小鼠大脑皮质和海马结构内胆碱能纤维的分布及增龄变化

用乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）组织化学方法和体视学测量技术，研究胆碱能纤维在小鼠大脑皮质和海马结构内的分布及增龄变化。结果显示，小鼠大脑皮质和海马结构内ＡＣｈＥ阳性纤维呈不同的板层样分布，老年小鼠（２４月龄）额－顶皮质第Ⅲ、Ⅴ层和海马ＣＡ１、ＣＡ３区分子层及齿状回分子层ＡＣｈＥ阳性纤维密度明显低于成年小鼠（１３月龄）和青年小鼠（３月龄）（Ｐ＜０．０１），后两组间除成年小鼠海马ＣＡ３区分子层纤维密度稍低外，其他各区无显著差异（Ｐ＞０．０５）。结果表明，胆碱能纤维在小鼠大脑皮质和海马结构内的分布具有年龄相关性和区域特异性。     

糖尿病大鼠海马胆碱能纤维变化及胰岛素治疗作用的研究

目的：观察实验性糖尿病大鼠海马的胆碱能纤维变化及胰岛素的治疗作用。方法：将成年SD大鼠分为对照组,糖尿病组（经腹腔注射链脲佐菌素制备实验性糖尿病大鼠模型）,治疗组（长效胰岛素2－3U／日,皮下注射,使空腹血糖低于10mmol/L）,于成模第3个月及第6个月末取海马,以AchE组化法显示胆碱能纤维。结果：与对照组相比,糖尿病组大鼠海马CA1区和齿状状回分子层胆碱能纤维密度于第3个月末无显著改变,第6个月末显著减少（P＜0．01）,治疗组第3个月及第6个月末均无显著改变。结论：糖尿病时确可发生海马胆碱能纤维密度的减少,这可能与糖尿病学习记忆功能损伤有关,早期应用胰岛素治疗可预防以上病变的发生。     

大鼠蓝斑胆碱能神经元衰老的形态学变化

目的观察大鼠蓝斑乙酰胆碱能神经元的衰老变化。方法选用不同年龄大鼠蓝斑经乙酰胆碱酯酶染色后，对反应阳性神经元的数量、树突构筑进行形态学计量分析。结果老龄大鼠蓝斑内AChE反应性神经元数量、灰度值随增龄而递减；胞体平均截面积随年龄呈增大趋势；神经元突起初级、次级分支明显增多，与幼龄鼠相比有显著性差异（P〈0.05）。结论大鼠蓝斑胆碱能神经元随年龄增长而出现衰老性变化，突起近侧分支呈代偿性增加。     

大鼠心肌缺血性损伤后胆碱能神经形态及密度观察

目的观察大鼠心肌缺血性损伤后,左心室胆碱能神经纤维形态及密度的变化。方法将90只 Wistar大鼠分为4组(A组15只,B、C、D组各25只)。A组为假手术组,实验组(B、C、D)分别结扎左冠状动脉前降支(LAD)形成急性前壁心肌梗死(AMI),梗塞后取材时间分别为6 h(B组)、12 h(C组)、48 h(D组)。应用 Karnovsky-Roots法,显示梗塞后不同时间左心室心肌胆碱能神经纤维的分布。结果 A组大鼠左心室心肌各层均见深褐色的胆碱能神经纤维沿肌间走行,B、C、D各组胆碱能神经纤维呈断裂、散在分布。A组左心室前壁胆碱能神经纤维密度为(1．52±0．16)％,B组为(1．28±0．15)％、C组为(1．02±0．11)％、D组为(0．65± 0．09)％,B、C、D各组与A组比较,差异均有统计学意义(P<0．05、P<0．01、P<0．01)。各组左心室后壁胆碱能神经纤维密度无明显变化。结论大鼠左心室前壁心肌缺血性损伤及坏死后,左心室前壁胆碱能神经呈断裂状,神经密度随时间延长而降低。     

胆碱能神经对反流性食管炎食管动力的影响

目的研究内源性胆碱能神经在反流性食管炎食管动力机制异常中的作用.方法经下食管括约肌切开制备反流性食管炎的猫模型,用连续水灌注测压系统检测正常猫及反流性食管炎的猫食管体部动力;用分光光度法分别测定正常猫及反流性食管炎的猫食管中段、远段肌组织中的乙酰胆碱转移酶和乙酰胆碱酯酶活力.结果反流性食管炎组食管远段平均收缩波幅度明显低于正常对照组(P＜0.0001),食管远段传导速度低于正常对照组(P＜0.05);反流性食管炎时食管中段及远段肌组织中乙酰胆碱转移酶活力均低于正常对照组的中段及远段(P＜0.05及P＜0.0001),以远段更明显(P＜0.0001).反流性食管炎组食管中段及远段肌组织中的乙酰胆碱酯酶活力与对照组比较差异均无显著性(P＞0.05).结论反流性食管炎可导致食管远段动力低下,内源性胆碱能神经功能异常是其重要机制之一.     

生长抑素对急性坏死性胰腺炎大鼠胆碱能抗炎通路的影响

目的探讨生长抑素（SS）对ANP大鼠血清乙酰胆碱酯酶（true choline esterase,TChE）和乙酰胆碱转移酶（choline acetyltransferase,ChAT）及IL-6和TNF-α水平的影响。方法将30只SD大鼠随机分成对照组、ANP组和SS组,每组10只。以胆胰管注入牛胆酸制备ANP模型,SS组于制模后即刻皮下注射SS34μg/kg体重。检测各组血WBC、血糖及血清ALT、AST、LDH、淀粉酶、TNF-α、IL-6、TChE、ChAT含量。结果ANP组血WBC、ALT、AST、LDH、淀粉酶、IL-6、TNF-α及TChE水平较对照组明显升高,而血清ChAT则明显降低（P〈0.01）;血清IL-6、TNF-α与ChAT呈负相关（r=-0.87,P=0.007;r=-0.96,P=0.000）,与TChE呈正相关（r=0.98,P=0.000;r=0.89,P=0.004）。SS组的血WBC、ALT、AST、LDH、淀粉酶、IL-6、TNF-α及TChE水平较ANP组显著降低,而血清ChAT则显著升高（P〈0.01）。3组血糖含量无显著差异。对照组、SS治疗组和ANP组血WBC、ALT、AST及LDH依次升高（P〈0.01）。结论SS可能通过增加ANP大鼠ChAT活性和降低TChE活性,减少IL-6、TNF-α分泌,从而减轻SIRS和脏器功能受损的程度。     

丰富环境训练对低碘大鼠中枢胆碱能神经元的作用初探

对碘缺乏大鼠从生后２５天起给予丰富环境训练，然后在４０日龄时测定脑重量、蛋白质、脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）、乙酰胆碱转移酶（ＣｈＡＴ）、乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）各亚类。结果表明，丰富环境的后天训练对脑的基本构成、细胞数目无明显改善作用。但后天训练可促进大鼠海马、大脑皮层和小脑胆碱能神经元功能活动，尤其是突触部分得以一定程度地改善。     

大豆异黄酮对AD模型大鼠认知功能及脑内胆碱能系统的影响

目的:探讨大豆异黄酮(SIF)对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠认知功能及脑内胆碱能系统的影响。方法:30只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和SIF组,每组10只。各组按规定剂量灌胃给药后观察大鼠学习记忆能力的改变、海马形态学的改变以及海马胆碱乙酰转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AchE)活性的变化。结果:1.与假手术组比较,模型组大鼠学习记忆能力明显下降(P0.01),与模型组相比,SIF组大鼠学习记忆能力有所提高(P0.05)。2.假手术组HE染色可见大鼠海马锥体细胞排列整齐、均匀,细胞结构完整,形态正常;模型组可见海马锥体细胞脱失、排列紊乱,结构不清,部分胞核固缩、深染;SIF组海马锥体细胞排列较整齐、均匀,结构尚清晰,形态基本正常。3.与假手术组比较,模型组海马ChAT活性明显降低(P0.05),AchE活性有增加趋势,但无显著差异(P0.05);与模型组比较,SIF组海马ChAT活性明显提高(P0.05),但AchE活性变化不明显(P0.05)。结论:SIF能够改善AD模型大鼠认知功能,提高大鼠脑内ChAT活性,提示药物的作用可能与胆碱递质合成增加有关。     

生长抑素对急性坏死性胰腺炎大鼠胆碱能抗炎通路的影响

目的 探讨生长抑素(SS)对ANP大鼠血清乙酰胆碱酯酶(true choline esterase,TChE)和乙酰胆碱转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)及IL-6和TNF-α水平的影响.方法 将30只SD大鼠随机分成对照组、ANP组和SS组,每组10只.以胆胰管注入牛胆酸制备ANP模型,SS组于制模后即刻皮下注射SS 34μg/kg体重.检测各组血WBC、血糖及血清ALT、AST、LDH、淀粉酶、TNF-α、IL-6、TChE、ChAT含量.结果 ANP组血WBC、ALT、AST、LDH、淀粉酶、IL-6、TNF-α及TChE水平较对照组明显升高,而血清ChAT则明显降低(P＜0.01);血清IL-6、TNF-α与ChAT呈负相关(r=-0.87,P=0.007;r=-0.96,P=0.000),与TChE呈正相关(r=0.98,P=0.000;r=0.89,P=0.004).SS组的血WBC、ALT、AST、LDH、淀粉酶、IL-6、TNF-α及TChE水平较ANP组显著降低,而血清ChAT则显著升高(P＜0.01).3组血糖含量无显著差异.对照组、SS治疗组和ANP组血WBC、ALT、AST及LDH依次升高(P＜0.01).结论 SS可能通过增加ANP大鼠ChAT活性和降低TChE活性,减少IL-6、TNF-α分泌,从而减轻SIRS和脏器功能受损的程度.     

胃电节律失常大鼠胃窦肌间神经丛胆碱能神经的改变

目的：探讨大鼠胃窦肌间神经丛胆碱能神经，氮能神经含量变化与胃电节律失常的关系。方法：63例大鼠随机分为正常对照组，胃电节律失常模型组和白芍组。饲养4周后记录并分析胃电信号，测定胃窦肌间神经丛胆碱能神经含量。结果：模型组胃电节律失常明显增加，胃窦肌间神经丛胆碱能神经含量减少；经白芍治疗后，胃电节律失常明显减少，胃窦肌间神经丛胆碱能神经含量恢复正常。结论：胃窦肌间神经丛的胆碱能神经与胃电节律关系密切，当胆碱能神经减少时，胃电节律失常明显增加。     

老龄大鼠基底前脑、海马、大脑皮质胆碱能系统的氧化损伤

目的探讨老龄大鼠胆碱能系统基底前脑-海马结构-大脑皮质的氧化损害。方法选用Wistar大鼠20只，随机分为2组（n=10）：青龄组（3—5月龄）、老龄组（27月龄）。采用紫外可见光光度计对2组大鼠基底前脑、海马结构和大脑皮质进行一氧化氮（NO）及丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性测定。结果与青龄组比较老龄组大鼠基底前脑、海马结构和大脑皮质NO及MDA含量均显著增高（均P〈0．01），SOD活性均明显降低（均P〈0．01）。结论27月龄大鼠胆碱能系统基底前脑-海马结构-大脑皮质3个脑区的神经元发生了明显的氧化损伤。     

健脑活血方对血管性痴呆病人胆碱能神经递质的影响

目的观察健脑活血方对轻度血管性痴呆(VD)病人认知能力及胆碱能神经递质的影响。方法选取2009年10月—2012年10月中国中医科学院西苑医院老年科、北京中医药大学东直门医院脑病科、北京中医药大学第三附属医院脑病科收治的轻度VD病人160例。采用多中心、随机对照的研究方法,将轻度VD病人160例随机分为试验组和对照组,每组80例。试验组给予健脑活血颗粒口服,对照组给予茴拉西坦胶囊口服,两组均观察用药3个月。治疗前后应用简易智能状态量表(MMSE)和日常生活活动能力量表(ADL)分别对病人进行测评,并对病人血清乙酰胆碱(Ach)、乙酰胆碱酯酶(AchE)和胆碱乙酰转移酶(ChAT)进行检测。结果治疗后试验组MMSE积分疗效总有效率为80.0%,高于对照组的66.3%,差异有统计学意义(P<0.05);试验组ADL疗效总有效率为76.3%,高于对照组的62.5%,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后血清Ach、ChAT较治疗前均明显升高(P<0.05或P<0.01),且治疗后试验组较对照组升高明显(P<0.05);两组血清AchE治疗后较治疗前均明显降低(P<0.05或P<0.01),治疗后试验组较对照组降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论健脑活血方能够有效改善轻度VD病人的认知能力,提高病人的日常生活能力,并能提高轻度VD病人Ach及ChAT活力,降低AchE活性。     

心气虚证模型大鼠学习记忆和脑内胆碱能系统变化

目的 观察心气虚证模型大鼠学习记忆和脑内皮层部位胆碱能系统的变化,探讨心气虚证模型大鼠学习记忆能力下降的机制,阐明中医"心主神明"的物质基础.方法 SD大鼠随机分为5组:正常对照组、疲劳对照组、小剂量普萘洛尔+疲劳组、中剂量普萘洛尔+疲劳组和大剂量普萘洛尔+疲劳组,采用强迫跑步加灌服普萘洛尔的方法建立心气虚证大鼠模型,采用Morris水迷宫法检测大鼠学习记忆能力,生化比色法检测乙酰胆碱酯酶(AchE),放免法检测M受体.结果 大剂量普萘洛尔+疲劳组出现学习能力的降低,皮层AchE活性显著增高,M受体Rt值显著降低.结论 心气虚证模型大鼠出现脑内胆碱能功能紊乱,可能是造成学习记忆能力下降的物质基础.     

雌性大鼠抗氧化系统的增龄性变化及肉桂抗衰老作用的实验研究

研究了雌性大鼠抗氧比系统的增龄性变化和肉桂的抗衰老作用。结果表明：雌性大鼠血清总抗氧化能力（TAA）、红细胞超氧化物歧化酶（SOD）活性、心肌组织Na＋、K＋－ATPase活性，在中年期以前随龄增加，中年期以后则随龄下降；肝细胞膜脂流动性（LFU）随龄呈降低趋势；脑脂褐素（LPF）和肝脏丙二醛（MDA）含量随龄明显增加。肉桂能提高老龄大鼠血清TAA及红细胞SOD活性，降低脑LPF和肝MDA含量，增加心肌Na＋，K＋－ATPase活性，改善肝细胞膜LFU；肉桂发挥抗衰老作用的最佳用药时间为30d。     

增龄对大鼠阴茎勃起功能的影响

目的　探讨增龄在勃起功能障碍 ( ED)中的作用。方法　应用注射阿朴吗啡和电刺激海绵体神经的方法 ,观察低月龄大鼠与老龄大鼠阴茎勃起情况 ,采用免疫组化方法检测大鼠阴茎组织一氧化氮合酶 ( NOS)的染色情况。结果　注射阿朴吗啡后 ,老龄大鼠阴茎勃起次数要少于低月龄大鼠 ( P<0 .0 5) ;电刺激海绵体神经后 ,老龄组大鼠阴茎海绵体内压增幅与低月龄大鼠相近 ( P>0 .0 5) ,但勃起潜伏期延长 ( P<0 .0 5) ;组织化学染色显示低月龄大鼠阴茎组织 NOS的染色明显强于老龄大鼠。结论　增龄对大鼠阴茎勃起功能有一定的影响 ,主要表现在中枢调节及 NOS水平下降两方面     

大鼠脑发育临界期内甲亢和甲减对中枢胆碱能神经元发育的影响

对20日龄的甲亢及甲减大鼠的海马、大脑皮层、前脑基底和小脑中乙酰胆碱转移酶(CHAT)、乙酰胆碱酯梅(ACHE)各亚类的活性进行了测定.结果显示,胆碱能神经元是甲状腺激素的靶神经元.在脑发育临界期,甲亢和甲减均会造成各脑区胆碱能神经元突触发育障碍.甲状腺激素缺乏可使胆碱能神经元的发育和成熟明显落后,而甲状腺激素水平增高对胆碱能神经元成熟的影响在各脑区有差异:在大脑皮层增高,海马降低,前脑基底和小脑无明显变化.由于CHAT和ACHE对甲状腺激素水工的改变在不同脑区反应的差异可能造成乙酰胆碱的代谢紊乱.     

燃煤污染型氟中毒大鼠学习记忆能力及胆碱酯酶活性改变

目的 观察燃煤污染型氟中毒大鼠学习记忆能力的变化,探讨其发生机制.方法 健康SD大鼠48只,按染氟剂量分为对照、低氟、高氟3组.低氟组、高氟组大鼠以燃煤型地方病氟中毒重病区燃煤烘烤的当地玉米为主要饲料,复制氟中毒大鼠模型,实验期为3、6个月,各8只大鼠.实验结束时用Morris水迷宫方法检测大鼠行为学变化,并用比色法测定脑组织乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶活性.结果 染氟剂量对逃避潜伏期时间、第7天穿过平台次数、逗留平台象限时间有明显影响(F值分别为29.29、6.47、6.50,P均<0.01):染氟时间对第7天穿过平台次数和逗留平台象限时间有明显影响(F值分别为16.11、45.59,P均<0.01);染氟剂量和时间对第7天穿过平台次数和逗留平台象限时间有交互作用(F值分别为4.67、5.68,P<0.05或<0.01).3个月时,高氟组大鼠逃避潜伏期时间[(14.71±4.85)s]较对照组[(9.28±4.22)s]明显增加(P<0.05);6个月时,低氟组、高氟组大鼠逃避潜伏期时间[(12.42±8.03)、(17.48±8.05)s]较对照组[(7.04±3.29)s]延长(P均<0.05),高氟组第7天穿过平台次数[(1.62±0.87)次]和逗留平台象限时间[(16.70±5.02)s]较对照组[(3.53±1.67)次、(23.33±5.35)s]降低(P均<0.05).染氟剂量对乙酰胆碱酯酶与丁酰胆碱酯酶活性均有明显影响(F值分别为12.83、13.27,P均<0.01);染氟时间对丁酰胆碱酯酶活性有明显影响(F=16.26,P<0.01).3个月时,低氟组丁酰胆碱酯酶活性[(0.55±0.12)kU/g]明显低于对照组[(0.73±0.10)kU/g,P<0.05],高氟组乙酰胆碱酯酶[(0.62±0.42)kU/g]和丁酰胆碱酯酶活性[(0.58±0.10)kU/g]均明显低于对照组[(1.41±0.52)、(0.73±0.10)kU/g,P均<0.05].胆碱酯酶活性与逃避潜伏期时间呈负相关(r=-0.68,P<0.01),胆碱酯酶活性与逗留平台象限时间呈正相关(r=0.57,P<0.01).结论 燃煤污染型慢性氟中毒大鼠学习记忆能力减退,可能与脑组织胆碱酯酶活性下降有关,二者间有量效关系.     

丁苯酞对脑低灌注老龄大鼠胆碱能神经功能的影响

目的 观察丁苯酞(NBP)对脑低灌注大鼠学习记忆的改善作用,探索其对胆碱乙酰基转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AChE)活力的影响.方法 永久性结扎老龄大鼠双侧颈总动脉3个月,制备脑低灌注模型.实验分4组:假手术组、模型组、NBP 30和120 mg/kg组.后两组连续给予NBP45 d后,用Morris水迷官检测大鼠的空间学习和记忆以及保存记忆的能力.同时,取皮层和海马,用生化法检测ChAT和AChE活力.结果 水迷宫定位航行实验中,NBP可以显著缩短脑低灌注大鼠找到安全台的潜伏期.空间探索实验中,NBP明显增加脑低灌注大鼠在目标象限活动时间的百分比.同时,NBP可以显著增加脑低灌注大鼠皮层和海马ChAT活力,而对脑组织AChE的活力无明显影响.结论 NBP可以改善脑低灌注大鼠的学习记忆缺陷,其中通过增加了ChAT活力,改善胆碱能系统功能是其重要机制之一.     

阿尔茨海默病中枢胆碱能系统的损伤及主要机制

阿尔茨海默病(AD)作为痴呆最常见的病因,是一种慢性神经退行性疾病,病因及发病机制目前尚未得到阐明,病理以细胞外淀粉样蛋白(Aβ)沉积和老年斑(SP)形成,细胞内神经原纤维缠结(NFTs)为主要特点,临床主要表现为进行性不可逆认知障碍.     

燃煤污染型氟中毒大鼠学习记忆能力及胆碱酯酶活性改变

Objective To observe the influence of coal burning fluorosis on learning and memory ability in rats and reveal its possible mechanisms. Methods Healthy 48 SD rats were divided into control, low-fluoride and high-fluoride group. All rats in fluoride exposed groups were fed with the eom polluted by drying processes with burning coal containing high level of fluoride obtained from the endemic fluorosis area to produce the animal model of fluorosis. The experiment period were 3,6 mouths, respectively. The ability of leaning and memory was measured by Morris test and cholinesterase activity detected by photometric method at 3 or 6 month after experiment, respectively. Results Fluoride contents signifieantlly influenced the escape latency, the numbers of crossing the platforms and the time of staying the platforms(the value of F was 29.29,6.47,6.50, respectively, P<0.01).In addition, the numbers of crossing the platforms and the time of staying the platforms were influenced by the exposed time(the value of F was 16.11,45.59, P<0.01). Furthermore, the fluoride contents and the exposed time had an interaction between the numbers of crossing the platforms and the time of staying the platforms (the value of F was 4.67,5.68, P<0.05 or<0.01). Three months after the experiment, the mean values of escape latency [(14.71± 4.85)s] of rats in highly fluoride exposed group were significantly prolonged as compared with controls [(9.28±4.22)s]; 6 month after the experiment, the mean values of escape latency[(12.42±8.03)s, (17.48± 8.05)s] of rats in both groups exposed to fluoride were significantly prolonged as compared to controls [(7.04± 3.29)s, P<0.05]. The decreased numbers of crossing the platforms[(1.62±0.87)number] and the declined time of staying the platforms[(16.70±5.02)s] were found in the rats exposed to high fluoride as compared to controls [(3.53±1.67 )number, (23.33±5.35)s, P<0.05]. The fluoride contents obviously influenced the activities of acetylcholinesterase and butylcolinesterase (the value of F was 12.83,13.27, P<0.01). On the other hand, the times of breeding also influnced the activities of butylcolinesterase (the value of F was 16.26, P<0.01). In 3 months of the experiment, the activities of butylcolinesterase [(0.55±0.12)kU/g] in low fluoride exposed group were significantly decreased in comparison with controls[(0.73±0.10)kU/g, P<0.05]. The activities of acetylcholinesterase[(0.62±0.42)kU/g] and butylcolioesterase[(0.58±0.10)kU/g] in high fluoride group were significantly decreased as compared to eontrois[(1.41±0.52), (0.73±0.10)kU/g, P<0.05]. The correlation analysis showed that there was a negative correlation between the cholinesterase and the escape latency(r=-0.68, P< 0.01), and a positive correlation between the cholinesterase and the time of staying the platforms(r=0.57, P< 0.01). Conclusions The ability of learning and memory in rats with coal buring fluorosis was decreased, which might be connected to the decreased activity of cholinesterase in a dose-effect correlation.