乙肝病毒DNA荧光定量PCR检测及其意义

目的 探讨荧光定量PCR法检测的乙型病毒DNA与乙肝病毒标志物之间的关系。方法 362例血清标本同时进行乙肝病毒标志物和HBV DNA的检测,按照不同的乙肝病毒标志阳性情况分级后,进行乙肝病毒DNA与乙肝病毒标志物的分析研究。结果 乙肝病毒标志物HBsAg HBeAg HBcAb阳性组HBV DNA阳性率97.7%,拷贝数在10^4-10^8之间;HBsAg HBeAb HBcAb阳性组阳性率56％,拷贝数在10^2－10^7之间;HBsAg HBcAb阳性组阳性率54％,拷贝数在10^2－10^7之间;HBsAg HBeAg组阳性率100％,拷贝数在10^7之间;HBeAb HBcAb组3例,有1例阳性,拷贝数10^2;HBsAb组阳性率14.3%,拷贝数在10^3－10^7之间;189例全阴性有2例阳性（1.06%）,拷贝数在10^4－10^5之间。结论 HBV DNA在各种模式的HBV标志阳性血清甚至全阴性的血清中均可检出,但检出率相差甚大,从1.06%－100％;HBV DNA乙肝病毒标志中HBeAg阳性者其HBV DNA阳性率及拷贝数较高;HBsAg及其抗体阳性者仍可检出HBV DNA,说明仅仅依靠乙肝病毒标志进行早期诊断以及判断病人是否具有传染性是不够的。     

209例儿童血清HBV标志物与HBV DNA检测分析

目的：探讨儿童乙型肝炎病毒（HBV）血清标志物与HBV-DNA含量的关系。方法：采用酶联免疫法（ELISA）对收集到的209份血清进行HBV M检测,再应用荧光定量PCR法进行HBV-DNA含量检测。结果：209份血清标本中129例（61.7%）HBV DNA阳性。HBV DNA阳性率在HBV M模式1（HBsAg＋、HBeAg＋、HBcAb＋）、模式2（HBsAg＋、HBeAb＋、HBcAb＋）、模式3（HBsAg＋、HBcAb＋）及模式4（HBsAb＋、HBeAb＋/-、HBcAb＋）中分别为96.5%、35.2%、45.7%、14.3%,各组比较,有显著性差异（χ2=88.556,P=0.000）。结论：儿童乙肝患者的多种血清标志物模式中都存在HBV-DNA复制,以HBeAg阳性者HBV-DNA复制水平最高。     

HBV感染者中HBV前S1蛋白检测分析

目的检测HBV前S1蛋白（PreSl-Ag）的水平,分析与HBVDNA复制的关系。方法用酶联免疫吸附分析法（EusA）检测HBV感染者血清中PreSl-Ag和HBV血清标志物（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb）,同时用RealTimePCR检测血清中HBVDNA含量。结果407例HBV感染者HBeAg（＋）的大三阳模式135例血清中,HBV—DNA、PreSl-Ag阳性率分别为87．4％和81．5％,两者差异无统计学意义;在117例HBeAg（-）的小三阳模式血清中,HBV—DNA．PreSl-Ag阳性检出率分别为74．4％和69．2％,两者差异无统计学意义。在266例HBV—DNA阳性患者血清中,PreSl-Ag阳性和HBeAg阳性检出率分别为74．4％、60．2％,两者差异具有统计学意义,P〈0．01。结论PreSl-Ag与HBV—DNA检测结果-致性较好,较HBeAg能更灵敏地反映体内HBV的复制状况,可与HBV—DNA互相补充,在临床诊断和治疗HBV感染中有重要意义。     

血清HBVDNA与乙型肝炎病毒血清学标志物的关系

目的探讨荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）技术定量检测HBV DNA与乙型肝炎病毒（HBV）血清学标志物之间的关系。方法采用ELISA检测乙肝病毒血清学标志物，FQ-PCR法检测HBVDNA，比较不同乙肝病毒血清学标志物阳性组合HBVDNA阳性情况。结果HBsAg、HBeAg和HBcAb性组HBVDNA阳性率为100％（155／155）；HBsAg、HBeAb和HBcAb阳性组HBV DNA阳性率为35．2％（50／142）；HBsAg、HBcAb阳性组HBV DNA阳性率为30．2％（38／126），HBsAg阳性组血清HBVDNA阳性率为10．0％（3／30）。结论荧光定量PCR法检测血清中衄VDNA含量可以准确地反映病人体内病毒的感染和复制情况，可准确地为临床提供科学的诊断依据。     

荧光定量PCR检测HBV DNA与HBV血清标志物的对比监测和分析

目的：探讨荧光定量PCR法检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA与HBV血清免疫学标志物(HBVM)的相互关系。方法：801例血清标本采用ELISA方法对其免疫学标志物进行检测，并用实时荧光定量-聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测血清HBV DNA。结果：HBV DNA的总检出率为67.0％，在模式HBsAg( )，HBeAg( )，HBcAb( )中，HBV DNA的含量明显高于HBsAg( )，HBeAb( )，HBcAb( )及HBsAg( )，HBcAb( )模式。在HBsAg(-)模式中HBV DNA亦有检出。结论：HBVM能提供乙肝感染的间接证据，而荧光定量PCR法检测HBV DNA准确灵敏，能真实反映HBV感染、复制及病程变化，在乙型肝炎的诊断治疗中具有重要的临床指导价值。     

HBsAg阳性人群HBV-DNA定量测定的调查研究

目的：通过收集HBsAg阳性人群血清进行HBV—DNA定量测定,分析HBV感染人体后不同年龄组、不同血清标志物模式病毒复制状况。方法：乙肝血清学标志物检查采用ELISA法,HBV—DNA检测采用实时荧光定量PCR法。结果：A、B、C、D四个年龄组模式Ⅰ（HBsAg＋,HBeAg＋／HBsAg＋,HBeAg＋,HBeAb＋）间有显著差异,F=9．90（P〈0．01）,模式Ⅱ（HBsAg＋,HBeAb＋／HBsAg＋,HBeAb＋,HBcAb＋）和模式Ⅲ（HBsAg＋．HBcAb）组间无差异,HBV—DNA阳性率（检测结果〉1．0×103copies／ml为阳性）模式Ⅰ与模式Ⅱ（u=9．60,P〈0．01）、模式Ⅰ与模式Ⅲ（u=4．61,P〈0．01）之间均有显著性差异,模式Ⅱ与模式Ⅲ（u=2．07,P〈0．05）有差异。结论：HbeAg阳性者病毒成高水平复制状态,并且不同年龄组间有差异。HBeAb阳性和无HBeAb者不能完全代表无病毒复制。乙肝免疫标示物和HBV—DNA的检测不能相互替代。     

HBVM阳性与HBV DNA定量检测的临床意义

目的了解乙肝病人血清标志物(HBVM)指标阳性与HBV DNA定量的相关性。方法收集住院病人血清标本94份，同时进行HBVM(ELISA法)及HBV DNA(荧光定量PCR法)定量检测。结果94例乙型肝炎病人中，HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性24例，血清HBV DNA均阳性，阳性率为100％，20例乙肝HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性血清中HBV DNA阳性17例，阳性率85％。结论HBVM与HBV DNA同时检测，对临床诊断、治疗方案的选择和抗病毒药物疗效观察有重要的指导意义。     

乙肝患者血清中HBV DNA测定及其意义

目的：了解HBV感染时，HBV DNA阳性的不同血清学指标组合情况。方法：对370份HBV DNA阳性的血清用ELISA方法进行血清学测定。结果：HBsAg、HBeAg、HBeAg、HBcAb均阳性的标本216例，占58.4％；HBsAg、HBcAb均阳性的标本63例，占17％；HBsAg、HBcAb均阳性的标本48例，占13％；HBsAg、HBeAg均阳性的标本30例，占8.1％；HBsAb、HBcAb均阳性的标本6例，占1.6％；HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb均阳性的标本6例，占1.6％；HBsAb阳性1例，占0.3%。结论：单凭HBsAg和HBeAg阳性来判断肝脏中HBV复制及有无传染性是不够的，是造成部分慢性乙肝漏诊；同时HBV DNA含量的监测，更有利于临床治疗方案的选择和疗效观察。     

乙肝患者前S1蛋白和HBV—DNA检测结果分析

目的探讨乙型肝炎患者前S1蛋白和HBV—DNA检测的临床价值．方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测748例乙肝患者HBV—M和前S1蛋白，并与HBV—DNA做对比分析。结果在HBsAg／HBeAg／HBcAb均阳性的高复制组中，前S1蛋白阳性占86．9％，HBV—DNA阳性占98.2％；HBsAg／HBeAb／HBcAb均阳性的低复制组中，前S1蛋白阳性占31.1％，HBV—DNA阳性占41．6％；HBsAb／HBeAb／HBcAb均阳性的康复组中．前S1蛋白和HBV—DNA均为阴性．结论前S1蛋白能够敏感地反映乙型肝炎病毒的复制情况，尤其可以反映HBeAg阴性的乙型肝炎惠者是否有病毒复制。     

395例精液HBV标志物测定结果分析

精液中HBV标志物HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb(两对半)测定文献报道甚少。本文从1999-08～2002-10收集不孕男性精液395份进行HBV标志物测定,同时与血清、精子HBV标志物进行比皎。并将8例血清HBV标志物呈阳性,而精浆HBV标志物呈阴性进行跟踪观察。结果报告如下：     

乙肝病毒标记物阳性表型血清标本HBV—DNA水平分析

目的分析乙肝病毒标记物阳性表型（Pres1、HBcAb—IgM、HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb．IgG中两项或两项以上阳性）血清标本中HBV—DNA水平,为乙型病毒性肝炎的诊断、病情发展及预后评估提供理论依据。方法对以ELISA法检测Pres1、HBcAb—IgM、HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb—IgG项目中两项或两项以上同时阳性的652例标本用荧光定量PCR法检测HBV—DNA水平,并对检测结果进行统计分析。结果非活动期标记物表型组可出现高水平HBV—DNA;正常对照组和非活动期标记物表型组血清HBV—DNA平均水平均明显低于活动期标记物表型组（P〈0．01）;高水平HBV—DNA标本中不一定会同时出现Pres1、HBeAg、HBcAb-IgM等活动期标记物。结论活动期乙肝病毒标记物检测阴性不能排除患者体内是否存在乙肝病毒复制,Pres1、HBeAg、HBcAb—IgM联合检测可以提高病毒感染阳性检出率,同时可以评估疾病的进展情况。     

HBV血清学标志物与HBV DNA水平和前S1蛋白抗原间的关连

目的探讨乙型肝炎血清标志物(HBV-M)与前S1蛋白抗原、HBV DNA检测的关连。方法采用ELISA法检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBcAb、HBeAb、前S1蛋白抗原,采用PCR法检测HBV DNA。结果636例乙肝患者血清中HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性占32.08%(204/636);HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性占45.91%(292/363);HBsAg、HBcAb阳性14.47%(92/636);HBsAg、HBeAg阳性2.20%(14/636);HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性5.35%(34/636)。HBeAg阳性218例,占34.28%;Pre-S1阳性318例,占50.0%;HBV DNA≥1.0×103Copies/lμ392例,占61.64%。结论Pre-S1抗原与HBV DNA、HBeAg有较好的一致性和互补性,可作为乙肝病毒存在和复制的观察指标。     

分析HBsAg与抗-HBs双阳患者血清模式与HBV DNA载量的临床意义

目的：探讨乙型肝炎病毒（HBV）感染者乙型肝炎表面抗原（HBsAg）与乙型肝炎表面抗体（抗-HBs）同时阳性的血清学模式的基因变异与HBV DNA的关系并探究其原因及临床意义。方法乙肝HBV血清学标志物五项指标(HBsAg、HBsAb、HBcAb、HBeAg、HBeAb)采用时间分辨法定量测定,HBV DNA含量的检测采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)。结果本研究入选的50例HBsAg与抗HBs双阳患者血清中共出现4种HBV血清学模式：(Ⅰ) HBsAg、抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc阳性模式占42.0%,HBV DNA阳性率占42.8%;(Ⅱ) HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBc阳性模式占32.0%,HBV DNA阳性率占70.5%;(Ⅲ)HBsAg、抗-HBs、抗-HBc阳性模式占24.0%,HBV DNA阳性率占25.0%;(Ⅳ)HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc阳性模式占2.0%,HBV DNA阳性率占100.0%。其中含有HBeAg阳性的Ⅱ、Ⅳ模式与Ⅰ、Ⅲ模式的HBV DNA阳性率分别作两两比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 HBsAg与抗HBs双阳患者血清中伴有HBeAg阳性者血清中HBV DNA载量最高,HBsAg与抗-HBs双阳模式是免疫系统的个性化表现,应引起临床的重视。     

乙型肝炎患者HBV抗体阳性模式与HBV DNA含量的相关分析

目的:探讨乙型肝炎患者HBV抗体阳性模式与HBV DNA含量的相关关系。方法:采用乙肝患者入院时第一份血清,同步进行HBV标志物(HBVM)、HBV DNA含量和肝功能检测,对其中96例HBV抗体阳性的病例进行综合分析。结果:HBsAg/HBeAb/HBcAb组和HBsAg/HBcAb组的HBV DNA含量显著高于HBsAb/HBeAb/HBcAb组和HBcAb组(P<0.01)。按临床分型,HBV DNA阳性率为HLC(85.0%)>CH(76.5%)>AH(12.5％)。结论:乙肝患者血清HBV抗体阳性并不表示体内病毒复制停止而无传染性,多数患者体内HBV DNA呈低水平持续复制,部分患者仍保持较高的复制水平。本文结果提示,慢性持续感染者体内病毒复制活跃与机体免疫功能紊乱或功能低下,不能清除病毒有关。部分HBeAb阳性患者HBV DNA持续复制,可能与HBV基因变异有关。     

HBV-DNA定量与乙肝标志物及谷丙转氨酶结果对比分析

目的探讨血清中HBV—DNA定量与乙肝标志物（HBV—M）及谷丙转氨酶（ALT）之间的关系及临床意义。方法采用荧光定量聚合酶链式反应法（FQ—PCR）和ELISA法分别检测578例病人的血清HBV—DNA含量和HBV-M,自动生化分析仪检测ALT并对结果进行对比分析。结果HBsAg（＋）、HBeAg（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV—DNA检出率833％（259／2311）,平均拷贝数1.1×10^8／ml。HBsAg（＋）、HBeAb（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV--DNA检出率33．5％（44／132）,平均拷贝数5.9×10^8／ml。HBsAg（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV-DNA检出率242％（14／58）,平均拷贝数1.9×10^8／ml。HBeAb（＋）、HBcAb（＋）组血清HBV—DNA检出率78％（1／15）,平均拷贝数3.5×10^3／ml。全阴性组血清HBVDNA检出率53％,平均峙贝数2．0×10^3／ml。HBsAg（＋）、aBeAg（＋）组的HBV--DNA阳性率高、定量值高,而HBsAg（＋）、HBeAg（-）组HBV—DNA阳性率较低、定量值也较低,二者差异有显著性;HBsAg（-）者亦可检出HBV-DNA;HBV感染者ALT阳性的概率增大,但二者在数量上无相关性。结论同时检测血清乙肝标志物和HBV—DNA及谷丙转氨酶,对临床HBV感染、复制及传染性的判断具有重要意义。     

HBV Pre-S1蛋白及HBV-DNA含量检测在诊断乙肝病毒复制中的临床意义

目的:探讨乙肝患者不同血清学标志物模式(HBV-M)与乙肝病毒DNA含量及乙肝病毒前S1蛋白的关系,为预测乙型肝炎病毒的传染程度、预防、诊断及治疗提供实验室依据。方法:采用ELISA法对1385例携带不同血清学标志物的乙肝患者进行HBVPre-S1和乙肝5项指标检测,并用聚合酶链反应定量检测血清HBV-DNA含量。结果:不同HBV免疫模式中HBsAg、HBeAg和HBcAb同时阳性,其HBV-DNA和HBVPre-S1的检出率分别为90.7%和71.1%;HBsAg、HBeAb和HBcAb阳性组的检出率分别为35.8%和27.3%;其他不同血清学模式组也有不同的阳性率。结论:HBV-DNA、乙肝病毒5项标志和HBVPre-S1联合检测,对HBV感染早期诊断,了解病毒的复制情况,疗效观察和预后判断均具有重要意义。     

艾滋病合并乙型肝炎患者乙肝病毒血清学与HBV-DNA的关系

目的 分析艾滋病合并乙型肝炎患者乙肝病毒血清学标志物(HBV-M)水平与HBV-DNA之间的关系.方法 采用荧光定量聚合酶链反应(FQ PCR)技术和时间分辨荧光免疫法(TRFIA)检测64例HIV/HBV合并感染者的乙肝病毒血清学标志物和HBV-DNA水平,结果 HBsAg+HBeAg+HBcAb组和HBsAg+HBeAg组的HBV-DNA阳性检出率分别为70.59％和100％,显著高于其他血清学标志物模式(P＜0.05),且HBeAg阳性组中HBV-DNA阳性率也显著高于HBeAg阴性组(P＜0.05).HBsAg含量在不同的HBV-DNA水平中总体有差异,两两比较发现在HBV-DNA＜3 copies/mL组与HBV-DNA 5 copies/mL组之间有统计学差异,HBsAg含量在高病毒复制组中显著高于HBV-DNA阴性组(P＜0.05),但HBsAg含量在HBV-DNA中低水平之间无统计学差异(P＞0.05).同样,HBsAg定量在不同HBV血清学标志物模式中总体有差异,通过两两比较,病毒复制活跃的HBsAg+HBeAg+HBcAb组HBsAg含量显著高于HBsAg+HBeAb+HBcAb组(P＜0.05),而其他血清学标志物模式之间没有明显的差异.经直线回归分析,HBV-DNA与HBsAg之间存在正相关(回归系数=0.244＞0),当HBsAg＞3.24 lgng/mL,即出现HBV-DNA阳性.结论 HBeAg在HIV/HBV合并感染者中可作为HBV复制活跃的标志之一,但须同时监测HBV-DNA水平,以评估病情的变化和指导临床诊疗.同样,HBsAg含量与HBV-DNA复制水平有关,HBV复制越活跃,HBsAg的含量也越高,二者相关性越好,但临床上单用HBsAg定量结果来评价HIV/HBV合并感染者HBV-DNA水平有其局限性,需具体结合HBV-DNA定量值和临床综合评价患者病情和疗效.     

乙型肝炎病毒感染者HBV DNA与血清病毒标志物的关系

目的　探讨乙型肝炎病毒 (HBV)感染者HBVDNA检出情况及其与血清病毒标志物的关系。方法　采用实时荧光定量PCR(FQ PCR)检测 2 0 0份HBV感染者血清中HBVDNA含量 ,同时用全自动免疫分析仪检测HBV 5项血清标志物。结果　 2 0 0份血清中 ,乙型肝炎病毒标志物不同组合组的HBVDNA阳性率有差异 ,HBsAg、HBeAg和 (或 )HBcAb阳性组阳性率约为 98.1% ,其中 96 %以上HBVDNA≥ 10 4copy/ml;HBsAg、HBcAb和 (或 )HBeAb阳性组HBVDNA阳性率约为 76 .5 % ,但其中 90 %以上HBVDNA≤ 10 4copy/ml;单纯HBV抗体阳性组HBVDNA阳性率约为13.0 % ,但均为HBVDNA≤ 10 3 copy/ml。三组间HBVDNA阳性率及分布均有明显差异 (P <0 .0 5 )。而且HBVDNA含量与疾病严重程度相关。结论　FQ PCR检测HBVDNA含量结合血清病毒标志物的检测结果对乙型肝炎的临床诊断与病情判断有重要意义     

HBV标志物定量与病毒载量关系探讨

目的 研究乙型肝炎病毒各血清标志物含量与HBV-DNA含量的关系.方法 采用时间分辨免疫荧光分析法(TRIFA)和实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)分别测定1 486例乙肝患者血清中乙型肝炎病毒抗原抗体定量和病毒含量.结果 不同HBV标志物阳性模式的HBsAg定量存在显著差异,相同模式的HBsAg定量也差异极大.HBeAg( )模式的HBV-DNA显著高于HBeAb( )模式及HBeAg(-)HBeAb(-)模式(P＜0.01),而后两者间无显著差异(P＞0.05).HBsAg、HBeAg含量与HBV DNA正相关(r值分别为0.383、0.635,P=0.01),HBeAb含量与HBV DNA负相关(r=-0.563,P=0.01).HBsAg定量与HBeAg定量正相关(r=0.466,P=0.01),与HBeAb定量负相关(r=-0.524,P=0.01).结论 HBV标志物定量之间及与HBV DNA含量间存在一定相关性,但个体差异极大.全面了解HBV标志物含量及HBV DNA定量可更准确判断病毒复制、状态,为临床决策提供可靠依据.     

携带HBV孕产妇血清免疫标志物含量与HBV-DNA载量分析

目的:探讨携带HBV孕产妇血清免疫标志物(HBV-M)含量与乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)载量之间的关系.方法:应用电化学发光法(ECLIA)检测240例携带HBV孕产妇血清标本中HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb含量,用荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)技术同时检测HBV-DNA载量,对2组检测结果进行统计学分析.结果:ECLIA检出不常见模式47例,出现10种血清模式,模式1～5组均有HBV-DNA阳性检出,其中模式1,2,5组的检出率为100％,HBV-DNA载量分别为6E+07±9.02E+07、4.85E+06±3.01E+06、1.51E+07±2.13E+07,模式6～10组HBV-DNA载量<5E+02;HBV-DNA阳性患者HBsAg、HBsAb、HBeAg的定量结果与阴性患者差异有统计学意义(P<0.05),而HBV-DNA阳性患者HbeAb、HBcAb的定量结果与阴性患者差异无统计学意义(P>0.05).240例携带HBV孕产妇血清HBsAg、HBeAg、HBeAb含量与HBV-DNA载量呈正相关(r=0.657、0.562、0.501,P<0.05),HBsAb含量与HBV-DNA载量呈负相关(r=-0.438,P<0.05).结论:HBV-M含量和HBV-DNA载量密切相关,建议将两者相结合,合理制定HBV母婴传播的预防措施.