大鼠脑缺血-再灌注损伤期脑温度变化规律的研究

目的探讨大鼠局部脑缺血再灌注脑温度变化的规律。方法将30只SD大鼠随机分为缺血再灌注组和假手术对照组,每组各15只。对缺血再灌注组大鼠使用线栓法制作大脑中动脉闭塞模型(MCAO),缺血3h再灌注48h。持续监测缺血后1h和再灌注后1h大鼠纹状体和脑皮质的温度变化,同时监测肛温。保持室温在22～25℃,湿度在60%。结果脑缺血再灌注组在缺血早期,纹状体温度下降1.3℃,脑皮质温度下降1.5℃,肛温变化不明显;再灌注后,纹状体和脑皮质温度反跳性升高0.5～0.8℃,其中脑皮质温度快速升至(36.3±0.6)℃,纹状体温度升至(36.8±0.8)℃。肛温变化仍不明显。假手术组脑温度相对稳定。结论缺血期脑温度先下降后缓慢升高,再灌注时脑温度反跳式升高后稍有下降,随后缓慢升高。     

西格列汀预处理对大鼠肺缺血再灌注损伤保护机制的研究

目的：探讨西格列汀对大鼠肺缺血再灌注损伤（LIRI）的作用。方法：通过夹闭左肺动脉30min后松开的方法，创建肺组织缺血再灌注损伤模型。设立空白对照组（Sham组），对照组（I/R组），实验组（sitagliptin组），将30只，SD大鼠，随机分组，每组10只，检测各组肺组织的湿干比（W/D）;HE染色光镜下比较各组肺组织病理改变；测定丙二醛（MDA）含量和抗氧化酶（SOD、GSH-Px）活性；测定NF-κB蛋白含量。结果：与假手术组对比，缺血再灌注组和西格列汀组的肺组织W/D、MDA、NF-κB含量升高，SOD、GSH-Px活性降低，而且肺组织病理也有明显变化;与缺血再灌注组对比，西格列汀组的肺组织W/D、MDA、NF-κB含量较低，SOD、GSH-Px活性较高，肺组织病理改变更轻。结论：西格列汀可减轻肺组织缺血再灌注损伤病理改变，并可能通过抑制NF-κB蛋白表达，减轻炎症反应和氧化应激，从而减轻大鼠的肺缺血再灌注损伤。     

低温对脑缺血-再灌注大鼠α-酮戊二酸脱氢酶复合物活性及脑梗死体积的影响

目的观察不同温度下脑缺血-再灌注大鼠线粒体α-酮戊二酸脱氢酶复合物（α—KGDHC）活性及脑梗死体积的变化，进一步探讨不同低温的神经保护机制。方法取雄性SD大鼠35只，按随机数字法分为假手术组（n=5）及大脑中动脉闭塞2h再灌注组（n=30），后者根据再灌注时温度的不同，再分为37℃、33℃及28℃组（n=10）。采用线栓法制备脑缺血-再灌注大鼠模型，再灌注时利用降温毯降温，使肛温分别保持37℃、33℃及28℃，时间为3h。在缺血后24h时检测各组大鼠双侧大脑皮质和海马区线粒体α—KGDHC活性及脑梗死体积。结果①假手术组、37℃组、33℃组、28℃组缺血侧皮质α-KGDHC分别为（20．1±1．3）、（9．5±0．9）、（15．2±1．1）、（5．5±1．2）mU／mg（蛋白）；海马区为（17．1±1．1）、（8．1±1．1）、（12．2±1．0）、（4．1±1．1）mU／mg（蛋白）。33℃组与37℃组和28℃组比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。②37℃组脑梗死的体积最大，占对侧大脑半球的（48．2±1．1）％，33℃组梗死体积最小，占（31．6±1．3）％，28℃组占（34．8±1．2）％，三组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论提高缺血-再灌注大鼠线粒体α-KGDHC活性是低温干预的神经保护作用机制之一。33℃低温比28℃低温有更好的效果。     

轻度低温对脑缺血再灌注后脑含水量,丙二醛和超氧化物歧化酶活性的影响

目前，对于轻度低温能否在脑缺血再灌注后有效抑制氧自由基生成和脂质过氧化反应存有异议。本研究选用沙鼠前脑缺血再灌注模型，采用低温３２～３３℃，对沙鼠脑组织含水量、丙二醛（ＭＤＡ）含量和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性进行检测观察。１材料与方法选择雄性沙鼠２...     

人硫氧还蛋白对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用及机制

目的探讨人硫氧还蛋白（hTrx）对肺缺血再灌注（I/R）损伤的保护作用及可能机制。方法将健康清洁级Wistar大鼠84只随机分为对照组12只、I/R组和Trx组各36只,后两组复制I/R肺损伤模型,Trx组于缺血前10 min和再灌注前10 min腹腔注射重组hTrx注射液0.75 mg/kg。于再灌注1、3、5 h分别取三组肺组织检测超氧化物歧化酶（SOD）活性,丙二醛（MDA）含量;原位缺口末端标记（TUNEL）法测定细胞凋亡指数（AI）;原位杂交法检测Caspase-3 mRNA表达。结果 I/R组各时点MDA含量、细胞AI和Caspase-3 mRNA表达均显著高于对照组（P均〈0.01）,而SOD活性则随再灌注时间延长有所降低;Trx组MDA含量、AI、Caspase-3 mRNA表达均显著低于I/R组（P均〈0.01）。AI与MDA、Caspase-3 mRNA呈显著正相关（r分别为0.844,0.775,P均〈0.01）;与SOD呈显著负相关（r为-0.820,P〈0.01）。结论 Trx对I/R后肺组织细胞凋亡具有抑制作用;其机制可能与清除自由基、抑制脂质过氧化、下调Caspase-3 mRNA表达有关。     

蛇床子素在家兔心肺联合移植中对供肺的保护作用

目的研究蛇床子素在家兔心肺联合移植中对供肺的保护作用及其作用机制。方法将16只健康家兔随机分为两组,对照组肺以改良低钾右旋糖酐（LPD）液灌注并保存，实验组则将蛇床子素加入改良LPD液灌注并保存，在4℃条件下保存12h后再灌注1h，测定肺组织的湿干重比（W／D）；测定肺组织中髓过氧化物酶（MPO）的活性、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）的含量、核转录因子-kB（NF-kB）的表达以及细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的表达；并观察肺组织病理结构的变化。结果再灌注后，实验组的W／D、MPO的活性、MDA含量及NF-kB和ICAM-1的表达低于对照组（P〈0．01），而实验组肺组织中的SOD含量较对照组增高（P〈0．05），肺组织损伤的病理变化程度较对照组轻。结论蛇床子素能减轻肺缺血再灌注损伤，对供肺具有一定的保护作用。     

参附注射液抑制兔再灌注肺组织NF-kB表达的实验研究

目的初步探讨参附注射液改善兔肺保存效果及可能的作用机制。方法16只健康家兔随机分为两组,对照组肺加入棉子糖（30mmol／L）的改良低钾右旋糖酐（LPD）液灌注及保存,实验组则将参附注射液（40mg／L）加入改良LPD液灌注及保存。在4℃保存12h后再灌注1h,测定动脉血氧分压（PaO2）、肺组织的干湿比（W／D）、肺组织中髓过氧化物酶（MPO）活性、NF—KB的表达并观察肺组织病理结构的变化。结果再灌注15min后,两组的Pa02逐渐降低,但实验组PaO2的降低程度明显低于对照组（P〈0．01）;再灌注后,实验组的W／D和MPO也明显低于对照组（P〈0．01）,肺组织NF-kB的表达也明显低于对照组（P〈0．01）,肺组织病理变化较对照组轻。结论参附注射液可抑制再灌注肺组织中NF—kB的表达,减轻肺缺血再灌注损伤,改善肺功能,对兔肺具有保护作用。     

银杏叶提取物对不同脑温状态大鼠缺血脑组织病理影响的研究

目的探讨银杏叶提取物(GBE)对不同脑温状态下大鼠缺血脑组织病理改变的影响。方法将24只Wistar大鼠随机分为常温假手术组、常温脑缺血对照组、亚低温脑缺血组、轻度高温银杏叶组、常温银杏叶组、亚低温银杏叶组(n=4),建立各组大鼠大脑中动脉缺血2h/再灌注4h模型,采用光镜、电镜观察各组大鼠缺血脑组织病理改变特点。结果亚低温银杏叶组、亚低温脑缺血组、常温银杏叶组、常温脑缺血对照组、轻度高温银杏叶组等各组大鼠缺血脑组织病理损伤范围及程度呈依次加重趋势。结论 GBE对脑缺血的保护作用受不同脑温影响,37.0～37.5℃常温状态下GBE的神经保护作用有限,而32.0～32.5℃亚低温状态下GBE对脑缺血的保护作用增强;亚低温和GBE联合干预,增强对脑缺血的保护。     

G-CSF对老年大鼠急性肺损伤过程中脂质过氧化及HO-1表达的影响

目的探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)处理对肺组织形态学、脂质过氧化及HO-1表达的影响。方法 60只SD老年大鼠随机分为假手术组、ALI组和G-CSF组,每组20只,采用气管内滴入脂多糖(LPS)方法诱导大鼠急性肺损伤模型。G-CSF于模型建立成功后给药后12 h处死动物,测定肺系数;光镜观察肺组织形态学改变;化学比色法检测肺组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性;RT-PCR方法检测肺组织血红素氧合酶-1(HO-1)mRNA表达的变化。结果与假手术组相比,ALI组肺组织形态学明显改变,肺系数及肺组织MDA含量增加,SOD活性下降,HO-1表达减少;与ALI组相比,G-CSF组大鼠肺组织损伤减轻,肺系数和肺组织MDA含量下降,SOD活性增加,HO-1表达增加。结论 G-CSF可以显著增加SOD活性和HO-1表达,减少MDA生成,从而在ALI过程中对肺组织起到保护作用。     

犬肺缺血预处理对体外循环心肌的影响

目的探讨肺缺血预处理对体外循环心肌的保护作用及机制。方法12只健康杂种犬,体重12～15kg,随机分为实验组和对照组,每组6只。对照组为单纯体外循环组;实验组为缺血预处理组,在主动脉阻断前行左肺门阻断5min,再灌注5min,重复一次,然后同对照组行体外循环,两组体外循环均持续1h。于体外循环前、再灌注120min后采集心肌标本,测定心肌含水量、MDA、SOD活性及病理改变。结果体外循环后心肌含水量和MDA实验组低于对照组;心肌SOD活性实验组高于对照组;实验组心肌标本炎症水肿程度明显较对照组轻。结论犬肺缺血预处理对体外循环心肌缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能是减轻了心肌缺血再灌注损伤。     

保心丸对大鼠心肌缺血再灌注心律失常的作用

目的观察保心丸对大鼠心肌缺血再灌注心律失常的作用，并探讨其作用机理。方法采用在体大鼠心肌缺血再灌注损伤模型，研究保心丸对再灌注心律失常，心肌超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性和脂质过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）含量的影响。结果保心丸可明显缩短缺血再灌注心律失常的持续时间，降低室颤的发生率，提高心肌ＳＯＤ活性，降低ＭＤＡ含量。结论保心丸具有抗心肌缺血再灌注心律失常的作用，其机理与抑制脂质过氧化反应有关     

益生注射液对大鼠移植肺缺血再灌注损伤的保护作用

将40只大鼠随机分成实验组和对照组,各10对,建立左肺移植模型.实验组应用益生注射液+低钾右旋糖酐液(LPD液)、对照组单纯应用LPD液为移植肺再灌注液和保存液.检测两组再灌注开始后各时点左肺静脉血氧分压,再灌注2 h后超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平及肺湿、干重比(W/D),并行术后受体左肺病理检查.结果 :左肺静脉血氧分压各时点实验组均高于对照组(P<0.05);再灌注2 h后SOD水平实验组较对照组高,MDA水平及W/D值实验组较对照组低(P<0.05);光镜下实验组移植肺较对照组病变程度轻.认为益生注射液能减轻大鼠移植肺早期缺血再灌注损伤(IRI),其保护作用机制可能与增加SOD水平,清除氧自由基、减轻脂质过氧化反应及炎症反应有关.     

凯时注射液对无心跳兔供体肺缺血再灌注损伤的影响

目的研究凯时注射液对无心跳兔肺缺血再灌注损伤的影响,并探讨其可能的作用机制。方法将24只健康新西兰大白兔随机平均分为三组,肝素化后处死,对照组立即予以LPD液灌注及保存,实验组1在处死后1h予LPD液灌注及保存,实验组2将凯时注射液（20ug／L）加入LPD液灌注及保存,两实验组在4℃保存5h后再灌注1h,对照组保存6h后灌注1h;测定经肺氧合后动脉血氧分压值（PaO2）和肺气道峰压值（PawP）,于再灌注结束后取右上肺组织,测其湿重（W）与干重（D）、计算湿／干重比（W／D）、ELISA法检测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量,免疫组化法检测核因子-κB及ICAM-1的表达．并用光学显微镜和透射电子显微镜观察再灌注后肺组织结构的病理变化。结果再灌注45min后,实验组1的PaO2降低最明显、PawP升高最显著,实验组2及对照组的PaO2降低程度及PawP的升高程度均低于实验组1（P〈0．01）;实验组1的（SOD）明显低于对照组及实验组2,实验组1的（MDA）降低程度明显高于实验组2及对照组,实验组1的肺组织（W／D）、NF—κB及ICAM-1的表达高于对照组及实验组2（P〈0．01）,肺组织的病理变化实验组1最重。结论凯时注射液能减轻无心跳兔肺缺血／再灌注损伤,改善肺功能,具有肺保护功能。     

亚低温通过下调分化抑制因子2保护脑缺血再灌注损伤大鼠

目的 探讨亚低温对脑缺血再灌注大鼠的保护作用以及对分化抑制因子2(inhibitor of differentiation 2,Id2)蛋白表达的影响.方法 72只成年雄性大鼠随机分为假手术组、常温组和亚低温组.应用线栓法制备大脑中动脉闭塞模型,亚低温组给予低温处理[肛温(33±1)℃,鼓膜温度(31±1)℃].分别在缺血再灌注6、12、24和72 h时采用改良神经功能损伤严重程度评分(modified Neurological Severity Score,mNSS)评价神经功能缺损,氯化三苯基四氮唑检测梗死体积,蛋白质印迹法检测缺血皮质Id2表达水平.结果 缺血再灌注6、12、24和72 h时,亚低温组mNSS评分均显著高于常温组,梗死体积均显著小于常温组(P均<0.001).蛋白质印迹分析显示,亚低温组脑缺血再灌注6、12、24和72 h时缺血皮质Id2蛋白表达水平显著低于常温组(P均<0.05).结论 亚低温能减轻脑缺血再灌注后神经功能缺损和缩小梗死体积,其机制可能与下调Id2蛋白表达水平有关.     

BQ123对大鼠肢体缺血再灌注后肺P-选择素表达的影响

目的 观察大鼠肢体缺血再灌注后肺组织P-选择素表达的变化及内皮素A受体阻断剂BQ123对其影响.方法 雄性Wistar大鼠随机分为3组（n=10）：对照组、再灌注组和BQ123处理组.缺血4h再灌注4h后采用ELISA方法定量检测肺P-选择素浓度,测定各组PaO2、BALF蛋白含量,测定肺组织髓过氧化物酶、内皮素1的含量,观察肺组织病理变化.结果 与再灌注组比较,BQ123处理组肺组织P-选择素含量明显降低,PaO2升高,BALF中总蛋白、肺组织髓过氧化物酶、内皮素1明显降低（P值均＜0.01）,肺组织形态损伤减轻.结论 BQ123抑制了大鼠肢体缺血再灌注后肺组织P-选择素的表达,减轻肺损伤.     

三七总皂苷对急性肺损伤大鼠血管外肺水的影响及其机制的研究

目的 探讨三七总皂苷(PNS)对急性肺损伤(ALI)大鼠血管外肺水(EVLW)含量及肺泡Ⅱ型上皮细胞钠通道α亚基(αENaC)mRNA和蛋白表达的影响.方法 使用肠缺血1h,再灌注3h建立ALI大鼠模型.48只大鼠随机分为4组(n=12):①单纯手术组,除不夹闭肠系膜上动脉外,余同第3组;②单纯手术+PNS组,除了以PNS代替生理盐水外,余同第1组;③ALI模型组;④ALI模型+PNS组.第2、4组动物再灌注前15 min腹腔注射PNS 100 mg/kg;第1、3组则给予等体积生理盐水代替PNS.再灌注3h后腹主动脉采血进行血气分析,重力法测定血管外肺水指数(EVLWI),逆转录-聚合酶链反应检测αENaC mRNA的表达,Western blotting法测定αENaC蛋白表达.结果 与ALI模型组比较,ALI模型+PNS组大鼠EVLWI显著降低[(27.68±1.31)ml/kg vs (32.57±1.50) ml/kg,P ＜0.01];αENaC mRNA及蛋白表达增强(P值均＜0.05);氧合指数显著增高(P值均＜0.01).结论 PNS能够降低肠缺血-再灌注损伤所致ALI大鼠的EVLW,改善低氧血症,这一作用可能部分是通过抑制αENaC mRNA及蛋白表达下降实现的.     

亚低温对大鼠缺血再灌注海马区线粒体钙及胞浆游离钙的影响

目的探讨亚低温对脑缺血／再灌注（I／R）损伤的保护作用机制，为临床脑缺血患者亚低温治疗提供理论依据。方法采用改良线栓法建立局灶性大鼠大脑中动脉I／R模型，将健康Wistar大鼠随机分为假手术组、常温（36．0℃～37．0℃）缺血组、亚低温（32．0℃～33．℃0）缺血组，其中后两组又根据观察时间点不同分为缺血2h再灌注2、4、6h三个亚组，观察各时间点大鼠缺血侧脑海马区线粒体钙含量（[MCa]）及胞浆游离钙含量（[Ca^2＋]．）的变化。结果与假手术组比较，常温缺血组和亚低温缺血组各观察时间点缺血侧脑海马区[MCa]显著降低，而[Ca^2＋]；明显增高（P〈0．05）；与常温组比较，亚低温缺血组大鼠缺血侧海马区[MCa]显著增高，[Ca^2＋]；明显降低（P〈0．05）。结论亚低温能有效抑制I／R损伤后海马区神经元细胞的钙超载．恢复线粒体能量代谢，从而稳定线粒体贮钙功能。     

二氮嗪对缺血再灌注心肌细胞脂质过氧化反应和超微结构的影响

目的:研究二氮嗪对体内大鼠心脏缺血再灌注损伤的保护效果并对其作用机制进行初步探讨。方法:健康SD大鼠随机分为两组,对照组静脉注射相应量溶媒,实验组按12.5 mg/kg剂量静脉注射二氮嗪进行预处理。10 min后行左侧开胸结扎前降支,造成局部心肌缺血2 h,恢复灌注2 h后取心脏,测量缺血心肌组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,同时电镜观察缺血区心肌细胞超微结构的改变。结果:与对照组相比,实验组MDA含量明显降低(P<0.05),超微结构显著改善,但 SOD活性却无明显改变。结论:二氮嗪对体内大鼠心脏缺血再灌注损伤具有较好的保护作用,其机制可能是通过减轻脂质过氧化反应而发挥作用。     

GM-1对原代培养神经元类缺血再灌注损伤的影响

目的 观察类缺血再灌注对大鼠皮质神经元细胞损伤的影响及神经节苷脂(GM1)对受损神经细胞的保护作用.方法 制备培养原代神经元类缺血再灌注损伤模型,应用 GM1分别于再灌注后不同时间进行MTT,凋亡流式细胞检测等.结果 进行类缺血再灌注后,任一时间点的缺血组、实验组的细胞活性均低于正常组,凋亡率高于正常组.1 h时缺血组与实验组的细胞活性和凋亡细胞染色无明显差别,而流式细胞仪检测细胞凋亡率显示实验组低于缺血组;在随后的不同时间点实验组的细胞活性显著高于缺血组,凋亡率显著低于缺血组.结论 GM1可保护类缺血再灌注后大鼠皮质神经元的损伤,作用从再灌后1 h即可出现,6 h～24 h时这种作用逐渐加强;GM1可减轻类缺血再灌注诱导的大鼠皮质神经元细胞凋亡,增加神经元的存活率,从而对损伤神经元细胞具有保护作用.     

局部亚低温对大鼠局灶脑缺血再灌注后β淀粉样蛋白表达及梗死体积的影响

目的观察病变侧缺血至再灌注期亚低温（32～33℃）对大鼠局灶性脑缺血再灌注后梗死体积和β淀粉样蛋白（β—amyloid protein,Aβ）表达的影响。方法采用改良线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,随机分为假手术组、常温缺血组和亚低温缺血组,两个缺血组各分为5个亚组：分别于缺血后2、3、6、8、12h进行再灌注4h后处死,其中亚低温组于缺血后30min实施病灶侧脑部亚低温并持续至再灌注期。处死大鼠前进行神经功能缺陷评分,TTC染色及运用计算机图像分析技术观察各组大鼠脑梗死体积,采用免疫组织化学法检测Aβ表达,末端脱核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术（TUNEL）观察神经细胞凋亡情况。结果与常温缺血组比较,亚低温缺血组大鼠脑梗死体积明显减少,Aβ阳性细胞数量明显减少（P〈0．05）,凋亡的神经细胞明显减少（P〈0．05）。神经功能缺陷评分亚低温缺血组明显低于相应时间点常温缺血组（P〈0．05或P〈0．01）。结论病变侧亚低温对脑缺血有保护作用,其机制可能为亚低温抑制Aβ表达,进而抑制神经元凋亡,减少脑梗死体积,促进脑缺血后神经功能恢复。