人生长激素的生物素—新和素放大酶联免疫法的建立

为建立有生物素和亲和素放大系统的人血清生长激素 (hGH)酶联免疫分析法 (BA ELISA) ,以微量的GH抗原免疫BALB/C小鼠 ,利用杂交瘤技术制备出 2 9株分泌抗hGH单克隆抗体 (MCA)的杂交瘤株。选择最佳配对MCA ,利用亲和素与生物素高亲和力的特性 ,建立了血清hGH双位点的BA ELISA法。我们的MCA滴度为 (0 5～ 5 0 0 )× 10 4,亲和常数Ka =(0 13～ 1 40 )× 10 10 L/mol。血清hGH的ELISA的灵敏度为 0 0 4± 0 0 1μg/L ;在血清中分别加入 1,2 5 ,5 μg/L的hGH ,其回收率为 90 7%～ 10 7 6 % (平均为 10 1 2 0 %± 0 0 3 % ) ;hGH含量为 2 8、10 0、2 9 8μg/L的血清批内、批间变异系数分别为 4 9%、3 8%、7 9%和 6 2 %、3 5 %、9 5 % ;用本法测定了正常儿童、生长激素缺乏症 (GHD)患儿和活动性肢端肥大症患者空腹血清hGH水平 ,分别为 1 87± 3 0、0 30± 0 42和 8 71± 6 95 μg/L。上述结果表明 ,本ELISA方法灵敏、特异、稳定、准确 ,能确切反映hGH分泌功能 ,在诸多方面均优于RIA。     

纤维素固相放射免疫测定甲胎蛋白

本文在国内首次报道了纤维素固相RIA法测定甲胎蛋白。本法简便灵敏,快迅稳定,平均回收率95.7±8.08％,批间变异系数r=7.8±1.7％,批内变异系数r=5.8±2.6％,线性关系较好(r=0.999),灵敏度比液相RIA提高6倍,32份血样品用双位点夹心法和试剂盒的液相RIA进行比较,结果经统计学处理,相关系数分别为r=0.82,r=0.80,均具有显著相关性。     

慢性心力衰竭患者血清GH和IGFⅡ测定的意义

目的:探讨慢性心力衰竭患者血清生长激素(GH)和胰岛素样生长因子Ⅱ(IGFⅡ)变化及其临床意义。方法:用放射免疫分析测定了146例慢性心力衰竭(CHF)患者和50例非慢性心力衰竭患者的血清GH和IGFⅡ水平,并进行对照统计分析。结果:CHF组血清GH显著低于对照组(P<0.01),IGFⅡ水平显著高于对照组(P<0.01),两者间成显著负相关(r=-0.337,P<0.05)。在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级组间,血清GH依次递减(FGH=40.88,P<0.01),IGFⅡ水平却依次递增(FIGFⅡ=3.208,P<0.05);GH水平在Ⅳ级组显著低于Ⅱ级组和Ⅲ级组(P<0.01),同时在Ⅲ级组显著低于Ⅱ级组(P<0.01);IGFⅡ水平在Ⅳ级组显著高于Ⅱ级组(P<0.05)。住院期间死亡组血清GH显著低于好转组(P<0.01),但IGFⅡ水平显著高于好转出院组(P<0.01)。结论:CHF患者血清GH显著降低,IGFⅡ显著升高,两者间成显著负相关。Ⅳ级组血清GH显著低于Ⅱ级组和Ⅲ级组,IGFⅡ则显著高于Ⅱ级组,住院期间死亡组血清GH显著降低,IGFⅡ水平显著升高。     

尿毒症血液透析患者血清GH/IGF-1、IL-2、IL-4水平的变化及相关性研究

目的 观察尿毒症血液透析(HD)患者血清GH/IGF-1、IL-2、IL-4水平的变化及其相互关系,以探讨其在免疫-内分泌平衡中的作用.方法 选择终末期尿毒症行HD患者35例及健康对照者20例,于清晨空腹采血,采用双抗体夹心ABC-ELISA法测定血清IGF-1、IL-2、IL-4的含量,化学发光法测定GH水平,多元相关分析研究它们之间的关系.结果 HD患者血清细胞因子IGF-1、IL-2水平与对照组比较明显升高,差异均有显著性(P<0.01);GH、IL-4与对照组比较降低,但无显著性差异(P0.05).多元相关分析表明HD患者血清GH与IGF-1(r=-0.38,P<0.05),GH与IL-4(r=-0.42,P<0.05)均呈显著负相关,而与IL-2无明显相关性;IGF-1与IL-2(r=0.45,P<0.01),IL-2与IL-4(r=0.53,P<0.01),IL-4与IGF-1(r=0.57,P<0.01)均呈显著正相关.结论 HD患者血清IL-2、IL-4水平变化与GH/IGF-1改变相关联,这种变化及其相互影响是免疫-内分泌平衡失调的因素之一.     

游离三碘甲状腺原氨酸酶免疫分析

将三碘甲状腺原氨酸（T3）与β－D半乳糖昔酶联结，制成T3-酶联结物（T3－E）。用T3－E作为示踪剂建立了游离T3（FT3）酶免疫分析（EIA）。本法灵敏度为0.29pmol／L，批内和批间变异系数分别为7.6％－8.7％和7.8％～14.9％，与二碘甲状腺原氨酸（T2）、反T3（rT3）和甲状腺素（T4）的交叉反应率分别为9.7×10-4、1.1×10-4和3.1×10-5。本法与FT3放射免疫分析（RIA）相关性好（r=0.91，P＜0.01）。用本法测定了36名正常人、16名健康孕妇、15例甲亢患者和15例甲低患者的血清中FT3值，其结果与临床相符。     

人γ-干扰素的单克隆抗体免疫放射量度分析

本文用高亲和力、高特异性的人重组γ-干扰素(Hur IFNγ)单克隆抗体(McAb)A3,建立了人γ-干扰素(Hu IFNγ)McAb免疫放射量度分析。本法最小可检测0.1IU/ml,批内和批间变异系数分别为7.4％和17.3％:回收率为1±0.17;稀释试验符合线性关系(r=0.98)。用本法检测29例健康献血员外周血单个核细胞产生IFNγ的量为27.56±10.52IU/ml     

人血清生长激素IRMA的临床意义

人生长激素(hGH)对机体生长及发育起着重要作用。尽管正常人血清hGH分泌呈脉冲式,可高至100μg/L,低到RIA不能测出,但是,借助一些激发试验、抑制试验及基础值的测定,也有助于生长激素分泌紊乱的诊断。现行血清hGH大都以多抗建立的RIA测定,与其他激素,如人泌乳素(hPRL)、胎盘泌乳素(hPL)不免有较大的交叉反应,灵敏度也只有0.2μg/L左右。最近,我们以两株高特异性、高亲和力的hGH单克隆抗体建立了血清hGH免疫放射测定法(IRMA),其灵敏度高达10ng/L。本文以本法测定了多种疾病状态和正常人的血清hGH基础值,以进一步考察GH-IRMA测定法的临床应用潜能。     

人血清生长激素放射免疫分析的临床应用（文献综述）

人血清生长激素(huraan growth hormone，hGH)的放射免疫分析可以直接准确侧定人血清或血浆中生长激素(GH)的浓度，是研究生理情况下垂体GH分泌的一项可靠的方法。在临床上，此项测定对hGH分泌异常的疾病如肢端肥大症、巨人症，垂体性侏儒和垂体功能低下等疾患的早期诊断有重要价值。     

CEA电化学发光免疫分析法的建立

目的建立人癌胚抗原（CEA）的电化学发光免疫分析法（ECLIA）。方法生物素标记的CEA McAb、钌复合物标记配对的CEA McAb、链霉亲和素包被的磁性微粒组成CEA ECLIA试剂,用ECLIA仪检测CEA并做方法学评价。用本法与进口的同类ECLIA试剂对119例结直肠癌、150例肺癌、45例胃癌、32例胰腺癌和34例肝细胞癌患者的血清CEA检测结果进行分析。调查218名志愿者血清CEA正常参考值。结果本法检测CEA的批内CV为1.6%～7.1%,批间CV为2.3%～11.7%,灵敏度为0.2 ng/mL。与CA19-9和AFP无交叉反应。自建ECLIA检测CEA浓度范围为0.2～1000.0ng/mL,正常参考值低于5.6ng/mL。结论自建CEA ECLIA与进口试剂比较（r=0.9641,P〈0.05）,正常参考范围接近进口同类方法。具备产业化的潜能。     

重度子痫前期患者胎盘组织及血清中PSG1的表达研究

目的 探讨妊娠特异性β1糖蛋白-1(PSG1)在重度子痫前期(SPE)孕妇胎盘组织及血清中的表达及其与SPE患者临床指标的相关性。方法 收集2020年8月至2021年4月住院并分娩的孕妇共57例,其中重度子痫前期(SPE)21例、妊娠期高血压(GH)23例、正常对照组孕妇13例;收集其分娩前血清标本及分娩后的胎盘组织;应用real-time PCR及Western blot分别检测其胎盘组织中PSG1 mRNA及PSG1蛋白的表达;利用ELISA法检测血清PSG1水平,并分析血清PSG1水平与相关指标之间的相关性。结果 随着病情的进展,无论在胎盘组织及血清中PSG1的表达均呈一定的下降趋势,具体表现为SPE孕妇胎盘组织及血清中PSG1的表达水平均显著低于GH及对照组孕妇(P<0.05);GH孕妇胎盘组织PSG1 mRNA水平低于对照组孕妇(P<0.05),而血清PSG1水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。PSG1在SPE组孕妇血清中的水平与孕妇收缩压(r=-0.687,P<0.05)、24h尿蛋白定量(r=-0.781,P<0.05)呈显著负...     

人血清生长激素结合蛋白活性的快速测定法及其初步临床应用

利用葡聚糖包裹活性炭分离技术，建立了人血清生长激素结合蛋白（GH-BP）活性快速测定法，并在方法学方面进行了探讨。本法批内CV为4.9％，批间CV为9．6％。结果显示正常男性、女性、儿童及妊娠后期的孕妇的GH-BP水平之间无显著性差异（P＞0．05）；而肝硬化患者和一些生长激素（GH）分泌正常的矮小患儿的GH-BP水平明显降低（P＜0001）。提示人血清GH-BP的测定，对GH不缺乏的矮小儿的临床诊断以及与生长激素受体（GHR）改变有关的疾病研究具有十分重要的意义。     

Graves''病患者GH与IGF-1水平观察

目的:探讨Graves病(GD)患者对血清生长激素(GH)与胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平的影响.方法:采用放射免疫分析(RIA)检测42例GD患者、20例经治疗甲状腺功能恢复至正常水平GD患者与30例健康人血清GH与IGF-1水平.结果:GD组,血清IGF-1水平(170.8±44.4)ng/ml、GH水平(2.89±1.18)ng/ml明显升高,与对照组(IGF-1为90.5±30.5ng/ml、GH为1.58±1.20ng/m1)比较有显著性差异(p＜0.01、p＜0.05),且IGF-1与FT4正相关(r=0.58,p＜0.01).GD治疗缓解组,IGF-1水平(105.1±37.0)ng/ml、GH水平(1.71±1.36)ng/ml明显低于初诊未治疗组,差异有显著性(P＜0.01、P＜0.05).结论:GD患者血清IGF-1和GH水平明显升高,并且可能与甲状腺激素存在一定的关系.     

单克隆抗体ELISA双抗体夹心法测定人白细胞介素2

本文叙述了测定人白细胞介素2(IL-2)含量的ELISA双抗体夹心法。用辣根过氧化物酶标记IL-2单克隆抗体。聚苯乙烯反应板预先用0.1％戊二醛处理,然后以单克隆抗体包被。本法批内变异系数CV=3.99％,批间变异系数CV=5.96％,标准曲线的测定范围为3.1～100u/ml,检测下限为1.55u/ml。应用本法已测定了2S例正常人和11例恶性肿瘤患者的IL-2含量。     

血清及胆汁SIgA夹心EIA测定法

本SIgA夹心酶免疫(EIA)定量分析法是以抗人分泌成分(SC)抗体包被固相载体、辣根过氧化物酶(HRP)标记抗人IgA抗体的Fab′片断作为酶标抗体。本方法灵敏度达O.625ng/孔,特异性强,批内变异系数和批间变异系数分别为5.8～9.3％和6.2～9.2％,回收率为99.6～108.7％,与相应的RIA法高度相关(r=0.961),标本用量甚微,2～4μl血清就可测定。用本方法测定117例正常成人血清,SIgA正常值为2.98～18.15μg/ml(8.04±3.60μg/mld);16份“T”管胆汁标本测定结果为40.8±25.0μg/ml。     

不同生长激素激发试验诊断垂体性侏儒症的临床价值比较

生长激素(Human growth hormone, hGH)缺乏所致的垂体性侏儒症是儿童矮小的重要原因之一,而通过检测药物性或生理性激发试验后的hGH水平,判断垂体hGH储备功能是诊断hGH分泌是否异常的可靠实验室方法,但目前临床上使用的激发试验方法较多,而且影响hGH基础值和反应值的因素也颇多,各种试验都存在一定的假阳性反应(指GH分泌低下).为此,本文对120例临床疑诊hGH分泌缺乏的身材矮小儿童随机分组分别进行左旋多巴、胰岛素、运动、深睡眠等激发试验,采用放射免疫分析法检测血清hGH,并加以比较,现将结果报道如下.     

酒精性肝硬化患者血清TGF-β1水平与脂质过氧化的相关性分析

目的:探讨酒精性肝硬化患者血清TGF-β1水平与脂质过氧化的相关性。方法:应用放射免疫分析和化学法对36例酒精性肝硬化患者进行了血清TGF-β1和SOD、MDA检测,并与35名正常健康人作比较。结果:酒精性肝硬化患者血清TGF-β1、MDA水平非常显著地高于正常人组(P<0.01),而血清SOD水平又非常显著地低于正常人组(P<0.01)。血清TGF-β1水平与MDA水平呈正相关(r=0.6138,P<0.01),而与SOD水平呈负相关(r=-0.3784,P<0.01)。结论:检测酒精性肝硬化患者血清TGF-β1和SOD、MDA水平的变化对于了解病情、观察疗效和病后判断均具有一定的临床实用价值。     

肺癌患者血清SS和VEGF检测的临床意义

目的:探讨了血清生长抑素(SS)和血管内皮生长因子(VEGF)水平在肺癌患者中的变化。方法:分别应用放射免疫分析和双抗体夹心ELISA对31例肺癌患者进行了血清SS和VEGF水平测定,并以35名正常健康人作比较。结果:肺癌患者血清SS和VEGF水平非常显著地高于正常人组(P<0.01),且SS和VEGF呈明显正相关(r=0.6021,P<0.01)。结论:检测肺癌患者血清SS和VEGF水平的变化对了解病情,指导临床实践均具有重要的临床价值。     

分娩前后血清生长激素变化的观察

目的 :了解女性血清生长激素 (GH)在妊娠期及分娩前后的变化。方法 :采用放射免疫分析 (RIA)检测 76例正常非孕期妇女、6例妊娠晚期妇女、32例临产期妇女和 2 0例产褥期妇女的血清生长激素 (GH)。结果 :妊娠晚期和临产组血清GH含量明显高于正常组和产褥组 ,差异有显著性 (p <0 0 1 ) ;妊娠晚期组与临产组无明显差异 (p >0 0 5 )产褥组与正常组也无明显差异 (p >0 0 5 )。 结论 :GH在妊娠后期和临产期明显升高 ,反映了母体的正常功能 ,为胎儿的正常发育所必需。分娩后迅速恢复正常 ,表明孕期及妊娠期增高的可能主要是母体中胎血GH的含量     

抑郁症患者血清维生素D与C反应蛋白水平

目的:探讨抑郁症患者血清维生素D与C反应蛋白水平与抑郁程度的相关性。方法:检测149名抑郁症患者和173名健康体检者血清维生素D和C反应蛋白的浓度,采用流调中心抑郁量表(CES-D)评估抑郁症患者的抑郁程度。对抑郁症患者血清维生素D和C反应蛋白与CES-D分进行相关性分析。结果:与正常人群相比,抑郁症患者的血清维生素D水平偏低(t=-16.54,P0.001),C反应蛋白的浓度偏高(t=8.63,P0.001)。抑郁症患者CES-D分与血清维生素D浓度呈负向相关(r=-0.568,P0.05),与血清C反应蛋白浓度呈正向相关(r=0.477,P0.05);抑郁症患者血清维生素D浓度与C反应蛋白浓度呈负向相关(r=-0.377,P0.05)。结论:抑郁症患者的血清维生素D水平偏低,血清C反应蛋白水平偏高,均与抑郁症患者抑郁程度存在相关。     

高灵敏度C-反应蛋白酶免疫分析及其临床应用

本文建立了高灵敏度C-反应蛋白的酶免疫分析(hs-CRP EIA或hs-CRP ELISA)方法.取抗CRP单克隆抗体C1在0.05mol/L pH9.0的碳酸缓冲液中将其包被在板条微孔内,成为固相抗体,以过碘酸钠方法将抗CRP单抗E11与辣根过氧化物酶相联结,成为标记抗体,与不同量的CRP标准品在磷酸缓冲液中保温反应,完成标准曲线.Bmax/B0为61.5,非特异结合小于1.6%,灵敏度小于0.1mg/L,批内CV为5.8%,批间CV为11.5%,回收率为98.8%.测定正常人450名:包括50岁以下270名,其中男160名、女110名,血清hs-CRP分别为1.34±0.80mg/L和1.25±0.92mg/L;50岁以上180名,其中男96名、女84名,hs-CRP分别为2.23±1.21mg/L和2.01±1.45mg/L.50岁以上组,血清hs-CRP值显著高于50岁以下组(P<0.01).测定急性心肌梗死12例,血清hs-CRP为51.6±20.1mg/L,显著高于正常人组(P<0.0001),其他心血管疾病14例,hs-CRP也都显著高于正常人组(P<0.001),肺癌10例,hs-CRP为18.2±8.34mg/L,显著高于正常人组(P<0.001),其他肿瘤14例,hs-CRP也都显著高于正常人组(P<0.001).新建hs-CRP ELISA与现行hs-CRP IRMA具有良好的相关性:Y=0.9198X, r2=0.9186.