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从内皮细胞总ＲＮＡ中用ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增出Ｅ－选择素ｃＤＮＡ全长编码区，并将其克隆到ｐＵＣ１８载体中，构建了重组质粒ｐＵＣ１８／Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ，对此质粒进行了酶切及ＤＮＡ序列分析鉴定。将Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎｃＤＮＡ插入到天坛株痘苗病毒载体ＳｍａＩ位点，构建了表达质粒ｐＪＳＡ１１７５／Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ。采用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ方法，ｐＪＳＡ１１７５／Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ转染ＴＫ－１４３细胞，用ＢｕｄＲ和ＬａｃＺ双筛选，获得带有人Ｅ－选择素ｃＤＮＡ的重组痘苗病毒。经活细胞荧光染色和ＡＰＡＭ检测，重组痘苗病毒能有效地表达人Ｅ－选择素ｃＤＮＡ。 相似文献
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目的 :目前认为动脉粥样硬化 (ＡＳ)是一种炎症性疾病 ,其致病因素多种 ,细胞因子生长因子等在其发病机制中起着重要的作用。因而通过ＴＮＦ α作用于内皮细胞 (ＥＣ)后 ,观察单核细胞对其粘附的变化 ,粘附分子表达以及对调控粘附分子基因的转录因子 (ＮＦκＢ)变化 ,以探讨ＴＮＦ α在ＡＳ发生早期细胞行为中的作用。方法 :人脐静脉内皮细胞和γＴＮＦ α(5ｎｇ/ｍｌ)作用 4ｈ后 ,用细胞计数法测Ｕ937细胞以ＥＣ粘附率 ,用ＥＬＩＳＡ法检测ＥＣ膜上粘附分子ＶＣＡＭ 1、ＩＣＡＭ 1、Ｐ ｓｅｌｅｃｔｉｎ的表达 ,以及采用细胞免疫化学方法测… 相似文献
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PECAM—1与血管内皮细胞通透性及白细胞渗出 总被引：6，自引：0，他引：6
钟敏 《国际病理科学与临床杂志》1999,19(5):352-354
血小板源内皮细胞粘附分子（ｐｌａｌｅｌｅｔｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌａｄｈｅｓｉｏｎ ｍｏｌｅｃｕｌｅ ,ＰＥＣＡＭ１） 是细胞粘附分子免疫球蛋白超家族成员之一,主要在内皮细胞、血小板、粒细胞和一些淋巴细胞上表达。ＰＥＣＡＭ１在炎症过程中调控内皮细胞通透性、介导白细胞跨内皮细胞迁移到炎症部位有重要作用,其作用机制与ＰＥＣＡＭ１ 的磷酸化、ＰＥＣＡＭ１ 在细胞膜上的分布改变及细胞骨架变化有关 相似文献
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目的 :大量的研究已证明高脂血症是动脉粥样硬化的重要危险因素 ,血脂异常可引起血管内皮细胞和血细胞的功能改变。近年来的研究发现 ,其中氧化低密度脂蛋白(Ｏｘ ＬＤＬ)起主要作用。故尔观测Ｏｘ ＬＤＬ对血管内皮细胞粘附分子ＩＣＡＭ 1、ＶＣＡＭ 1、Ｐ ｓｅｌｅｃｔｉｎ表达和粘附作用的影响。方法 :本研究采用人脐静脉内皮细胞 (ＨＵＶＥＣ)作研究载体 ,采用单核细胞系Ｕ937细胞观测Ｏｘ ＬＤＬ对内皮细胞 (ＥＣ)粘附功能的影响 ,采用免疫组化ＡＢＣ法和ＥＬＩＳＡ二种方法观测Ｏｘ ＬＤＬ(10 0 μｇ/ｍｌ和 2 0 0 μｇ/ｍｌ二种浓度 … 相似文献
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从ｐＵＣ１８／Ｅ－选择素（Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎＣＤ６２Ｅ）重组质粒，以ＰＣＲ的方法扩增得到Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ突变体ＣＤ６２Ｅ１和ＣＤ６２Ｅ２基因。将其分别插入痘苗病毒表达载体ｐＪＳＡ１１７５的单一ＳｍａⅠ位点，在痘苗病毒真核系统中进行了表达。初步的细胞粘附功能试验结果表明，Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ分子不同结构域的缺失可削弱其粘附能力，为进一步研究Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ公子的结构与功能奠定了基础。 相似文献
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从ｐＵＣ１８／Ｅ－选择素（Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ ＣＤ６２Ｅ）重组质粒，以ＰＣＲ的方法扩增得到Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ突变体ＣＤ６２Ｅ１和ＣＤ６２Ｅ２基因。将其分别插入痘苗病毒表达载体ｐＪＳＡ１１７５的单一ＳｍａＩ位点，在痘苗病毒真核系统中进行了表达。初步的细胞粘附功能试验结果表明，Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ分子不同结构域的可削弱其粘附能力，为进一步研究Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ公子的结构与功能奠定了基础。 相似文献
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E—选择素cDNA克隆和表达 总被引：4，自引：0，他引：4
从内皮细胞总ＲＮＡ中用ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增出Ｅ选择素ｃＤＮＡ全长编码区，并将其克隆到ｐＵＣ１８载体中，构建了组质粒ｐＵＣ１８／Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ对此质粒进行了酶切及ＤＮＡ序列分析鉴定，将Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎｃＤＮＡ插入一以天坛株痘苗病毒载体ＳｍａＩ位构建了表达质粒ｐＪＳＡ１１７５／Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ，采用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ方法，ｐＪＳＡ１１７５／Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ转染ＴＫ＾－１４３细胞，用 相似文献
8.
采用消化法分离并培养人脐静脉内皮细胞 (ＨＵＶＥＣ) ,并将ＨＵＶＥＣ接种在ＰａｒａｆｉｌｍＴＭ 上培养后 ,将ＰａｒａｆｉｌｍＴＭ 扩张5 0 % ,在体外模拟血管的过度扩张。将分离的中性粒细胞用ＴＮＦ(10 0 0Ｕ ｍｌ)作用 30ｍｉｎ ,加入到扩张后的内皮单层中以未处理的中性粒细胞作为对照。采用染色法测定中性粒细胞与内皮单层的粘附率 ,酶联免疫吸附法测定粘附分子ＩＣＡＭ 1和Ｅ ｓｅｌｅｃｔｉｎ的表达。结果正常内皮细胞单层与中性粒细胞只有少量的粘附 ,扩张 5 0 %后的内皮细胞单层与中性粒细胞的粘附明显增加 ,与激活的中性粒细… 相似文献
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新的心血管疾病的遗传标记新近，法国ＩＮＳＥＲＭ ｕｎｉｔ的科学家发现，一个与保护心脏免遭冠心病有关的基因——Ｐ．选择素（Ｐ－Ｓｅｌｅｃｔｉｎ）基固的表达与否可作为指示是否发生心肌梗塞的遗传标记。Ｐ－选择素是一种细胞粘附分子，表达于内皮细胞表面，在炎症... 相似文献
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Ｅ选择素是细胞粘附分子中选择素（Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ）家族的主要成员之一,属人类白细胞分化抗原ＣＤ６２Ｅ,为１１０ｋＤ的跨膜糖蛋白［１］;大多数研究认为,Ｅ选择素只表达在受细胞因子作用后的血管内皮细胞［２］,但近来有文献报道,非内皮源性的细胞经细胞因子或脂多糖诱导后也可表达Ｅ选择素［３,４］。本研究将观察新生牛脑微血管内皮细胞（ＢＣＭＳＭＣ）经ＩＬ１β诱导后是否表达Ｅ选择素。１ 材料与方法１１ 动物 新生牛,雄性,购自上海光明乳制品公司奶牛场;Ｗｉｓｔａｒ大鼠,雌雄兼用,本校实验动物中… 相似文献
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哮喘青春期缓解者外周血可溶性血管细胞粘附分子-1的测定 总被引：1，自引：0，他引：1
血管细胞粘附分子 1(ＶＣＡＭ 1)主要表达于活化的内皮细胞 ,它介导了炎症细胞与血管内皮细胞的粘附和跨内皮转移 ,在气道粘膜的嗜酸粒细胞 ,淋巴细胞的选择性聚集、浸润中起重要作用[1] 。可溶性血管细胞粘附分子 1(ｓＶ ＣＡＭ 1)是存在于血清中的从血管内皮细胞上自然脱落的ＶＣＡＭ 1分子 ,是反映体内ＶＣＡＭ 1表达水平的可溶性标志物。临床上某些哮喘儿童到青春期会自然缓解甚至痊愈是个普遍现象[2 ] ,其机制尚未阐明。本实验通过对哮喘青春期缓解组、哮喘组和正常对照组的外周血ｓＶＣＡＭ 1水平的测定和比较 ,探索其中的规律。1 … 相似文献
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ｓＰ -ｓｅｌｅｃｔｉｎ是存在于血小板α颗粒和内皮细胞分泌颗粒内的能介导嗜中性粒细胞、单核细胞及血小板与内皮细胞粘附的糖蛋白。其血中含量的变化与肿瘤的发展及转移密切相关[1 ] 。ＣＡ5 0含量的高低与肿瘤的发展及预后有十分密切的关系[2 ] 。本文报告直肠癌患者手术治疗前后血中Ｐ -选择素和ＣＡ5 0含量的变化 ,并就临床意义作初步探讨 ,现将结果报告如下。对象和方法一、对象 :(一 )正常人 :35人。均为我院保健科体检合格的健康人 ,无心、肝、肺、肾等重要脏器疾患 ,肝、肾功能试验正常 ,无家族肿瘤病史 ,年龄 2 0～ 5 5岁 ,平均 … 相似文献
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ｓＰ -ｓｅｌｅｃｔｉｎ是存在于血小板α颗粒和内皮细胞分泌颗粒 (ｐａｌａｄｅｂｏｄｙ)内的能介导嗜中性粒细胞、单核细胞及血小板与内皮细胞粘附的糖蛋白。其血浆水平的变化与肿瘤的发展及转移密切相关[1] 。血清转化生长因子 (ＴＧＦ -α)则是由肿瘤细胞产生的细胞因子 ,正常组织产生的量甚微 ,它能作为促进因子在肿瘤的发生中发挥重要作用[2 ] 。白细胞介素 - 6 (ＩＬ - 6 )及白细胞介素 - 8(ＩＬ - 8)为单核细胞、内皮细胞产生的细胞因子 ,是免疫应答及机体炎症反应的重要介质[3] 。其水平的变化均与肝细胞结构及功能的损害有关。为… 相似文献
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血管内皮 -钙粘附素 (ｖａｓｏｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ -ｃａｄｈｅｒｉｎ ,ＶＥ -ｃａｄｈｅｒｉｎ)属于钙粘附素家族成员 ,它存在于不同类型血管的内皮细胞 ,可与细胞内介导蛋白相互作用而形成血管内皮 -钙粘附素 /连环蛋白复合体。血管内皮 -钙粘附素 /连环蛋白复合体是粘附连接(ａｄｈｅｒｅｎｓｊｕｎｃｔｉｏｎｓ ,ＡＪ)的重要组成部分 ,它在调节微血管内皮通透性方面扮演了重要角色。1 血管内皮 -钙粘附素的表达血管内皮 -钙粘附素是一种内皮特异性钙粘附素。在胚胎期血管发生的最初时期 ,血管内皮 -钙粘附素表达于卵黄囊间质的中胚… 相似文献
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血清可溶性Ｐ -选择素 (ｓＰ -Ｓｅｌｅｃｔｉｎ)是存在于血小板α颗粒和内皮细胞分泌颗粒内的能介导嗜中性粒细胞、单核细胞及血小板内皮细胞粘附的糖蛋白 ,其血中含量的变化与肿瘤的发展及转移密切相关[1] 。血清转化生长因子 (ＴＧＦ -α)则是由肿瘤细胞产生的细胞因子 ,它能作为促进因子在肿瘤的发生中发挥重要作用[2 ] 。有关食管癌患者手术前后血浆可溶性ｐ -选择素及转化生长因子含量的测定国内尚少见报道。为此 ,我们进行了探讨 ,并就临床意义作初步探讨 ,现报告如下。对象和方法一、对象 :(一 )正常人 :35人。均为我院健康体检的合… 相似文献
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正常生理情况下血管内皮细胞不表达或者弱表达ＶＣＡＭ 1,但在炎症病灶区和免疫反应时产生的细胞因子可诱导血管内皮细胞ＶＣＡＭ 1的表达 ,从而导致单核 /巨噬细胞的浸润。研究证实 ,ＶＬＡ 4(ｖｅｒｙｌａｔｅａｐｐｅａｒｉｎｇａｎｔｉｇｅｎ 4)抗体能完全阻滞ＶＣＡＭ 1依赖性的细胞 细胞间的粘附。正常脑内存在少量ＥＤ2阳性单核/巨噬细胞。而在自发性高血压鼠和老龄鼠其数量增加。细胞因子ＩＬ 1(ｉｎｔｅｒ ｌｅｕｋｉｎ 1)和ＴＮＦ α(ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ α)对单核 /巨噬细胞的浸润起调节作用。本次实验 ,旨… 相似文献
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肺癌患者血浆P-选择素水平的检测 总被引：1，自引：0，他引：1
Ｐ选择素（Ｐｓｅｌ）是存在于血小板α颗粒和内皮细胞分泌颗粒内的一种糖蛋白；在控制炎症方面起重要作用。目前认为肿瘤细胞也可经其表面的Ｐｓｅｌ受体介导与血小板及内皮细胞粘附，从而促进肿瘤细胞的浸润与转移，如小细胞性肺癌细胞［４］。本研究用ＥＬＩＳＡ法检测了６５例不同期肺癌患者血浆Ｐ选择素（ｓＰｓｅｌ）水平，并对其临床意义进行了探讨。１ 对象和方法１－１ 对象 ６５例肺癌患者，男４７例、女１８例；年龄３３～７６岁，平均５３岁。所有病例均经临床确诊，并按ＴＮＭ分期（国际抗癌协会推荐）。对照为健… 相似文献
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大量的单核细胞募集是动脉粥样损伤形成的早期表现之一,相关的内皮细胞粘附分子在其中具有积极作用。本文研究了溶血磷脂酰胆碱（Ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ,Ｌｙｓｏ－ＰＣ）对培养的人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣｓ）膜上细胞间粘附分子－（Ｉｎｔｅｒｃｅｌｌｕｌａｒ ａｄｈｅｓｉｏｎ ｍｏｌｅｃｕｌｅ－１,ＩＣＡＭ－１）、Ｅ选择素（Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ－ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ ａｄｈｅｓｉｏｎ 相似文献