死亡相关蛋白激酶基因在胃癌组织中的表达

目的:研究死亡相关蛋白激酶(DAPk)基因在原发性胃癌组织中的表达,探讨其在胃癌发生发展中可能的作用。方法:收集62例原发性胃癌及相对应的癌旁正常组织。应用RT-PCR检测DAPk mRNA表达,免疫组化方法检测DAPk蛋白表达。结果:RT-PCR方法显示DAPk mRNA表达水平在胃癌组织中明显低于癌旁正常组织(OD值为0.2863±0.2027比0.5736±0.1968,P<0.0001)。免疫组化分析显示,DAPk在所有癌旁正常组织中表达均为阳性,积分范围为2-12,平均8.61±2.89;而在胃癌组织中表达则明显减弱或缺失,积分范围为0-9,平均2.90±3.38。DAPk在癌旁正常组织中的表达水平显著高于胃癌组织(P<0.0001)。结论:在原发性胃癌组织中,DAPk mRNA和蛋白表达明显缺失或低下。     

超声心动图对不同胎龄胎儿先天性心血管畸形的诊断价值

目的对比分析超声心动图对不同胎龄胎儿先天性心血管畸形（CCM）的诊断价值。方法对102例高危孕妇胎儿超声心动图检查资料进行回顾分析,检查时间段分为三个阶段,即胎龄20周±7d（阶段A）、胎龄28周±5d（阶段B）、胎儿出生后24周±8d（阶段C）;将三个阶段的阳性结果进行对比分析。结果胎儿CCM阳性检出率分别为阶段A 23例（22.5%）、阶段B 18例（17.6%）、阶段C 18例（17.6%）;阶段A中2例（1.9%）室间隔缺损最终由阶段B和阶段C证实均为阴性;与阶段C比较,阶段A和阶段B有3例（2.9%）阳性结果诊断有一定差异;三个阶段阳性诊断结果完全一致者16例（15.7%）,另外有2例（1.9%）因引产无法得到随访。结论与出生后比较,胎龄28周±5d时较20周±7d时超声心动图诊断胎儿CCM的准确率高。     

189例胎儿肝重与体重胎龄的测量分析

测量受精龄１３～３８周的胎儿１８９例，结果表明：肝重量随体重、胎龄的增加而增加。其生长速度２５～２８周增长最快，此后逐渐减慢。并且肝重量与胎龄呈直线相关，相关系数均＞０．８，Ｐ＜０．０１。肝重量与体重亦呈直线相关，相关系数＞０．９９，Ｐ＜０．００１。     

碳酸锂对慢性应激抑郁模型大鼠海马蛋白激酶A和蛋白激酶C表达的影响

  目的 研究碳酸锂对慢性应激抑郁模型大鼠海马蛋白激酶A（PKA）和蛋白激酶C（PKC）表达的影响。方法 将大鼠随机分为抑郁模型组、碳酸锂组和对照组。模型组和碳酸锂组给予21 d的应激刺激,此期间对照组正常饲养,刺激期间碳酸锂组每天灌胃给予碳酸锂（60 mg/kg）,模型组和对照组每天灌胃给予等体积的生理盐水。应用open-field法和液体消耗实验进行行为学检测。采用Western blot检测各组大鼠海马PKA和PKC的表达情况。结果 应激后,模型组大鼠水平穿越格数、竖立次数、修饰次数和糖水消耗百分比均显著低于对照组,碳酸锂组水平穿越格数和糖水消耗百分比低于对照组（P0.05）。Western blot结果显示,模型组大鼠海马PKA和PKC的表达水平显著低于对照组（P0.05）。结论 碳酸锂可以逆转慢性应激抑郁模型大鼠海马中PKA和PKC表达的降低,碳酸锂对PKC表达的影响大于对PKA的影响。     

丝裂素活化蛋白激酶在高血压大鼠心肌中的表达

研究心肌丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）活性及其在细胞中的表达，评价ＭＡＰＫ在高血压心肌重构中的作用。方法对３４和５４周龄组的脑卒中型自发性高血压大鼠及正常血压大鼠进行心肌ＭＡＰＫ活性及其免疫组化定位研究。结果高血压大鼠和正常大鼠的心肌重量与体重比显著增加，心肌出现肥大；心肌ＭＡＰＫ活性３４周龄组增加了１．８１倍，５４周龄组增加了１．４６倍。免疫组化研究显示高血压大鼠心肌内有丰富的ＭＡＰＫ表达，且主要分布于心肌间质细胞。结论心肌ＭＡＰＫ激活可能是传递心肌肥大信息的主要通路。     

脂多糖诱导大鼠肺泡巨噬细胞p38蛋白激酶基因的表达

目的探讨脂多糖 (LPS)诱导的肺泡巨噬细胞 (AM) p3 8蛋白激酶mRNA及其蛋白质表达的变化。方法分离培养AM ,分别采用原位分子杂交和免疫细胞化学方法检测AM p3 8蛋白激酶mRNA及其蛋白质的表达。结果p3 8mRNA在正常对照组AM中有少量表达 ,LPS刺激后 p3 8mRNA表达显著增强 (P <0 .0 1 )。p3 8蛋白质在正常对照组AM中的表达呈弥散性分布 ,以胞浆为主 ,胞核较少 ;LPS刺激后 ,胞浆染色明显减弱 ,胞核染色明显增强 ,胞核染色阳性细胞的百分比由正常对照组的 6.1 2± 2 .0 5 %上升到 3 5 .2± 8.3 5 % ,为正常对照组的 5 .75倍 ,二者比较差异具有显著性 (P <0 .0 1 )。结论LPS刺激AM p3 8mRNA的表达增强 ,诱发 p3 8蛋白激酶由胞浆转位到胞核     

p38调节活化蛋白激酶绿色荧光蛋白融合载体的构建及表达

目的构建在哺乳动物细胞中表达的PRAK绿色荧光蛋白融合表达载体.方法将克隆在pET-14b上的PRAK亚克隆到绿色荧光蛋白载体DEGFP-C2上,随后转染Hela细胞,并在荧光显微镜下观察.结果重组质粒经酶切、PCR和测序鉴定正确无误,并在Hela细胞中得到高量表达.融合蛋白发出的绿色荧光表明EGFP-PRAK主要分布在细胞核中.结论成功构建了PRAK绿色荧光蛋白融合载体,该载体能在哺乳动物细胞中进行表达,为研究PRAK的细胞内定位和移位提供了一个重要的工具.     

p38调节活化蛋白激酶绿色荧光蛋白融合载体的构建及表达

目的 构建在哺乳动物细胞中表达的PRAK绿色荧光蛋白融合表达载体。方法 将克隆在pET-14b上的PRAK亚克隆到绿色荧光蛋白载体pEGFP-C2上,随后转染Hela细胞,并在荧光显微镜下观察。结果 重组质粒经酶切、PCR和测序鉴定正确无误,并在Hela细胞中得到高量表达。融合蛋白发出的绿色荧光表明EGFP-PRAK主要分布在细胞核中。结论 成功构建了PRAK绿色荧光蛋白融合载体,该载体能在哺乳动物细胞中进行表达,为研究PRAK的细胞内定位和移位提供了一个重要的工具。     

氟西汀对抑郁大鼠行为及海马组织内应激活化蛋白激酶信号通路的影响

目的探讨氟西汀对抑郁大鼠行为学表现及海马组织内丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)及Jun氨基末端激酶(JNK)通路蛋白表达的影响。方法 40只雄性Sprague Dawley大鼠随机分为正常组、抑郁症组、生理盐水组和氟西汀组,每组10只。正常组大鼠不给予任何刺激;抑郁症组、生理盐水组和氟西汀组大鼠给予8周慢性不可预见性应激(CUMS),于CUMS第5～8周,氟西汀组大鼠给予氟西汀(10 mg·kg-1·d-1)灌胃,生理盐水组大鼠给予生理盐水(10 mg·kg-1·d-1)灌胃;正常组和抑郁症组大鼠不给予任何干预措施。分别于CUMS前(造模前),CUMS4周后(造模后)、8周后(干预后)评估4组大鼠行为学变化,最后一次行为学评估后处死大鼠,并取海马组织,采用Western blot法检测海马组织内MKP-1、JNK、磷酸化JNK(p-JNK)蛋白表达水平,并计算p-JNK/JNK比值。结果造模前各组大鼠体质量、蔗糖偏好指数、强迫游泳不动时间及旷场实验结果比较差异均无统计学意义(P> 0. 05)。正常组大鼠造模前后各行为学指标比较差异均无统计学意义(P> 0. 05);与造模前比较,造模后抑郁症组、生理盐水组、氟西汀组大鼠体质量降低,蔗糖偏好指数下降,强迫游泳不动时间增加,水平运动距离和直立次数减少(P <0. 05)。与正常组比较,造模后抑郁症组、生理盐水组、氟西汀组大鼠体质量降低,蔗糖偏好指数下降,强迫游泳不动时间增加,水平运动距离和直立次数减少(P <0. 05)。造模后,抑郁症组、生理盐水组、氟西汀组大鼠各种行为学指标比较差异均无统计学意义(P> 0. 05)。与正常组比较,干预后生理盐水组及抑郁症组大鼠体质量降低,蔗糖偏好指数下降,强迫游泳不动时间增加,水平运动距离和直立次数减少(P <0. 05)。干预后,氟西汀组与正常组大鼠各项行为学指标比较差异均无统计学意义(P> 0. 05),生理盐水组与抑郁症组大鼠各项行为学指标比较差异均无统计学意义(P> 0. 05)。与生理盐水组和抑郁症组比较,氟西汀组大鼠体质量增加,蔗糖偏好指数上升,强迫游泳不动时间减少,水平运动距离和直立次数增加(P <0. 05)。抑郁症组和生理盐水组大鼠海马组织内MKP-1蛋白表达量高于正常组(P <0. 05),氟西汀组大鼠海马组织内MKP-1蛋白表达量低于抑郁症组和生理盐水组(P <0. 05),氟西汀组与正常组大鼠海马组织内MKP-1蛋白表达量比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。4组大鼠海马组织内p-JNK、JNK蛋白表达量及p-JNK/JNK比值比较差异均无统计学意义(P> 0. 05)。结论 MKP-1改变可能是抑郁症发病的一个重要基因,其影响抑郁症发病的机制可能不是通过JNK信号通路。氟西汀可能通过下调MKP-1表达水平而改善大鼠抑郁状态。     

不同胎龄早产儿喂养不耐受影响因素分析

目的 探讨不同胎龄早产儿喂养不耐受的影响因素。方法回顾性调查分析胎龄小于等于32周早产儿102例和胎龄大于32周早产儿362例,单因素和多因素Logistic回归分析某些高危因素(母体异常、胎盘脐带异常、宫内窘迫、胎膜早破、分娩方式、产期使用糖皮质激素情况、围生期感染、呼吸暂停、机械通气等)与不同胎龄早产儿发生喂养不耐受的相关性。结果小于等于32周组早产儿与大于32周组早产儿中喂养不耐受的发生率分别为41.18%和22.38%,两者显著差异(P<0.05)。多因素Logistic分析显示,小于等于32周组早产儿发生喂养不耐受的影响因素有:产前应用糖皮质激素、呼吸暂停、机械通气;大于32周组早产儿发生喂养不耐受的影响因素有:胎膜早破、围生期感染、呼吸暂停。结论不同胎龄早产儿发生喂养不耐受的影响因素不完全相同,临床防治工作中应有所区别。     

Ku70和Ku80基因在系统性红斑狼疮患者皮肤上的表达

目的 :研究Ku70和Ku80基因在系统性红斑狼疮 (systemiclupuserythematosus,SLE)患者皮肤表达的变化及其与SLE发病的关系。方法 :利用Ku70、Ku80地高辛标记的cDNAs探针对皮损区、非皮损区及正常对照皮肤进行原位杂交。结果 :Ku70、Ku80mRNAs的表达量从高到低依次为SLE皮损区、SLE非皮损区、正常皮肤。另外还发现在皮肤的层次上真皮浅层单一核细胞Ku70、Ku80mRNAs表达量高于表皮基底层细胞、表皮棘细胞层和颗粒层细胞。结论 :Ku70、Ku80mRNAs的表达在SLE患者皮肤上发病区高于非发病区 ,更大于正常皮肤。Ku70、Ku80mRNAs表达的变化与SLE的发病有关 ,其机制有待进一步研究     

皮肤恶性肿瘤及其它皮肤疾病中p53的表达

１９７９年,Ｌａｎｅ和Ｃｒａｗｆｏｒｄ在ＳＶ大Ｔ抗原基因转染的细胞中首次发现了中基因［１］。近二十年的研究表明,ｐ５３基因是与人类肿瘤关系最密切的基因,它存在两种类型：野生型和突变型。正常情况下,ｐ５３基因以野生型参与多种细胞内过程,其产物具有抑制Ｇ０／Ｇ１期细胞进入Ｓ期及诱导细胞凋亡的作用,故被认为是一种抑癌基因。而突变型ｐ５３基因由于结构变化丧失了上述功能,成为人类肿瘤中最常见的癌基因之一。现将皮肤恶性肿瘤及其它皮肤疾病中ｐ５３基因的突变情况及表达综述如下。１ Ｐ５３基因的结构及生物学特征 人…     

TLR9在不同胎龄新生儿脐血中的表达变化

目的 通过观察早产儿不同胎龄Toll样受体9（TLR9）的表达,探讨早产儿免疫功能低下的机制。方法 采集2010年7月至2014年6月在上海市嘉定区妇幼保健院产科出生的活产新生儿的脐血229份,按胎龄分为4组,28~31周组,31~34周组,34~37周组,≥37周组,采用流式细胞术和实时荧光定量PCR方法,分别检测其TLR9的蛋白和mRNA表达情况,了解其与胎龄之间的关系,并分析mRNA和蛋白表达间的相关性。结果 TLR9阳性细胞率在28~31周组,31~34周组,34~37周组,≥37周组分别为（15.93±6.23）%,（11.63±6.70）%,（13.66±6.88）%,（20.51±12.06）%;其在胎龄28~31周较高,至31~34周逐渐下降至最低,两组差异有统计学意义（P<0.05）;34~37周后TLR9阳性细胞率表达逐渐升高,至≥37周达最高,两胎龄组比较,差异具有统计学意义（P<0.05）。31~37周间新生儿脐血TLR9阳性细胞率与胎龄呈正相关（r=0.273,P=0.006）。TLR9 mRNA表达在28~31周组,31~34周组,34~37周组,≥37周组分别为（4.95±3.44）%,（8.89±8.49）%,（13.91±10.92）%,（7.19±7.11）%;其在28~36周逐渐升高,与胎龄呈正相关（r=0.355,P< 0.001）。≥37周TLR9 mRNA表达量下降,该值虽高于28~31周,但差异无统计学意义（P>0.05）。相关性分析表明,同胎龄时期同样本新生儿的TLR9 mRNA和TLR9阳性细胞率之间存在负相关（r=-0.227,P=0.011）。结论 TLR9阳性细胞率和TLR9 mRNA表达在不同胎龄组新生儿间有差异,TLR9阳性细胞率表达在31~37周间随着胎龄的增加而增加,TLR9 mRNA在28~36周间随着胎龄的增加而增加。     

腺苷酸活化的蛋白激酶在食管鳞癌中的表达及其临床意义

目的 通过研究腺苷酸活化的蛋白激酶(AMPK)在食管鳞癌组织和正常食管组织中的表达和激活情况,探讨AMPK在食管癌发生中的意义。 方法 应用免疫印迹(Western blot)方法检测40例食管鳞癌病例标本和对应的正常食管组织中AMPK下游底物乙酰辅酶A羧化酶(ACC)及p-ACC的表达,并分析其与临床病理参数之间的关系。 结果 食管鳞癌组p-ACC蛋白的表达低于正常食管组织,差异有统计学意义(P<0.05)。p-ACC表达下调率在低分化鳞癌组是81.8%(9/11),高于中高分化鳞癌组3.5%(1/29),差异有统计学意义(χ2=22.11,P<0.05)。统计分析表明,p-ACC表达下调与食管癌患者的年龄、性别、TNM分期及淋巴结转移无相关性(P>0.05)。 结论 p-ACC在食管鳞癌中的表达下调,并与食管癌的组织分化程度相关,提示p-ACC表达的下调可能与食管癌的发生、发展相关,这对评估食管癌生物学行为及为寻找食管癌新的治疗靶点有一定的指导作用。     

脂质体修饰p42丝裂原活化蛋白激酶反义寡核苷酸对心肌肥厚大鼠p42丝裂原活化蛋白激酶表达的影响

目的观察p42丝裂原活化蛋白激酶（p42一MAPK）反义寡核苷酸对肾性高血压导终3肌肥厚大鼠p42一MAPK表达的影响。方法纳入健康清洁级SD大鼠30Z，建立肾性高血压大鼠模型，分为假手术纽、模型纽、反义链纽、错义链纽及脂质体对照组。用脂质体将p42一MAPK反叉寡核苷酸转染入相应组别大鼠，测定收缩压、左心室质量指数、心肌细胞直径和面积。免疫印迹法测定p42一MAPK表达。免疫沉淀法测定p42一MAPK活性。结果p42一MAPK反义寡核苷酸能显著降低模型组p42一MAPK表达及活性，下调肥厚重塑相关指标。结论p42一MAPK反义寡核苷酸可能是基因治疗心肌肥厚重塑的新靶点。     

外源性p38调节活化蛋白激酶细胞内定位研究

目的 研究外源性调节活化蛋白激酶 (PRAK)在细胞内的定位.方法 将克隆在pET-14b上的PRAK亚克隆到绿色荧光蛋白载体pEGFP-C2上,随后转染Hela细胞,并通过荧光显微镜观察外源性PRAK导入真核细胞后在细胞内的分布.结果 重组质粒经酶切、PCR和测序鉴定正确无误,并在Hela细胞中得到高量表达.融合蛋白发出的绿色荧光表明EGFP-PRAK主要分布在细胞核中.结论 成功构建了PRAK绿色荧光蛋白融合载体,该载体能在哺乳动物细胞中进行表达,通过荧光显微镜观察外源性PRAK主要分布在细胞核内.     

不同胎龄新生儿体格发育的综合分析

对29912例不同胎龄单胎活产儿体格发育的生长速度、身体指数、发育阶段与指标分类、指标相关关系进行了综合分析,为进一步了解胎儿在子宫内的生长发育情况提供了科学依据。     

不同胎龄和出生体重的早产儿死亡情况分析

目的 分析不同胎龄和出生体重的早产儿的死亡情况,以了解胎龄、出生体重对早产儿病死率的影响.方法 收集2007年1月1日-2008年12月31日在同济大学附属上海市第一妇婴保健院出生的早产儿1 453例,依据不同胎龄、出生体重统计其病死率,并对死亡原因进行分析.结果 1 453例早产儿中,死亡47例,病死率为3.23%.胎龄<32周早产儿的胎龄越小病死率越高(P值均<0.05),胎龄≥32周早产儿的病死率与胎龄无关联(P0.05).胎龄<32周早产儿的死亡原因前3位分别为新生儿呼吸窘迫综合征(8例)、新生儿窒息(5例)、新生儿感染(3例);胎龄32～36~(+6)周早产儿死亡原因前2位分别为先天畸形(3例)、新生儿感染(2例).结论 胎龄32周、体重达1 500 g可能是胎儿发育的一个界点.应加强围产期保健.     

胎儿身长或顶臀长与胎龄关系的研究

本文采用长春市妇产科医院自然流产和死亡的胎儿140例,按月龄分7个组(4~10个月),对胎儿的身长和顶臀长进行了测量,对二者的生长发育及其与胎龄的关系进行了研究。结果如下:1.胎儿身长、顶臀长的生长是随月份的增加而增长,描绘出的曲线是不规则的上升曲线。2.胎儿身长、顶臀长的增长速度是不均等的。3.胎龄与胎儿的身长或顶臀长之间有直线正相关的关系。相关系数分别是0.98、0.98。其相关回归方程式分别是:y=9.32+4.37X,y=7.77+2.83X。     

胎儿主肺动脉多普勒流速曲线参数与胎龄的相关性分析

分析胎儿主肺动脉多普勒流速曲线参数与胎龄的相关性,为临床胎儿肺成熟及肺循环的评估提供依据。回顾性分析本院接诊的23~40周的正常胎儿400例临床资料,分析不同胎龄胎儿主肺动脉多普勒流速曲线参数AT、ET、AT/ET、PI、RI、PSV、EDV和MV,并分析不同胎龄与上述参数的相关性。结果显示不同胎龄研究对象的胎儿主肺动脉多普勒流速曲线参数AT、AT/ET、PI、RI、PSV、EDV和MV水平存在明显变化(P<0.05)而ET无显著变化(P<0.05);不同多普勒流速曲线参数与胎龄有一定的相关性,其中AT及AT/ET与胎龄的相关性最强,相关系数分别为0.785(P<0.05)和0.802(P<0.05),而ET和RI与胎龄无明显的相关性(P>0.05)。因此,胎儿主肺动脉多普勒流速曲线参数与胎龄有相关性,其中AT及AT/ET与胎龄的相关性最强。