黄芩素对乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231增殖的影响

目的：探讨植物雌激素结构类似物黄芩素对乳腺癌细胞MCF-7和MDA－MB-231增殖的影响。方法：MTT法测定不同剂量黄芩素作用于MCF－7和MDA—MB-231细胞株不同时间后对细胞增殖的影响;流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡情况。结果：随黄芩素浓度增加,细胞增殖受到抑制,细胞的生存率逐渐下降;随着黄芩素作用时间的延长,细胞的生存率也逐渐下降。结论：黄芩素能抑制MCF07和MDA—MB-231细胞的增殖,诱导细胞凋亡的发生。     

椎茸的乙酸乙脂提取物诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的作用

目的观察椎茸的乙酸乙脂提取物对体外培养的人乳腺癌MCF7细胞株诱导凋亡的作用。方法MTT法测定提取物对MCF7细胞生长的影响;AnnexinVFITC和PI染色,采用FCM测定MCF7细胞的凋亡指数;采用FCM分析细胞周期的影响;Westernblot法分析CyclinD1、Cdk4、Bax和p21WAE1/CIP1表达。结果椎茸的乙酸乙脂提取物可以剂量依赖性的抑制乳腺癌细胞株MCF7的生长,使MCF7细胞生长停滞在G0/G1期而诱导MCF7细胞凋亡;通过Bax和p21WAE1/CIP1的表达和降低CyclinD1、Cdk4的表达而诱导MCF7细胞的凋亡。结论椎茸的乙酸乙脂提取物通过诱导细胞凋亡而产生抗乳腺癌的活性。     

4-肼基苯磺酸特异性抑制SHP-2激活突变的乳腺癌细胞增殖

目的研究4-肼基苯磺酸对SHP-2激活突变的乳腺癌MDA-MB-231细胞株增殖的特异性抑制作用,为新型抗乳腺癌药物的开发提供些许参考。方法不同浓度的4-肼基苯磺酸处理SHP-2激活突变的MDA-MB-231细胞,用MTT法检测细胞的增殖。结果 4-肼基苯磺酸对乳腺癌MDA-MB-231细胞株的增殖有明显抑制作用,并呈剂量依赖性;同时对SHP-2低活性的对照组细胞无明显作用。结论 4-肼基苯磺酸可特异性地抑制SHP-2激活突变的乳腺癌MDA-MB-231细胞的体外增殖,这种抑制效果应是通过特异性抑制SHP-2异常增高的磷酸酶活性来实现的。     

癌细胞分化剂尿多酸肽对乳腺癌细胞生长的抑制作用

目的研究癌细胞分化诱导剂尿多酸肽(CDA-II)抑制乳腺癌细胞生长的作用。方法将CDA-II与不同生物学特性的乳腺癌细胞株M CF-7和M DA-M B-231进行体外培养,同时以维甲酸为阳性对照,观察CDA-II对乳腺癌细胞生长曲线及形态学等方面的影响。结果CDA-II可减缓两株乳腺癌细胞的生长和增殖能力。结论CDA-II可抑制不同生物学特性的两株乳腺癌细胞的生长和增殖能力,为CDA-II治疗乳腺癌提供了实验依据,揭示了其治疗乳腺癌的可能应用前景。     

小檗碱调节己糖激酶Ⅱ抑制乳腺癌细胞糖酵解的作用研究

摘 要 目的：研究小檗碱对乳腺癌细胞糖酵解的干预作用及对己糖激酶Ⅱ的影响。方法: 分别采用人乳腺癌MDA MB 231,MCF 7细胞株,通过MTT实验, 考察小檗碱对乳腺癌细胞增殖的抑制作用,检测小檗碱干预后乳腺癌细胞中葡萄糖消耗及乳酸含量,评价小檗碱对乳腺癌细胞糖酵解的影响;检测乳腺癌细胞中ATP及NAD+/NADH含量,评价乳腺癌细胞能量供应情况;通过检测己糖激酶Ⅱ活性及蛋白定量,明确小檗碱对乳腺癌细胞己糖激酶的影响。结果: 小檗碱对人乳腺癌细胞株MDA MB 231,MCF 7细胞增殖,具有明显抑制作用,并呈浓度依赖性;小檗碱可以明显降低不同乳腺癌细胞株中葡萄糖消耗及乳酸含量,中高剂量组相较于对照组差异有统计学意义(P<0.05);同时相较于对照组,中高剂量组可明显降低细胞ATP含量,升高NAD+/NADH含量(P<0.05);此外小檗碱可以抑制乳腺癌细胞己糖激酶Ⅱ活性及其蛋白含量。结论: 小檗碱可以明显抑制乳腺癌细胞增殖,并抑制乳腺癌细胞糖酵解,降低其能量供应,同时明显抑制乳腺癌细胞中己糖激酶Ⅱ的表达。     

蟾皮水提物及其多肽抗乳腺癌作用及机制的初步研究

目的探究蟾皮水提物中的多肽对乳腺癌细胞的抗肿瘤活性及其作用机制。方法基于转录组数据,应用液质联用技术,对蟾皮水提物中的多肽成分进行全谱分析。通过生物信息学分析,对蟾皮水提物中的多肽进行抗肿瘤活性预测和理化性质分析,优选出蟾皮水提物中具有抗乳腺癌活性的多肽并进行人工合成。应用MDA-MBA-231、MCF7、4T1乳腺癌细胞模型,研究蟾皮水提物及其多肽抑制乳腺癌细胞生长的作用机制,CCK8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果通过LC-MS/MS与转录组数据联合应用,对蟾皮水提物的多肽成分进行全谱分析,共得到837条多肽。抗肿瘤活性预测结果显示9条多肽具有潜在的抗肿瘤活性,对其进行理化性质分析,优选出5条多肽用于药理学实验。CCK8结果显示蟾皮水提物对不同乳腺癌细胞均有抗肿瘤活性,但有效剂量不同;ST-17和QK-17对MDA-MB-231、4T1的增殖具有较强的抑制作用,但对MCF7的抑制作用较弱。流式细胞术结果显示,蟾皮水提物和ST-17可以引起MDA-MB-231发生细胞周期阻滞,分别阻滞于S期和G2/M期;蟾皮水提物和QK-17可以诱导MDA-MB-231发生凋亡。结论蟾皮水提物及其部分多肽可抑制乳腺癌细胞的增殖,可能通过引起细胞周期阻滞和诱导细胞凋亡发挥抗肿瘤作用。     

半边旗提取物5F对乳腺癌细胞内活性氧水平的影响

目的 观察中草药半边旗提取物5F(Ent-11a-hydroxy-15-oxo-kaur-16-en-19-oic-acid,5F)对乳腺癌细胞的抑制作用及其对乳腺癌细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平的影响。方法 不同浓度(0、5、10、20、40μg/m L)的5F分别处理3种不同乳腺癌细胞(MCF-7、MDA-MB-231以及SK-BR-3),用CCK-8法检测5F对不同乳腺癌细胞株增殖的影响;流式细胞仪检测5F处理后的各乳腺癌细胞株的凋亡率;检测不同浓度的5F处理后的乳腺癌细胞内ROS的水平。结果 5F可抑制MDA-MB-231、MCF-7、SK-BR-3三种乳腺癌细胞的增殖,其抑制效果与5F的浓度及作用时间呈显著正相关(P<0.05);经5F作用24 h后,MDA-MB-231细胞、MCF-7细胞及SK-BR-3细胞的凋亡率较阴性对照组明显增加(P<0.05);5F作用于乳腺癌细胞株,ROS相对含量均较未处理组降低,且随5F浓度升高ROS水平降低越明显(P<0.05)。结论 5F可抑制乳腺癌细胞的增殖,其抑制效果与5F浓度和作用时间相关;5F能降低细胞内ROS的生成水平,并呈现剂量依赖性。     

杠柳苷元抑制人乳腺癌细胞增殖作用的研究

目的 观察杠柳苷元(periplogenin)对人乳腺癌细胞MCF7的抑制作用并考察其抑制作用的机理.方法 使用四氮唑盐(MTT)法测定杠柳苷元对MCF7细胞的增殖抑制效果,并使用蛋白免疫印迹法测定其中凋亡蛋白的表达.结果 杠柳苷元对MCF7细胞起到了明显的抑制作用,其抑制作用呈剂量依赖性,蛋白免疫印迹法也观察到杠柳苷元促进MCF7细胞内凋亡相关蛋白的表达,其表达呈时间依赖性.结论 杠柳苷元具有显著的体外抑制MCF7细胞增殖的作用,其抑制作用是通过促进MCF7细胞凋亡而发挥的.     

肝素对乳腺癌细胞-MCF-7的抗增殖作用

目的　观察肝素对乳腺癌细胞的抗增殖作用。方法　MCF 7、MDA MB 2 31人乳腺上皮癌细胞培养 ,细胞计数。结果　肝素 40mg·L-1可明显抑制MCF 7细胞的生长 ,该抑制作用受血清的影响。结论　肝素能抑制在有血清培养条件下的MCF 7人乳腺上皮癌细胞的生长。     

阿霉素诱导小鼠MCF-7乳腺癌细胞凋亡和抑制增殖的体内实验研究

目的:探讨阿霉素对荷瘤鼠MCF7乳腺癌细胞凋亡和增殖的影响。方法:建立小鼠MCF7乳腺癌细胞模型,用TUNEL法和免疫组化法检测阿霉素作用下MCF7乳腺癌细胞的凋亡和PCNA表达的变化。结果:1.25mg·kg-1阿霉素的抑瘤率为43%。MCF7乳腺癌细胞的凋亡指数为1.93%,较荷瘤对照组的1.11%明显升高(P<0.05)。增殖指数为35.75%,较荷瘤对照组的56.38%明显下降(P<0.01)。结论:阿霉素有诱导小鼠MCF7乳腺癌细胞凋亡和抑制其增殖的作用。     

尿多酸肽对人胃癌细胞SGC7901增殖的体外抑制作用

目的：研究肿瘤细胞分化诱导剂尿多酸肽（CDA—Ⅱ）对人胃癌细胞的体外抑制作用．方法：将CDA—Ⅱ胃癌细胞株SGC7901进行体外培养，观察CDA—Ⅱ对人胃癌细胞生长曲线及形态学等方面的影响。以四唑盐（MTT）比色法测定培养板中加入CDA—Ⅱ后，人胃癌细胞SGC7901的生物活性。结果：CDA—Ⅱ可减缓胃癌细胞的生长和增殖能力，体外实验中CDA—Ⅱ剂量为1—5mg／ml，对人胃癌细胞SGC7901的作用最佳剂量为1mg／ml。结论：在体外实验中CDA-Ⅱ可抑制胃癌细胞的增殖能力，对人胃癌细胞SGC7901有显著的抑制作用。     

Inhibitory effect of CDA-II, a urinary preparation, on aflatoxin B(1)-induced oxidative stress and DNA damage in primary cultured rat hepatocytes.

The effects of CDA-II (cell differentiation agent II; a urinary preparation) on both aflatoxin B(1) (AFB(1))-induced cell injury and DNA damage were investigated using cultured rat hepatocytes. CDA-II was able to suppress both the lipid peroxidation and lactate dehydrogenase leakage induced by AFB(1). Glutathione (GSH) depletion by AFB(1) was replenished by CDA-II treatment. Under these experimental conditions, CDA-II enhanced the activity of GSH peroxidase, but not GSH S-transferase. By evaluation of unscheduled DNA synthesis, CDA-II reduced AFB(1)-induced DNA damage in hepatocyte cultures. These findings suggest that CDA-II can inhibit cytotoxicity of AFB(1) through enhancing the activity of GSH peroxidase and preventing GSH depletion.     

CDA-II,a urinary preparation,induces growth arrest and apoptosis of human leukemia cells through inactivation of nuclear factor-kappaB in a caspase-dependent manner

CDA-II (cell differentiation agent II) was a urinary preparation, isolated from healthy human urine. We determined the anticancer activity of CDA-II using human acute myeloid leukemia (AML) cell lines, K562, Kasumi-1 and KG-1. An in vitro cytotoxicity assay showed that CDA-II exhibited growth arrest in leukemic cells, while it did not induce cytotoxicity in normal peripheral blood monouclear cells (PBMCs). In vivo studies using the Kasumi-1 xenografted SCID mouse model showed tumor inhibition rate were increased and the survival time were prolonged in a dose-dependent manner, without any significant toxicity on mice body. Depolarized mitochondrial membranes and the activation of caspase-3, 9 as well as PARP were found in leukemic cells treated with CDA-II for 6–24 h. We further found NF-κB nuclear translocation were prevented by CDA-II treatment, which therefore inactivated NF-κB and down-regulated its target genes expression, including Bcl-2/Bax ratio, Mcl-1 and XIAP. The caspase-3 inhibitor Z-DEVD-FMK inhibited CDA-II-induced apoptosis and CDA-II combined with NF-κB inhibitor PDTC significantly increased the apoptotic rate of leukemic cells. We concluded that CDA-II potently induced caspase-dependent leukemia-specific apoptosis in leukemic cells mediated through inactivation of NF-κB, involving in Bcl-2 family and XIAP, which has no cytotoxicity on normal cells.     

羟基喜树碱依赖Caspase3途径诱导人乳腺癌Bcap37细胞凋亡

目的:探讨羟基喜树碱(HCPT)诱导人乳腺癌Bcap37细胞凋亡所涉及的信号转导途径。方法:采用MTT法测定细胞的增殖活力,琼脂糖凝胶电泳观察细胞调亡,流式细胞仪进行细胞周期分析,West-ernblot法研究细胞调亡途径。结果:HCPT对Bcap-37有明显的生长抑制作用。10~100μmol·L-1HCPT作用细胞后,琼脂糖凝胶电泳检测到典型的DNA梯状条带。Caspase3在细胞凋亡过程中发生降解,Caspase3抑制剂DEVD-CHO可抑制HCPT诱导的Caspase3的降解和细胞凋亡。结论:HCPT对Bcap-37有明显的生长抑制和诱导调亡作用。Caspase3在HCPT诱导人乳腺癌Bcap37细胞调亡中起着重要作用。     

Antiestrogenic and antitumor effects of droloxifene in experimental breast carcinoma

The pharmacological effects of droloxifene [E)-a [p-[2-(dimethylamino)ethoxy]phenyl]-a'-ethyl-3-stilbenol, FK435), a new antiestrogen drug, were studied and compared with those of tamoxifen in animals and in vitro cultured cells. Droloxifene showed about 20-fold and 3-fold higher affinity to estrogen receptors (ER) in the rat uterus and human ER positive MCF-7 breast carcinoma cells, respectively, than tamoxifen, and was more active in decreasing uterine weight of mature rats and 17 beta-estradiol-treated immature rats. Tamoxifen increased uterus growth in immature rats, but droloxifene did not, suggesting that droloxifene has no estrogenic effects. Both drugs inhibited the growth of in vitro cultured MCF-7 cells, with droloxifene being the more active agent, but this effect of both drugs was countered by 17 beta-estradiol. Neither drug, however, had effects on the in vitro growth of human ER negative MDA-MB-231 breast carcinoma cells. In vivo, both drugs inhibited the growth of MCF-7 carcinoma implanted subcutaneously in BALB/c nu/nu mice, but not the growth of human ER negative MX-1 breast carcinoma. The results suggest that droloxifene has antitumor effects on human ER positive breast cancers, and would be useful for the treatment of estrogen-dependent breast cancers.     

孕激素受体拮抗剂ZXH951对乳腺癌细胞生长抑制作用及对端粒酶活性的影响

目的　研究ZXH951在体外对乳腺癌细胞的生长抑制作用及对端粒酶活性的影响。方法　分别用细胞生长曲线、集落形成及竞争性配体与受体结合法,测定ZXH951的体外抗肿瘤作用及其与孕激素受体（PR）、雌激素受体(ER)结合活性;用流式细胞术及多聚酶链反应-端粒重复序列扩增法探讨ZXH951对人乳腺癌T47D细胞周期及端粒酶活性的影响。结果　ZXH951对ER和PR双阳性的乳腺癌细胞T47D体外增殖有较强的抑制作用,而对ER和PR双阴性的人乳腺癌细胞MDA-MB-231无明显抑制作用;ZXH951与PR有较强结合活性,而与ER无明显结合活性;可将T47D细胞阻滞在G1期,并对端粒酶活性有一定抑制作用。 结论　ZXH951是一个有发展前景的新型抗孕激素类化合物,在体外对乳腺癌细胞有较强的抑制作用,其作用机制可能与其通过PR介导的细胞增殖及对端粒酶活性抑制有关。     

阿片生长因子抑制乳腺癌细胞生长的研究

目的:探讨阿片生长因子(OGF)对MCF-7人乳腺癌细胞生长的影响。方法:细胞计数观察OGF、阿片生长因子受体(OGFr)拮抗剂纳洛酮(Naloxone)组及对照组细胞数的差别;MTT实验观察应用OGF、Naloxone及OGF联合Naloxone(OGF+Naloxone)细胞增殖抑制率的变化;流式细胞术(FCM)细胞周期分析OGF、Naloxone对MCF-7细胞生长的影响。结果:细胞计数显示,OGF处理组细胞数明显低于Naloxone处理组及对照组(P<0.01),而后2组细胞数差异无统计学意义(P>0.05);MTT实验显示,OGF处理组细胞增殖抑制率明显高于Naloxone处理组及OGF+Naloxone处理组(P<0.01),而后2组差异无统计学意义(P>0.05);OGF处理组MCF-7细胞G0/G1期分数明显高于Naloxone处理组及对照组(P<0.01),而后2组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:OGF能抑制MCF-7人乳腺癌细胞的生长。OGFr拮抗剂能阻断这种作用。OGF阻断细胞周期于G0/G1期。     

乳腺癌组织中Survivin 和VEGF的表达及意义

目的:研究抗凋亡蛋白Survivin、血管内皮生长因子VEGF在乳腺癌中的表达情况,探讨二者与乳腺癌侵袭的关系以及二者之间的联系.方法:应用免疫组织化学方法检测Survivin 和VEGF在41例乳腺癌标本中和10例正常乳腺组织对照组的表达情况.结果:乳腺癌中Survivin的阳性表达(68.29%),VEGF的阳性表达(63.41%),明显高于对照组中的表达,且他们的表达与肿瘤的淋巴结转移和c-erBb-2有相关性.Survivin表达与VEGF表达呈明显正相关(P＜0.01).结论:Survivin与VEGF的表达在乳腺癌的发生、发展中起重要作用.Survivin的高表达促进了VEGF的促内皮细胞功能.     

氨氯地平对人乳腺癌细胞MCF-7细胞的抑制作用及机制研究

目的观察氨氯地平对人乳腺癌细胞MCF-7周期、周期蛋白相关基因及产物表达的影响,探讨氨氯地平对人乳腺癌MCF-7细胞周期的影响及其机制。方法MTT检测细胞增殖;流式细胞仪分析细胞周期;RT-PCR技术检测细胞周期相关基因cyclinD1、p21mRNA的表达;Western blot检测细胞周期蛋白cyclinD1、p21的蛋白表达。结果氨氯地平剂量和时间依赖性的抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖,IC50为14.439μmol.L-1。经7.22μmol.L-1(1/2IC50)、14.439μmol.L-1(IC50)、28.88μmol.L-1(2IC50)的氨氯地平作用人乳腺癌MCF-7细胞48h,G0/G1期细胞较对照组明显增高(P<0.05);并使人乳腺癌MCF-7细胞中cyclinD1mRNA及蛋白表达降低;p21mRNA及蛋白表达升高。结论氨氯地平对人乳腺癌MCF-7细胞具有抗增殖作用,并使细胞阻滞于G1期。其G1阻滞机制可能与调控细胞周期相关基因cyclinD1、p21mRNA及蛋白的表达相关。