姜黄素对哮喘大鼠气道炎症与核因子κB表达的影响

目的：探讨姜黄素对支气管大鼠气道炎症及核因子-κB(NF-κB)的影响。方法：Wistar大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、姜黄素组各12只，采用卵蛋白(OVA)等致敏大鼠哮喘模型，观察3组动物哮喘发作症状、气道炎症情况及免疫组化染色后NF-κB的核着色情况。结果：哮喘模型组大鼠哮喘发作症状最明显，姜黄素组大鼠症状轻，正常对照组无症状。哮喘模型组支气管周围明显炎细胞浸润，且以浆细胞，嗜酸性粒细胞浸润为主，姜黄素组较哮喘模型组明显减轻，正常对照组无明显炎细胞浸润。肺泡灌洗液总细胞数及嗜酸性粒细胞哮喘模型组明显高于正常对照组和姜黄素组。肺组织石蜡切片免疫组化发现哮喘模型组NF-κB的核着色最强，姜黄素组较弱，正常对照组微弱表达。结论：姜黄素可抑制哮喘的慢性气道炎症，其机制可能与姜黄素抑制哮喘大鼠NF-κB的活性有关。     

姜黄素对哮喘大鼠气道炎症与核因子κB表达的影响

目的:探讨姜黄素对支气管大鼠气道炎症及核因子-κBNF-κB的影()响。方法:Wistar大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、姜黄素组各12只,采用卵蛋白OVA等致敏大鼠哮喘模型,观察3组动物哮喘发作症()状、气道炎症情况及免疫组化染色后NF-κB的核着色情况。结果:哮喘模型组大鼠哮喘发作症状最明显,姜黄素组大鼠症状轻,正常对照组无症状。哮喘模型组支气管周围明显炎细胞浸润,且以浆细胞、嗜酸性粒细胞浸润为主,姜黄素组较哮喘模型组明显减轻,正常对照组无明显炎细胞浸润。肺泡灌洗液总细胞数及嗜酸性粒细胞哮喘模型组明显高于正常对照组和姜黄素组。肺组织石蜡切片免疫组化发现哮喘模型组NF-κB的核着色最强,姜黄素组较弱,正常对照组微弱表达。结论:姜黄素可抑制哮喘的慢性气道炎症,其机制可能与姜黄素抑制哮喘大鼠NF-κB的活性有关。     

糖皮质激素对哮喘大鼠气道上皮细胞NF-κB、ICAM-1表达的影响

目的探讨糖皮质激素（布地奈德混悬液）对核因子-κB（NF-κB）、细胞间粘附分子-1（ICAM-1）在哮喘大鼠气道上皮细胞表达的影响。方法将30只大鼠随机分为对照组、哮喘组、布地奈德治疗组，应用免疫组化技术结合计算机病理图像分析系统测定大鼠气道上皮胶原的沉积和气道上皮细胞NF—κB、ICAM-1的相对含量。结果哮喘组NF—κB、ICAM-1的表达水平、气道上皮胶原的沉积明显高于对照组及布地奈德治疗组（均P〈0．01），气道上皮细胞NF—κB与ICAM-1表达呈正相关（r-0．61，P〈0．01），ICAM的表达水平与气道上皮胶原含量呈正相关（r=0．47，P〈0．01）。结论NK-κB、ICMA-1在哮喘气道重构的发生机制中发挥重要作用，早期应用布地奈德可能通过下调NF-κB、ICAM-1的表达，干预气道重构。     

尘螨疫苗免疫治疗下调哮喘小鼠气道IL-17的表达

目的探讨尘螨疫苗免疫治疗对尘螨过敏性哮喘小鼠气道IL-17表达的影响。方法 24只BAL B/c小鼠随机分为正常对照组(A组)、哮喘对照组(B组)和尘螨疫苗治疗组(C组),每组8只。A组小鼠始终采用生理盐水处理;B、C组小鼠采用尘螨过敏原经腹腔建立尘螨过敏性哮喘小鼠模型后,B组采用生理盐水治疗,C组采用粉尘螨疫苗治疗。治疗7d后采用尘螨粗提液雾化激发B、C组小鼠,末次激发24h后取小鼠肺组织采用HE染色观察炎性反应变化,取小鼠气道采用免疫组化法分析IL-17浓度,取小鼠脾细胞培养上清液采用ELISA法测定IL-17浓度。结果光镜下可见B组小鼠肺组织结构紊乱、充血及水肿,有大量炎性细胞浸润,而A、C组小鼠肺组织未见明显病理变化。B组小鼠气道IL-17表达明显高于A、C组小鼠。同时B组小鼠脾细胞培养上清液IL-17浓度显著高于A、C组小鼠(P0.01),而A、C组小鼠脾细胞培养上清液IL-17浓度差异无统计学意义(P0.05)。结论尘螨疫苗免疫治疗可降低尘螨过敏性哮喘小鼠气道IL-17的表达,减轻尘螨过敏性哮喘小鼠气道炎性反应。     

咪喹莫特对哮喘小鼠TGF-β1及Smads蛋白的影响

目的观察咪喹莫特对哮喘小鼠肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)及其信号转导分子Smads表达的影响。方法40只小鼠按随机数字表法分成4组,每组10只。正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、布地奈德治疗组(C组)和咪喹莫特治疗组(D组)。小鼠于第0、14天以卵白蛋白(OVA)致敏,第24天开始雾化吸入1%OVA激发并持续28 d,建立哮喘气道重塑模型,C组和D组在吸入OVA前2 h分别雾化吸入布地奈德或咪喹莫特30 min。于最后1次雾化结束后24 h,对肺组织切片行苏木精-伊红(HE)染色观察病理学改变、过碘酸雪夫(AB-PAS)染色定量杯状细胞百分比及黏液分泌、Masson染色测定胶原沉积;用免疫组化方法检测肺组织TGF-β1的蛋白表达水平;用逆转录-聚合酶链反应半定量检测肺组织TGF-β1mRNA以及Smad2、Smad7 mRNA表达水平。结果B组杯状细胞增生明显,伴黏液高分泌,气管壁胶原过度沉积,与A组比较差异有统计学意义(P<0.05);D组杯状细胞轻度增生,黏液分泌减少,气管壁胶原沉积减轻,与B组比较差异有统计学意义(P<0.05);B组TGF-β1蛋白和mRNA、Smad2mRNA的表达较A组增加,差异有统计学意义(P<0.05),C、D组TGF-β1蛋白和mRNA、Smad2mRNA的表达下降,与B组比较差异均有统计学意义(P<0.05),D组可显著上调Smad7mRNA的表达,与B组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论雾化吸入咪喹莫特通过抑制慢性哮喘小鼠肺组织TGF-β1蛋白和mRNA、Smad2mRNA的过度表达,上调Smad7mRNA的表达,从而阻断TGF-β1的胞内信号转导,可在一定程度上减轻哮喘小鼠的气道重塑。     

姜黄素与地塞米松对百草枯中毒大鼠肺组织损伤治疗作用的对比研究

目的 观察姜黄素和地塞米松对百草枯致肺纤维化大鼠胶原沉积、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响.方法 将80只雄性Wistar大鼠随机分为4组,每组20只.百草枯组用百草枯50 mg/kg一次性灌胃染毒,1 h后腹腔注射生理盐水1 ml;姜黄素组染毒1 h后腹腔注射姜黄素200 mg/kg;地塞米松组染毒1 h后腹腔注射地塞米松3 mg/kg;对照组用1 ml生理盐水灌胃,1 h后再腹腔注射生理盐水1 ml.各组每日用药1次,直至处死动物前1 d为止.各组于1、3、7、14 d随机处死5只动物,取肺组织进行苏木素-伊红(HE)染色、Masson染色,观察病理学改变;采用免疫组化染色,检测肺组织中TGF-β1表达水平.结果 地塞米松组和姜黄素组大鼠肺组织胶原沉积较百草枯组明显减少.百草枯组、地塞米松组和姜黄素组7 d和14 d时TGF-β1表达均显著高于对照组,且地塞米松组和姜黄素组明显低于百草枯组(P＜0.05或P<0.01);而地塞米松组和姜黄素组各时间点TGF-β1表达则无明显差异(P均>0.05).结论 姜黄素和地塞米松均可减轻百草枯所致大鼠肺泡炎和肺纤维化,其作用机制可能与抑制TGF-β1有关.姜黄素和地塞米松治疗效果无明显差异,但姜黄素比地塞米松副作用少,更具有临床应用价值.     

STAT5、STAT6在哮喘肺组织的表达

目的探讨信号传导和转录激活因子(STAT)5、STAT6在哮喘小鼠肺组织的表达。方法 16只小鼠随机分为A组(哮喘模型组,8只)和B组(正常对照组,8只)。其中A组小鼠于第1、13天分别给予卵清蛋白(OVA)20μg和Al(OH)3 1 mg混悬液致敏,第21～30天每天予2%OVA生理盐水10 ml建立哮喘模型;B组以生理盐水代替OVA致敏和激发。31 d颈椎脱臼处死小鼠,取肺组织,经固定、石蜡包埋,制成组织切片,采用免疫组化方法检测肺组织STAT5、STAT6蛋白的表达水平。结果 A组STAT5、STAT6蛋白表达明显高于B组〔(23.25±3.28)×103 vs(2.33±0.78)×103,P<0.01;(26.11±3.95)×103 vs(2.78±0.32)×103,P<0.01〕。肺组织病理学改变:A组大鼠肺组织切片HE染色可见支气管和血管周围炎性细胞浸润,以淋巴细胞、嗜酸性粒细胞为主,气道腔内可见黏液栓,气道上皮多处断裂,气道上皮细胞存在STAT6的表达,而且气道上皮细胞是哮喘主要的STAT6高表达细胞,胞浆呈棕黄色,且着色较深,气道内黏液腺体增生、杯状细胞肥大、上皮剥脱。B组无上述情况。结论 STAT5、STAT6在哮喘的发病机制中起重要作用。STAT5可能参与了哮喘发病的调控过程,具有促进嗜酸性粒细胞分化、增殖作用;气道炎性细胞浸润以及气道高反应性可能与STAT6基因高表达有关。     

氨茶碱对肥胖哮喘大鼠脂联素表达及气道炎症的干预作用

目的:观察肥胖哮喘大鼠体内脂联素表达水平的变化及氨茶碱对脂联素表达及气道炎症的影响.方法:将大鼠随机分为正常体重对照组(A组)、哮喘组(B组)、茶碱干预组(C组)和肥胖对照组(D组)、哮喘组(E组)、茶碱干预组(F组),建立肥胖、哮喘模型.计数支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞总数,图像分析软件测定气道壁厚度,ELISA测定血清、BALF脂联素浓度,RT-PCR测定脂肪组织脂联素mRNA的表达.结果:(1)BALF细胞总数和支气管壁厚度,E组较B组均有所升高,C、F组分别较B、E组明显降低.(2)脂肪组织脂联素mRNA表达及血清、BALF脂联素浓度,E组较B组明显降低,C、F组分别较B、E组明显升高.结论:脂联素表达显著降低是肥胖哮喘大鼠气道炎症更为明显的重要原因.氨茶碱能抑制气道炎症并部分恢复哮喘大鼠脂联素表达.     

盐酸氨溴索对新生大鼠高氧慢性肺损伤肺纤维化的干预研究

目的探讨盐酸氨溴索对高氧性肺损伤新生大鼠肺组织纤维化的干预作用。方法出生12 h内的清洁级SD大鼠30只作为研究对象,随机分成3组(每组10只):空气对照组(A组)、高氧组(B组)、高氧加盐酸氨溴索组(C组)。除A组外,B组和C组均建立高氧肺损伤动物模型。C组新生大鼠每天腹腔注射溶于9 g/L氯化钠溶液中的盐酸氨溴索[20 mg/(kg.d)],A、B组新生鼠每日腹腔注射等量9 g/L氯化钠溶液,持续14 d。第14 d处死,取其肺组织切片,伊红染色法(HE)观察其肺组织病理变化;Masson三色染色图像定量分析计算其胶原纤维阳性面积百分比,酶联免疫分析法(ELISA法)测定肺组织Ⅲ和Ⅳ型胶原蛋白,判断其肺纤维化程度。结果 B组第14天肺组织病理发现间质细胞增多,肺泡数目减少,肺组织出现纤维化改变;C组肺组织病理改变明显减轻。与A组比较,B组Ⅲ型胶原及Ⅳ型胶原表达明显增多,胶原纤维阳性面积百分比明显增高(P<0.05)。C组与B组比较,Ⅲ型胶原及Ⅳ型胶原表达及胶原纤维阳性面积百分比明显下降(P<0.05)。结论盐酸氨溴索早期干预可减轻高氧性肺损伤新生大鼠的肺组织纤维化程度。     

红景天苷抑制大鼠肺纤维化机制研究

目的探讨红景天苷对大鼠肺纤维化的抑制作用机制。方法 SD大鼠18只,随机分为3组:对照组(6只),生理盐水组(A组,6只),红景天苷组(B组,6只)。大鼠气管内注射博来霉素制备肺纤维化模型后,A组每天腹腔注射生理盐水(5 mg/kg),B组每天腹腔注射红景天苷(5 mg/kg)。对照组气管和腹腔内注入等体积生理盐水。4周后处死动物,提取肺组织分别行Masson染色,免疫组化检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA),PCR检测胶原I的mRNA表达。结果与对照组相比,A组Masson染色纤维化程度增强,α-SMA表达、胶原I mRNA表达明显升高(P0.05);同A组相比,B组Masson染色纤维化程度减弱,α-SMA表达、胶原I mRNA表达降低(P0.05)。结论红景天苷对肺纤维化有一定治疗作用,其机制可能与调控胶原相关蛋白有关。     

滨蒿内酯对大鼠哮喘模型α—SMA的表达及平滑肌增殖的影响

目的 观察滨蒿内酯对哮喘大鼠气道壁平滑肌增殖及α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达的影响,探讨滨蒿内酯治疗哮喘的作用机制。方法40只雄性大鼠随机分成4组：正常对照组（N组）、哮喘组（A组）、地塞米松治疗组（D组）及滨蒿内酯治疗组（S组）,以卵清蛋白致敏和激发方法建立哮喘大鼠动物模型并给予相应治疗,光镜下测定平滑肌层厚度及内外径,免疫组化法检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）在肺组织的表达。结果哮喘模型组大鼠表现为呼气时间延长,呼气峰压明显增大,模型复制成功;A组气道壁α-SMA蛋白表达阳性率和平滑肌层厚度较N组均显著增加（均为P〈0．01）,气道内外径比值较正常组减小（P〈0．01）,S组α-SMA蛋白表达及平滑肌层厚度较A组减少,两两比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论滨蒿内酯能够抑制α-SMA的表达,减轻气道炎症反应、减轻平滑肌增殖,延缓气道重构进程。     

骨髓间充质干细胞移植对百草枯中毒导致肺纤维化的影响

目的 观察外源性骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对大鼠急性PQ中毒导致的肺纤维化是否产生治疗作用及其可能的机制.方法 取54只SD雄性大鼠,随机(随机数字法)分成3组:A组为空白对照组,B组为PQ+ PBS组,C组为PQ+BMSCs组.其中B组、C组均以120mg/kg的PQ溶液予以一次性灌胃染毒,染毒后6hC组大鼠予以尾静脉注入BMSCs 1×106个/mL,而B组大鼠则予以注入相应剂量的PBS.观察各组大鼠的一般情况,于染毒后7d、14 d、28 d处死未死亡的大鼠,取左下肺组织,行HE和Masson染色观察各组肺组织的病理改变情况,根据Szapiel肺泡炎和肺纤维化的分级法进行肺纤维化评分,并行免疫组织化学检测肺组织中TGF-β1及HGF的表达情况;取右下肺,检测HYP对比各组肺组织中的HYP含量的变化情况.结果 肺组织病理改变:染毒7d后可见B组肺泡炎性改变明显,肺泡腔内可见大量渗出液;C组的肺泡炎性渗出相对B组为轻.14 d可见B组肺泡间质水肿及渗出减轻,但肺间质胶原纤维增多;C组间质纤维化沉积程度相对B组较轻.28 d时B组肺间隔增厚普遍可见胶原纤维沉积,肺泡扩张明显,肺泡间隔断裂,肺泡结构紊乱;C组间隔中的胶原纤维化较B组轻,肺泡基本结构仍可见.HYP含量:B组大鼠肺组织HYP含量随着染毒时间的延长呈进行性增加,28 d时达最高峰,各时间点与A组比较均增高(P＜0.01);C组HYP的含量随时间的延长呈进行性增加,28 d达到最高峰,各时间点均较B组减少(P＜0.01).肺组织TGF-β1及HGF的表达:B组大鼠肺组织TGF-β1表达含量增多且分布范围较A组广,TGF-β1的表达在7d为最高峰,此后逐渐减少,但各时间点均高于A组(P＜0.05);C组大鼠肺组织各时间点TGF-β1表达含量均较B组少(P＜0.05).B组肺组织HGF的表达随着时间点延长逐渐增多,但各时间点比较差异无统计学意义(P＞0.05);B组与A组比较略有增多,但差异无统计学意义(P＞0.05);C组肺组织HGF表达含量随着时间的延长逐渐增多,各时间点比较差异有统计学意义(P＜0.05),各时间点与A组及B组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 外源性BMSCs移植对PQ诱导的肺纤维化程度有一定的抑制作用,可能与其上调HGF表达、下调TGF-β1的表达有关.     

RNA干扰靶向抑制结缔组织生长因子拮抗肾脏纤维化的发展

目的 研究RNA干扰靶向抑制结缔组织生长因子(CTGF)对高血压大鼠肾脏纤维化指标的影响.方法 本研究于2006-2008年在武汉协和医院心血管病研究所完成,实验以自发性高血压大鼠(SHR)为动物模型,随机(随机数字法)分为未干预的SHR组(n=10)和RNA干扰组(RNAi组,n=10),并设置WKY大鼠(n=8)为正常对照组.构建并筛选出靶向大鼠CTGF的RNAi质粒重组体,通过升主动脉钳夹冠脉灌注法联合尾静脉注射将质粒转染至大鼠体内,RNA干扰结束后,获取肾脏标本,RT-PCR和Western blotting检测肾脏组织CTGF及纤维连接蛋白(FN)的mRNA和蛋白表达,免疫组化技术分析CTGF及FN在肾脏的空间表达.0.1%天狼星红-饱和苦味酸胶原染色分析肾组织胶原类型及代谢水平(以胶原容积分数CVF表示),比色法测定肾脏组织羟脯氨酸含量.所有数据以(x-±s)表示,多个均数的组间比较采用单因素方差分析,以P<0.05为有统计学意义.结果 RNA干扰使高血压大鼠肾脏组织CTGF的mRNA和蛋白表达分别下调66%和62%(P<0.01),FN mRNA和蛋白的表达也相应降低达56%和51%(P<0.01);免疫组化显示了同样的抑制效应,而且观察到CTGF及FN不同的空间表达,CTGF在肾实质和间质中均可表达,而FN主要在肾脏间质表达.天狼星红染色显示RNA干扰组胶原沉积减少,偏光显微镜下进一步观察到RNA 干扰主要抑制了I型胶原的合成;肾脏组织羟脯氨酸含量在RNA干扰组显著减少[SHR组:(0.596±0.067)μg/mg,RNAi组:(0.368±0.084)μg/mg,P<0.01].结论 C-CTGF靶向性RNA干扰显著下调肾组织中CTGF的表达并相应抑制细胞外基质在肾间质的沉积,且这种效应独立于降压之外.提示CTGF在肾脏纤维化发生及进展中起着关键作用.     

地塞米松对急性肺损伤肺组织中foxml基因的作用

目的 探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)内毒素所致的小鼠急性肺损伤(acute lung in-jury,ALI)时肺组织foxml转录因子和foxml基因表达及其在ALI中的保护作用,并观察地塞米松(dex-amethasone,DEX)对foxml基因表达和病情转归的影响.方法 72只健康小鼠随机(随机数字法)分为3组:对照组(A组,n=24),模型组(B组,n=24),地塞米松治疗组(C组,n=24).对照组小鼠腹腔注射0.9%生理盐水(0.3 mL).模型组小鼠腹腔注射LPS(5 mg/kg).地塞米松治疗组小鼠腹腔注射u)s(5 mg/kg),6 h后腹腔注射地塞米松(5 mg/kg),三组分别选取24 h,48 h,72 h三个观测点.免疫组织化学方法检测各组小鼠肺组织foxml蛋白的表达,应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测各组小鼠肺组织foxml基因的表达强度,并观察肺组织病理变化.结果 组间比较,在24 h,48 h,72 h时,模型组小鼠肺组织foxml mRNA与foxml蛋白均显著高于对照组(P<0.05),地塞米松治疗组小鼠肺组织foxml mRNA与foxml蛋白均显著高于模型组(P<0.05);组内比较,在48 h无论模型组和地塞米松治疗组小鼠肺组织foxml mRNA与foxml蛋白均达到高峰,48 h小鼠肺组织foxml mRNA与foxml蛋白显著高于72 h(P<0.05),72 h显著高于24 h(P<0.05).地塞米松治疗组和模型组比较,肺组织病理改变明显减轻.结论 在模型组和地塞米松治疗组,肺组织中foxml mRNA和foxml蛋白均明显增加.地塞米松通过促进肺组织中foxml mRNA和foxml蛋白表达,修复受损的内皮细胞和上皮细胞,减轻肺损伤的程度.     

百草枯中毒大鼠肺组织热休克蛋白70表达及乌司他丁干预研究

目的 观察热休克蛋白70(HSP70)在百草枯(Paraquat PQ)中毒大鼠肺组织中表达及乌司他丁干预对其影响.方法 72只Spragne-Dawley(SD)大鼠随机(随机数字法)分为3组:空白对照组(A组)、染毒组(B组)和乌司他丁组(C组),每组各24只.B组和C组PQ灌胃(80 mg/kg)染毒建立急性中毒模型.C组于PQ灌胃后30 min腹腔注射给UTI(10万U·kg-1·d-1).观察染毒后12,24,48,72 h各组肺组织HSP70的表达、湿/干重比(W/D)和病理改变.HSP70采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定.计量资料以均数±标准差((x)±s)表示,组间单因素方差分析,结果以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 与A组相比,各时间点B组和C组肺组织HSP70的表达明显增强,尤以C组为甚,差异有统计学意义.B组和C组肺组织病理检查可见PQ中毒后肺泡壁充血、炎性细胞浸润,并有局灶性出血.但C组病理改变较轻.结论 乌司他丁增强HSP70的表达,从而减轻PQ中毒大鼠急性肺损伤.     

乌司他丁对百草枯中毒大鼠氧化应激及核因子κB的影响

目的观察急性百草枯（PQ）中毒大鼠氧化应激及肺组织核因子-κB（NF-κB）的变化,探讨乌司他丁（UTI）的治疗机制。方法将72只SD大鼠按随机数字表法分为A、B、C 3组,每组各24只。B、C组PQ灌胃（80 mg·kg^-1）染毒建立SD大鼠肺损伤模型;A组生理盐水1 mL灌胃。C组于PQ灌胃后30 min腹腔内注射UTI 10 U·kg^-1·d^-1;A、B组腹腔注射等量生理盐水。注射后12、24、48、72 h观察3组大鼠肺组织病理改变;测定血清中丙二醛（MDA）含量及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）的变化;计算肺湿/干重比（W/D）及肺组织中NF-κB p65 mRNA的表达。结果肺组织病理变化：B、C组PQ中毒后肺泡壁充血、炎性细胞浸润,并有局灶性出血;A组无明显变化。MDA含量：B、C组各时间点明显高于A组,C组较B组明显降低（P〈0.05或P〈0.01）。SOD、GSH-Px：B组各时间点较A组明显下降（P〈0.01）,C组较B组明显升高（P〈0.05或P〈0.01）。NF-κB p65 mRNA表达：B、C组肺组织表达明显高于A组（P〈0.05或P〈0.01）,C组明显低于B组（P〈0.01）。肺W/D：B、C组各时间点较A组明显增强（P〈0.05或P〈0.01）,C组较B组明显下降（P〈0.05）。结论氧化应激及NF-κB活化是参与PQ中毒肺损伤的重要因素;UTI能纠正氧化还原失衡,抑制NF-κB活化,减轻PQ中毒大鼠的肺损伤。     

大鼠糖尿病性心肌病的超声心动图研究

目的 应用超声心动图多普勒组织成像(DTI)及背向散射积分(IBS)技术评价糖尿病性心肌病大鼠左心室功能及心肌纤维化.方法 通过腹腔注射链尿左菌素(65 mg/kg)建立SD大鼠糖尿病模型,模型成功后第4、12、24周,测定左室缩短分数(LVFS)、二尖瓣121舒张早期与舒张晚期血流速度比值(E/A)、二尖瓣环DTI舒张早期与舒张晚期峰值运动速度比值(Ea/Aa)以及左室后壁心肌校正IBS(IB%)、IBS周期变异幅度(CVIB).Masson染色观察胶原在心肌间质的沉积.同期检测心脏质量指数(HWI)、心肌SERCA2a活性及CTGF在心肌的分布及表达.并与同龄正常大鼠组进行比较.结果 ①糖尿病组舒张功能减低最早出现在模型成功后第4周(E/A<1),并逐渐加重,24周达二尖瓣血流假性正常阶段(E/A>1),DTI可帮助鉴别(Ea/Aa<1).与对照组相比,糖尿病大鼠IB%明显增高(P<0.05),CVIB于第24周时明显减低,差异均有统计学意义(P<0.05).LVFS无明显变化.②与对照组相比,糖尿病大鼠HWI、心肌胶原容积分数、血管周围胶原面积及结缔组织生长因子表达均明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05),且与IB%呈正相关,同时SERCA2a活性明显减低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 超声心动图能早期检测到左室功能异常和心肌纤维化.在二尖瓣血流假性正常阶段,DTI可协助诊断.糖尿病心肌病可能与SERCA2a活性下降及CTGF的过表达有关.     

超声作用下CTGF-siRNA对大鼠肝纤维化基因治疗的实验研究

目的探讨利用超声微泡造影剂介导携带结缔组织生长因子-小干扰RNA(CTGF-siRNA)真核表达质粒转染大鼠肝细胞的有效性。方法 (1)构建CTGF-siRNA真核表达质粒;(2)将40只实验大鼠随机分为7组:正常组,实验对照组,CTGF-siRNA质粒组,超声联合微泡组,超声联合微泡介导基因低、中、高剂量组;(3)建立肝纤维化模型,基因治疗4周后处死大鼠,超声及病理切片HE染色评价肝纤维化程度,masson染色观察胶原纤维含量,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝组织中CTGF、Ⅰ型和Ⅲ型胶原的mRNA表达。结果 (1)CTGF-siRNA基因治疗后超声及病理切片显示干预组纤维化程度降低;(2)masson染色显示超声介导微泡基因组胶原纤维含量表达量随着剂量增高而降低(P<0.05);(3)RT-PCR显示超声介导微泡基因组CTGF、Ⅰ型和Ⅲ型胶原的mRNA表达明显低于其他组,且随着质粒剂量增大而减少(P<0.05)。结论超声微泡作用下CTGF-siRNA基因能特异地作用于靶位点,有效抑制肝纤维化进程,提高对肝纤维化干预的特异度。     

微小RNA-21和转化生长因子β1在急性呼吸窘迫综合征大鼠肺纤维化组织中的表达变化

目的检测微小RNA-21（miR-21）和转化生长因子β1（TGF-β1）在脓毒症诱导急性呼吸窘迫综合征（ARDS）大鼠肺纤维化组织中的表达变化。 方法将72只大鼠分为对照组和实验组,每组36只。对照组大鼠仅开腹后关腹处理;实验组大鼠采用盲肠结扎-穿孔法建立ARDS模型。每组大鼠分别于术后12 h、1 d、2 d、3 d、4 d、5 d时间点各处死6只大鼠。取大鼠左肺组织用于苏木精-伊红（HE）染色,镜下观察肺组织结构变化,免疫组织化学法检测TGF-β1表达。取右肺组织,应用PCR法检测大鼠肺组织miR-21表达情况。 结果各实验组大鼠术后较相应对照组出现活动明显减少,反应迟钝,呼吸急促。显微镜下,对照组大鼠肺组织未见明显炎症细胞浸润和肺实质胶原沉积。实验组大鼠肺组织可见大量炎症细胞及红细胞渗出,成纤维细胞明显增多并可见纤维组织增生。实验组大鼠肺组织miR-21表达水平术后2~5 d与同时间对照组相比均显著增高（t=7.121、5.330、6.513、19.371,P均< 0.05）。对照组各时间点阳性细胞数均为0,实验组大鼠术后1~5 d肺组织TGF-β1表达阳性率分别为22.64%、32.69%、36.20%、38.32%、45.64%。 结论miR-21和TGF-β1在ARDS所致的肺纤维化组织中表达升高,提示miR-21和TGF-β1在ARDS大鼠的肺纤维化形成中起着重要作用。