胰岛素样生长因子Ⅱ对辐射后体外培养成骨细胞增殖的影响

目的：探讨不同剂理辐射后胰岛素样生长因子Ⅱ（Insulin-like growth factor Ⅱ,IGF-Ⅱ)对成骨细胞增殖的效应。方法：成骨细胞通过酶消化法从SD大鼠乳鼠颅骨中获得传代，分别进行0，100，400，600，900，cGy的γ线辐射，然后用含有不同浓度IGF－Ⅱ的培养液培养6d，观察成骨细胞的增殖情况，并用MTTI地进行检测。结果：γ线电离辐射抑制了细胞增殖，100cGy剂量时细胞的增殖率从0辐射时的489．1％下降到437．5％，而IGF－Ⅱ使增殖率恢复到完全正常的状态，即使到了400cGy，也能使增殖率得到一定程度的恢复，但当剂量到达900cGy时，IGF－Ⅱ的这种促增殖效应几乎不存在。结论：IGF－Ⅱ能有效拮抗电离辐射对成骨细胞的抑制效应，但这种作用依赖于辐射剂量的大小。     

胰岛素样生长因子-I对培养人牙周膜成纤维细胞生物学活性的影响

胰岛素样生长因子(IGF)可通过直接作用于成骨细胞或通过甲状旁腺素间接影响骨代谢过程而参与骨的改建。本文利用细胞培养技术观察了IGF-I对培养人牙周膜成纤维细胞(PDLFs)增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性变化以及蛋白质含量改变的影响。结果显示,IGP-I对PDLFs有明显的促增殖作用,对PDLFs的ALP活性、蛋白质合成也具有较强的促进作用,表明IGF-I可能通过PDLFs发挥其调节牙槽骨改建的作用,从而在牙齿移动过程中起重要作用。     

胰岛素样生长因子I对高糖条件下成骨细胞骨形成的影响

目的:研究胰岛素样生长因子I对高糖条件下成骨细胞骨形成的影响,探讨胰岛素样生长因子I对糖尿病性骨病的作用机制.方法:离体实验通过对细胞增殖和矿化的检测,从细胞分子水平评价胰岛素样生长因子I对高糖环境下成骨细胞的作用.体内实验诱导1型糖尿病大鼠动物模型,分别给予胰岛素(6～8 U/d)和胰岛素样生长因子I(30 μg/kg·d)治疗,通过X线、组织切片HE染色和四环素双标记的方法观察牙槽骨改建情况.结果:离体实验的结果显示胰岛素样生长因子I可减少高浓度葡萄糖引起的成骨细胞的异常增殖,促进钙沉积和矿化结节的形成.体内实验研究显示与正常组相比,糖尿病大鼠拔牙创骨愈合减慢,骨形成减少,牙槽骨高度和牙槽骨骨形成率显著降低.胰岛素样生长因子I的治疗不仅能控制糖尿病大鼠的血糖保持在正常范围内,还可以增加牙槽骨高度和提高骨形成率.结论:高浓度葡萄糖导致糖尿病大鼠拔牙后骨形成减少、牙槽骨高度降低等病理改变;胰岛素样生长因子I可以促进糖尿病状态下成骨细胞骨形成和矿化,有利于糖尿病大鼠拔牙后骨创愈合和新骨形成.     

成骨细胞与血管内皮细胞联合培养对成骨细胞功能的影响

目的　探讨不同比例兔成骨细胞(ROB)与血管内皮细胞(RVEC)直接联合共培养后,对成骨细胞功能的影 响。方法　取兔成骨细胞与血管内皮细胞,将两者分为4组分别以1∶0、1∶1、2∶1、4∶1直接联合共培养于培养皿中, 通过对细胞内碱性磷酸酶活性(ALP)测定和培养液中骨钙素(OC)定量测定,观察血管内皮细胞对成骨细胞功能的 影响。结果　成骨细胞与血管内皮细胞直接联合共培养相容性良好,2∶1的细胞比例组ALP活性及OC含量较其 他各组明显增高。结论　在体外直接联合共培养的体系中,血管内皮细胞有明显促进成骨细胞活性的作用。     

三维培养模型中胰岛素样生长因子-I对人牙周膜细胞增殖及碱性磷酸酶活性的影响

目的 了解胰岛素样生长因子-I(IGF-I)在三维培养条件下对人牙周膜细胞(hPDLCs)增殖及碱性磷酸酶(ALP)活性的影响.方法 通过组织块法分离培养hPDLCs.采用旋转细胞培养系统(RCCS)建立三维培养环境.将细胞分为4组,分别为阴性对照组、阳性对照组(三维培养组、IGF-I组)、实验组(三维培养加IGF-I...     

胰岛素样生长因子Ⅱ对小鼠成骨样细胞MC3T3-E1一氧化氮合酶基因表达的影响

目的　探讨胰岛素样生长因子Ⅱ (IGF Ⅱ )调节成骨细胞一氧化氮 (NO)水平及诱导型(iNOS)和内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)mRNA转录的作用。方法　不同浓度和不同时间IGF Ⅱ作用于小鼠成骨样细胞株MC3T3 E1细胞后 ,采用噻唑蓝 (MTT)比色法检测细胞增殖、硝酸还原酶法测定细胞培养物上清NO浓度、逆转录聚合酶链式反应检测细胞的iNOS和eNOSmRNA转录水平。结果 1μg/LIGF Ⅱ作用 72h ,10和 10 0 μg/LIGF Ⅱ分别作用 2 4、4 8和 72hMC3T3 E1细胞 ,其MTT值均明显升高 (P <0 0 5、P <0 0 1)。 10 0 μg/LIGF Ⅱ分别作用 4 8和 72h ,细胞iNOSmRNA水平及其上清液中NO水平均显著下降 (P <0 0 1) ,但IGF Ⅱ以不同浓度及时间作用的细胞eNOSmRNA水平均无明显改变 (P >0 0 5 )。结论　 1～ 10 0 μg/LIGF Ⅱ均能促进MC3T3 E1细胞增殖 ,此作用可能与IGF Ⅱ维持细胞低水平NO有关。较高浓度的IGF Ⅱ (10 0 μg/L)可在转录水平上下调MC3T3 E1细胞iNOS基因表达 ,但不影响eNOSmRNA的转录 ,这可能是MC3T3 E1细胞维持低水平NO的机制之一。     

牙胚、牙髓和牙周膜成纤维细胞中胰岛素样生长因子的生物学活性

胰岛素样生长因子在人体和组织中有着广泛的分布，在胚胎发育、细胞生长分化、骨改建、神经生长等方面有重要作用。本文就近几年来胰岛素样生长因子在牙胚发育、牙髓和牙周膜成纤维细胞生长与分化、物质合成、损伤修复和对碱性磷酸酶的影响等生物学活性进行了综述。     

胰岛素样生长因子和碱性成纤维细胞生长因子对人牙周膜细胞增殖的影响

目的：探讨重组人胰岛素样生长因子(rhIGF）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)单独及联合应用对人牙周膜细胞（PDLC）增殖的影响。方法：采用细胞培养技术,噻唑盐比色测定（MTT）法。结果：rhIGF-1和bFGF对PDLC的促增殖效应较对照组有明显提高,rhIGF-1在浓度为3.125μg/L时对PDLC作用非常显著。bFGF浓度在1－10μg/L之间时对PDLC有较强的促进增殖作用,其起效浓度是1μg/L。rhIGF和bFGF联合作用时其促增殖作用较两种因子在相同浓度时单独应用相差显著。结论：rhIGF和bFGF单独或联合应用时有促进PDLC的增殖的作用。     

雌激素和流体剪切力对成骨细胞增殖和功能的影响

目的：初步了解雌激素与流体剪切力单独作用及联合作用对体外培养的成骨细胞增殖和功能的影响。方法：采用酶消化法进行SD大鼠新生子鼠颅盖骨成骨细胞的原代培养，将生长活跃、特性稳定的Ⅲ～Ⅳ代成骨细胞，用于实验。选择恒定的雌激素浓度及合适的振荡频率分4种组合方式施加于成骨细胞上，比较这4种方式在不同时间段对细胞增殖和碱性磷酸酶活性有何不同影响。结果：雌激素和流体剪切力均可促进成骨细胞的增殖和ALP的活性，但长时间的剪切力作用则抑制细胞增殖。流体剪切力早期可迅速提高成骨细胞的ALP活性，比雌激素作用显著。雌激素和流体剪切力联合作用对成骨细胞的增殖和分化也有促进作用，但两者并非总是协同作用，在细胞分化早期对细胞增殖表现为协同作用，但对ALP活性却表现为拮抗作用。结论：雌激素和流体剪切力及两者复合作用均可促进体外培养的成骨细胞增殖，提高ALP的活性。     

胰岛素样生长因子-Ⅱ对培养人牙周膜成纤维细胞生物学活性的影响

目的：研究ＩＧＦ－ＩＩ对培养人牙周膜成纤维细胞（ＰＤＬＦ）生物学活性的影响,方法：接种一定量培养至第５代的人ＰＤＬＦ,用ＭＴＴ法和碱性磷酸酶比色法观察ＩＧＦ－ＩＩ作用下,ＰＤＬＦ的增殖和碱性磷酸酶活性的变化。结果：ＩＧＦ－ＩＩ在实验浓度范围内,对ＰＤＬＦ有较明显的促增殖作用,对ＰＤＬＦ的ＡＬＰ活性具有较强的促进作用。结论：ＩＧＦ－ＩＩ对ＰＤＬＦ的生物学活性有一定的影响,揭示其可能通过ＰＤＬＦ发挥其     

大鼠成骨细胞体外培养的研究

选用ＳＤ１－３ｄ乳鼠颅顶骨分离培养鼠体外成同有细胞，并对分离的鼠颅顶骨成骨细胞做多方面的生物学特性鉴定。结果表明：鼠体外成骨细胞具内成骨细胞的形态特征、碱性磷酸酶活性以及合成、分泌骨形成蛋白等功能，并能在体发生钙化，从而 证实建立的鼠成骨细胞具有体内成骨细胞的功能和特性，可用于硬组织替代材料的细胞相容性研究，亦可用于与骨组织有关的医学基础实验。     

体外培养成骨细胞电离辐射效应的研究进展

颌骨辐射损伤多见于头颈部肿瘤的放疗,治疗十分棘手。利用体外培养进行的研究比体内模型更直接更确切。成骨细胞受辐射后出现形态、功能的改变,并影响其增殖能力。利用体外模型可以更为明确地反映出这种损伤的情况。然而成骨细胞的辐射效应很不一致,影响它的因素多种多样,在许多方面仍有待于进一步的研究。     

体外培养成骨细胞电离辐射效应的研究进展

颌骨辐射损伤多见于头颈部肿瘤的放疗,治疗十分棘手。利用体外培养进行的研究比体内模型更直接更砌切。成骨细胞受辐射后出现形状、功能的改变,并影响其增殖能力。利用体外模型可以更为明确地反映出这种损伤的情况。     

持续性静压力对成骨样细胞MC3T3-E1生物学特性的影响

目的 :研究持续性静压力对成骨样细胞MC3T3 -E1生物学特性的影响。方法 :利用已建立的细胞体外加力装置 ,给MC3T3 -E1细胞施加 2atm的持续性静压力 ,应用细胞计数 ,生化分析和放射免疫等方法 ,观察受力后不同时间细胞增殖、碱性磷酸酶活性以及骨钙素表达量等方面的变化。结果 :加力组细胞增殖速度减缓 ,实验组和对照组的细胞群体倍增时间分别为 72 .96h和 63 .3 6h ;随着培养时间的延长 ,细胞碱性磷酸酶活性增强 ,但加力组和对照组无明显差异 (P >0 .0 5 ) ;持续性静压力作用 2 4h后 ,与对照组相比 ,加力组骨钙素分泌的增加有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 :一定大小的持续性静压力在抑制MC3T3 -E1细胞生长的同时促进其分化成熟。     

持续压力对大鼠成骨细胞碱性磷酸酶分泌活性的影响

目的　研究持续压力对体外培养大鼠成骨细胞碱性磷酸酶分泌活性的影响。方法　利用自行研制的细胞加力装置给大鼠成骨细胞施加不同大小的静压力 ,观察加力不同时程后的碱性磷酸酶分泌活性。结果　加力后成骨细胞碱性磷酸酶分泌活性降低 ,停止加力后 2 4h碱性磷酸酶的分泌活性在 3× 10 5Pa组恢复正常 ,而在 4× 10 5Pa和 5× 10 5Pa组未完全恢复。结论　持续压力可降低成骨细胞碱性磷酸酶的分泌活性 ,适当力值的压力在恢复正常后碱性磷酸酶的分泌活性可恢复正常 ,力值过大则可能影响细胞的功能。     

人成骨细胞与脐静脉血管内皮细胞直接混合培养的实验研究

目的探讨人成骨细胞(MG-63)与人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)共同培养后,对成骨细胞功能的影响。方法取MG-63与人HUVECs直接联合培养于培养皿中,通过对人成骨细胞内碱性磷酸酶(ALP)活性和骨钙素(OC)定量测定,观察HUVECs对人成骨细胞功能的影响。结果人成骨细胞与HUVECs直接联合共培养后,两种细胞均生长良好,人成骨细胞内ALP活性和OC定量测定结果,共培养组明显高于对照组。结论HUVECs在体外与人成骨细胞直接联合共培养中,有促进人成骨细胞活性的作用。     

酸碱处理对多孔钛成骨细胞增殖和分化的影响

目的研究酸碱处理对多孔钛表面小鼠前成骨细胞MC3T3-E1增殖及分化的影响。 方法粉末冶金法制备多孔钛,酸蚀处理后,NaOH浸泡不同时间,得到酸碱处理多孔钛（AAPT）。制备AAPT试件73个,未处理多孔钛（NTPT）试件41个和未处理致密钛（NTDT）试件30个。采用扫面电镜观察表面形貌,BCA法检测蛋白吸附能力,筛选适宜的碱处理时间。对于NTPT及AAPT组试件,采用表面接触角分析仪与拉曼光谱仪分析表面水接触角和化学组成。对于NTDT、NTPT及AAPT组试件,CCK-8法检测细胞增殖活性,实时荧光定量聚合酶链反应检测碱性磷酸酶（ALP）及骨钙素（OCN）基因相对表达量。采用独立样本t检验和单因素方差分析进行统计分析,LSD-t检验进行两两比较。 结果12 h NaOH处理组（AA₁₂PT）纳米结构最为清晰,且蛋白吸附量（0.367 mg/ml）最高（F= 400.835,P<0.05）,因此采用该组进行后续实验。AA₁₂PT组试件表面接触角（22.08°）显著小于NTPT组（93.7°）,差异有统计学意义（F= 1.194,P<0.001）。AA₁₂PT组试件可见钛酸氢钠特征散射峰。接种3、5、7 d后,NTDT组的细胞增殖活性均高于AA₁₂PT组（F_{3 d}= 245.517、F_{5 d}= 102.442、F_{7 d}= 119.047,P<0.001）,AA₁₂PT组均高于NTPT组（P_{3 d}= 0.005、P_{5 d}= 0.038、P_{7 d}= 0.010）。接种7 d后,AA₁₂PT与NTPT组的ALP基因和OCN基因相对表达量均高于NTDT组（F_ALP= 13.698,P_{ALP-AA1 2PT}< 0.001、P_ALP-NTPT= 0.002;F_OCN= 175.859,P_OCN<0.001）。接种14 d后,NTDT组的ALP基因及OCN基因相对表达量均高于NTPT组（F_ALP= 33.691,P_ALP= 0.045;F_OCN= 42.789,P_OCN= 0.044）。 结论酸碱处理可显著提高多孔钛材料的蛋白吸附量,促进成骨细胞的增殖、分化。     

胰岛素样生长因子2对小鼠成骨样细胞诱导型一氧化氮合酶基因表达的影响

目的 探讨胰岛素样生长因子2(IGF-Ⅱ)对成骨细胞一氧化氮(NO)水平和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA转录水平的影响。方法 采用小鼠成骨样细胞株MC3T3-E1作为IGF-Ⅱ效应的细胞模型。不同浓度IGF-Ⅱ作用于MC3T3-E1细胞72 h后,采用硝酸还原酶法测定细胞培养上清液中NO浓度,半定量反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测细胞iNOSmRNA水平。结果 100 ng/mL IGF-Ⅱ作用72 h的细胞,其上清液中NO水平下降(P<0.01),iNOS mRNA水平也降低(P<0.01)。结论 100 ng/mL IGF-Ⅱ能降低MC3T3-E1细胞NO水平,下调其iNOS mRNA转录水平。100 ng/mL IGF-Ⅱ在转录水平下调MC3T3-E1细胞iNOS基因的表达,可能是IGF-Ⅱ维持MC3T3-E1细胞低水平NO的机制之一。     

胰岛素样生长因子I对糖尿病大鼠拔牙后牙槽骨改建的影响

目的研究胰岛素样生长因子I（IGF—I）对糖尿病大鼠拔牙后牙槽骨改建的影响,为糖尿病性牙周病的治疗提供依据。方法对四氧嘧啶诱导的糖尿病大鼠拔牙后进行胰岛素和胰岛素样生长因子I治疗,通过X线、组织切片苏木精一伊红染色和四环素双标记的方法观察牙槽骨改建情况。结果与正常组相比,糖尿病大鼠拔牙创骨愈合减慢,骨形成减少,牙槽骨高度和牙槽骨骨形成率显著降低。IGF—I的治疗不仅能控制糖尿病大鼠的血糖保持在正常范围内,还可以增加牙槽骨高度和提高骨形成率。结论IGF-I的治疗可以促进糖尿病大鼠拔牙创骨愈合和增加骨形成量,且与胰岛素治疗之间没有明显差别。     

纳米氧化铝陶瓷对成骨细胞功能代谢影响的研究

目的 :比较纳米氧化铝 (nAl2 O3 )和常规氧化铝 (cAl2 O3 )对成骨细胞功能代谢方面影响。方法 :采用压制成型和无压烧结工艺制备nAl2 O3 和cAl2 O3 的块体材料 ,将体外原代分离培养成骨细胞分别接种于nAl2 O3 和cAl2 O3 的表面 ,分别在 7、14、2 1、2 8d时检测细胞内总蛋白、ALP活性及细胞基质钙含量。结果 :所制备的nAl2 O3 和cAl2 O3 的平均粒径分别为 60nm和 1.80 μm。 14、2 1和 2 8d时 ,nAl2 O3 表面附着的成骨细胞ALP活性和细胞基质钙含量均高于cAl2 O3 。结论 :与相应的cAl2 O3 比较 ,nAl2 O3 更能增强成骨细胞的功能及代谢活动