大肠杆菌GW1104和GW1107检测SOS反应抑制剂及其机制

Ｅ．ｃｏｌｉＧＷ１１０４，ＧＷ１１０７为温度敏感株，均携带ｕｍｕ∷Ｍｕｄ（Ａｐ，ｌａｃ）融合基因。其基因型特点分别为ｒｅｃＡ４４１（ｔｉｆ─１）及ｒｅｃＡ４４１（ｔｉｆ─１），ｌｅｘＡ（Ｄｅｆ）（ｓｐｒ）。ＧＷ１１０７可在３２℃自发诱导或４２℃温度诱导ＳＯＳ反应，ＧＷ１１０４只能在４２℃诱导ＳＯＳ反应。找们利用两菌株的基因特性，建立了一套检测ＳＯＳ反应抑制剂及研究其抑制机制的快速实验系统。发现一些中药、蔬菜和化学品可不同程度以不同机制抑制ＳＯＳ反应，在１１种样品中，水菱壳等能同时抑制ＧＷ１１０４温度（４２℃）诱导及ＧＷ１１０７自发（３２℃）诱导的ＳＯＳ反应；韭菜等只能抑制ＧＷ１１０４温度诱导的ＳＯＳ反应。提示前各抑制ＳＯＳ反应作用点位于ｌｅｘＡ或其前ＳＯＳ反应途径上，后者位于ｌｅｘＡ后ＳＯＳ反应途径上。     

烟碱、高温及其联合作用对大鼠肝 GST、Cp和脂质过氧化反应的影响

为探讨烟碱、高温及其联合作用对肝损伤的机制和敏感的检测指标，观察了烟碱（６．５ｍｇｋｇ－１ｄ－１灌胃，连续８天）或（和）高温（４２℃，６０分钟）处理大鼠肝线粒体、微粒体丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）和血清谷胱甘肽Ｓ转移酶（ＧＳＴ）、铜蓝蛋白（Ｃｐ）、丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）及细胞超微结构变化。结果发现：烟碱、高温均可导致肝微粒体脂质过氧化、微粒体ＳＯＤ的活力被抑制，两者具有协同作用；提高胞浆Ｃｐ活力，联合作用呈抑制效应。烟碱可抑制线粒体ＧＳＨ－Ｐｘ和胞浆ＧＳＴ活力。血清ＧＳＴ升高可能是热应激肝细胞受损的敏感指标。     

烟碱,高温及其联合作用对大鼠肝GST,Cp和脂质过氧…

为探讨烟碱，高温及其联合作用对肝损伤的机制和敏感的检测指标他烟碱（６．５ｍｇ．ｋｇ＾－１．ｄ＾－１灌胃，连续８天）或（和）高温（４２℃，６０分钟）处理大鼠肝线粒体，微粒体丙二醛（ＭＤＡ），超氧化物岐化酶（ＳＯＤ）谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）和血清谷胱甘肽Ｓ转移酶（ＧＳＴ），铜蓝蛋白（Ｃｐ），丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）及细胞超微结构变化，结果发现，烟碱，高温均可导致肝微粒脂质过氧化，微普体ＳＯＤ的     

N-端融合蛋白对重组HBeAg抗原性的影响

目的　研究 Ｎ－ 末端融合蛋白对大肠杆菌中表达的 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 抗原性的影响。方法　用 Ｐ Ｃ Ｒ 法,从抗－ Ｈ Ｂｃ（ ＋ ） 血清标本中获得 Ｈ Ｂ Ｖ Ｐｒｅ ｃ － ｃ 基因片段,将其插入质粒 Ｔｒｃ９９ Ａ,重组成亚克隆 Ｐ Ｈ Ｂ Ｉ。以 Ｐ Ｈ Ｂ Ｉ为模板,扩增获得编码乙肝病毒核心蛋白１ ～１４０ 氨基酸的基因片段,加上终止信号,分别插入质粒ｐ Ｇ Ｅ Ｘ－ ２ Ｔ 和 Ｔｒｃ９９ Ａ 中,各自转化后,以 Ｉ Ｐ Ｔ Ｇ 诱导,大肠杆菌表达插入基因。以 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 和 Ｓ Ｄ Ｓ－ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 方法测定表达产物的分子量和 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 、 Ｈ Ｂｃ Ａｇ 滴度。结果　在 Ｉ Ｐ Ｔ Ｇ 诱导下,大肠杆菌中分别表达 Ｎ－ 端融合的 Ｇ Ｓ Ｔ－ Ｈ Ｂｅ Ａｇ 融合蛋白和非融合 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 蛋白。分子量各为４１０００ Ｄ 和１５０００ Ｄ。培养裂解物经 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 测定,融合蛋白 Ｈ Ｂｅ Ａｇ ： Ｈ Ｂｃ Ａｇ 的滴度比为２５６ ：１ ,非融合蛋白为１６ ：１ 。结论　 Ｎ－ 端融合蛋白 Ｇ Ｓ Ｔ－ Ｈ Ｂｅ Ａｇ 抗原性更接近血清 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 。     

CPB-ST融合基因的构建及表达研究

用限制性核酸内切酶ＥｃｏＲＩ和ＳａｌⅠ双酶切含有大肠杆菌耐热性肠毒素ＳＴ１前体蛋白基因的质粒ｐＸＳＴ１，回收３２５ｂｐ的ＳＴ基因片段，然后，通过Ｔ４ＤＮＡ连接酶将其定向连接于事先经同样的双酶切处理的带有产气荚膜梭菌β－毒素基因（ＣＰＢ）的重组质粒ｐＥＣＢ２中ＣＰＢ基因的下降，转化受体菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中，经ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ酶切反应鉴定重组质粒，得到了理想重组质粒ｐＥＣＢ－ＳＴ１。重组菌株Ｂｌ２１（ＤＥ３）（ｐＥＣＢ－ＳＴ１）经ＩＰＴＧ诱导后，其表达产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｉｎｇ及ＥＬＩＳＡ检测，结果表明重组菌株可以表达ＣＰＢ－ＳＴ融合蛋白，而且该融合蛋白无天然β－毒素和ＳＴ１的生物毒性。     

大肠杆菌肠毒素ST_1—LT_B融合基因的高效表达

用限制性核酸内切酶ＥｃｏＲＩ和ＨｉｎｄⅢ双酶切含大肠杆菌肠毒素ＳＴ１—ＬＴＢ融合基因的质粒ｐＸＳＬＴ１，回收０．８４ｋｂ的ＳＴ１—ＬＴＢ融合基因，再将载体ｐＥＴ—２８ｂ（＋）用ＥｃｏＲⅠ和ＨｉｎｄⅢ双酶切，然后将其与ＳＴ１—ＬＴＢ融合基因连接，转化至受体菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中。经ＥｃｏＲⅠ、ＨｉｎｄⅢ、ＢａｍＨⅠ酶切反应鉴定重组子质粒，得到了理想重组质粒ｐＸＥＴ－ＳＬＴ１。重组菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴＳＬＴ１）经ＩＰＴＧ诱导后，其表达产物经ＳＤＳ—ＰＡＧＥ和ＥＬＩＳＡ检测，结果表明重组菌株可以高效表达ＳＴ１—ＬＴＢ融合蛋白，该融合蛋白占菌体总蛋白的３３．２１％，而且无天然ＳＴ１生物毒性     

杂色曲霉素单克隆抗体的研制与特性鉴定

杂色曲霉素（ＳＴ）衍生后偶联到牛血清白蛋白（ＢＳＡ）或血蓝蛋白（Ｈ）上，制得复合抗原ＢＳＡ－ＳＴ和Ｈ－ＳＴ。将ＢＳＡ－ＳＴ免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，取脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合。筛选到一株稳定分泌抗ＳＴ抗体的单克隆杂交瘤细胞株，该株细胞诱导的小鼠腹水及血清中均富含抗ＳＴ单克隆抗体（ＭｃＡｂ－ＳＴ）。经鉴定，ＭｃＡｂ－ＳＴ属于ＩｇＧ＿１，与Ｈ－ＳＴ反应之亲和力常数为１．２９ｘ１０￣９Ｌ／ｍｏｌ，其分子量为１６８０００（重链５３０００，轻链３１０００）。ＭｃＡｂ－ＳＴ的结构类似物的相对交叉反应下超过２％。应用ＭｃＡｂ－ＳＴ及Ｈ－ＳＴ建立的ＩＣ一ＥＬＩＳＡ法测定ＳＴ的线性范围是０．１～１０ｎｇ／ｍｌ，最低检测量是０．５ｐｇ／　２５μｌ，为快速检测粮食中ＳＴ提供厂重要手段。     

抗河豚毒素单克隆抗体的制备及其特性的初步研究

将用合成的匙孔形虫戚血蓝蛋白－甲醛－河豚毒素（ＫＬＨ－ＨＣＨＯ－ＴＴＸ）连接物免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系Ｓｐ２／０融合，经３～４次亚克隆，建立了３个稳定分泌抗河豚毒素的杂交瘤细胞株，分别命名为１Ｇ３、４Ｇ３、６Ｄ９。其中１Ｇ３和４Ｇ３分属ＩｇＧ２ｂ亚类，６Ｄ９属ＩｇＧ１亚类。腹水的抗体稀释度为１∶１０５～１：５×１０６。用竞争抑制性酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）测定三种抗体的最低反应浓度为１×１０－３ｍｇ／Ｌ。     

高频作业人员脂质过氧化和免疫功能的改变

观察高频（频率２００￣１０００ｋＨｚ）作业人员６２名血中ＬＰＯ、ＧＳＨ－Ｐｘ、ＳＯＤ、ＣＰ、ＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ｃＧＭＰ、ｃＡＭＰ的变化，探讨慢性低强度高频辐射对作业人员脂质过氧化和免疫功能的影响机制。结果表明：高频作业人员血中ＬＰＯ、ＧＳＨ－Ｐｘ与对照组差异显著，ｃＧＭＰ、ｃＡＭＰ和ＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＭ显著高于对照组；ＳＯＤ和ＣＰ的改变无统计学意义；高频淬火机的危害较大。     

对苯二甲酸,乙二醇,联苯—联苯醚长期低剂量接触对工人健康 …

为探索长期低剂量接触对苯二甲酸（ＴＰＡ）、乙二醇（ＥＧ）、联苯醚（ＤＯＷ）对工人健康的影响，采用职业流行病学的方法，霜化纤公司１２３０名ＴＰＡ、ＥＧ、ＤＯＷ作业工人和１７７名对照工人进行调查，结果表明，接触组血清ＡＬＴ、ＧＧＴ、ＡＬＰ舔生和尿β２－ＭＧ含量明显高于姐；接触组尿蛋白是性检出率分另为３．２５％、６．４２％，与对照组相比有显著差异。提示长期接触低深度ＴＰＡ、ＥＧ、ＤＯＷ可引起工人的肝肾功     

茶对促癌物（TPA）诱发小鼠皮肤癌基因表达的影响

通过研究在小鼠皮肤上涂抹儿茶素ＥＧＣＧ对促癌物（ＴＰＡ）诱发小鼠皮肤组织某些癌症发生有重要关系的基因（ｃ－ｍｙｃ，ＯＤＣ、蛋白激酶Ｃ即ＰＫＣ基因）表达水平的影响，对茶叶抗皮肤癌的机制做了较深入的探讨。其结果表明阳性小鼠皮肤涂１０ｎｍｏｌＴＰＡ４ｈ后，上皮组织中ＯＤＣ基因表达水平比阴性组高出４．５倍，而ＥＧＣＧ对其有明显的抑制作用，１μｍｏｌ和５μｍｏｌＥＧＣＧ剂量组的抑制率分别为１６％和５６％，有一定的剂量－反应关系。Ｃ－ｍｙｃ与ｐＫＣ基因表达水平在阳性组也有明显的升高，分别为５．０和１．９倍，ＥＧＣＧ同样具有抑制作用，５μｍｏｌ的抑制率分别为２４％和２１％。     

福建发现首例HIV—2感染者

目的：我国目前尚未发现ＨＩＶ－２病毒感染者,首例ＨＩＶ－２病毒感染者的检出对于ＨＩＶ－２病原学的研究、血清学确认实践、及艾滋病的预防控制具有重要意义。方法：被检血清标本用ＦＡＧＴ（ＧＢＣ,ＨＩＶ－１＋２）、ＥＩＡ（Ｖｉｒｏｎｏｓｔｉｃａ,ＨＩＶ－１＋２）和ＰＡ（Ｓｅｒｏｄｉａ,ＨＩＶ－１）３种不同原理的检测方法进行ＨＩＶ抗体初筛检测,可疑阳性血清经免疫印迹试验（ＷＢ）确认,通过分析蛋白反应条带确定ＨＩＶ抗体的性质。进行艾滋病流行病学调查,分析被检人员感染ＨＩＶ的地点、途径及可能扩散传播的范围。结果：ＦＡＧＴ和ＥＬＩＳＡＨＩＶ抗体初筛检测试验发现１个回国人员ＨＩＶ抗体阳性,用ＨＩＶ－１＋２和ＨＩＶ－２特异性的抗体ＷＢ试验证实为ＨＩＶ－２病毒感染。这是福建也是我国首例确认报告的ＨＩＶ－２抗体阳性者。     

限食对非酶糖化作用的影响

本研究通过限制小鼠的摄食量（６０％）而维生素和矿物质与对照小鼠等量供给，建立了限食模型。通过制备ＡＧＥ（ＡｄｖａｎｃｅｄＧｌｙｃａｔｉｏｎＥｎｄｐｒｏｄｕｃ－ｔｓ，高级糖化终产物）特异性抗血清，采用竞争性ＥＬＩＳＡ（ＥｎｚｙｍｅＬｉｎｋｅｄＩｍ－ｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔＡｓｓａｙ，酶联免疫吸附试验）测定了小鼠组织中ＡＧＥ的含量，发现限食可广泛减少体组织中ＡＧＥ的累积。放射受体分析法测定８月龄小鼠限食１２个月盾腹腔巨噬细胞的ＡＧＥ受体，发现其数量比对照鼠高１０倍左右，每个细胞有１．０２９×１０６；其结合常数比对照鼠高出１倍，达１．４２×１０８ｍｏｌ－１。结合前人的研究结果，提出了限食延寿机制的非酶糖化假说。     

4-氧和4-羟-四甲基哌啶氮氧自由基及衍生物对体外鼠肝谷胱甘肽影响及铁离子的络合作用

ＰＯＨ、ＨＴＭＰＯＨ。５,５－对硝基苯甲酸（ＤＴＮＢ）,谷胱甘肽（ＧＳＨ）,碘基水杨酸（ＳＳＡ）,硫酸亚铁（ＦｅＳＯ４）均为国产分析纯。１．２方法１．２．１４－ＴＥＭＰＯ对大鼠组织匀浆ＧＳＨ含量的影响（１）大鼠组织匀浆的制备［３,４］：取大鼠肝组织用...     

微乳液-8-羟基喹啉体系测定Fe(Ⅲ)

研究了 Ｏ／ Ｗ 阴离子微乳液十二烷基硫酸钠（ Ｓ Ｄ Ｓ）／正丁醇（ｎ－ Ｃ４ Ｈ９ Ｏ Ｈ）／正庚烷（ｎ－ Ｇ７ Ｈ１６ ）／ Ｈ２ Ｏ 对 Ｆｅ 与８－ 羟基喹啉（ Ｈ Ｏｘ ）显色体系的增敏增稳作用,实验结果表明其灵敏度为ε４６０ ＝ ６５６×１０３ Ｌ·ｍ ｏｌ－ １ ·ｃｍ － １ ,ε５８０ ＝ ５５９×１０３ Ｌ·ｍ ｏｌ－ １ ·ｃｍ － １ ,与相同含水量的 Ｓ Ｄ Ｓ胶束体系（ε４６０ ＝ ４７２×１０３ Ｌ·ｍ ｏｌ－ １ ·ｃｍ － １ ,ε５８０ ＝ ４０５×１０３ Ｌ·ｍ ｏｌ－ １ ·ｃｍ － １ ）比较,发现其测定灵敏度显著增加,增加百分比分别为３８９％ 、４６９％ ,某些实验条件得以改善。     

干扰素治疗丙型肝炎疗效相关因素分析

目的：探讨预测干扰素治疗慢性丙型肝炎（ＣＨＣ）疗效的临床上适用、简便、易行的指标。方法：对采用干扰素（ＩＦＮα－１ｂ）治疗３２例ＣＨＣ临床资料进行观察,包括治疗前后肝功能（ＡＬＴ、ＳＢ、ＧＧＴ）、抗－ＨＣＶＯＤ水平、ＨＣＶ基因型、ＨＣＶＲＮＡ、ＳＩＬ－２Ｒ、β２－ＭＧ等,治疗结束时有效者为肝功能复常同时ＨＣＶＲＮＡ阴转,其余反应模式均为无效者。结果：ＨＣＶ基因型为Ⅲ型患者疗效（５／１０）明显高于Ⅱ型（２／１９）（Ｐ＜０．０５）,有效者治疗前血清抗—ＨＣＶＯＤ明显低于无效者（Ｐ＜０．０５）,治疗后有效者β２－ＭＧ升高水平（３．４５±１．０８）ｍｇ／Ｌ明显高于无效者（１．３３±０．９５）ｍｇ／Ｌ（Ｐ＜０．０５）,而两者治疗前ＡＬＴ、ＳＢ、ＧＧＴ、ＩｇＭ、β２－ＭＧ患者的年龄无明显差别（Ｐ＞０．０５）。结论：感染ＨＣＶ基因型,治疗前抗—ＨＣＶＯＤ水平及治疗后β２－ＭＧ变化对预测ＩＦＮ治疗ＣＨＣ疗效有一定参考价值。     

一氧化氮在急性肝衰竭中的作用

为探讨ＮＯ在急性肝衰竭中的作用，采用Ｄ－ＧａｌＮ（８００ｍｇ／ｋｇ）和ＬＰＳ（８μｇ／鼠）腹腔注射复制大鼠急性肝衰竭模型，用氨胍（ＡＧ，１００ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１）和左旋精氨酸（ＬＡ，４００ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１）皮下注射３ｄ，分别抑制和促进ＮＯ的合成，注射Ｄ－ＧａｌＮ和ＬＰＳ后２４ｈ处死，留血清测定ＮＯ、ＡＬＴ和ＡＳＴ的水平，肝组织测定诱导型ＮＯ合酶（ｉＮＯＳ）的活性并作组织学观察。结果发现急性肝衰竭时ＮＯ和ｉＮＯＳ的水平升高（Ｐ＜００５），与ＡＬＴ和ＡＳＴ的升高相一致（Ｐ＜００５），抑制ｉＮＯＳ的活性或促进ＮＯ的合成，则ＮＯ、ＡＬＴ和ＡＳＴ的水平降低（Ｐ＜００５）或升高（Ｐ＜００５），组织学观察证实了上述结果。说明ＮＯ及ｉＮＯＳ参与急性肝衰竭，抑制ＮＯ的合成对急性肝衰竭有保护作用。     

第8届亚洲营养会议第二轮通知

ＧＯＯＤＮＵＴＲＩＴＩＯＮＦＯＲＡＬＬ！－ＮＥＷＥＲＡＦＯＲＮＵＴＲＩＴＩＯＮＲＩＧＨＴＯｒｇａｎｉｚｅｄｂｙｔｈｅＫｏｒｅａｎＮｕｔｒｉｔｉｏｎＳｏｃｉｅｔｙＵｎｄｅｒｔｈｅＡｕｓｐｉｃｅｓｏｆｔｈｅＦｅｄｅｒａｔｉｏｎｏｆＡｓｉａｎＮｕｔｒｉｔｉ...     

库尔特MD10血球计数仪改MD18的方法

１软件库尔特ＭＤ１０（Ｅ版本）在一张高密小盘上载有：（１）ＤＯＳ５．０系统文件５个：ＩＯ．ＳＹＳ、ＭＳ－ＤＯＳ．ＳＹＳ、ＣＯＭＭＡＮＤ．ＣＯＭ、ＨＩＭＥＭ．ＳＹＳ、ＲＡＭ－ＤＲＩＶＥＲ·ＳＹＳ。其中前三个文件是ＤＯＳ的核心，完成操作系统的基本功能；ＨＩＭＥＭ．ＳＹＳ可以提供上位内存，ＲＡＭＤＲＩＶＥＲ．ＳＹＳ可用建立一个虚拟盘。（２）系统配置、自动批处理文件各１个：ＣＯＮ－ＦＩＧ．ＳＹＳ、ＡＵＴＯＥＸＥＣ．ＢＡＴ。前者为程序的运行提供运行环境，包括用ＨＩＭＥＭ．ＳＹＳ开辟上位内存和用ＲＡＭＤＲＩ…     

西门子SOMATOM ART CT灯丝电流减少故障维修

故障现象：１．ＣＴ开机后，软件拷贝检索正常，直到出现ＳＯＭＡＴＯＭＡＲＴＶＤ１０８表格后出现Ｒｅｓｅｔ，经过几次Ｒｅｓｅｔ后，机架面板指示灯才能正常显示；２．在以后的扫描过程中也老出现Ｒｅｓｅｔ，床体锁住不能运动，Ｒｅｓｅｔ后又能继续扫描；３．查询系统报告，故障记录如下：ａ．ＥＩ０２１７ｂ．ＥＩ０１０５ｃ．ＥＸ０８２１ＥＸＰ－ＦＩＬ－ＬＯＷ－ＥＲＲ（％Ｓ）ｄ．ＥＸ０８２４ＰＵＳＨ－ＥＲＲ（％Ｓ）分析检修：１．排除计算机系统及软件原因。关掉机架电源，单启动计算机系统，程序自检能通过，说明计算机系统…