多胺代谢在临床研究中的意义及进展

多胺广泛分布于生物组织和体液中,参与体内多种生理和病理过程,具有促进细胞分化、增生、生长,对维持细胞膜和线粒体的完整性、DNA和RNA结构的稳定性,以及在基因表达、信号转导、调节蛋白合成过程等方面都具有重要意义。本文就多胺的代谢在临床工作研究中的意义及进展加以综述。     

溶酶体中GAG抗氧化应激诱导细胞凋亡的信号传导通路

在氧化应激诱导细胞凋亡过程中,溶酶体中的葡萄糖胺聚糖（GAG）具有在早期溶酶体水平负调控细胞凋亡的作用。本文重点阐述溶酶体中葡萄糖胺聚糖抗氧化应激诱导细胞凋亡作用的信号传导通路。     

自噬在巨噬细胞清除凋亡淋巴细胞中的作用

目的研究巨噬细胞吞噬凋亡淋巴细胞后自噬结构的形态学特征,探讨自噬对巨噬细胞清除凋亡细胞的作用。方法用环磷酰胺诱导淋巴细胞凋亡。在扫描电子显微镜下观察巨噬细胞吞噬凋亡细胞的形态学变化,透射电镜下观察巨噬细胞内的自噬前体、自噬体和自噬溶酶体的结构特点,用图像分析仪测量自噬结构的断面面积。以单丹磺酰尸胺(MDC)染色法标记巨噬细胞的自噬体,在激光扫描共焦显微镜下观察和定量分析。结果巨噬细胞活跃地吞噬凋亡淋巴细胞、凋亡细胞核、凋亡小体或其他细胞碎片,形成异噬体。与对照组比较,吞噬凋亡细胞组的自噬细胞及其自噬体数目增多,自噬前体、自噬体和自噬溶酶体与细胞质的断面面积之比增大。许多自噬体内可见凋亡小体或其他细胞碎片,这些自噬体的体积较大,多位于细胞膜下。未观察到含有整个凋亡细胞或凋亡细胞核的自噬体。结论巨噬细胞清除凋亡淋巴细胞时自噬功能显著增强。自噬对于凋亡淋巴细胞的清除起着重要的直接和间接作用。     

凋亡过程中真核细胞翻译启始因子与蛋白质翻译

细胞凋亡引起细胞主动死亡,此过程中蛋白质的合成受到影响。在细胞凋亡时caspases被激活,并抑制真核细胞翻译启始因子(eIF)家族成员的活性,后者对蛋白质的表达有重要意义。研究凋亡过程中的eIF家族成员为诱导肿瘤细胞凋亡提供了新思路。     

凋亡过程中真核细胞翻译启始因子与蛋白质翻译

细胞凋亡引起细胞主动死亡，此过程中蛋白质的合成受到影响。在细胞凋亡时caspases被激活，并抑制真核细胞翻译启始因子(eIF)家族成员的活性，后者对蛋白质的表达有重要意义。研究凋亡过程中的eIF家族成员为诱导肿瘤细胞凋亡提供了新思路。     

鸟氨酸脱羧酶/多胺系统在大鼠缺血预适应心肌保护中的作用

目的：探讨鸟氨酸脱羧酶（ODC）/多胺系统在缺血预适应（IPC）心肌保护中的作用。方法:应用离体灌流大鼠心脏复制模拟心肌缺血/再灌注模型。心脏随机分为6组：对照组 (control)、缺血/再灌注组 (IR)、弱缺血预适应组 (IPCw)、强缺血预适应组 (IPCs)、IPCw+多胺抑制剂组 (DF-EG-IPCw)和IPCs+多胺抑制剂组(DF-EG-IPCs)。免疫印迹法定量分析多胺合成限速酶鸟氨酸脱羧酶 (ODC)的表达;高效液相色谱测定心肌组织中的多胺（腐胺、精脒、精胺）含量;Powerlab多导生理记录系统记录心脏功能;氯化三苯基四氮唑 (TTC) 染色检测心肌梗死面积;TUNEL方法检测细胞凋亡率,比较其中的差异性。结果:（1）与对照组比,IR组ODC表达下调,腐胺含量增加,精胺含量减少,总多胺池减少（P<0.05）,此时心功能下降（LVDP、HR、CF均低于对照组,P<0.05）,心肌梗死面积及心肌细胞凋亡率增加（P<0.05）;（2）与IR组比,弱及强缺血预处理组（IPCw、IPCs）心肌ODC表达上调,腐胺含量减少,精胺含量增加,总多胺池增加（P<0.05或P<0.01）,此时大鼠心功能有明显改善（LVDP、HR、CF与IR组比,P<0.05）,心肌梗死面积及心肌细胞凋亡率均明显降低（P<0.01）;（3）给予多胺抑制剂后,心肌ODC表达,腐胺、精脒、精胺及总多胺池含量均明显降低（DF-EG-IPCw组 vs IPCw组;DF-EG-IPCs组vs IPCs组,P<0.05或P<0.01）,心功能明显下降（P<0.05）,心肌梗死面积及细胞凋亡率均明显增加（P<0.05）。结论:缺血预适应能明显上调大鼠心肌ODC/多胺系统,减轻缺血/再灌注心肌损伤;多胺合成代谢抑制剂取消了预适应介导的心功能改善、缩小心肌梗死面积及减少心肌细胞凋亡的作用,提示ODC/多胺系统可能参与了缺血预适应介导的心肌保护作用。     

小鼠胚胎肾程序性细胞死亡行为的超微结构变化

目的:观察小鼠胚胎肾发育过程中程序性细胞死亡行为的超微结构变化.方法:应用透射电子显微镜技术对不同胚龄(E12、14、16、18 d)胎鼠的肾程序性细胞死亡进行系统观察.结果:在小鼠胚胎肾中,细胞凋亡多见,出现在肾发育的各个时期和各个结构中,程序性坏死和副凋亡少见,只出现在发育中的肾单位内.程序性细胞死亡的结局包括被吞噬、被血流带走和经尿液排出.结论:细胞凋亡、程序性坏死和副凋亡构成了小鼠胚胎肾发育过程中的程序性细胞死亡,以细胞凋亡为主,程序性坏死和副凋亡为辅.肾发育过程中程序性死亡的细胞尸骸经尿液排出是一个与肾结构特征有关的处理方式.     

多胺生物合成的调节与肿瘤

多胺是原核细胞及真核细胞均能合成的一类脂肪族胺,一般说前者含有腐胺(pu)及精脒(spd),后者还会有精胺(sp)。已有的资料表明,多胺起着细胞调节因子的作用。生理浓度的多胺在体外能增加DNA复制、转录和mRNA的翻译。细胞内多胺浓度与细胞增殖速度密切相关。快速生长的细胞中多胺含量比非增殖细胞的为多。肿瘤细胞亦常有较高水平的多胺。多胺生物合成的关键酶鸟氨酸脱羟酶(ODC)的活性在一些生长刺激因子作用下明显增高,同时多胺、DNA及RNA水平也相应增高。多胺在细胞生长、分裂及分化中重要作用的分子基础可能在于它与生物大分子如DNA、RNA及蛋白质的反应。(另文综述) 本文     

多胺的细胞保护作用

细胞损伤时多胺的合成和摄取增加。多胺对多种组织细胞损伤具有直接保护作用，其可能机制包括调节细胞离子平衡；影响胞内信息传导通路；维持细胞内Ｃａ２＋稳态；抑制膜指质过氧化；促进细胞修复等环节。多胺的细胞保护作用具有一定的药理学意义。     

雷利度胺单独及联合硼替佐米抑制KM3细胞生长、诱导凋亡的机制研究

目的: 观察雷利度胺(lenalidomide)单药及联合硼替佐米(bortezomib)诱导多发性骨髓瘤(MM)KM3细胞凋亡的作用,并初步探讨其机制。方法: 应用台盼蓝拒染法检测单药雷利度胺及与bortezomib联合对KM3细胞生长抑制的影响;应用流式细胞术检测细胞凋亡;应用RT-PCR方法检测p65 mRNA的表达情况;应用Western blotting检测P65(protein 65)、pP65(phosphorylated p65)、PARP 及caspase-3、-8、-9蛋白的表达变化。结果: 雷利度胺可以抑制KM3细胞生长,抑制p65 mRNA及其蛋白的表达,并激活caspase-8、-3及PARP,诱导细胞凋亡。雷利度胺与bortezomib联合时有协同促细胞凋亡作用。结论: 雷利度胺单独作用于KM3细胞可以抑制其生长并诱导细胞凋亡,与bortezomib联用时有协同效应。     

生物材料聚酰胺-胺树状大分子合成及其体外细胞相容性评价

主要通过Michael加成和酰胺化逐步迭代合成反应得到聚酰胺-胺（PAMAM）树状大分子并对合成产物进行了结构表征。对生物医学有潜在应用价值的第五代（G5．0）提出了廉价易行的合成提纯步骤并通过细胞计数、MTF检测和FCM对L-929细胞系进行了体外生物相容性评价分析。结果表明，按照本试验的合成及纯化所得PAMAM G5．0对L-929细胞系在给药范围内无细胞毒性，无致瘤性，有良好的细胞相容性。     

贮脂细胞凋亡与肝纤维化逆转

贮脂细胞经过激活、刺激性增殖、表型转换后分泌大量的细胞外基质和基质金属硫蛋白酶抑制剂 (TIMPs)而在肝纤维化中发挥了关键作用。但随着贮脂细胞的激活 ,其凋亡敏感性发生改变 ,通过Fas依赖途径发生凋亡 ,其数量明显减少 ,细胞外基质合成和TIMPs的表达快速下降 ,而使肝纤维化发生逆转。这一过程涉及贮脂细胞中凋亡和抑凋亡基因的表达变化。提示通过诱导激活的贮脂细胞凋亡 ,可能为肝纤维化的逆转治疗提供一新的乐观手段。     

热休克蛋白70在人食管癌EC9706细胞凋亡过程中的表达与定位变化

目的 探讨姜黄素对人食管癌EC9706细胞凋亡的诱导作用,热休克蛋白70(HSP70)在肿瘤细胞凋亡过程中在核基质上的变化及其与凋亡调控相关蛋白的关系.方法 用细胞计数和流式细胞仪检测姜黄素对人食管癌EC9706细胞的增殖抑制作用,以光学显微镜和透射电镜观察姜黄素诱导人食管癌EC9706细胞凋亡前后的细胞结构变化,琼脂糖凝胶电泳观察人食管癌EC9706细胞凋亡前后的DNA结构变化.双向凝胶电泳和质谱鉴定分析HSP70在核基质中的存在与变化;并以Western blotting进行确证;激光扫描共焦显微镜观察HSP70在EC9706细胞凋亡过程中的定位及其与Bax、Bcl-2等基因产物的共定位关系.结果 姜黄素能显著抑制人食管癌EC9706细胞增殖并诱导人食管癌EC9706细胞凋亡,双向凝胶电泳、质谱鉴定和结果 发现并证实,HSP70在姜黄素处理前后的EC9706细胞核基质蛋白中的存在及其表达下调变化.激光扫描共焦显微镜观察结果 显示,HSP70在EC9706细胞凋亡过程中与Bax、Bcl-2等基因产物具有共定位关系,且其共定位区域发生了变化.结论 姜黄素对人食管癌EC9706细胞具有显著的凋亡诱导作用;HSP70作为一种新发现的核基质蛋白,在姜黄素诱导人食管癌EC9706凋亡过程中的表达与分布发生了显著变化.HSP70与凋亡相关基因的关系对EC9706细胞凋亡具有重要影响.     

多胺对DNA构象及稳定性的影响

正离子多肽可以直接与DNA相互作用,亦可间接地影响染色体蛋白质的合成与化学修饰,调节DNA的构象,因而对DNA的复制、修复、转录、基因表达及有丝分裂等过程非常重要。同时,多胺可使DNA结构趋于稳定,以避免各种变性因素所致的DNA损害。本文评述了多胺与DNA分子及染色体蛋白质等的相互作用及其机制。     

多胺调节的蛋白磷酸化作用——细胞内多胺作用的一种可能靶效应

多胺是活细胞内普遍存在的一种成分。已揭示在某些重要的生物过程中,例如DNA、RNA和蛋白质的合成中,多胺可能具有一定的作用.但其作用机制目前还不够明确.最近某些资料表明,在细胞内多胺至少有部分生物学作用可能通过调节蛋白激酶系统来实现.作者认为多胺可作为一种特殊信使,调节细胞内某些蛋白激酶反应.并且由此可能确定一个新颖的受多胺调节的蛋白磷酸化系统。多胺、蛋白磷酸化与细胞的代谢活性多胺是所有活细胞内的脂质阳离子小分子化合物,以腐胺、精脒和精胺为主要代表。腐胺和精脒是普遍存在的,而精胺仅限于有核白细胞内.由     

TdT缺口末端标记法检测大鼠石蜡切片内凋亡细胞

用末端转移酶介导的切口末端标记法（ＴＵＮＥＬ），检测了大鼠不同器官内的凋亡细胞。结果显示，凋亡细胞在光镜下多以核圆形、深染为特征，呈散在分布。有的凋亡细胞裂解成一个或多个凋亡小体。凋亡细胞数量因器官而异，在细胞增生活跃和细胞更替速度快的器官如小肠、大肠和淋巴结内，凋亡细胞较多，相对稳定的肝、胰等器官亡细胞较少。凋亡细胞通常被巨噬细胞或邻近细胞吞噬。该法的优点在于保存组织结构的同时，在原位到凋亡细胞     

小鼠肾脏发育中的细胞凋亡

目的：研究小鼠肾脏发育过程中的细胞凋亡规律及形态学特点,方法：应用光镜、电镜技术和TUNEL法分别对不同胚龄、生后日龄小鼠肾脏细胞凋亡进行了观察。结果：皮质凋亡细胞多出现在生肾区S小体之间和是肾小体内,凋亡高峰期在胚龄14－18d之间,髓质凋亡细胞出现在肾小鼠管上皮内,凋亡高峰期在生后7d 左右。超微结构观察可见皮质和髓质凋亡细胞主要表现为核固缩,染色质凝集,细胞皱缩。皮质和髓质凋亡细胞结局为,被邻近细胞吞噬,或脱落到肾小管腔内,结论：小鼠肾脏发育过程中确有细胞凋亡;皮质中细胞凋亡与生肾区的出现和肾小体发育完善有关,髓质中细胞凋亡与髓质中肾小管和集合小0管的有发育完善有关。     

葡萄糖神经酰胺合成酶与肿瘤多药耐药

多药耐药(multidrug resistence,MDR)是肿瘤化疗失败的主要原因,多年来医学界一直致力于多药耐药机制的研究。神经酰胺信号系统在细胞凋亡中的作用逐渐引起人们的重视,神经酰胺是细胞凋亡过程中的第二信使,葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)可以催化神经酰胺糖基化,使其转变为无细胞毒性的葡萄糖神经酰胺,进而促进鞘糖脂的合成,大量研究表明细胞内GCS水平的增高与MDR表型有关。     

力学影响细胞凋亡及其信号转导机制研究进展

力学刺激会影响细胞凋亡的发生,进而影响组织器官结构和功能的变化,从而在机体的生理病理过程中起到重要作用,与很多疾病的发生发展密切相关。近年来力对细胞凋亡影响的信号转导机制逐渐开始受到细胞力学研究者的关注,现阶段部分实验研究结果显示力学刺激的形式、强度以及作用细胞种类的不同都会影响细胞凋亡,作用的过程和结果不尽相同。这一过程中的信号通路及其凋亡相关基因和蛋白的表达错综复杂,其中涉及的具体信号转导机制尚不明确。本文就细胞凋亡的特点、相关的信号通路、不同力学刺激对细胞凋亡的影响以及其信号转导通路的现阶段研究进展展开综述。     

线粒体调控的细胞凋亡研究进展

细胞凋亡是指一种由基因控制的,细胞自主死亡的过程。其发生过程涉及细胞中多种信号转导通路的参与。其中线粒体在该过程中起到了关键的作用。病理条件下细胞内外环境的改变可通过影响线粒体的功能,从而调节细胞凋亡。笔者就目前线粒体调控的细胞凋亡机制的研究展开综述。主要介绍了线粒体结构功能改变与细胞凋亡、线粒体凋亡相关蛋白的释放及Bcl-2家族蛋白的介入等的最新研究进展。