基因工程人类免疫缺陷症病毒疫苗的安全性和免疫原性

作者研究了env2-3(SF2)抗原与胞壁酰三肽二棕榈磷脂酰乙醇胺(MtP-PE)佐剂合用作为1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)亚单位疫苗对人体的安全性和免疫原性。受试者为25名未感染过HIV的健康者。env2-3(SF2)为代表HIV-1SF2分离物env基因gp120区的未糖基化多肽,用基因工程方法制备,其分子量约56000,env2-3(SF2)抗原纯度>95%。佐剂为MTP-PE,最后疫苗是在注射前将乳化抗原与佐剂混合制得。采取两种免疫程序,单用佐剂(每次100μg)或在相同佐剂中加低剂量env2-3(SF2)(每次50μg)或加大剂量env2-3(SF2)(每次     

利用HIV合成肽试验避免蛋白印迹法中的可疑结果

1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)感染常用血清学方法进行诊断。经ELISA筛检出的阳性结果须用蛋白印迹法(WB)确证。由于WB结果的判读常会遇到困难,因此作者提出以合成肽试验(SPA)替代WB来证实ELISA阳性结果。 8073份高危人群的样本,经几种病毒裂解物或重组HIV-1加HIV-2ELISA试验检测,有1209份阳性。再用HIV-1WB及应用     

一种以病毒糖蛋白固定于伴刀豆球蛋白A包被的微漏板孔来检测HIV-1包膜糖蛋白抗体的新型ELISA

作者用伴刀豆球蛋白A(ConA)吸附微量滴定板孔,并用以亲和固定在无血清培养基中生长的1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)感染细胞培养液中释放的经去垢剂处理的病毒糖蛋白,大大简化了HIV-1包膜(env)糖蛋白固相的制备程序,从而建立了一种新型ConA env ELISA。以100μl ConA(200μg/ml)包被板孔,用含0.1%Triton-X的PBS洗涤后,将100μl经去垢剂处理的无血清病毒原液加至孔中作用1小时;洗涤板孔,以含10%胎牛血清的RPMI培养液(RPMI-10%FCS)封闭未反应     

重组HIV-2金丝雀痘(ALVAC)疫苗在食蟹猴中的免疫原性和保护力

作者在26只食蟹猴中对其组建的两种携带2型人类免疫缺陷症病毒(HIV-2)基因的重组金丝雀痘病毒的免疫效果进行了研究.一种是vCP188,表达全部HIV-2env基因产物;另一种是vCP206,表达HIV-2gag和pcl基因产物以及HIV-2env基因产物gp120(TM).用纯化的天然HIV-2gp125或     

脊髓灰质炎病毒嵌合体诱生广泛反应性HIV-1中和抗体

1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)包膜蛋白(env)具有广泛的序列异质性和抗原变异性,也存在着抗原性保守位点.理想的疫苗应含有此保守位点,以便诱生能与许多病毒分离株起反应的抗体.作者选用HIV-1跨膜糖蛋白gp41(组特异性抗原决定簇),以Ⅰ型脊髓灰质炎病毒Sabin疫苗株为表达载体(pCASl),用DNA重组技术构建成脊髓灰质炎病毒/HIV-1抗原嵌合体Sl/env/3.     

联合检测HIV抗体的试剂盒对抗-HIV-2的敏感性

许多检测人类免疫缺陷症病毒(HIV)抗体的试剂盒可同时检测血清中抗HIV-1和HIV-2抗体。为调查其中9种试剂盒对抗-HIV-2的敏感性,作者从塞内加尔、塞拉利昂、葡萄牙、法国和英国收集了16份HIV-2感染病人的血清样品,用阴性人血清进行稀释。所有16份样品经竞争性抗-HIV-2放射免疫法(RIA)(92%以上抑制)测定及与HIV-2包膜抗原gp36均呈强反应。用竞争性抗-HIV-1 RIA检测或与HIV-1包膜抗原gp41均无反应。8种联合检测HIV-1/HIV-2     

对HIV-1 env DNA疫苗免疫应答的遗传学控制

含有编码1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)env蛋白的HIV-1特异性DNA疫苗可诱导强的体液和细胞介导免疫应答。作者用不同品系的小鼠研究了HIV-1特异性DNA疫苗诱导抗体产生及迟发型超敏反应(DTH)的遗传学控制。     

具有高度免疫原性的抗C亚型HIV-1合成肽疫苗构建物的制备

一些疾病的治疗已经从合成肽疫苗的使用中获益。作者将两种不同的肽合成方式结合起来制备成一种含多种表位免疫原 ( MEI)的合成肽免疫原 ,并用动物模型测定了这种合成肽疫苗构建物诱导的免疫应答。　　 MEI序列衍生于 C亚型 1型人类免疫缺陷病毒 ( HIV- 1 )包膜的 V3区 ,肽序列内的四聚体端点 GPGQ为型特异性中和抗体的主要结合位点。在合成时 ,按既定百分率和位点混合氨基酸使一些氨基酸偶联 ,这种方法获得的肽混合物代表 6 .7× 1 0 7个包膜序列 ,其中包括已知的 339个序列中的 30 1个序列以及 V3序列。通过疏水图等观察分析 ,证实…     

紫外线处理聚苯乙烯微量板的ELISA法检测合成肽的抗体

用普通ELISA技术检测合成肽的特异抗体,有时会受到肽链不易在固相支持物上固定的限制,为了改进合成肽在固相上的附着能力,作者用紫外线(UV)照射聚苯乙烯微量板建立了一种灵敏和快速的免疫分析法。最佳照射时间的选择:将聚苯乙烯微量板用UV照射(辐射强度为3.39J.cm~(-2))照射3～20分钟(不得超过20分钟,否则板会受热而损坏)后,包被合成肽SP89051(HIV包膜蛋白gpl20的片断)(2.5μg/ml),按ELISA法,测定HIV-1阳性病人的血清及抗合成的gp     

抗艾滋病新药

艾滋病(Acquired ImmunodefieiencySyndrom,AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染而引起,是一种获得性免疫缺陷性综合征(ARC)。现已确定HIV的构型可分为二型:HIV-1和HIV-2。其中HIV-1的致病性最强,世界上绝大多数AIDS患者是由此致病的,HIV-2主要流行于西非。HIV主要侵犯淋巴细胞,造成免疫系统受损,也     

用重组蛋白免疫检测法联合检测HIV-1、HIV-2及HTLV-Ⅰ抗体

1/2型人类免疫缺陷症病毒（HIV-1/2）及Ⅰ/Ⅱ型人T细胞白血病病毒（HTLV- Ⅰ/Ⅱ）为人类致病因子。作者应用重组蛋白抗原及合成肽抗原建立了经济有效的联合检测HIV-1/2及HTLV-Ⅰ抗体的ELISA。     

用合成肽免疫灵长目全面鉴定HIV-1gp120上的T细胞激活表位

理想的疫苗应该能刺激在防御病毒感染中起关键作用的T细胞应答。本文作者运用固相法合成1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)gpl20全部氨基酸序列的40种部分重叠肽,分别与卵白蛋白(OVA)共价连接,并用完全或不完全弗氏佐剂乳化后,肌肉注射40只3～5岁猕猴。共注射2或3针,间隔时间为3周,剂量为100μg,第2针和/或第3针免疫后1～2周采血,周密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),并作淋巴细胞增殖试验;通过检测PBMC培养上清中白细胞介素2(IL-2)的活性和PBMC中~3H胸苷渗入的放射自显影活性,用算术平均刺激指数(SI)作为评价指标来鉴定HIV-1gp120氨基酸序列中的T细胞激活位点,SI≥4.0被认为是强的T细胞激活表位。另外,在末次     

HIV变异性与艾滋病疫苗的前景

本文概述了为研制有效艾滋病疫苗而进行的诱导中和抗体研究工作;并描述了1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)包膜上的主要中和性抗原决定簇(PND);讨论了PND的变异性与代表PND的合成肽对中和抗体的诱导。应用代表大多数HIV-1分离株PND顺序的不同肽的混合物以及组建含几个病毒分离株PND的杂交免疫原可解决与PND变异性有关的问题。本文还讨论了另一种有可能诱导某种细胞内免疫力的方法:作者用HIV-1感染者淋巴细胞培养上清液感染Hut-78细胞获得的细胞克隆(F12),虽有完整的HIV-1前病毒,但不能释放病毒颗粒。并且F12细胞能完全抵抗HIV-1或HIV-2分离株的重复感染。目前,作者试图将该克隆的F12/HIV基因组转入HIV易感细胞以产生同源病毒干扰作用,从而使这些细胞抵抗HIV感染.     

表达HIV-1 gag和包膜蛋白的有核壳包裹的脊髓灰质炎病毒复制子诱导的免疫应答

作者不久前建立了应用RNA病毒——脊髓灰质炎病毒(PV)作重组疫苗载体的系统。构建的PV基因组中核壳区被人类免疫缺陷症病毒(HIV)gag和env基因片段所取代。由重组痘苗病毒(VV-P1)反式提供核壳蛋白的互补系统使缺损的基因组能被核壳包裹。用这类复制子感染细胞可表达与PV核壳蛋白PV4和PV1融合的重组蛋白。 本研究中,作者采用了表达HIV-1 gag核壳蛋白(p24)以及HIV-11.5kb env基因的有核壳包裹的复制子。这种复制子是在VV-P1存在的情况下经20次连续传代获得的。将这种有核壳包裹的复制子在2型PVLansing株存在的情况下传代(共感染)可使复制子被PV核壳蛋白所包裹。这种类型的复制子至少经三次连续传代后仍然存在。将这种表达HIV-1 gag、被2型PV Lansing株核壳包裹的复制子经肌肉、直肠或胃途径接     

以金丝雀痘病毒为载体的HIV-1疫苗单独或联合使用gp120免疫的安全性和免疫原性评价

作者在 2期临床研究中考核了金丝雀痘病毒的 1型人类免疫缺陷病毒 ( HIV- 1 )抗原在高危和低危受试者中的安全性和免疫原性。　　重组金丝雀痘病毒 AL VAC v CP2 0 5表达的 HIV- 1基因产物 ,包括 HIV- 1 L AI株gag基因表达的 p55多蛋白 ,HIV- 1 LAI株中可表达蛋白酶活性的 pol基因部分 ,HIV-1 MN株的部分 env基因表达的 gp1 2 0 ,HIV- 1 L AI株的 gp4 1跨膜区。试验中同时使用重组 gp1 2 0亚单位以提高抗体和辅助性T细胞应答。　　试验采用双盲法进行 ,分别在 0、1、3、6月于左臂肌肉注射 v CP2 0 5或安慰剂 ,于右臂注射 gp…     

抗病毒药 多肽T(Peptide T)

化学名 H-丙氨酰-丝氨酰-苏氨酰-苏氨酰-苏氨酰-天冬氨酰-酪氨酰-苏氨酸合成本品是通过常规的固相多肽合成法合成[AU 8775408,EP 240394]。药理多肽T是一个合成八肽,它的顺序是通过研究APV分离物的核膜蛋白(gp120)而得到的,APV分离物来自人体免疫缺陷病毒(HIV-1)。多肽T对病毒/gp 120结合具有很强的竞争作用。具有相同母核的类似物(D-丙氨酰_1-多肽T-酰胺)目前正在     

合成短肽与人类相容性佐剂诱导的抗HIV-1蛋白的CTL应答

全球性预防艾滋病的希望寄托于开发有效的疫苗。诱导抗不同人类免疫缺陷病毒( HIV)表位的抗体应答和广泛的细胞毒性 T细胞 ( CTL)应答可消除感染初期宿主体内的病毒。为使机体产生强有力的免疫应答 ,作者使用合成短肽与免疫刺激剂佐剂一同接种转基因小鼠 ,观察了抗 HIV- 1蛋白 CTL应答的诱导情况。　　作者合成了 6种 HIV短肽 ( RT4 76 -484、 p1 777- 85、 gp1 6 0 31 8- 32 7、 RT346 -354、gp4 1 81 4 - 82 3及 RT956 - 96 4) ,将合成肽同 1 4 k Da( D,L-聚乳酸 -乙醇酸共聚物( PL GA)制成微球。微球的大小通过激光散射技术…     

合成肽诱导抗脊髓灰质炎病毒中和抗体

作者按Hopp等的方法,合成含有Ⅰ型脊髓灰质炎病毒结构蛋白VP1氨基酸顺序的5种肽。用6种单克隆中和抗体(能分别与不同的中和反应抗原决定簇A、B、C、D、E和F相结合)与5种合成肽作ELISA,测定这些合成肽被单克隆抗体(McAb)识别的能力。结果表明,5种肽中有4种能被McAb所识别。     

用重组禽痘病毒表达HIV-1包膜基因

1型人免疫缺陷症病毒(HIV-1)env基因编码糖基化蛋白前体,其在细胞中被蛋白酶水解成精蛋白(gp)120及gp41.已在gp41氨基末端发现高度免疫显性表位,后者能使健康的血清阳性个体产生体液免疫,在体外能特异性地抑制淋巴细胞增生.此区与Ⅰ型和Ⅱ型人嗜T淋巴细胞病毒的gp21E跨膜蛋白和多种逆转录病毒的免疫抑制(IS)区具有同源序列.作者通过基因重组获得了表达HIV-1SF2株包膜基因的重组金丝雀痘(CP)病毒和禽痘(FP)病毒,并将它的表达情况在鸡胚成纤维细胞(CEF)、猴肾细胞(Vero)及     

对36种检测HIV抗体的商品试验的比较评价

作者总结了1988～1990年间对测定1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)和/或HIV-2抗体的试验进行评价的结果。共用了537份血清,其中65%是非洲人血清,26%为欧洲人血清,9%是南美洲人血清。HIV-1阳性率是39.1%,HIV-2是15.7%,36种试剂盒中有20种是ELISA,11种简单试验,4种辅助性试验和1种鉴别试验。这些试验均按说明