胞移植症状缓解的猴脑切片显示神经元的减少无明显改变。结论：MRI是恒河猴PD模型建立的一种评价手段，可以用于细胞移植疗效的评价。     

Venous "lakes" of the hands

Following pharmacologic vasodilatation, multiple vascular "lakes" were observed on angiograms of the hand in 55 patients. Most had no history of vascular anomalies or disease. The authors believe that these lakes are venous structures and that their filling is a physiologic phenomenon.     

防晕船口服液及抗晕船口服液预防晕船的效果观察

目的 观察自制“抗晕船口服液”及“防晕船口服液”海上预防晕船的效果。方法 在登陆艇上将986名首次出海出现不同程度晕船症状的志愿者分为4组，于开船前半小时分别服用安慰剂(对照组)、防晕口服液(A组)、抗晕口服液(B组)、防晕口服液 抗晕口服液(C组)，记录受试者出现的晕船症状并进行统计学分析。结果 4组均有预防晕船效果，对照组预防晕船作用显著低于其余3组，C组预防晕船作用明显高于A组和B组，各组间副作用无显著差别。各组对低、中敏受试者均有不同程度的抗晕船效果，但对照组明显低于其他各组；在高敏受试者中，对照组无抗晕船效果；在中、高敏受试者中，C组抗晕船的有效率、保护率明显高于A组和B组。结论 抗晕船口服液及防晕船口服液具有明显的预防晕船作用，两者联用效果更佳。