复方斑蝥注射液联合奥沙利铂对肝癌HepG2细胞增殖与凋亡的影响

目的：探讨复方斑蝥注射液（CCI）、奥沙利铂（L-OHP）单药及联合作用对人肝癌HepG2细胞株的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法：MTT法观察不同浓度复方斑蝥注射液、奥沙利铂单药及联合应用对HepG2细胞生长的抑制作用;采用流式细胞仪检测上述药物单独或联合应用对HepG2细胞的凋亡率的影响。结果：复方斑蝥注射液、奥沙利铂单药及联合作用对HepG2细胞的抑制作用均呈明显的剂量依赖关系。均可诱导细胞凋亡,联用时有协同作用。结论：复方斑蝥注射液、奥沙利铂能够抑制人肝癌HepG2细胞增殖并诱导凋亡。两药联合有协同作用。     

复方斑蝥注射液联合奥沙利铂对肝癌HepG2细胞增殖与凋亡的影响

目的:探讨复方斑蝥注射液(CCI)、奥沙利铂(L-OHP)单药及联合作用对人肝癌HepG2细胞株的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法:MTT法观察不同浓度复方斑蝥注射液、奥沙利铂单药及联合应用对HepG2细胞生长的抑制作用;采用流式细胞仪检测上述药物单独或联合应用对HepG2细胞的凋亡率的影响。结果:复方斑蝥注射液、奥沙利铂单药及联合作用对HepG2细胞的抑制作用均呈明显的剂量依赖关系。均可诱导细胞凋亡,联用时有协同作用。结论:复方斑蝥注射液、奥沙利铂能够抑制人肝癌HepG2细胞增殖并诱导凋亡。两药联合有协同作用。     

去甲斑蝥酸钠治疗中晚期原发性肝癌的疗效观察

目的 观察去甲斑蝥酸钠注射液在治疗中晚期原发性肝癌中缓解临床症状的作用.方法 47例中晚期原发性肝癌分为两组,均行经肝动脉导管化疗栓塞术(TACE)治疗后,去甲斑蝥酸钠组24例,给予去甲斑螫酸钠注射液10 mg/d,1周后改为20 mg/d,30 d为1个疗程,连用1～2个疗程;对照组23例化疗后未处理.治疗结束后评价疗效.结果 去甲斑蝥酸钠组和对照组的总有效率分别为54.2%和43.5%.两组治疗前后Karnofsky评分均有提高,但去甲斑蝥酸钠组提高更显著.结论 去甲斑螫酸钠注射液在缓解中晚期原发性肝癌的临床症状方面有一定疗效.     

CAAP1抑制肝癌HepG2细胞凋亡而促进其增殖、迁移和侵袭

目的:探讨CAAP1对肝癌HepG2细胞凋亡、增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制.方法:构建CAAP1过表达载体pcDNA3/CAAP1和敲降载体pSilencer 2.l-U6 neo/shR-CAAPl,转染肝癌HepG2细胞后,qPCR和WB实验分别检测CAAP1mRNA和蛋白的表达水平.实验分为过表达对照组(p...     

碘125粒子植入术联合去甲斑蝥酸钠治疗原发性肝癌

目的探讨碘125粒子植入术联合去甲斑蝥酸钠治疗原发性肝癌的临床疗效。方法将枣庄市肿瘤医院2010年6月至2015年6月期间收治的120例原发性肝癌随机分成两组,均行碘125粒子植入治疗,其中60例于术后加用去甲斑蝥酸钠静脉滴注14 d,作为治疗组;另60例患者术后常规对症支持治疗,作为对照组。随访1~60个月。术后30、60 d分别检测两组患者各项生化、免疫指标。结果治疗组临床缓解率高,血清血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、甲胎蛋白(AFP)降低显著,肝功能明显改善,T淋巴细胞亚群CD4、CD8检测指标高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论碘125粒子植入术联合去甲斑蝥酸钠治疗原发性肝癌,临床疗效显著,值得进一步研究。     

HOXA9基因抑制肝癌细胞HepG2迁移与侵袭能力的实验研究

目的：探讨同源盒基因HOXA9对肝细胞肝癌细胞株HepG2迁移与侵袭能力的影响。方法：采用EndoFectinTM -Max转染试剂将HOXA9基因真核表达载体及其空载体转染至HepG2细胞,并应用脂质体法转染HOXA9 siRNA序列及阴性对照序列,采用实时荧光定量PCR（ Real-time PCR）及Western blot方法检测转染后HOXA9的mRNA和蛋白表达水平。以划痕实验和Transwell方法检测转染后细胞的迁移和侵袭能力。结果：在肝癌细胞HepG2中瞬时转染HOXA9真核表达载体后,其mRNA和蛋白表达明显增加,划痕实验检测发现48h细胞愈合率明显抑制,Transwell实验发现迁移和侵袭至下室的细胞数目明显减少;而转染HOXA9 siRNA序列后,HepG2细胞中HOXA9 mRNA及蛋白表达明显下调,划痕实验显示48h划痕愈合率增加,Tran-swell实验显示迁移和侵袭至下室的细胞数目明显增多。结论：HOXA9基因对肝癌细胞HepG2的迁移和侵袭能力有明显抑制作用,为进一步研究HOXA9在肝细胞肝癌发生和进展中的作用奠定了基础。     

三氧化二砷对肝癌HepG2细胞侵袭转移及USP22蛋白表达的影响

目的:探究不同浓度三氧化二砷(As2O3)对肝癌HepG2细胞侵袭转移能力的影响以及对HepG2细胞中USP22蛋白表达的影响,进一步完善其分子机制。方法:CCK8细胞增殖实验检测不同浓度As2O3在不同时间点对HepG2细胞增殖的影响;细胞划痕和Transwell方法检测HepG2细胞在不同浓度As2O3作用下侵袭转移能力的变化;Western blot检测As2O3作用下HepG2细胞中USP22蛋白的表达水平。结果:随着As2O3浓度和作用时间的增加,HepG2细胞增殖明显受到抑制。与对照组相比,24 h时分别用2、4、8 μmol/L的As2O3处理的HepG2细胞侵袭转移能力降低,细胞中USP22蛋白表达水平明显下降。结论:As2O3可抑制人肝癌HepG2细胞侵袭转移能力,其分子机制可能与下调的USP22蛋白水平相关。     

索拉非尼联合斑蝥酸钠对肝癌HepG2细胞的抑制作用

目的 探讨索拉非尼联合斑蝥酸钠对肝癌HepG2细胞的抑制作用及相关机制。方法 将不同浓度的索拉非尼和斑蝥酸钠分为索拉非尼组、斑蝥酸钠组及索拉非尼+斑蝥酸钠联合用药组（联合用药组）,并设空白对照组,分别作用于肝癌HepG2细胞。CCK-8法测定两个单药组及联合用药组对肝癌HepG2细胞的抑制作用,流式细胞术检测细胞周期,Western blot法检测ERK及pERK蛋白的表达水平。结果 索拉非尼组、斑蝥酸钠组及联合用药组均可抑制肝癌HepG2细胞的增殖,并具有剂量-时间依赖效应,联合用药组细胞抑制率高于两个单药组（P均<0.05）。索拉非尼浓度为4 μmol/L、斑蝥酸钠浓度为3.88 μmol/L联合用药的48 h时段表现为协同作用,其余大多表现为相加作用。3组G1期细胞百分比均明显高于对照组 （P均<0.001）,联合用药组较两个单药组更高（P<0.05）;两个单药组及联合用药组的ERK蛋白的表达较对照组无明显差异 （P=0.1）,索拉非尼组及联合用药组pERK蛋白的表达明显低于对照组的（P<0.05）,斑蝥酸钠组明显高于对照组 （P=0.023）。结论 索拉非尼和斑蝥酸钠对肝癌HepG2细胞均有抑制增殖的作用,联合用药表现为协同或相加作用,其机制可能与阻滞细胞周期及抑制RAF/MEK/ERK信号传导通路有关。     

七氟烷对乳腺癌BT549细胞侵袭、迁移及MMP-2、MMP-9表达的影响

目的:探讨七氟烷对乳腺癌BT549细胞侵袭、迁移及基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达的影响。方法:乳腺癌BT549细胞用七氟烷处理后,细胞划痕实验检测细胞迁移,Transwell小室检测细胞侵袭,Western blot检测MMP-2、MMP-9蛋白表达。结果:七氟烷处理后的BT549细胞迁移率由（36.45±3.21）%降低至（14.68±1.52）%,侵袭细胞数目由（136.58±13.36）个减少到（79.95±14.25）个,MMP-2水平由0.48±0.04减少为0.14±0.03,MMP-9水平由0.96±0.07减少为0.22±0.05,两组比较差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论:七氟烷能够抑制乳腺癌BT549细胞迁移和侵袭,降低细胞中MMP-2、MMP-9表达水平。     

去甲斑蝥素对人肝癌HepG2细胞生长抑制作用的实验观察

目的探讨去甲斑蝥素对人肝癌HepG2细胞系抑制和诱导凋亡作用。方法采用MTT法检测细胞的生长活性,应用流式细胞仪检测、透射电镜下观察去甲斑素处理HepG2细胞后细胞周期阻滞和细胞凋亡的发生情况。结果 5～40μg/ml去甲斑蝥素均能抑制HepG2细胞增殖(P<0.05),其抑制率与作用时间及NCTD浓度相关。流式细胞仪检测发现,去甲斑蝥素处理HepG2细胞后,实验组G2/M细胞明显多于对照组,P<0.05,提示细胞周期停滞于G2/M期。透射电镜下可见,HepG2细胞出现凋亡形态学改变。结论去甲斑蝥素对HepG2细胞有抑制作用,可能与阻滞细胞周期及诱导细胞凋亡有关。     

转移相关基因-2调控肿瘤侵袭转移的研究

转移相关基因-2（MTA2）是转移相关基因家族成员之一,其蛋白质序列及功能结构域编码序列与MTA1具有高度同源性。MTA2参与构成核小体重构及组蛋白去乙酰化酶（NuRD）复合物,并可与多种转录因子相互作用,参与基因转录调控。MTA2在多种恶性肿瘤中异常表达,并与肿瘤恶性生物学行为密切相关,提示MTA2在肿瘤发生、发展过程中发挥重要作用。本文将对MTA2在肿瘤中的表达情况、生物学功能以及在肿瘤侵袭、转移中的相关分子机制等进行综述。     

三氧化二砷抑制骨肉瘤转移和侵袭的体外研究

目的研究三氧化二砷（As2O3）对骨肉瘤细胞运动、迁移和侵袭的影响及初步机制探讨。方法通过初筛选用人类骨肉瘤细胞系MNNG,采用细胞迁移实验、伤口愈合实验、侵袭实验和免疫印迹等方法研究As2O3对骨肉瘤细胞转移的影响。结果通过迁移实验选择迁移能力最强的MNNG细胞作为研究对象,经过As2O3处理后,MNNG细胞的伤15愈合能力减弱,迁移和侵袭的穿膜细胞数均明显低于对照组,差异有统计学意义（P=0．0016,P=0．0015）,并能下调基质金属蛋白酶9（MMP－9）的表达。结论As2O3能有效抑制骨肉瘤细胞的运动、迁移和侵袭能力,其作用机制可能与下调MMP－9的表达相关。     

槲皮素提高肝癌HepG2细胞热化疗疗效的实验研究

  目的 研究热休克对人肝癌HepG2细胞耐药性的影响，合用槲皮素（Qu）能否提高肝癌细胞热化疗的疗效。方法 42 ℃恒温水浴法热休克传代人肝癌细胞系HepG2细胞90 min。MTT检测半数抑制浓度（IC50），求得耐药倍数、增敏倍数。荧光染色检测凋亡率。流式细胞术检测HSP70和P-gp表达率。结果 Qu能诱导HepG2细胞凋亡。HepG2细胞热休克诱导后4 h对ADM耐药性升高2.78倍（P＜ 0.05），HSP70阳性细胞数升高，4 h达到11.47 ％，升高近1倍（P ＜0.01），P-gp阳性细胞数12 h达到96.31 ％，升高近2倍（P ＜0.01）。热休克前应用Qu能有效抑制热休克诱导HSP70和P-gp的过量表达，抑制细胞对ADM耐药性的产生，起增敏作用（P ＜0.05），呈浓度依赖性。结论 槲皮素可阻断热休克诱导HepG2细胞HSP70和P-gp的过表达，抑制耐药性的产生，起到热化疗的增敏作用，可成为肿瘤耐药逆转剂。     

幽门螺杆菌对肝癌细胞HepG2的体外细胞毒作用

背景与目的:幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,HP)是慢性胃炎和消化性溃疡的重要病因,人和动物胃肠外疾病亦与HP感染密切相关,本研究探讨HP对肝癌细胞株HepG2的形态和生长的影响。方法:利用体外细胞培养技术,将不同浓度的cagA(+)HP和cagA(-)HP与HepG2共同培养,应用细胞形态学观察、DNA电泳、透射电镜、MTT检测、酶学检测等技术,观察HP菌液对体外培养HepG2细胞的形态、生长速度和酶学改变的影响。结果:(1)随着cagA(+)HP菌液浓度的增大和作用时间的延长,HepG2细胞形态由贴壁的梭形变为圆形,贴壁细胞减少,悬浮细胞增多,并且细胞周围出现碎片;(2)随着cagA(+)HP菌液浓度的增大,可见DNA条带;(3)随着cagA(+)HP菌液浓度的增大和作用时间的延长,HepG2细胞核染色质浓缩,呈新月形聚集于核缘,胞质浓缩,可见空泡;(4)随着cagA(+)HP菌液浓度的增大,对HepG2细胞杀伤率逐渐增强(P<0.01);(5)与cagA(+)HP菌液共同孵育后,HepG2细胞出现ALT、LDH升高(P<0.01);(6)未发现cagA(-)HP对陈仁,等.幽门螺杆菌对肝癌HepG2细胞生长的影响。结论:cagA(+)HP对HepG2细胞具有明显的体外细胞毒作用,其毒性作用与HP菌液的浓度和作用时间呈明显正相关。     

姜黄素对人鼻咽癌CNE-2Z细胞侵袭和转移的体外实验研究

背景与目的:鼻咽癌放射治疗后的局部复发和远处转移是患者死亡的主要原因之一。姜黄素(curcumin)是从姜科姜黄属植物姜黄(Curcuma longa)根茎中提取的一种酚性色素,具有抗菌、抗肿瘤及抗氧化作用。本研究旨在探讨姜黄素对人鼻咽癌CNE-2Z细胞侵袭和转移的影响,并探讨其可能的机制。方法:以10、20、40和80μmol/L姜黄素分别处理CNE-2Z细胞24、48 h后,MTT法检测其对细胞的生长抑制作用。应用Transwell小室进行人工重组基底膜(matrigel)侵袭和运动实验,观察姜黄素对CNE-2Z细胞侵袭和转移的影响。RT-PCR和Western blot分别检测不同浓度姜黄素作用后细胞中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)表达水平的变化。结果:应用姜黄素处理后,人鼻咽癌CNE-2Z细胞生长受到抑制,且作用呈时效-量效依赖关系;同时细胞侵袭和迁移能力明显降低;EGFR基因和蛋白表达亦明显减弱。结论:姜黄素能够减弱人鼻咽癌CNE-2Z细胞的体外侵袭和转移能力,其机制可能与降低EGFR的表达有关。     

Effects of neuregulins on invasion and metastasis of non-overexpression ErbB2 breast cancer cells

Objective: To explore the effects of neuregulins on ErbB2 receptor signal transduction pathway activation, and invasion and metastasis of non-overexpression ErbB2 breast cancer cell MDA-MB-231. Methods: The expressions of neuregulin were detected by immunocytochemistry and Western blot. MDA-MB-231 cells were treated with ErbB2 kinase inhibitor AG825. Proliferations were measured with MTT assay. Invasion and metastasis of MDA-ME-231 cells were evaluated with transwell chamber. The enzyme activities of MMP-2 and MMP-9 were detected by gelatin zymography. The expressions of MMP-2 and HIF-1α were detected by Western blot.Results: MDA-MB-231 cells expressed a relatively higher level of neuregulin. In Western blot, the positive reaction band was found at 44KD which coincides with the molecular weight of NRG. When MDA-MB-231 cells were treated with AG825, the proliferation was inhibited in a time-dose-dependent manner (P＜0.01), invasion and metastasis were also depressed (P＜0.05). The enzyme activities of MMP-2 and MMP-9 were lower (P＜0.05). The expression levels of MMP-2 and HIF-1α were decreased (P＜0.05).Conclusion: Our study indicates that neuregulins are synthesized in MDA-MB-231 cells as transmembrane proteins, neuregulins could activate ErbB2 receptor signal transduction pathway by autocrine or paracrine secretion, and induce invasion and metastasis of MDA-MB-231 cells.     

透明质酸酶与血管内皮生长因子在人乳腺癌侵袭与转移中的作用

目的研究透明质酸酶(H yase)与血管内皮生长因子(VEG F)在人乳腺癌侵袭与转移中的意义。方法应用组织匀浆、ELSA及免疫组化等方法测定H yase和VEG F在人乳腺癌中的表达并对其病理特征进行比较。结果乳腺癌组织学分级Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级组H yase的均值分别为(3.99±1.91)m U/g、(8.01±2.59)m U/g和(12.00±3.96)m U/g,Ⅲ级和Ⅱ级组H yase表达明显高于Ⅰ级组,Ⅲ级组明显高于Ⅱ级组,其差异具有显著的统计学意义(P<0.05)。乳腺癌无淋巴结转移组和淋巴结转移组H yase的均值分别为(5.25±2.84)m U/g和(8.21±3.26)m U/g,乳腺癌淋巴结转移组H yase表达明显高于无淋巴结转移组。VEG F阳性率在淋巴结转移组为82.6%,明显高于无淋巴结转移组33.3%(P<0.05)。VEG F阳性组和阴性组H yase为(8.39±3.26)m U/g和(5.16±2.58)m U/g,二者间具有显著性统计学差异(P<0.05)。结论H yase和VEG F一样,与人乳腺癌侵袭与转移相关。     

Effects of curcumin on invasion and metastasis in the human cervical cancer cells Caski

Objective: To explore the effects of curcumin on invasion and metastasis in the human cervical cancer cells Caski.Methods: Caski cells were treated with 10, 25, 50μmol/L curcumin for 24, 48, 72 h. Proliferation of Caski cells was measured with MTT assay. When treated with 50μmol/L curcumin for 72 h, the expressions of MMP-2, MT1-MMP and NF-κB of cells were detected by Western-blot, and invasion and metastasis of Caski cells were evaluated with transwell chamber.Results: After being treated with 10μmol/L, 25μmol/L, 50μmol/L curcumin for 24, 48 and 72 h, the proliferation of Caski cells was inhibited in a dose-and time-dependent manner. The expression of MMP-2, MT1-MMP and NF-κB were decreased when being treated with 50μmol/L curcumin for 72 h. After treatment with 50μmol/L curcumin, in invasion assay, the number of cells in curcumin treated group to migrate to filter coated with Matrigel was reduced compared with control group(P＜0.05). Meanwhile, in migration assay, the number of cells in curcumin treated group to migrate to filter was also decreased compared with control group (P＜0.05).Conclusion: Curcumin could affect the invasion and metastasis of the human cervical cancer cells Caski. Inhibiting the expression of MMP-2, MT1-MMP and NF-κB was probably one of its molecular mechanisms.     

普鲁卡因对人肝癌HepG2细胞增殖影响的实验研究

目的：探讨普鲁卡因（procaine）对体外人肝癌HepG2细胞增殖的影响。方法：应用不同浓度（0-10）mmol/L普鲁卡因处理HepG2细胞,倒置显微镜观察细胞形态学改变、四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测细胞存活率、流式细胞术（FCM）观察细胞周期变化情况。结果：倒置显微镜观察普鲁卡因处理后的HepG2细胞呈现缩小、空泡、脱壁等形态学特征。MTT结果分析表明普鲁卡因能显著抑制HepG2细胞增殖,其抑制率呈药物浓度及时间依赖性。FCM结果显示普鲁卡因可以使HepG2细胞的G0/G1延长,S期缩短。结论：盐酸普鲁卡因能够使HepG2细胞的生长阻滞在G0/G1期,从而显著抑制HepG2细胞的增殖,并且具有剂量、时间依赖效应。