Effects of subchronic exposure to static magnetic field on testicular function in rats

BACKGROUND: The aim of this study was to investigate the effect of static magnetic field (SMF) exposure on testicular function, antioxidant status and DNA oxidation in rats. METHODS: Male adult rats were exposed to SMF (128 mT; 1 h/day for 30 days). After sacrifice, the epididymal sperm number was counted. Testosterone concentration in plasma and testis was measured by radioimmunoassay. MDA level and GPx, CAT and SOD activities were used as markers of oxidative stress in testis. The 8-oxo-dG level is measured by the HPLC-EC system. RESULTS: Subchronic exposure to SMF has no effect on epididymal sperm count, spermatozoa motility and genital organ weight. In contrast, SMF induces a decrease of testicular and plasmatic testosterone levels, respectively (1.48 +/- 0.56 vs. 4.66 +/- 0.51 ng/g, p<0.05; 0.97 +/- 0.16 vs. 1.64 +/- 0.18 ng/mL, p<0.05). Exposed rats displayed an increase of malondialdehyde (2.01 +/- 0.03 vs. 1.47 +/- 0.06 micromol/g protein, p<0.05), metallothioneins (1.04 +/- 0.22 vs. 0.37 +/- 0.06 microg/g, p<0.05) and 8-oxo-dG concentrations (3.38 +/- 0.30 vs. 2.36 +/- 0.28 8-oxo-dG/10(6) bases, p<0.05) in the testis. In the gonad, SMF decreases the CAT (14.33 +/- 1.16 vs. 21.67 +/- 2.05 U/mg protein, p<0.05), GPx (177.40 +/- 5.97 vs. 237.20 +/- 15.65 U/mg protein, p<0.05) and mitochondrial Mn-SOD (2.95 +/- 0.10 vs. 3.53 +/- 0.29 U/mg protein, p<0.05) activities. However, cytosolic CuZn-SOD activity is unaffected. CONCLUSIONS: Subchronic exposure to SMF failed to alter spermatogenesis in rat testis. In contrast, the same treatment decreased testosterone levels and induced DNA oxidation.     

蛋白酶抑制剂对内毒素致大鼠急性肺损伤的保护作用

目的:静脉应用蛋白酶抑制剂以了解其对内毒素所致的大鼠肺损伤的保护作用及其机制.方法:雄性Wistar大鼠32只,体重(250～270 g),分为对照组(C,n=8)、内毒素组(A,n=8)、大剂量治疗组(U,n=8)及小剂量治疗组(V,n=8),除对照组外,其他组均给予内毒素(5 mg/kg),治疗组同时给予内毒素和乌司他丁注射(U组100 000 u/kg,V组50 000 u/kg).2 h后测定血清内皮素,进行动脉血气分析,取肺组织观察大体标本形态和光镜下的组织病理形态,测定肺组织血管通透性变化、湿/干质量比值、髓过氧化物酶活性、脂质过氧化产物[丙二醛(malonaldehyde,MDA)和共轭二烯(conjugated-diene,C-diene)].结果:光镜下可见对照组肺组织学正常,内毒素组肺间质弥漫性出血,肺泡腔内可见大量粒细胞聚集、浸润,并可见弥漫性肺泡间隔增厚,而乌司他丁治疗组上述病理表现明显减轻.肺组织湿/干质量比值和每克肺组织伊文思蓝含量在内毒素组分别为(5.41±0.06)和(27.64±2.48)μg,对照组分别为(4.95±0.08)和(12.99±2.83)μg,组间比较差异有统计学意义;U组为(5.0±0.05)和(19.47±2.09)μg;V组为(4.98±0.06)和(21.44±3.12)μg,明显低于内毒素组,U组和V组间差异无统计学意义.血清内皮素及髓过氧化物水平内毒素组分别为(948.23±103.45)u/g和(152.90±8.41)u/g,高于对照组的(729.38±88.64)u/g和(54.62±15.49)u/g,U组为(633.27±93.27)u/g和(119.40±11.32)u/g,V组为(671.87±105.45)u/g和(129.55±9.57)u/g,则低于内毒素组,U组和V组间差异无统计学意义.肺组织脂质过氧化产物水平内毒素组[(MDA(73.95±4.62)nmol/g;C-diene(10.96±0.81)nmol/g]明显高于对照组[MDA(39.65±6.21)nmol/g;C-diene(3.34±0.51)nmol/g],治疗组[U组:MDA(51.26±5.56)nmol/g,C-diene(7.59±0.84)nmol/g;V组:MDA(59.87±4.62)nmol/g,C-diene(8.79±0.45)nmol/g]则较内毒素组明显降低,MDA水平U组低于V组.结论:乌司他丁明显降低肺组织的炎症反应,减轻肺组织的损害,对内毒素所致大鼠肺损伤具有一定的保护作用.     

黄芩甙与甘露醇,地塞米松对大鼠感染性脑水肿保护作用比较

目的：比较黄芩甙与甘露醇、地塞米松对感染性脑水肿的治疗作用。为脑水肿的临床治疗探讨新的方法。方法：应用感染性脑水肿模型,将４０只ＳＤ大鼠随机分为感染性脑水肿（ＢＥ）组、甘露醇治疗（ＭＡＮ）组、地塞米松治疗（ＤＸＭ）组、黄苷治疗（ＢＣ）组及生理盐水对照组（ＮＳ）组,观察脑组织含水量、干脑组织钠、钾离子含量、伊文思兰（ＥＢ）含量、脑组织病理形态学变化。结果：大鼠脑组织含水量、ＥＢ含量、钠离子含量ＢＥ组     

All-trans retinoic acid in pulmonary vascular structural remodeling in rats with pulmonary hypertension induced by monocrotaline

Objective To determine whether all-trans retinoic acid (atRA) exerts an inhibitory effect on rats with pulmonary hypertension induced by monocrotaline.Methods All rats were given a single subcutaneous injection of either monocrotaline (60 mg/kg) or saline.Monocrotaline-injected rats received either atRA (30 mg· kg(-1)·day(-1)) or saline through oral-gastro intubation.On Days 7 , 14, 21, and 28 respectively after monocrotaline injection, cardiovascular cath eters were inserted to examine the mean pulmonary artery pressure of rats in eac h group.Meanwhile, the matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) mRNA expression an d hydroxyproline content in the main pulmonary artery were determined by RT-PCR and chromometry, respectively.Results The mean pulmonary artery pressure of rats in the model group increased signific antly on day 21 and reached a peak on Day 28 compared with the control group (25 .7±4.3 mm Hg vs 15.1±1.5 mm Hg and 38.5±6.4 mm Hg vs 16.4±2.0 mm Hg, P&lt;0.01).MMP-1 mRNA overexpression was present on Day 14 (0.72 ±0.15 vs 0.39±0.08, P&lt;0.01) and was rapidly down-regulated on Day 21 and 28 compared with Day 14, but was still higher than that in the control.The hydroxyoroline content of the main pulmonary artery dropped significantly on Da y 14 (4.01±1.13 μg/mg vs 5.10±0.91 μg/mg, P&lt;0.05) and increased s ignificantly on Days 21 and 28 compared with the control.atRA inhibited the MM P-1 mRNA overexpression from Day 14 to Day 28 and reduced the hydroxyproline co ntent (5.59±0.70 μg/mg vs 7.96±1.13 μg/mg and 7.77±0.96 μg/mg vs 9.93±1.27 μg/mg, P&lt;0.01) and the mean pulmonary artery pressure compa red with the model group (19.6±3.2 mm Hg vs 25.7±4.3 mm Hg and 26.3± 4.6 mm Hg vs 38.5±6.4 mm Hg, P&lt;0.01).Conclusion atRA inhibits MMP-1 overexpression and the accumulation of collagen, which migh t elicit favorable geometric remodeling in rat pulmonary hypertension induced by monocrotaline.     

辛伐他汀对自发性高血压大鼠左心室肥厚的影响及与蛋白激酶B表达的关系

目的探讨辛伐他汀逆转左心室肥厚(LVH)的作用及其分子生物学机制。方法16只雄性自发性高血压大鼠(SHR)分为SHR对照组和SHR治疗组,分别给予安慰剂及辛伐他汀灌胃治疗,年龄、性别、数量配对的Wistar Kyoto(WKY)大鼠给予安慰剂治疗作为正常对照组,观察辛伐他汀对大鼠收缩压和左心室重量/体重比值(LVW/BW)的影响,采用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)检测心肌组织心钠素mRNA表达,RT PCR和Western印迹检测心肌组织蛋白激酶B(PKB)的mRNA和蛋白表达水平。结果(1)SHR对照组和SHR治疗组大鼠的收缩压分别为221mmHg±10mmHg(1mmHg=0.133kPa)和217mmHg±8mmHg,均显著高于正常对照组大鼠(126mmHg±6mm Hg),差异有统计学意义(均P<0.01),SHR治疗组大鼠收缩压与SHR对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)SHR对照组大鼠的LVM/BW为4.10mg/g±0.13mg/g,明显高于正常对照组(3.04mg/g±0.12mg/g),差异有统计学意义(P<0.01),而SHR治疗组的LVM/BW(3.73mg/g±0.08mg/g)明显低于SHR对照组(P<0.01)。(3)SHR对照组大鼠心肌组织心钠素的mRNA表达水平(0.44±0.03)明显高于正常对照组(0.17±0.03),SHR治疗组心钠素的表达水平(0.27±0.03)明显低于SHR对照组(均P<0.01)。(4)SHR对照组大鼠PKB的mRNA表达水平(0.45±0.05)和蛋白表达水平(62±     

血红素氧合酶-1的诱导对肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨血红素氧合酶-1的诱导对肺缺血再灌注损伤的保护作用。方法将40只健康Sprague-Dawley大鼠随机分为4组：假手术对照（sham）组、肺缺血再灌注（I／R）组（阻断左肺门30min再灌注2h）、氯化血红素（Hemin）组（给予血红素氧合酶-1的诱导剂）与锌原卟啉（ZnPP）组（给予血红素氧合酶-1的抑制剂）。检测各组肺组织超氧化物歧化酶（SOD）活性,血浆肿瘤坏死因子（TNF-α）含量,观察肺组织湿干重比（W／D）以及电镜下肺组织超微结构变化。结果Hemin组肺湿／干重比（5．92±0．66）低于I／R组（7．55±0．66）（P〈0．01）,SOD活性（9．2±0．5）高于I／R组（2．8±0．4）（P〈0．01）,TNF-α含量（60．37±8．25）低于I／R组（452．26±22．59）（P〈0．01）,电镜下肺组织超微结构损伤改变明显减轻;而给予ZnPP（ZnPP组）后使上述改变发生逆转。结论血红素氧合酶-1的诱导可有效保护肺缺血再灌注损伤。     

百日咳菌液对大鼠培养脑切片兴奋性氨基酸释放的影响

目的：了解百日咳菌液对培养的大鼠脑切片兴奋性氨基酸（ＥＡＡｓ）释放的影响及１１双氢－５Ｈ－二苯（ａ,ｂ）－环庚烯亚胺（ＭＫ－８０１）对脑切片有无保护作用,方法：ＳＤ大鼠随机分成正常脑切片培养组（ＮＣ组）１０％百日咳菌液脑切片培养组（ＰＢＣ组）和ＭＫ－８０１预处理后１０％百日咳菌液脑切片培养组（ＭＰＢＣ组）及乳酸脱相色谱法测脑切片培养上清液中的ＥＡＡｓ释放量,结果：ＰＢＣ组的谷氨酸（Ｇｌｕ）门冬氨酸     

白细胞介素1受体拮抗蛋白间接体内转基因抑制骨关节炎软骨破坏

目的通过白细胞介素1受体拮抗蛋白(IL-1Ra)间接体内转基因治疗实验性兔骨关节炎,探讨IL-1Ra对关节软骨病理改变及软骨基质降解的抑制作用.方法将30只新西兰大白兔随机分成3组,每组10只.对3组兔的左膝关节行部分滑膜切除,从中分离并培养滑膜成纤维细胞;3组兔的右膝关节行前交叉韧带横断术(ACLT)建立骨关节炎模型.把自体滑膜细胞回输第1组兔右膝关节腔内;把转染标记基因的自体滑膜细胞回输到第2组兔右膝关节腔内;把转染IL-1Ra基因的自体滑膜细胞回输到第3组兔右膝关节腔内.在各组滑膜细胞回输后的第2、4周,用ELISA方法分别检测关节液中IL-1Ra水平,用二甲基亚甲蓝法测定关节液及软骨中硫酸葡糖氨基聚糖(GAG)水平,各组软骨行组织染色、病理分级.结果在基因转入关节腔后,第3组兔右膝关节液中IL-1Ra水平在第2周时为(20.6±1.8) ng/ml,第4周时为(4.8±0.5) ng/ml;而第1、2组 IL-1Ra水平2、4周时均较低.第3组关节软骨降解明显被抑制,关节液中GAG含量为40.1 μg/ml,抑制率为56.2%,第2组关节液中GAG含量为84.5 μg/ml.然而第3组软骨中GAG含量比第2组高2倍,分别为30.2 μg/mg和10.8 μg/mg.第3组骨关节炎病理改变明显受到抑制.结论关节腔内注入体外转染IL-1Ra基因的自体滑膜细胞,能使关节腔局部IL-1Ra水平明显升高,使关节软骨病理改变及软骨基质降解受到抑制.     

血管生成抑制因子1对胶质母细胞瘤的治疗作用及其机制的实验研究

目的探讨脑组织特异性血管生成抑制因子1(BAI1)对胶质母细胞瘤的治疗作用及其作用机制。方法采用COS-TPC法进行BAI1-腺病毒载体的构建,病毒重组子的成功构建和对肿瘤细胞的转染通过RT-PCR来验证。采用立体定向的方法将胶质母细胞瘤细胞U87MG接种于裸鼠脑内,待肿瘤形成后向瘤内注射病毒重组子AdeBAI1(AdeBAI1组)或AdeLacZ(Mock)(AdeMock组),两组均为6只裸鼠。观察裸鼠的存活时间。用AdeBAI1或AdeMock转染3个胶质母细胞瘤细胞系SW1783、U87MG和U373MG,48h后收集细胞,用MTT方法进行活细胞计数。用Trizol试剂提取总RNA。用RT-PCR方法研究BAI1及其他血管生成相关因子的mRNA的表达。结果BAI1mRNA的表达仅见于AdeBAI1转染的细胞中。颅内胶质母细胞瘤治疗结果显示,AdeBAI1组平均生成期为(26·0±4·6)d,AdeMock治疗组为(17·3±2·3)d,两组比较P<0·05。AdeBAI1组转染后细胞计数为(2·12±0·18)×105、AdeMock组为(4·23±0·18)×105,两组比较P<0·05。提示胶质母细胞瘤细胞的增殖可被BAI1抑制。AdeBAI1转染后血管生成相关因子Angiostatin和VEGF的表达降低,而VEGF-B和TSP1的表达升高。结论肿瘤内注射AdeBAI1可以抑制胶质母细胞瘤的生长。BAI1的表达升高可以影响其他血管生成相关因子的表达。BAI1的表达升高可以抑制肿瘤细胞的增殖作用。BAI1的抗肿瘤作用可能来自于抑制血管生成以及抑制肿瘤细胞的增殖两个方面。     

电脉冲介导基因转移效率的实验研究

目的　研究电脉冲介导的基因转移效率及其最佳的基因转移的电脉冲参数。方法　用微量注射器将pcD2/LacZ质粒10μg,在昆明小鼠的股四头肌注射,1～2min内在注射部位给予不同参数的电脉冲刺激(不同的电脉冲参数每组10只小鼠),然后进行β-半乳糖苷酶活性的测定或酶组织化学染色。同时设空白对照组及单纯注射组。结果　电脉冲可明显增加LacZ基因的表达,电脉冲组的β-半乳糖苷酶活性（131.6U/mg±86.5U/mg蛋白）是单纯注射组（4.9U/mg±1.0U/mg蛋白）的30倍（P<0.05）。组织化学染色结果表明电脉冲组肌肉组织中β-半乳糖苷酶蓝色颗粒的数目和染色的程度均明显高于单纯肌肉注射组。当电脉冲参数电压200V/cm,波宽40ms,脉冲次数6次和频率1Hz时,可获得最高的基因表达效率。结论　在最佳的电脉冲参数条件下,电脉冲介导的基因转移可获得较高的基因表达。     

双苯氟嗪对沙土鼠急性脑缺血性脑水肿的影响

目的　探讨新型钙通道阻滞剂双苯氟嗪 (Dip)对急性缺血性脑水肿的作用及机制。方法　选取 1 30只沙土鼠 ,随机分为假手术组、模型对照组、Dip 2 5mg/kg和 50mg/kg组 ,每组 2 0只。行双侧颈动脉结扎 (BCAL) ,制备沙土鼠急性全脑缺血模型。各组动物分别腹腔注射溶剂或不同剂量的Dip ,观察对脑组织Na+ 、K+ 和水含量及Na+ 、K+ ATP酶活性的影响。结果　BCAL后沙土鼠脑组织中的Na+ 和水含量显著高于假手术组 ,K+ 含量及Na+ 、K+ ATP酶活性则显著低于假手术组 ;Dip 2 5和50mg/kg组呈剂量依赖性改变 ,急性脑缺血所致的沙土鼠脑组织K+ 含量及Na+ 、K+ ATP酶活性降低(r=0 9981 )和Na+ 及水含量升高 ,差异有显著意义 (P <0 0 5或 0 0 1 ) ,且脑组织水含量与Na+ 、K+ ATP酶活性变化呈明显负相关 (r=- 0 9997,P <0 0 1 )。结论　Dip能通过改善BCAL所致钠钾泵功能失调而减轻缺血性脑水肿     

乌司他丁对大鼠肠缺血-再灌注损伤的保护作用

目的 探讨大鼠肠缺血-再灌注损伤致肠黏膜损害的机理及乌司他丁的保护作用.方法 Wistar雄性大鼠30只,随机分成假手术组(SO组)、肠缺血45 min再灌注6 h组(I/R组)组,乌司他丁预处理组(UTI组).每组均为10只.用无创伤动脉夹夹闭大鼠肠系膜上动脉制成肠缺血-再灌注模型,假手术组仅无菌开腹,但不钳夹该血管.乌司他丁预处理组在术前30 min经阴茎背静脉注入乌司他丁(2×104 U/kg),而肠缺血45 min再灌注6 h组和假手术组则分别注入等量生理盐水.在缺血45 min再灌注6 h后,各组分别采集静脉血、肠系膜淋巴组织及小肠组织标本.分别观察各组血清肠脂肪酸结合蛋白(IFABP),一氧化氮(NO),肿瘤坏死因子(TNF)α水平;小肠组织丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),髓过氧化物酶(MPO)水平;血液及肠系膜淋巴组织细菌移位率;并对小肠组织进行光镜及电镜观察.结果 和I/R组比较,UTI组IFABP,NO,TNF-α,MDA,MPO水平均明显降低,SOD活性显著升高[IFABP(520.87±75.41)pg/ml比(1493.57±136.35)pg/ml,NO (58.97±7.06)μmol/L比(95.15±9.13)μmol/L,TNF-α(15.38±1.70)pg/ml比(23.55±4.34)pg/ml,MDA(4.5±1.1)nmol/mg比(9.2±2.6)nmol/mg,MPO(1.98±0.22)U/g比(3.02±0.55)U/g,SOD(77.08±7.14)U/mg比(60.61±6.83)U/mg,P均＜0.01].差异具有统计学意义.肠系膜淋巴组织细菌移位率显著降低(P＜0.05),病理损害明显减轻.结论 乌司他丁可能通过减少氧自由基的生成、诚轻中性粒细胞聚集及活化、降低TNF-α、NO释放抑制过度炎症反应,对肠黏膜有一定的保护作用.     

Localization and distribution of magnetic chemotherapeutic drugs with magnetic targeting in rat brain

Background Magnetic targeting therapy may be a new method for the treatment of malignent tumors. The purpose of this study was to investigate the localization and distribution of ferrofluid microsphere of human serum albumin methotrexate (FM-HSA-MTX) carriers in the brain and to explore the magnetic targeting chemotherapy for malignant brain tumor.Methods Ninety SD rats were divided into three groups: targeting group, non-magnetic targeting group, and control group. Synthesized FM-HSA-MTX carriers (MTX 25 mg/kg) were injected into the systemic circulation via the caudal vein (magnetic targeting group, n=30). A 0.6 T magnetic field was placed around the right hemisphere. The non-magnetic targeting group (n=30) was administered with FM-HSA-MTX without external magnetic field, meanwhile the control group (n=30) was treated with MTX and a magnetic field. Random serial sacrifices (n=10) were conducted at 15, 30 and 45 minutes after drug administration. Bilateral hemispheres were collected respectively, and analyzed for total MTX content. Results MTX content in the right hemisphere of the magnetic targeting group was significantly higher than that in the other two groups at 15, 30 and 45 minutes after drug administration （P＜0.05) No difference was seen between the non-targeting group and control group. In the magnetic targeting group, MTX returned to the peak level ［(0.564±0.018） mg/g, q15-45=32.252, P＜0.05］ 45 minutes after the injection but it deceased in the other two groups ［non-magnetic targeting group: （0.060±0.015） mg/g, q15-45=9.245, P＜0.05, control group: （0.074±0.045） mg/g, q15-45=6.299, P＜0.05］. In the magnetic targeting group, the concentration of MTX in the right hemisphere was significantly higher than that in the left hemisphere (t45min=21.135, P=0.000) but no difference was observed between bilateral hemispheres in the other two groups （non-magnetic targeting group： t45min=0.434, P=0.670; control group： t45min=0.533, P=0.600）. Conclusion In the presence of the external magnetic field, FM-HSA-MTX can distribute successfully in the targeting areas of the brain.     

黄芩苷对创伤性脑损伤模型大鼠的治疗作用及Akt/Nrf2信号通路的影响

目的 探讨黄芩苷对创伤性脑损伤（TBI）模型大鼠的治疗作用及蛋白激酶B(Akt)/核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的影响。方法 建立TBI模型大鼠,按照随机数字表法分成模型组、阳性对照组（单唾液酸四己糖神经节苷脂钠注射液14 mg/kg）及黄芩苷低、中、高剂量组（50、100、200 mg/kg）,每组12只;另取12只大鼠设为假手术组。检测大鼠神经功能缺损评分（mNSS）、脑组织含水量、脑组织Akt、Nrf2 mRNA和蛋白表达水平,并观察大鼠脑组织病理结构。结果 假手术组大鼠脑组织细胞结构完整、排列整齐,未见出血及水肿;模型组大鼠脑组织细胞排列松散,且部分细胞点状坏死,大量炎性细胞浸润,出血和水肿明显;黄芩苷低、中、高剂量组大鼠脑组织出血、水肿面积和点状坏死细胞数量逐渐减少;阳性对照组和黄芩苷高剂量组效果相近。与假手术组比较,模型组大鼠mNSS评分[（8.43±1.72）分比（0.37±0.04）分,P<0.05]、脑组织含水量[（82.93±2.19）%比（68.72±1.36）%,P<0.05]升高,脑组织Akt、Nrf2 mRNA[Akt mRNA:(0....     

利多卡因对小鼠短暂全脑缺血后学习记忆障碍和胆碱能系统损害的影响

目的:观察利多卡因对不同ApoE基因型小鼠短暂全脑缺血后学习记忆障碍和中枢胆碱能系统损害的影响.方法:健康雄性C57BL/6J野生型小鼠(C57小鼠)和ApoE基因敲除型小鼠(ApoE小鼠)各随机分为3组:C57对照组(假手术操作,不夹闭双侧颈总动脉)C57缺血组(夹闭双侧颈总动脉17 min,经腹腔给予生理盐水)C57利多卡因组(夹闭双侧颈总动脉17 min,经腹腔给予利多卡因)ApoE对照组(处理同C57对照组)ApoE缺血组(处理同C57缺血组)ApoE利多卡因组(处理同C57利多卡因组).术后恢复7 d,从第8天起进行Morris水迷宫测试,连续5 d.术后第12天水迷宫测试后断头处死大鼠,分离双侧大脑皮层和海马测定乙酰胆碱酯酶、胆碱乙酰基转移酶活性和M受体结合活性.结果:(1)潜伏期:各缺血组均明显长于同品系相应的对照组,C57利多卡因组还明显长于C57缺血组[测试第3天(74.1±32.7)s比(49.2±19.5)s],但ApoE利多卡因组明显短于ApoE缺血组[测试第3～5天分别为(40.7±27.7)s比(84.7±26.8)s,(31.2±19.2)s比(72.1±33.0)s,和(28.0±22.1)s比(60.8±26.9)s](P＜0.05或0.01).两品系间比较,ApoE缺血组明显长于C57缺血组,但ApoE利多卡因组明显短于C57利多卡因组(P＜0.05或0.01).(2)有效搜索策略百分比:各缺血组均明显低于同品系相应的对照组,C57利多卡因组还明显低于C57缺血组[测试第3～5天分别为(18.2±11.7)%比(41.7±17.7)%,(22.7±20.8)%比(55.6±20.8)%,和(29.6±27.0)%比(66.7±21.7)%],但ApoE利多卡因组明显高于ApoE缺血组[测试第3～5天分别为(41.7±25.8)%比(15.6±12.9)%,(58.3±20.4)%比(18.8±11.6)%,和(66.7±30.3)%比(28.1±20.9)%](P＜0.01).两品系间比较,ApoE缺血组明显低于C57缺血组,但ApoE利多卡因组明显高于C57利多卡因组(P＜0.01).(3)胆碱能系统指标:各缺血组明显低于同品系相应的对照组,C57利多卡因组还明显低于C57缺血组,但ApoE利多卡因组明显高于ApoE缺血组(P＜0.05或0.01).两品系间比较,ApoE利多卡因组明显高于C57利多卡因组(P＜0.05或0.01).结论:短暂全脑缺血导致小鼠明显的脑损害,表现为学习记忆功能障碍和中枢胆碱能系统功能损害;ApoE小鼠学习记忆功能障碍的程度较C57小鼠更重.利多卡因加重了短暂全脑缺血所导致的C57小鼠脑损害,但可减轻ApoE小鼠的脑损害程度.     

改善胰岛素抵抗药物治疗大鼠非酒精性脂肪肝病的实验研究

目的探讨罗格列酮和二甲双胍对大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的治疗作用。方法44只雄性SD大鼠分为正常对照组(8只)和NAFLD组(36只)。以高脂饲料饲养建立NAFLD大鼠模型,8周末,处死NAFLD组大鼠4只,证实造模成功后,将NAFLD组进一步分为4组:NAFLD对照组(8只)、罗格列酮治疗组(8只)、二甲双胍治疗组(8只)和饮食治疗组(8只),除NAFLD对照组外,其余各组均进食普通饲料。12周末,处死所有动物,检测血脂、肝功能、肿瘤坏死因子α(TNFα)、肝脂质、肝组织TNFα、脂肪酸合成酶(FAS)的mRNA表达等指标及肝组织病理学。结果罗格列酮和二甲双胍治疗组血甘油三酯(0.61mmol/L±0.17mmol/L,0.63mmol/L±0.16mmol/Lvs0.85mmol/L±0.15mmol/L),总胆固醇(2.49mmol/L±0.68mmol/L,2.49mmol/L±0.58mmol/Lvs4.55mmol/L±1.58mmol/L),肝功能(丙氨酸氨基转移酶:38.3U/L±10.6U/L,43.3U/L±27.5U/Lvs110.6U/L±44.2U/L,天冬氨酸氨基转移酶:141.7U/L±14.3U/L,174.5U/L±57.9U/Lvs251.8U/L±91.0U/L),肝组织甘油三酯含量(18.9mg/g±2.7mg/g,20.4mg/g±3.6mg/gvs54.8mg/g±7.6mg/g)均显著低于NAFLD对照组(均P<0.05),其肝脂肪变性(分级:0.8±0.3,1.0±0.2vs2.8±0.5)及炎症程度(积分:0.8±0.2,1.0±0.3vs1.8±0.4)亦显著减轻(均P<0.01)。饮食治疗也能使血脂异常和肝组织病理学改变有一定改善,但对肝功能异常和肝脏炎症改善不明显,且疗效不如两药物治疗组。罗格列酮和二甲双胍治疗组的血清TNFα(125pg/ml±21pg/ml,155pg/ml±33pg/ml vs324pg/ml±34pg/ml)及肝组织TNFαmRNA(0.24±0.14,0.30±0.12vs0.85±0.12),FAS mRNA表达水平(0.22±0.14,0.29±0.16vs0.68±0.23)亦显著低于NAFLD对照组(均P<0.05)。结论罗格列酮和二甲双胍可有效治疗大鼠NAFLD。     

氧化应激对心房颤动犬心房病理组织学及超微结构改变的影响

目的 观察氧化应激对慢性心房快速起搏诱发心房颤动(房颤)犬心房肌钙激活蛋白酶Ⅰ表达及肌细胞超微结构改变的影响.方法 20只犬无菌条件下开胸手术,植入高频起搏器(400次/分),建立房颤犬模型,分为假手术组(不起搏),对照组和普罗布考组心房快速起搏6周.普罗布考组于起搏前1周服用普罗布考(100 mg/kg),至起搏6周结束.采用免疫组化方法和Western印迹法检测各组犬心房肌钙激活蛋白表达情况;分别于起搏前和起搏6周后,记录各组犬房颤诱发情况;比色法检测各组犬心房肌氧化应激相关指标.结果 对照组左、右心房肌肌溶解比率[(53.6±11.8)%,(58.5±9.2)%]比假手术组[(4.4±3.1)%,(4.1±2.9)%]显著增加(P＜0.01);对照组比假手术组心房肌细胞线粒体肿胀伴糖原沉积明显,心房肌钙激活蛋白酶Ⅰ表达显著上调(P＜0.01);普罗布考组左、右心房肌细胞病理组织学和超微结构改变比对照组明显减轻,肌溶解比率明显减少[(12.3±3.2)%,(12.0±2.6)%,P＜0.01],钙激活蛋白酶Ⅰ表达显著下调(P＜0.01).普罗布考组心房肌MDA水平比对照组显著降低(P＜0.01),T-AOC和抗O2-水平明显增加(P＜0.01),房颤诱发率和平均持续时间显著减少(均P＜0.01).心房肌钙激活蛋白酶Ⅰ表达和MDA均与肌溶解程度呈显著正相关(r=0.958,r=0.939,P＜0.01).结论 普罗布考能够通过抑制氧化应激,抑制房颤犬心房肌肌溶解等病理组织学和超微结构变化,防止心房颤动犬心房重构,减少房颤发生.     

阻塞性黄疸患者生长激素/胰岛素样生长因子-Ⅰ轴变化的研究

目的　探讨阻塞性黄疸患者生长激素/胰岛素样生长因子-Ⅰ轴的变化及其临床意义。方法　对60例男性阻塞性黄疸患者（阻黄组）围手术期血浆生长激素、生长激素结合蛋白、胰岛素样生长因子,内毒素、肝功能及前白蛋白水平进行观察,并与40例男性单纯性胆囊结石患者（对照组）进行比较。结果　生长激素、生长激素结合蛋白、胰岛素样生长因子-Ⅰ在阻黄组分别为7.4μg/L±3.6μg/L、9.1±2.3B/T*100、49.8mg/L±6.6mg/L,较对照组（13.9μg/L±5.7μg/L、13.3±1.6B/T*100、61.4mg/L±6.5mg/L显著降低,差异有显著意义(P<0.01),并与黄疸程度,前白蛋白、内毒素水平相关(P<0.01)。结论　阻塞性黄疸患者生长激素/胰岛素样生长因子-Ⅰ轴存在明显下调。其原因可能与营养障碍、内毒素血症引起的生长激素受体表达受抑有关,并可进一步加重营养障碍和内毒素血症,是介导阻塞性黄疸病理生理改变的重要因素。     

RNA干扰真核表达载体pEGFP-H1介导的血管内皮生长因子shRNA治疗人胶质瘤的实验研究

目的　构建针对血管内皮生长因子(VEGF)的短发夹环RNA(shRNA)质粒(pEGFPH1 /VEGF),观察其在体内和体外对胶质瘤细胞株U251生长的抑制作用。方法　应用PCR构建携带绿色荧光蛋白(EGFP)基因的RNA干扰真核表达载体pEGFP- H1,并利用该载体介导VEGFshRNA。用阳离子脂质体转染U251细胞,通过荧光显微镜和流式细胞仪观察EGFP的表达,用RT- PCR检测VEGFmRNA的表达,以酶联免疫吸附实验(ELISA)检测培养液中VEGF蛋白的含量。同时筛选转染pEGFP- H1和pEGFP- H1 /VEGF的U251稳定细胞株,制备裸鼠U251细胞移植瘤模型,观察肿瘤生长情况。结果　与空载体转染组相比, pEGFP- H1 /VEGF对VEGF的抑制率达77. 9%。对照组和pEGFP -H1组裸鼠肿瘤重量分别为1 .7g±0 4g和1 .5g±0 .7g,体积分别为1573mm3 ±330mm3 和1430mm3 ±382mm3,两组之间重量和体积差异均无统计学意义(P>0 .05 ),而pEGFP- H1 /VEGF组肿瘤重量为0 .5g±0 .4g,体积为401mm3 ±272mm3,与对照组比较差异有统计学意义(P<0. 01)。结论　pEGFP H1介导的VEGFshRNA能有效抑制U251细胞中VEGF的表达,并在体内抑制肿瘤生长。     

清热解毒类中药单体的体外内抗肝癌作用研究

目的：探讨5种清热解毒中药单体对SMMC-7721肝癌细胞增殖和对H22荷瘤小鼠移植瘤的抑制作用。方法 SMMC-7721人肝癌细胞分别经不同浓度的迷迭香酸、黄芩苷、橙黄决明素、绿原酸和黄连素作用48 h后,四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖抑制率并筛选出有效中药单体。采用H22肝癌细胞建立小鼠移植性肝癌模型,给予H22荷瘤小鼠不同浓度的迷迭香酸（300 mg／kg、150 mg／kg、75 mg／kg）和黄芩苷（200 mg／kg、100 mg／kg、50 mg／kg）10 d后,剥取瘤块、胸腺、脾脏称重,并计算抑瘤率、胸腺指数和脾脏指数。结果迷迭香酸500 mg／L、250 mg／L、125 mg／L 浓度组和黄芩苷500 mg／L、250 mg／L浓度组吸光度A值均明显低于对照组（ P＜0．05）,且细胞增殖抑制率均达到30％以上;橙黄决明素及黄连素组的细胞增殖抑制率均低于30％,绿原酸组细胞增殖抑制率＜0。各剂量迷迭香酸组的瘤重均较模型组明显下降（P＜0．05）,对H22移植瘤的抑制率分别为48．2％、43．0％和39．0％,迷迭香酸各剂量组的胸腺指数和脾脏指数与模型组比较,差异无统计学意义（P＞0．05）。300 mg／kg黄芩苷组肿瘤重均低于模型组（P＜0．05）,抑瘤率达到55．7％,黄芩苷各剂量组的脾脏、胸腺指数与模型组比较无显著性差异（P＞0．05）。结论迷迭香酸和黄芩苷体外对SMMC-7721肝癌细胞和体内对H22移植瘤均有明显的抑制作用。