间充质干细胞与免疫细胞相互作用于骨折愈合的研究进展

骨折发生后的初始炎症反应过程在骨折愈合中起着至关重要的作用,但长期的炎症则抑制骨折修复。免疫细胞及其细胞因子对骨折愈合的影响机制仍不清楚。某些细胞因子能促进成骨,而其他则抑制骨折愈合。基于间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的细胞疗法是一种新型、微创和前沿的增强骨折修复方法。MSCs不仅分化成骨,而且通过各种机制施加于免疫细胞调节作用。本文就MSCs在骨折愈合过程中的应用及MSCs与免疫细胞的相互作用最新进展予以综述,为骨折愈合的进一步研究提供依据。     

生物力学在骨折愈合过程中的作用

近年来随着生物力学学科的迅猛发展,力学环境因素影响骨折修复的重要性已逐渐凸显,无论是在分子生物学水平还是在临床治疗方面,学者们对骨折愈合应力环境的研究取得了很大进展,为骨折治疗提供了诸多理论依据。为此笔者综述近年来骨折愈合的生物力学研究,以加深临床医师对骨折的认识,指导临床。     

骨折愈合过程中生长因子的作用研究进展

骨折后生长因子积极参与了骨折修复的全过程,体内各种细胞分泌的生长因子作用于不同的靶细胞,在骨折愈合的不同时期起着各种重要作用。本文针对近年来这方面的一些研究进展作一综述。     

丹参促进骨折愈合的研究进展

丹参是我国传统医学中用以活血化瘀的首选中药,本身可单独成方,被广泛地应用于临床各科.本文拟就诸多丹参促进骨折愈合的研究报道作一综述.……     

临床放疗对骨折愈合的影响

临床上运用放射治疗的部分病例并发有骨质破坏,甚至骨折,放疗对骨折愈合的影响值得关注。该文总结近年相关研究文献,就骨折愈合修复机制、放疗影响骨折修复机制和减小放疗对骨折愈合影响等方面介绍减小放疗不良反应的科研发现及进展。研究证明分次放疗、改变放疗介入时间对减小放疗对骨折愈合影响无显著效果,放疗对骨折愈合有阻碍和削弱作用,容易造成骨折延迟愈合或不愈合。近来研究发现低剂量放疗具有促进组织血液循环和骨折愈合的作用,分次放疗联合氨磷汀(amifostine)能够保护成骨细胞免受电离辐射损害并维持其生理功能。     

中药促进骨折愈合的研究现状

祖国医学认为骨折愈合过程是一个“瘀去、新生、骨合”的过程[1] ,其实质就是机体调动一切积极因素 ,参加骨与周围组织损伤修复的过程 ,表现为损伤与抗损伤的矛盾运动。1　中药促进骨折愈合的机理骨折愈合有其内在的规律性 ,可以通过促进其中对骨折愈合修复起作用的因素来达到目的。中药正是从骨折愈合不同时期特点出发派上用场的。按骨折愈合过程 ,在血肿机化期 ,丹参、郁金、川芎、桃仁、红花等活血化瘀药可以加快微循环血流速度 ,增加毛细血管网的通透性 ,这样就可以改善骨折断端局部血液循环 ,清除血凝块及代谢产物[1,2 ] 。在骨痂形成…     

骨与关节损伤基础理论研究的国外动态(文献综述)

最近十几年来,由于不少学者着重于骨关节损伤的基础理论研究,所以对骨折愈合的机理和影响骨折愈合的因素有了进一步认识。鉴于这方面的材料很多,本文又不可能包罗万象,只能摘一些有关骨折修复的基本过程的实验研究工作,加以介绍,来看国外在这方面的进展。     

神经生长因子促进骨折愈合研究进展

神经生长因子(NGF)是神经系统中一类重要的生物活性分子,可由不同类型细胞所分泌。近年研究发现,NGF不仅能促进神经元生长和神经损伤修复,还能促进新生骨形成,从而加速骨折愈合过程。该文就NGF生物学特性、促进骨折愈合作用机制、促进骨折愈合方法等作一综述。     

电刺激促进骨折愈合的历史和现状

近年来,人们对骨折愈合过程的认识到了分子生物学水平.伴随着人们对其修复过程认识的不断深入,国内外专家学者也在不断地从各个方面探求促进骨折愈合的方法.电刺激作为传统的治疗骨折和骨不连的有效手段,一直是临床骨科研究和应用的热点,而且随着研究的深入,它也不断地得到改进,不断地融入了各种医学理论,本文将就其发展过程及现状作一综述.……     

生物力学测试在骨折实验中的应用

骨折的实验研究主要包括骨折发生和骨愈合的机制;观察骨愈合的过程及其特点,阐明各种内外固定的原理和比较各种方法的治疗效果。研究工作中常用的指标有组织形态和生物化学方面的,近年来又加上生物力学方面的测试。采用生物力学测试,结合骨折端血运的直接观察,Ca~(45)自显影及组织学的整体切片等手段,从骨折断端间的血运重建、骨组织修复和钙沉积的情况,结合生物力学测试的结果进行分析,就能对骨愈合的质量进行精确、定量的评价。进行各种内外固定原理和治疗效果比较的研究也离不开生物力学的测试。因此,生物力学测试,新鲜骨和塑料包埋骨整体切片技术在国外一些研究单位已成为常规的研究手段。     

植入型复方丹参缓释剂对骨折愈合影响的实验研究

目的:观察丹参缓释剂植入骨折局部对骨折愈合的影响.方法:42只新西兰健康白兔随机分为两组,均于右前肢桡骨中段制成3mm骨缺损的骨折模型,同时实验组放置丹参缓释剂60mg,对照组放置等量赋形剂.分别于术后第2、4、5、6周取右桡骨行X线片及组织学检查;第2、4、6周行电镜及骨密度检查;第5、6周进行生物力学测试.结果:X线片显示实验组较对照组骨折愈合提前.组织学观察实验组纤维性骨痂、软骨性骨痂、骨小梁之间过渡加快,毛细血管增生明显.电镜检查实验组示骨折修复细胞形态学变化均有利于修复骨折.术后第2、4、6周时骨密度值实验组均较对照组高,其中第4周时两者差异具有显著性(P＜0.05).术后第5、6周实验组抗折力均较对照组高(P＜0.05).结论:在骨折局部使用丹参缓释剂对骨折愈合具有一定的促进作用.     

丹参抑制骨骼肌肌源性干细胞成纤维样分化作用的研究

目的 研究丹参对体外培养的骨骼肌肌源性干细胞(MDSCs)纤维样分化的作用.方法 采用差速贴壁法分离出大鼠MDSCs,利用TGF-β1诱导MDSC向成纤维样细胞分化,观察丹参对细胞成纤维样分化的影响.将体外培养的细胞分为3组:A组,对照组;B组,10 ng/ml TGF-β1组;C组,10 ng/ml TGF-β1+150 mg/L丹参组.在放大400倍相差显微镜下观察细胞生长情况,利用免疫细胞化学方法、RT-PCR、Western Blot检测MDSCs表达CTGF、COLⅠ、COL Ⅲ的情况.结果 在体外,TGF-β1能加强MDSCs表达结缔组织生长因子(CTGF)和胶原蛋白,丹参拮抗TGF-β1的作用,降低细胞CTGF、COLⅠ、COL Ⅲ mRNA的表达水平,降低CTGF、COLⅠ、COL Ⅲ蛋白的水平.结论 丹参可以抑制TGF-β1诱导MDSCs成纤维样分化作用.其机制可能是抑制CTGF表达,从而降低细胞合成和分泌胶原纤维,抑制细胞成纤维样分化.

Abstract：

Objective To investigate the effect of Salvia miltiorrhiza on fibroblastic differentiation of skeletal muscle-derived stem cells (MDSCs) in vitro. Methods MDSCs in rats were isolated by the method of adhering to culture plastic at different time points. Fibroblastic differentiation of MDSCs was induced by TGF-β1 administration and the effects of Salvia miltiorrhiza on fibroblastic differentiation were observed. The cells cultivated in vitro were divided into three groups according the supplement of TGF-β1 and Salvia miltiorrhiza in culture media: group A (control group) had no TGF-β1 and Salvia miltiorrhiza;group B had 10 ng/ml TGF-β1;group C had 10 ng/ml TGF-β1 and 150 mg/L Salvia miltiorrhiza. Cell growth was observed using phase contrast microscope. The expressions of CTGF,COLⅠand COL Ⅲ in each group were detected by immunocytochemistry,RT-PCR and Western Blot. Results In vitro,TGF-β1 promoted the expression of CTGF and collagens of MDSCs. However,the effect of TGF-β1 could be inhibited by Salvia miltiorrhiza,resulting in decreased mRNA and protein expression of CTGF,COLⅠand COL Ⅲ. Conclusion Salvia miltiorrhiza could inhibit fibroblastic differentiation of MDSCs induced by TGF-β1. The mechanism might be that inhibition of CTGF expression reduces the synthesis and secretion of collagen fibers and in turn inhibits the fibroblastic differentiation.     

基于NLRP3/caspase-1通路研究丹参提取物对系膜增生性肾小球肾炎大鼠的保护作用

目的基于NLRP3/caspase-1通路探讨丹参提取物对系膜增生性肾小球肾炎(mesangial proliferative glomerulonephritis,MsPGN)大鼠的保护作用。方法取48只大鼠建立MsPGN模型,随机分为4组:(1)模型组:不给予药物治疗;(2)丹参提取物组:每日给予丹参提取物(10 mL/kg)灌胃;(3)VX-765组:每日给予VX-765(NLRP3炎性小体抑制剂,50 mg/kg)腹腔注射;(4)丹参提取物+VX-765组:每日给予丹参提取物(10 mL/kg)灌胃,并给予VX-765(50 mg/kg)腹腔注射。另取12只大鼠设为假手术组。各组均持续给药28 d。末次给药结束24 h后,收集各组大鼠24 h尿液,检测24 h尿蛋白含量;检测各组大鼠血清中BUN、Scr、IL-1β、IL-18水平;观察各组大鼠肾组织病理变化,并根据肾小球系膜细胞增殖程度、肾小管-间质病变程度进行病理评分;采用实时荧光定量PCR及免疫印迹法检测各组大鼠肾组织中NLRP3、caspase-1的mRNA和蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠出现肾小球体积变大、内部细胞数量增多,系膜细胞弥漫性增生、细胞基质增多,肾间质有炎性细胞浸润等肾组织病理损伤症状,肾小球系膜细胞增殖程度评分、肾小管-间质病理评分、24 h尿蛋白含量、血清BUN、Scr、IL-1β、IL-18、肾组织NLRP3及caspase-1表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,丹参提取物组、VX-765组、丹参提取物+VX-765组大鼠上述病理损伤症状减轻,肾小球系膜细胞增殖程度评分、肾小管-间质病理评分、24 h尿蛋白含量、血清BUN、Scr、IL-1β、IL-18、肾组织NLRP3及caspase-1表达均显著降低(P<0.05);与丹参提取物组及VX-765组分别比较,丹参提取物+VX-765组大鼠上述病理损伤症状进一步减轻,肾小球系膜细胞增殖程度评分、肾小管-间质病理评分、24 h尿蛋白含量、血清BUN、Scr、IL-1β、IL-18、肾组织NLRP3及caspase-1表达均显著降低(P<0.05)。结论丹参提取物可以减轻MsPGN大鼠炎症反应及系膜增生性病变,保护大鼠肾组织,修复大鼠肾功能,可能通过下调NLRP3/caspase-1通路实现。     

丹参注射液对血管紧张素Ⅱ诱导系膜细胞PAI-1表达和ROS含量的影响

目的观察丹参注射液对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导系膜细胞纤溶酶原激活物抑制物1（PM-1）表达和活性氧（ROS）含量的影响,探讨丹参注射液抗肾小球硬化的机制。方法将培养的大鼠系膜细胞分为未干预组（N组）、AngⅡ-Ⅲ激组（A组,AnglI浓度为100nmol／L）、AngⅡ＋丹参干预组（按照丹参注射液浓度分为S1、S2和S3组,丹参注射液浓度分别为37．5g／L、75g／L和150g／L）以及单独丹参干预组（S组,丹参注射液浓度为150g／L）。S1、S2和岛组加入丹参注射液作用1h后,再加入AngⅡ（浓度为100nmol／L）共孵育24h。观察各组系膜细胞PAI-1mRNA和蛋白表达以及细胞ROS含量的变化。结果与N组相比,A组PAI-1mRNA和蛋白表达升高（P〈0．01）,S组PAI-1 mRNA和蛋白表达无差异（P〉0．05）;与A组相比,S1、S2、S3组PAI-1mRNA和蛋白表达降低（P〈0．01）。与N组相比,A组细胞R0s含量升高（P〈0．01）,S组细胞ROS含量无差异（P〉0．05）;与A组相比,S1组细胞ROS含量无差异（P〉0．05）,S2、s3组细胞ROS含量降低（P〈0．01）。结论AngⅡ通过刺激系膜细胞产生致肾纤维化因子,丹参注射液能抑制这些因子的产生。     

Beneficial effects of Salvia miltiorrhiza in the healing of burn wounds: an experimental study in rats

Introduction: Burn healing is a complicated process and very few treatments can positively alter its effects. The aim of this study was to investigate the effects Salvia miltiorrhiza (SM -Danshen), a traditional Chinese medicine, on burn wound healing.

Material and methods: Twenty rats were included in this study and divided into two groups. 3?×?2?cm wide burn areas were created in the dorsal skin of all the animals with thermal contact. Intraoral 1?ml/day saline and 1?g/kg/day SM were given in control and experiment groups, respectively. Fourteen days following the burn injury burn zones were evaluated with indocyanine green-SPY imaging device, and multiple samples were collected for histopathological evaluation. Standard photographs were taken for the evaluation of necrotic skin areas.

Results: Neovascularization was increased in the SM group when compared with the control group (p?=?0.0406). SPY studies revealed a meaningful increase in the tissue perfusion in the SM group (p?=?0.0286). The average amount of necrotic area in the control and experiment group on the postoperative 14th day was 71.6% (±16.51) and 42.5% (±10.64) respectively (p?=?0.0002).

Conclusion: Our study shows that SM can decrease the amount of necrosis in burn wounds by increasing tissue perfusion and neovascularization.     

中药促进骨折愈合在细胞分子水平的研究进展

中药被广泛应用于治疗骨折和骨质疏松等骨科相关疾病,已有许多动物实验和临床试验证明中药,如淫羊藿、骨碎补等可刺激骨再生和抑制骨再吸收,最终促进骨折愈合。许多细胞实验证明这些中药成分可上调胞内成骨性转录因子和成骨相关基因产物表达,诱导前成骨细胞成骨分化和刺激成骨细胞增殖,促进骨结节形成和基质矿化。同时也可上调胞内破骨性转录因子和破骨相关基因产物表达,抑制前破骨细胞破骨分化和破骨细胞骨再吸收活性。此外这些中药成分还可影响胞内信号通路发挥以上相同的作用。由此发现前成骨细胞和前破骨细胞中的成骨性和破骨性转录因子、转录因子调节的基因表达和信号通路是中药促进骨折愈合的主要分子机制,也是目前中药促进骨折愈合的研究热点。     

丹参及其活性单体成分调控骨质疏松症相关信号通路的研究进展

骨质疏松症是目前临床上常见的一种骨科疾病，其特征是每单位体积的骨量减少，使得骨强度受损，从而导致患骨发生骨折。而现阶段治疗骨质疏松症多以西药为主，但存在如费用高、有不良反应等缺点。近年来，随着中药药理学研究的不断深入，相关人员发现，丹参及其活性单体可调节相关骨性细胞增殖、凋亡以及分化，从而促进骨骼的生长和愈合。然而目前该领域的相关研究较为零散，多数仅仅局限于某个活性单体在某种骨性细胞上的作用，而中医治疗具有多靶点、多途径的特点，因此笔者通过总结近年来丹参及其活性单体在防治骨质疏松方面的相关研究，从整体方面来对丹参的抗骨质疏松机制进行探讨，并总结目前相关研究所存在的一些问题，从而为中医药防治骨质疏松研究提供一些帮助。     

丹参对高能冲击波致肾损伤保护的实验研究

目的 :探讨丹参对高能冲击波致肾损伤的保护作用。方法 :将 30只家兔随机分为丹参组和生理盐水对照组 ,体外冲击波碎石 (ESWL)前 3d分别静脉注射丹参和生理盐水 ,测定ESWL前后不同时间血浆中内皮素 (ET 1)、超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA)水平 ,并观察肾组织病理变化。结果 :对照组ESWL在血浆中ET 1、MDA值较冲击前显著升高 (P <0 .0 5 ) ,SOD显著性降低 (P <0 .0 5 ) ;丹参组ESWL后血浆中ET 1、MDA显著低于对照组 (P <0 .0 5 ) ,SOD值则显著高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,且病理检查较对照组损伤轻。结论 :丹参对高能冲击波致肾损伤具有保护作用。     

Long-term influence of prepubertal testicular torsion on spermatogenesis

PURPOSE: To study the influence of prepubertal unilateral testicular torsion on spermatogenesis postpubertally. METHODS: Sixty prepubertal SD male rats were divided into 6 groups. In each group, animal suffered different courses of unilateral testicular torsion including sham operation, 2- and 6-hour-long torsion, and permanent torsion. Salvia miltiorrhiza was injected as a remedy to release the I/R injury in the 2- and 6-hour-long torted groups. Postpubertally, the percentage of DNA content of haploid cells in the testes was determined individually. RESULTS: The percentage of haploid cells in the sham operation group was 76.5+/-1.9%. The number decreased in every other group (p<0.01). Comparing with the same course of torsion, Salvia miltiorrhiza injection could improve the percentage of haploid cells (p<0.01). In the permanent unilateral testicular torted group, the percentage was nearly zero (0.4+/-0.2%). CONCLUSIONS: Prepubertal unilateral testicular torsion induces decreased spermatogenesis postpubertally. The result takes place in the bilateral testes. Salvia miltiorrhiza, as an antioxidant remedy, could relieve the injury which manifests improved spermatogenesis.     

The science of ultrasound therapy for fracture healing

Fracture healing involves a complex interplay of cellular processes, culminating in bridging of a fracture gap with bone. Fracture healing can be compromised by numerous exogenous and endogenous patient factors, and intense research is currently going on to identify modalities that can increase the likelihood of successful healing. Low-intensity pulsed ultrasound (LIPUS) has been proposed as a modality that may have a benefit for increasing reliable fracture healing as well as perhaps increasing the rate of fracture healing. We conducted a review to establish basic scince evidence of therapeutic role of lipus in fracture healing. An electronic search without language restrictions was accomplished of three databases (PubMed, Embase, Cinahl) for ultrasound-related research in osteocyte and chondrocyte cell culture and in animal fracture models, published from inception of the databases through December, 2008. Studies deemed to be most relevant were included in this review. Multiple in vitro and animal in vivo studies were identified. An extensive body of literature exists which delineates the mechanism of action for ultrasound on cellular and tissue signaling systems that may be related to fracture healing. Research on LIPUS in animal fracture models has demonstrated promising results for acceleration of fracture healing and for promotion of fracture healing in compromised tissue beds. A large body of cellular and animal research exists which reveals that LIPUS may be beneficial for accelerating normal fracture healing or for promoting fracture healing in compromised tissue beds. Further investigation of the effects of LIPUS in human fracture healing is warranted for this promising new therapy.