细胞周期素依赖激酶抑制蛋白p27与泌尿系统肿瘤

细胞周期素、周期素依赖激酶及周期素依赖激酶抑制蛋白控制细胞周期的运转，从而决定细胞的增生肥大等。其中任何一种发生变化均可导致细胞增生的异常，甚至癌变。P27^kipl(简称p27)是一种重要的细胞周期素依赖激酶抑制蛋白，它可抑制细胞的增生。近年研究发现P27的缺失起抵抗生长抑     

鼻咽癌中细胞周期蛋白E与细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p27^kipl的相关性分析

目的：研究鼻咽癌中细胞周期蛋白E（cyclinE）和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子（p27^kipl）的表达及相关性。方法：以抗cyclinE抗体、抗p27^kipl抗体为标记物，采用免疫组织化学方法（Elivision法）对37例鼻咽癌、17例慢性鼻咽炎石蜡标本进行检测，并结合临床资料进行分析。结果：37例鼻咽癌组织中cyclinE和p27^kipl阳性表达率分别为51．4％和45．9％，17例慢性鼻咽炎中cyclinE和p27^kipl阳性表达率分别为5．9％和88．2％，两者比较差异有显著性（P〈0．01）。cyclinE阳性表达与病理分型、临床分期、淋巴结转移、颅神经侵犯无关（P〉0．05），但与3年生存率有关（P〈0．05）；p27^kipl阳性表达与病理分型、临床分期、淋巴结转移无关（P〉0．05），但与颅神经侵犯及3年生存率有关（P〈0．05）。cyclinE与p27^kipl二者的表达有负相关性（r=-0．509,χ2=9．745。P=0．002）。结论：cyclinE和p27^kipl表达可能是判断鼻咽癌生物学行为的指标。     

细胞周期调控和骨肉瘤的发生发展

骨肉瘤是一类细胞周期性疾病,其发生发展与细胞周期有关。细胞周期的正常运行依赖于许多调节因子,如细胞周期素依赖激酶（CDKs）、细胞周期素（cyclins)、细胞周期素依赖激酶抑制蛋白（CKIs）等的相互作用,通过各调节因子保持动态平衡来保证细胞周期的正常循环,若其中任何一类调节因子过多或过少,非正常激活、灭活等都将破坏细胞周期的正常进行,从而异常细胞可逃离正常监测,形成独立的细胞周期,发生骨肉瘤。     

鼻咽癌中细胞周期蛋白E与细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p27kip1的相关性分析

目的: 研究鼻咽癌中细胞周期蛋白E(cyclin E)和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子(p27kip1)的表达及相关性.方法: 以抗cyclin E抗体、抗p27kip1抗体为标记物,采用免疫组织化学方法(Elivision法)对37例鼻咽癌、17例慢性鼻咽炎石蜡标本进行检测,并结合临床资料进行分析.结果: 37例鼻咽癌组织中cyclin E和p27kip1阳性表达率分别为51.4%和45.9%,17例慢性鼻咽炎中cyclin E和p27kip1阳性表达率分别为5.9%和88.2%,两者比较差异有显著性(P＜0.01).Cyclin E阳性表达与病理分型、临床分期、淋巴结转移、颅神经侵犯无关(P＞0.05),但与3年生存率有关(P＜0.05);p27kip1阳性表达与病理分型、临床分期、淋巴结转移无关(P＞0.05),但与颅神经侵犯及3年生存率有关(P＜0.05).Cyclin E与p27kip1二者的表达有负相关性(r=-0.509,χ2=9.745,P=0.002).结论: cyclin E和p27kip1表达可能是判断鼻咽癌生物学行为的指标.     

中心体蛋白对DNA损伤时细胞周期调控和细胞凋亡的影响

目的探讨中心体蛋白(ninein-like protein,Nlp)对人类食管癌细胞遭受DNA损伤时细胞周期调控和细胞凋亡的影响。方法用Lipofectamine2000转染和G418筛选构建稳定高表达Nlp的克隆,应用RT-PCR和Western blotting鉴定空载对照克隆和Nlp高表达克隆;采用血清饥饿法使细胞周期同步化并用UV照射处理细胞,流式细胞仪分析细胞周期和细胞凋亡。结果筛选并鉴定出明显高表达Nlp的稳定克隆。与空载对照克隆相比,Nlp高表达的克隆G2/M期细胞增加8.1%。有丝分裂指数实验显示Nlp高表达的克隆进入M期受阻,sub-G1期比例增加,发生凋亡的细胞是对照的1.4倍。UV照射后,相对于空载对照克隆,Nlp高表达的克隆G2/M期细胞所占比例增加了22.1%;凋亡的细胞增加至对照的3倍,差异有统计学意义(P<0.05)。结论中心体蛋白Nlp参与细胞周期调控和细胞凋亡,并且能促进DNA损伤时G2/M期细胞阻滞和细胞凋亡的发生。     

细胞周期调控和骨肉瘤的发生发展

骨肉瘤是一类细胞周期性疾病,其发生发展与细胞周期有关。细胞周期的正常运行依赖于许多调节因子,如细胞周期素依赖激酶(CDKs)、细胞周期素(cyclins)、细胞周期素依赖激酶抑制蛋白(CKIs)等的相互作用,通过各调节因子保持动态平衡来保证细胞周期的正常循环,若其中任一类调节因子过多或过少,非正常激活、灭活等都将破坏细胞周期的正常进行,从而异常细胞可逃离正常监测,形成独立的细胞周期,发生骨肉瘤。     

细胞周期调控蛋白在K562细胞的表达及意义

目的：探讨细胞周期调控蛋白CyclinD1,CyclinE,Cdk2,Cdk5在K562细胞增殖和分化时的不同表达。方法：本实验采用Western-Blotting-ECL方法分析了苦参碱作用K562细胞前、后24,48,72h,CyclinD1,CycliE,Cdk2,Cdk5的不同表达。结果：在增殖的K562细胞中,伴随着DNA合成增加,CyclinE和Cdk2保持高表达;而在分化的细胞中,随着DNA合成减少,CyclinD1,Cdk5表达增强。结论：在细胞从增殖向分化途径逆转时,伴随着一些特殊的Cyclin/Cdk表达的改变。     

细胞周期调控与卵巢癌

细胞周期调控需要有多个元件参与,在细胞增殖过程中,细胞周期受细胞周期素、细胞周期素依赖激酶、细胞周期素依赖激酶酶抑制蛋白的精密调控.三者之间对卵巢癌的发生、发展及其预后有一定的相关关系.     

细胞周期素依赖性激酶与肿瘤

肿瘤是遗传因素和环境因素共同作用下细胞周期紊乱、细胞失控性生长所致的一类疾病。细胞周期素依赖性激酶是调节真核生物细胞周期的关键分子之一,深入研究细胞周期素依赖性激酶在细胞周期与细胞生长中的作用,对于阐述肿瘤发生、发展的病理机制以及肿瘤治疗的新途径具有重要的意义。     

细胞周期调节负控蛋白P27在肾小球系膜细胞增殖中的调控作用

目的探讨lL-13,ET-1,甲基强的松龙及肝素钠对肾小球系膜细胞膜表达细胞周期负控p27的变化.方法不同浓度IL-13(10ng/ml,100ng/ml),ET-1(10-7mol/L),甲基强的松龙0.5μg/ml,肝素钠100mg/L和200mg/L,作用于培养的系膜细胞.流式细胞仪检测p27表达水平.结果IL-13 10 ng/ml组和100ng/ml浓度组p27表达为(46.74±3.25)和(23.8±2.56),与对照组比较有明显差异(P＜0.001,P＜0.05),两浓度组之间有显著差异(P＜0.01).ET-1刺激14h和18h后p27的表达分别为(14.76±1.49)和(12.18±1.30),与对照组比较均有明显差异(P＜0.05,P＜0.05).甲基强的松龙48h及72 h p27表达为(9.9±1.01)和(9.12±0.93),与对照组比较明显降低,P＜0.001.肝素钠100mg/L和200 mg/L浓度p27的表达分别为(26.94±1.23)和(28.04±0.99),较对照组明显升高(P＜0.05),不同浓度组间比较无明显差异.结论肾小球系膜细胞受不同因素作用后细胞周期调节负控蛋白p27表达水平不同.p27在调节系膜细胞增殖过程中起重要作用.     

氨基胍通过降低周期素激酶抑制剂P27水平减轻高糖培养系膜细胞肥大程度

目的:研究氨基胍(AG)减轻高糖培养系膜细胞(MC)肥大程度与周期素激酶抑制剂P27的关系.方法:Western 印迹方法测定MC裂解液P27水平,[3H]胸腺嘧啶核苷([3H]TdR)及[3H]亮氨酸([3H]Leu)掺入方法测定MC肥大情况.结果:同正常糖(100 mg/dl)培养相比,高糖(450 mg/dl)培养MC中P27水平增高(P<0.01),MC肥大;[3H]Leu掺入增加及[3H]TdR掺入降低(P<0.01);AG(0.25 mmol/L)降低高糖培养MC中P27水平[(2.5±0.6 ) vs (4.0±0.8),P<0.05],使MC肥大程度减轻;[3H]leu掺入降低,[(3 426±532) vs (4 652±309) cpm/孔,P<0.01],[3H]TdR掺入增加[(1 233±69) vs (543±27) cpm/孔,P<0.01].结论:AG可能通过降低高糖培养MC中P27水平减轻MC肥大程度.     

蟾蜍灵调控系膜细胞增殖与细胞周期激酶抑制剂p21的关系

目的: 观察蟾蜍灵对大鼠系膜细胞(mesangial cell,MC) p21表达的影响,探讨其调控系膜细胞增殖的机制?方法:MTT法观察不同浓度蟾蜍灵(0.01?0.04?0.08?0.16 μmol/L)对PDGF-BB(20 ng/ml)诱导的MC 增殖的影响;流式细胞术测定MC细胞周期的变化;RT-PCR法测定p21基因表达的改变;Western blot法测定p21蛋白水平变化?结果:PDGF-BB刺激MC12 h后,加入不同浓度蟾蜍灵干预24 h,蟾蜍灵从0.04 μmol/L至0.16 μmol/L的呈浓度依赖抑制PDGF-BB诱导的MC增殖(P < 0.05)?0.08 μmol/L蟾蜍灵干预24 h后,可使PDGF-BB诱导的MC G0/G1期细胞比例升高,使S期细胞比例下降,且上调P21mRNA和蛋白水平的表达(P < 0.05)?0.08 μmol/L蟾蜍灵对正常系膜细胞无明显影响(P > 0.0.5)?结论:蟾蜍灵可能通过上调细胞周期激酶抑制剂p21的表达来抑制PDGF-BB诱导的MC的增殖?     

细胞周期素依赖蛋白激酶-5抑制剂Roscovitine对瑞芬太尼痛觉过敏大鼠痛行为的影响

目的 探讨预先鞘内注射细胞周期素依赖蛋白激酶-5(Cdk5)抑制剂Roscovitine对瑞芬太尼痛觉过敏大鼠痛行为的影响.方法 SD雄性大鼠45只,随机数字表法分成5组(n=9):对照组(C)、切口痛组(Ⅰ)、瑞芬太尼组(R)、Roscovitine组(ROS)、Roscovitine+瑞芬太尼组(ROS+ R).ROS,ROS+R组术前30 min鞘内给予Roscovitine10μl(50μg),余组给予20％ DMSO10μl.除C组外均制作切口痛模型;R和ROS+R组切皮同时皮下泵注瑞芬太尼0.4ml (0.04mg/kg) 30 min.于术前24h、术后2h、6h、24h、48h检测大鼠术侧足底机械缩足阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT)和热缩足潜伏期(paw withdrawal thermal latency,PWTL).结果 与C组相比,Ⅰ组术后PWMT、PWTL明显降低(P＜0.01).与Ⅰ组相比,R组术后PWMT,PWTL明显降低(P＜0.01);而ROS组术后PWTL明显升高[2h:(20.26±1.33)s,(17.97±0.47) s;48h:(22.15±0.60)s,(19.89±1.27)s] (P＜0.05).ROS+R与R组相比,术后2h PWTL[ (19.13±1.72)s,(14.41±2.30)s]及PWMT[(10.4±1.95)g,(6.38±0.91)g]开始升高,分别持续至48h[(19.24±2.80)s,(14.87±1.95)s]和24h[ (8.88±1.41)g,(6.83 ±0.80)g] (P＜0.05).结论 Roscovitine能减轻大鼠切口引起的热痛敏,并能缓解瑞芬太尼诱发的切口痛大鼠痛觉过敏.     

非小细胞肺癌EGFR-TKI耐药预测生物标志物研究进展

随着对肿瘤发病机制及其生物学行为的深入研究,分子靶向治疗成为目前治疗非小细胞肺癌(non-small celllung cancer,NSCLC)最具前景的研究领域。其中表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor tyrosinekinase inhibitor,EGFR-TKI)可延长患者无进展生存期并明显提高患者生活质量,然而耐药已成为影响该类药物临床应用的最大障碍。因此对EGFR-TKI耐药机制的研究已成为关注的热点。现已发现其耐药可能与受体突变、细胞内信号转导相关蛋白、EGFR以外的TK受体介导的通路活化等有关。文中就NSCLC对EGFR-TKI耐药机制的最新研究进展进行综述。     

表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂治疗晚期非小细胞肺癌临床观察

目的评价表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFRT-TKI)治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效及安全性。方法晚期NSCLC患者160例使用EGFR-TKI吉非替尼或厄洛替尼治疗,其中77例(48.1%)为一线治疗组,83例(51.9%)为二线治疗组。观测其临床特征、治疗效果及生存时间,并对药物安全性进行评估。结果EGFR—TKI治疗总有效率为33.8%(54/160),疾病控制率为74.4%(119/160)。无进展中位生存时间为9.8个月,中位生存时间为14.5个月,1年生存率为55%。Logistic多因素回归分析显示,病理类型、皮疹情况和血清CEA变化与有效率相关(P均<0.05);病理类型、吸烟史、皮疹情况、血清CEA变化与疾病控制率相关(P均<0.05);病理类型为影响无进展生存的独立因素,PS评分为影响生存的独立因素。一线治疗、二线治疗疗效相当。药物不良反应主要表现为皮疹和轻度腹泻。结论 EGFR—TKI治疗晚期NSCLC安全有效。     

大黄素抑制系膜细胞增生与周期素激酶抑制剂p27的关系

目的:探讨周期素激酶抑制剂p27在大黄素抑制肾系膜细胞(mesangial cell,MC)增生中的作用.方法:蛋白印迹(western 杂交)方法测定MC裂解液p27蛋白水平,3H胸腺嘧啶核苷(3HTdR)测定MC增生的情况,观察不同浓度大黄素(50 mg/L、100 mg/L )对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激的MC中p27水平及增生程度的影响. 结果: TNF-α (20万U/L)使无血清培养24 h的MC中p27水平降低,同时使3HTdR掺入增加;大黄素提高TNF-α刺激的 MC中p27水平,同时使3HTdR掺入减少.大黄素的上述作用随剂量的增大而增强. 结论: 大黄素可能通过提高p27水平抑制 TNF-α诱导的MC增生.     

系膜增生性肾炎大鼠肾小球周期素激酶抑制剂P27的变化及意义

目的:探讨周期素激酶抑制剂P27在系膜增生性肾炎模型Thy1肾炎大鼠系膜细胞(MC)增生中的作用.方法:利用抗胸腺细胞抗体制成Thy1肾炎模型,Western印迹法测定肾小球裂解液P27蛋白水平, RT-PCR方法测定肾小球P27 mRNA,ELISA方法测定肾小球裂解液细胞外基质(ECM)蛋白(纤维连接蛋白及Ⅳ型胶原).结果:Thy1肾炎第1天P27水平即有明显下降,第3天(MC增生最为明显)P27水平最低,第5天(MC增生开始消散)P27水平有所回升,提示P27水平与MC增生程度有关;Thy1肾炎第3天肾小球P27 mRNA与正常对照组比较无明显差别;而Thy1肾炎大鼠肾小球纤维连接蛋白和Ⅳ型胶原均升高(P<0.01),在第3天达峰值,第5天略有回降,但仍显著高于正常对照组(P<0.01).结论:P27水平下降可能在Thy1肾炎MC增生中起重要作用.     

细胞周期蛋白D1基因表达与非小细胞肺癌生物学行为的关系

目的：探讨非小细胞肺癌周期蛋白Ｄ１（ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１）的表达与肿瘤生物学行为的关系。方法：采用免疫组织化学Ｅｎ Ｖｉｓｉｏｎ二步法对４６例非小细胞肺癌手术标本进行ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１检测,并结合临床随访资料作结果分析。结果：ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１阳性表达率为５４．３％（２５／４６）,但与年龄、性别、ＴＮＭ分期、组织类型及组织学分级均无相关性（Ｐ〉０．０５）;临床随访资料显示,在ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因中     

非小细胞肺癌术后辅助EGFR-TKI的治疗进展

早期非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）术后含铂两药的辅助化学药物治疗（以下简称化疗）可以改善患者的生存时间,但是化疗已经进入平台期。大量的随机对照临床试验已经证实有表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase inhibitor,TKI）能显著改善EGFR突变NSCLC患者的生存,但其在早期NSCLC中的作用还没有明确。所以本文对近几年EGFR-TKI作为NSCLC的辅助治疗进行了综述。