氯氰菊酯和甲基对硫磷混配对大鼠生殖发育的影响

[目的]探讨妊娠期氯氰菊酯和甲基对硫磷混配染毒,对母鼠的生殖毒性和对子代大鼠生殖和发育的影响。[方法]Wistar孕鼠112只随机均分为4组,于孕1～15天连续经口灌胃染毒不同剂量农药(两种农药以相当于0、1/300、1/95、1/30LD50的剂量等毒混配),对照组采用溶剂灌胃。56只孕鼠(每组14只)妊娠19天时处死,测定胚胎毒性;另56只孕鼠自然分娩,记录空孕率、每窝活产数、妊娠天数、平均产仔数和性别比;测量其371只仔鼠的体重增长和生长发育情况;10周龄时随机抽取雌鼠32只(每组8只)、雄鼠40只(每组10只)处死,称量生殖腺重量,计数睾丸每日生精量和附睾精子数。[结果]孕鼠胚胎毒性指标中仅高剂量组活胎比低于中剂量组和对照组(P<0.05);各剂量组分娩孕鼠的空孕率、妊娠天数、产仔数、平均活产数、仔鼠性别比与对照组相比无差异(P>0.05)。各剂量组仔鼠体重增长与对照组一致(P>0.05);高剂量组仔鼠出生第一天尾长比对照组长(P>0.05);雌性仔鼠的卵巢脏器系数与混配农药剂量之间存在剂量-效应关系(rs=0.3144,P=0.0172);各剂量组雄鼠睾丸每日精子生成量和附睾精子数与对照组相比无差异(P>0.05)。[结论]妊娠期甲基对硫磷和氯氰菊酯混配染毒,对母鼠有一定的胚胎毒性,并对仔鼠生长发育有轻微的影响。     

出生前暴露甲基对硫磷与氯氰菊酯混配农药对大鼠子代神经行为毒性的影响

[目的]探讨出生前甲基对硫磷与氯氰菊酯混配染毒,对大鼠子代神经行为发育的影响. [方法]48只Wistar孕鼠随机分为4组,于妊娠第1～15天用农药甲基对硫磷与氯氰菊酯进行连续灌胃染毒,对照组采用溶剂灌胃.甲基对硫磷剂量分别为:0,0.0230,0.0725,0.2300mg/kg体重;氯氰菊酯剂量分别为0,0.8000,2.5265,8.0000mg/kg体重.甲基对硫磷与氯氰菊酯采用等毒性混配,即分别为:0、1/300 LD50、1/95 LD501/30LD250,对349只仔鼠进行早期神经行为发育指标的测试;对64只仔鼠进行Morris水迷宫空间学习和记忆能力的测试. [结果]仔鼠断崖回避达标率在出生的第5、6天,高、中剂量组低于对照组(P＜0.05);视觉定位达标率在出生的第16天下午,高、低剂量组低于对照组(P＜0.05) Morris水迷宫实验测试指标,各剂量组与对照组差别无显著性(P＞0.05). [结论]大鼠孕期暴露于甲基对硫磷与氯氰菊酯混配农药,对仔鼠的神经行为发育可产生一定的影响.     

氯氰菊酯和甲基对硫磷混配对大鼠内分泌和免疫系统的影响——Ⅰ.剂量-效应关系

目的探讨农药氯氰菊酯(Cyp)和甲基对硫磷(MP)混配对大鼠生殖激素、甲状腺激素和免疫功能的影响及其剂量-效应关系。方法健康2月龄Wistar大鼠80只,随机分为4组,氯氰菊酯和甲基对硫磷剂量分别为(0、1/600、1/135和1/30)LD50混配,即Cyp0·0、0·4、1·8和8·0mg/kg bw+MP0·0、0·0115、0·0518和0·2300mg/kg bw;对照组用色拉油,隔日对大鼠灌胃1次,共30天。测量大鼠体重增长,称量脏器湿重;用放射免疫法测定血清生殖激素指标促黄体生成激素(LH)、促卵泡成熟激素(FSH)、雌二醇(E2)和睾酮(T);甲状腺激素指标(T3、T4和TSH),以及免疫指标IgG和IgA;取血测定淋巴细胞转化率、中性粒细胞吞噬率。结果未观察到2种农药混配对大鼠体重增长的影响;肾上腺相对重量各剂量组比对照组增加(P<0·05)。血清FSH和E2水平中、高剂量组比对照组升高(P<0·05);血清TSH含量随混配农药剂量升高有上升趋势(rs=0·327,P=0·004)。淋巴细胞转化率各剂量组比对照组显著降低(P<0·01),中性粒细胞吞噬率各剂量组比对照组升高(P<0·01),血清IgG水平中、高剂量组比对照组显著降低(P<0·01);IgA水平雌鼠中、高剂量组比对照组升高(P<0·01),而雄鼠低剂量组比对照组降低(P<0·05)。以上改变均呈现剂量-效应关系。结论氯氰菊酯与甲基对硫磷混配可干扰大鼠生殖激素和免疫系统,尤其是使雌二醇水平明显增高。     

哺乳期氯氰菊酯暴露对断乳期雄性小鼠生殖内分泌的影响

目的 探讨哺乳期母鼠接触氯氰菊酯对断乳期雄性子代小鼠生殖内分泌的损害作用,为研究氯氰菊酯的生殖发育毒作用提供理论依据.方法 将21只健康清洁级ICR孕鼠随机分为溶剂对照组(玉米油)、低剂量(6.25 mg/kg)和高剂量氯氰菊酯染毒组(25 mg/kg),每组7只.分娩后第1天,母鼠以灌胃方式进行染毒,每天1次,染毒至分娩后第21天.染毒后,每组随机取雄性仔鼠15只,称重,剖杀取睾丸,称重睾丸并计算脏器系数.采用放免法检测血清、睾丸组织睾酮(T)和血清雌二醇(E2)水平.取小鼠的同侧睾丸,HE染色后进行组织病理学观察.采用TUNEL法检测睾丸细胞凋亡情况.结果 与溶剂对照组相比,高、低剂量氯氰菊酯染毒组雄性仔鼠体重、睾丸重量和睾丸系数较低,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).与溶剂对照组相比,高剂量氯氰菊酯染毒组雄性仔鼠血清T水平较低,差异有统计学意义(P＜0.01).与低剂量氯氰菊酯染毒组比较,高剂量氯氰菊酯染毒组雄性仔鼠血清T水平较低,差异有统计学意义(P＜0.05).随着氯氰菊酯染毒剂量的升高,血清和睾丸组织T水平均呈下降趋势.各染毒组雄性仔鼠血清E2和睾丸T水平间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).组织病理学结果显示,处理组仔鼠睾丸生精细胞层减少,管腔内径增大,细胞相对稀疏,且排列较紊乱,但睾丸细胞凋亡无明显影响.结论 哺乳期母鼠接触氯氰菊酯对断乳期雄性子代小鼠生殖内分泌有明显损害作用.     

出生前氯氰菊酯与甲基对硫磷暴露对大鼠脑细胞DNA损伤的探讨

目的探讨大鼠出生前暴露于农药氯氰菊酯和甲基对硫磷混配对胎鼠和子鼠脑细胞DNA的毒性效应。方法48只Wistar大鼠在怀孕第1~15天每日一次采用甲基对硫磷、氯氰菊酯混配农药灌胃,1个对照组和3个暴露组,剂量分别为0、(0.0230+0.8000)、(0.0725+2.5265)和(0.2300+8.0000)mg/kgbw,相当于(0、1/300、1/95和1/30)LD50。分别取24只孕16天胎鼠大脑和24只出生后30天龄子鼠大脑,采用单细胞凝胶电泳技术分析脑细胞DNA的损伤。结果甲基对硫磷和氯氰菊酯混配在中、高剂量水平可明显引起妊娠16天胎鼠脑细胞DNA的断裂(P<0.05),并存在明显的剂量-反应关系(r=0.836,P=0.000)。在高剂量水平可引起出生后30天子鼠脑细胞DNA损伤的断裂(P<0.05);子鼠脑细胞DNA损伤程度比胎鼠减轻(F=15.81,P<0.05)。结论大鼠出生前暴露于甲基对硫磷和氯氰菊酯混配可引起神经细胞DNA链断裂损伤,呈现剂量-反应关系,在较低剂量水平DNA损伤能够被修复,而在较高剂量水平DNA损伤不能够被修复。     

氯氰菊酯和甲基对硫磷混配对大鼠内分泌和免疫系统的影响——Ⅱ.联合作用

目的 探讨农药氯氰菊酯(Cyp)和甲基对硫磷(MP)混配对大鼠生殖激素、甲状腺激素和免疫功能的联合作用.方法 健康2月龄Wistar大鼠80只,按3×2析因设计随机分为8组(雌雄各4组).以1/30LD50剂量隔日灌胃1次,即0,Cyp 8.0mg/kg bw,MP 0.23mg/kg bw,Cyp 8.0+MP 0.23mg/kg bw,连续30天,对照组用色拉油.测量大鼠体重增长,脏器湿重;用放射免疫法测定血清生殖激素指标促黄体生成激素(LH)、促卵泡成熟激素(FSH)、雌二醇(E2)和睾酮(T);甲状腺激素指标(T3、T4和TSH);以及免疫指标IgG和IgA,取血测定淋巴细胞转化率、中性粒细胞吞噬率.结果 氯氰菊酯和甲基对硫磷混配对大多数指标为相加作用,但对卵巢和肾脏重量、淋巴细胞转化率和血清IgA为拮抗作用;对雌二醇的联合作用则有性别差异对雌鼠为协同作用,两种农药能分别使雌鼠血清雌二醇升高1.44倍或1.21倍;而对雄鼠则为相加作用,氯氰菊酯可使雄鼠E2值增加64.64%.结论 氯氰菊酯和甲基对硫磷混配可对大鼠生殖激素、甲状腺激素和免疫功能产生联合作用,雌二醇是较敏感的指标.     

母鼠混配农药暴露对仔鼠大脑NMDA受体亚单位NR1表达的影响

[目的]探讨母鼠暴露甲基对硫磷与氯氰菊酯混配农药对仔鼠大脑NMDA受体亚单位NR1表达的影响。[方法]将48只妊娠Wistar大鼠随机分为高、中、低3个剂量组和1个对照组，于妊娠第1～15天用甲基对硫磷与氯氰菊酯等毒性混配液进行连续灌胃染毒，剂量分别为1／30 LD50、1／95LD50、1／300 LD50，对照组采用食用油灌胃。在仔鼠出生后7、14、21、28天龄时分别从各组中随机抽取5只，共80只动物作为观察对象。采用免疫组化方法测定大脑皮质内侧、皮质外侧、梨状皮质、中脑黑质网状结构、海马（CA1、CA3、DG区）的NR1受体表达。[结果]在大脑皮质外侧，中、高剂量组21、28天龄仔鼠的NR1受体蛋白表达比对照组降低（P〈0．05）。在中脑高剂量组21天龄仔鼠的NR1受体表达高于对照组（P〈0．05）。在海马CA1区，高剂量组14天龄仔鼠NR1受体的表达低于低剂量组（P〈0．01），高剂量组21天龄仔鼠则低于对照组和低剂量组（P〈0．01）；随着该混配农药剂量水平的升高，NR1受体蛋白表达显著下降，具有剂量-效应关系（r=-0．377，P〈0．01）。海马CA3区低剂量组14天龄仔鼠的NR1受体阳性细胞表达数高于对照组（P〈0．05），其他部位的NR1受体蛋白表达无改变（P〉0．05）。[结论]母鼠甲基对硫磷和氯氰菊酯混配农药暴露可干扰仔鼠脑NR1受体的正常表达过程，使大脑部分区域NR1受体表达下调，延迟受体蛋白的表达高峰。     

氯氰菊酯和甲基对硫磷混配对大鼠内分泌和免疫系统的影响——II.联合作用

目的探讨农药氯氰菊酯(Cyp)和甲基对硫磷(MP)混配对大鼠生殖激素、甲状腺激素和免疫功能的联合作用。方法健康2月龄Wistar大鼠80只,按3×2析因设计随机分为8组(雌雄各4组)。以1/30LD50剂量隔日灌胃1次,即0,Cyp8·0mg/kgbw,MP0·23mg/kgbw,Cyp8·0+MP0·23mg/kgbw,连续30天,对照组用色拉油。测量大鼠体重增长,脏器湿重;用放射免疫法测定血清生殖激素指标促黄体生成激素(LH)、促卵泡成熟激素(FSH)、雌二醇(E2)和睾酮(T);甲状腺激素指标(T3、T4和TSH);以及免疫指标IgG和IgA,取血测定淋巴细胞转化率、中性粒细胞吞噬率。结果氯氰菊酯和甲基对硫磷混配对大多数指标为相加作用,但对卵巢和肾脏重量、淋巴细胞转化率和血清IgA为拮抗作用;对雌二醇的联合作用则有性别差异:对雌鼠为协同作用,两种农药能分别使雌鼠血清雌二醇升高1·44倍或1·21倍;而对雄鼠则为相加作用,氯氰菊酯可使雄鼠E2值增加64·64%。结论氯氰菊酯和甲基对硫磷混配可对大鼠生殖激素、甲状腺激素和免疫功能产生联合作用,雌二醇是较敏感的指标。     

哺乳期母鼠接触氯氰菊酯对雄性仔鼠睾酮合成的影响

目的探讨哺乳期母鼠接触氯氰菊酯对雄性仔鼠断乳期及成年性激素合成的影响。方法将140只刚出生ICR小鼠随机分为氯氰菊酯染毒组和溶剂对照组,从分娩后第一天,染毒组每天给予母鼠25mg/kg氯氰菊酯灌胃染毒,直至分娩后第21天仔鼠断奶,对照组给予等体积玉米油灌胃。分别于出生后21天及70天时,每组取15只雄性仔鼠,放免法检测血清和睾丸组织睾酮(T)和雌二醇(E2)水平,用RT-PCR方法检测睾丸中StAR和睾酮合成酶mRNA表达水平,用Western blot检测睾丸中StAR和睾酮合成酶的蛋白表达水平。结果染毒组断乳期雄性仔鼠血清睾酮显著降低(P<0.01)及睾丸睾酮水平降低(P<0.05),对雌激素水平没有影响(P>0.05),且哺乳期氯氰菊酯暴露组雄性仔鼠睾丸中P450scc的mRNA水平与蛋白表达水平较对照组均显著降低(P<0.01),StAR、17β-HSD和P450 17α的mRNA表达水平较对照组有一定降低(P<0.05),但其蛋白表达水平几乎未受影响。哺乳期母鼠氯氰菊酯暴露对成年雄性仔鼠的血清睾酮、睾丸睾酮水平及睾丸中StAR和睾酮合成酶的mRNA与蛋白表达水平几乎没有影响(P>0.05)。结论哺乳期氯氰菊酯暴露可能主要通过下调睾丸中P450scc的mRNA与蛋白表达而影响21天雄性仔鼠睾丸中睾酮的合成。     

妊哺期沥青烟染毒对仔鼠海马脏器系数及学习记忆的影响

目的 了解研究母鼠妊娠期和哺乳期沥青烟染毒对仔鼠学习记忆和海马组织脏器系数的影响.方法 昆明种成年母鼠40只,随机分成高、中、低剂量组和对照组,每组10只.母鼠自孕第1d置于1 m3静式染毒柜内,开始沥青烟染毒2 h/d,至仔鼠出生后21 d断乳.染毒剂量为165( LD0)、82( 1/2 LD0)、41( 1/4 LD0) mg/m3.分别于出生后第7、14、21 d测定仔鼠体重和海马组织重量并计算其脏器系数;21 d用Y型迷宫测定仔鼠学习记忆能力T1、T2、T3(以仔鼠连续10次测试中成功9次即为获得记忆,以总测试次数减10得到的差值记为T1,3d后再用同样方法复测,结果记为T2,以公式(T1 -T2)/T1×100％计算记忆保持率记为T3.测定或检查时每窝随机取1只仔鼠,每组取10只.结果 高剂量染毒组仔鼠21 d体重显著低于对照组(P＜0.05);出生不同时间点高剂量染毒组仔鼠海马组织重量及其脏器系数显著高于对照组(P＜0.01);Y型迷宫实验结果显示,仔鼠出生后各时间点中、高剂量组T1、T2高于对照组,T3低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.001).结论 妊娠期和哺乳期母体高剂量沥青烟染毒可减缓仔鼠体重的正常增长;同时可影响仔鼠海马组织的正常发育并降低其学习记忆能力.     

孕期二苯基甲烷二异氰酸酯暴露对子代雄性小鼠性成熟后睾丸组织能量代谢功能的影响

目的探讨孕期二苯基甲烷二异氰酸酯(MDI)暴露对子代雄性小鼠性成熟后睾丸组织能量代谢功能的影响。方法将清洁级健康昆明种孕小鼠16只按体重随机分为高剂量(1/8LD50)、中剂量(1/16LD50)、低剂量(1/32LD50)MDI染毒组和溶剂对照组(玉米油),每组4只。于妊娠第14天开始,每日灌胃染毒,灌胃剂量为5ml/kg,持续至母鼠自然分娩。记录孕鼠染毒期间体重增量和分娩时间。待仔鼠8周龄(性成熟)时,分离双侧睾丸,称重,并计算睾丸的脏器系数。并检测睾丸组织中琥珀酸脱氢酶(SDH)、Na-K-ATP酶、Ca-Mg-ATP酶和总ATP酶的活力以及蛋白的含量。结果各组孕鼠分娩时间和体重增量间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。与高剂量MDI染毒组比较,中、低剂量MDI染毒组和溶剂对照组睾丸系数较高,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。与溶剂对照组比较,高、中、低剂量MDI染毒组SDH、Na-K-ATPase、Ca-Mg-ATPase以及总ATPase酶活力均下降,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05);且随着染毒剂量的增高,SDH、Na-K-ATPase、Ca-Mg-ATPase...     

低剂量毒死蜱和氯氰菊酯联合染毒对雌性大鼠生殖发育的影响

目的 观察低剂量毒死蜱(氯吡硫磷)和氯氰菊酯联合染毒对雌性大鼠生育功能的影响。 方法 健康Wistar大鼠雌雄按2∶1合笼,将孕鼠分为对照组、毒死蜱组、氯氰菊酯组和联合染毒组等4组,每组8只。按照1 ml/kg量灌胃,毒死蜱组剂量为1.6 mg/kg,氯氰菊酯组剂量为2.5 mg/kg,联合染毒组给药毒死蜱1.6 mg/kg+氯氰菊酯2.5 mg/kg。从孕1~孕8 d染毒,孕19 d,处死孕鼠,记录黄体数和总着床数,活胎的体重和身长,并观察活胎外观是否有畸形。分离胎盘并记录胎盘重量,测定大鼠全血的乙酰胆碱酯酶(AchE)的活力,免疫组织化学检测P450aromA。 结果 孕第19 d,联合染毒组孕鼠体质量与对照组比较明显降低(P<0.05);各组孕鼠黄体数、总着床数、死胎率、胎仔性别比例和胎仔身长与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。联合染毒组胎盘质量较对照组显著降低(P<0.05)。染毒各组活胎仔体质量较对照组明显降低(P<0.05)。联合染毒组孕鼠全血中AChE活力较对照组显著降低(P<0.05)。单独染毒组胎盘P450aromA蛋白表达与对照组相似,联合染毒组胎盘P450aromA蛋白表达显著高于对照组(P<0.05)。 结论 低剂量毒死蜱和氯氰菊酯联合染毒产生一定的胚胎毒性,造成仔鼠发育迟缓,并引起了孕鼠AchE的下降和胎盘P450aromA蛋白表达的增强。     

孕期三丁基氯化锡染毒对子代雄性大鼠发育及性激素的影响

目的 探讨孕期三丁基氯化锡(TBTC)暴露对子代雄性大鼠发育及性激素的影响.方法 将健康成年SPF级妊娠Wistar大鼠随机分为5.0、2.5、1.0 mg/kg TBTC染毒组和阴性对照组(玉米油),每组4只.从妊娠第12天起,采用经口灌胃方式进行染毒,每天1次,直至妊娠第20天,灌胃剂量为5.0 ml/kg.出生后第70天,每组随机抽取10只雄性仔鼠,称重后断头取血,分离双侧睾丸及附睾组织,称重,计算睾丸和附睾的脏器系数.测定血清中睾酮(T)浓度、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)水平.结果 各TBTC染毒组孕鼠产仔数及雌雄比例间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).与对照组比较,2.5和5.0 mg/kg组雄性仔鼠断乳后体重降低,睾丸的脏器系数升高,差异均有统计学意义(P＜0.01).各TBTC染毒组雄性仔鼠附睾脏器系数间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).各TBTC染毒组雄性仔鼠血清中T、LH、FSH浓度间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 在妊娠中后期TBTC染毒对子代雄性大鼠具有内分泌干扰作用,影响其生长发育,但暴露尚未引起雄性仔鼠血清中性激素的变化.

Abstract：

Objective To explore the effects of tributyltin chloride (TBTC) exposure during pregnancy on development and sex hormone level of male offspring Wistar rats. Methods The healthy pregnant Wistar rats were randomly divided into 4 groups, 4 in each group,they were given doses of TBTC (5.0,2.5,1.0 mg/kg) by gavage from days 12-20 of gestation. On postnatal day (PND) 70,10 male offspring rats were randomly selected in each group and sacrificed, the blood samples were collected. The testis and epididymis were weighed for account of organic coefficient. The concentration of testosterone (T), luteinizing hormone (LH), follicle stimulating hormone (FSH) in serum was measured. Results There were no significant differences in number and the sex ratio of offspring rats between the control group and the treatments groups (P>0.05). Compared with the control group, an obvious retarded development was observed from PND21-70 and the viscera coefficient of testis were increased significantly in 2.5 or 5.0 mg/(kg·d) group (P<0.01). No significant difference was observed in serum LH,FSH level. Conclusion TBTC exposure during pregnancy can cause retarded development and increase of organic coefficient of testis of male offspring rats.     

镉、铅、乐果和对硫磷雌激素样联合作用初步研究

目的探讨镉、铅、乐果和对硫磷对未成年雌性小鼠雌激素样联合作用。方法选择断乳后17天龄SPF级雌性昆明小鼠192只,体重(25±2)g,随机分为16个组:空白对照组,氯化镉、醋酸铅、乐果和对硫磷组单独作用12个组,联合作用3个组。给药浓度为氯化镉、醋酸铅、乐果和对硫磷LD50(分别为9.3、140、45和3mg/kg)的1/20、1/50及1/100,给药体积为10ml/kg BW,每天腹腔注射,连续3天。实验第4天,处死小鼠,测量子宫脏器系数、子宫上皮细胞高度及子宫雌激素受体(ER)表达。结果氯化镉1/50LD50、醋酸铅1/50LD50及联合作用1/100LD50剂量组能显著改变子宫脏器系数;氯化镉各剂量组、醋酸铅1/20LD50剂量组和联合作用的1/20LD50、1/50LD50剂量组可引起未成年雌性小鼠子宫上皮细胞高度的显著增加,即引起子宫内膜的明显增生;除氯化镉和乐果的1/20LD50、1/50LD50剂量组其他所有实验组与空白对照比较均能显著增强雌激素受体(ER)的表达。结论镉、铅、乐果和对硫磷对未成年雌性小鼠雌激素样联合作用与单因素作用存在显著差异,且在不同剂量不同指标中表现不尽相同。