脂蛋白（a）与巨噬细胞内脂质聚积关系的研究

目的：泡沫细胞形成是早期动脉粥样斑块的典型特征。本文通过对脂蛋白(a)[lipoprotein(a),Lp(a)]与巨噬细胞的相互作用进行研究，探讨Lp(a)与泡沫细胞形成的关系。方法：经生物素—亲和素—酶联法到定不同浓度生物素标记的天然及氧化型Lp(a)与小鼠腹腔巨噬细胞表面的结合量。天然及氧化型Lp(a)与小鼠腹腔巨噬细胞共同孵育后，酶法测定细胞内胆固醇及胆固醇酯含量的变化。结果：天然的Lp(a)能以一定的亲合力、可饱和的与巨噬细胞表面结合，氧化修饰后Lp(a)与巨噬细胞的结合量显著增加。天然及氧化型Lp(a)均能引起巨噬细胞的过量摄取，导致细胞内胆固醇含量增加，其中以氧化型Lp(a)的作用更为显著。与氧化型Lp(a)孵育后，巨噬细胞内胆固醇含量的增加是与天然Lp(a)孵育后的2．5倍，而胆固醇酯的含量增加是与天然Lp(a)孵育后的6．1倍。结论：Lp(a)能与巨噬细胞表面特异性结合，并促使细胞对其吞噬、降解；且巨噬细胞对氧化型Lp(a)的结合、摄取量显著增加。     

氧化修饰引起脂蛋白(a)结构和生化特性变化

目的 :研究体外丙二醛 ( MDA)、铜离子 ( Cu2 +)氧化修饰脂蛋白 ( a) [L p( a) ]结构和生物学性质的变化。　 方法与结果 :氧化修饰 L a( a)过氧化程度增高 ,负电荷增加 ,易被巨噬细胞——清道夫受体识别和摄取。MDA修饰 Lp( a)出现新的 MDA- L DL位点 ;同纤维蛋白溶酶原 ( Pg)竞争抑制试验显示氧化、修饰 Lp( a)同 Pg同源性增加。　 结论 :提示载脂蛋白 ( a)状态与动脉粥样硬化的病理过程有关     

老年2型糖尿病血管并发症与脂代谢关系的探讨

目的 探讨老年2型糖尿病患者血管并发症与血脂、载脂蛋白、脂蛋白（a)之间的关系。方法 将老年2型糖尿病患者分为62例无血管并发症组（Ⅱ组）及58例有血管并发症组（I组），对两组病例进行了血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL－C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL－C）、载脂蛋白AI（ApoAI)、载脂蛋白B（ApoB)及脂蛋白（a)[Lp(a)]的测定。结果 I组与Ⅱ组比较：TC、TG、LDL－C、ApoB、Lp(a)水平均显著增高，而HDL－C和ApoAI明显降低。结论 老年2型糖尿病患者由于体内胰岛素相对不足和胰岛素抵抗，使血脂、载脂蛋白、脂蛋白浓度和组成成分发生变化及功能发生异常，从而促进动脉粥样硬化，伴随着血管并发症的发生。因此，临床上对老年2型糖尿病患者进行调脂治疗是减少血管并发症的重要手段之一。     

脂蛋白(a)与动脉粥样硬化相关性的研究进展

载脂蛋白（a）Lp（a）是挪威遗传学家Berg1963年研究β-脂蛋白变异时从血浆中分离出来的一种与低密度脂蛋白（LDL）相似的蛋白质，由载脂蛋白（a）[apo（a）]和apoB经二硫键连接而成。apo（a）是具有多种多态性，是Lp（a）的特征性糖蛋白成分与血浆Lp（a）水平、动脉粥样性疾病的发生发展密切相关。目前关于Lp（a）报道很多，本文就Lp（a）与动脉粥样硬化的相关性作一综述。     

琼脂糖凝胶电泳法测定血清中各种脂蛋白胆固醇

目的：对琼脂糖凝胶电脉法同时测定血清极密度脂蛋白（VLDL）,低密度脂蛋白（LDL）,高密度脂蛋白（HDL）和脂蛋白（a)Lp(a）的胆固 即VLDL－C,LDL－C,HDL－C和Lp(a)-C含量的方法进行评价。方法：采用Helena REP全自动快速电泳系统分离血清VLDL,LDL,HDL和Lp(a),然后结合胆固醇染色法同时测定VLDL－C,LDL－C,HDL－C和Lp(a)-C的含量,分别了该法的精密度,准确度和干扰因素,并将该法与传统方法如测定HDL－C的磷钨酸－镁沉淀法（PTA－Mg2 )法,测定LDL－C的聚乙烯硫酸沉淀法（PVS法）及测定Lp(a)的免疫秀射比浊法（ITA法）进行比较,结果：电泳法测定VLDL－C,LDL－C和HLD－C批内CV分别为5．16％－7．46％,1.26％－3．28%,3．78－5．86％;批间CV分别为8．35％－11．25％,2．78％－4．08％,4．23％－6．36％。检测线性范围总胆固醇为94．3％和89．6。电泳法与传统法测定LDL－C,HDL－C的相关系数（r)分别为0．9609,0．9557,电泳法测定Lp(a)-C与ITA法测定Lq(a)的r为9235,以该法检测北京地区98例健康人,HDL－C,VLDL－C,LDL－C,Lp(a)－C参考范围分别为0．95－2．10mmol/L,0.07-0.46mmol/L,1.77-2.87mmol/L,0-0.22mmol/L。结论：电泳法测定值与传统法一致,电泳法操作简便,快速经济,可同时测定4种脂蛋白胆固醇,适合于临床常规及研究使用。     

Lp(a)对THP-1源性巨噬细胞基质金属蛋白酶和基质金属蛋白酶抑制剂表达和活性的影响

目的通过研究脂蛋白a对巨噬细胞源性基质金属蛋白酶（MMPs）和基质金属蛋白酶内源性组织拟制剂（TIMPs）表达的调节作用，探讨脂蛋白a促动脉粥样硬化的机制。方法利用从新鲜混合血浆经超速离心和亲和层析纯化的脂蛋白a刺激人单核细胞白血病THp01细胞经豆蔻酰佛波醇乙酯诱导24h转化而成的巨噬细胞。孵育10h和36h后收集细胞裂解液和条件培养基分别进行MMPs／TIMPs mRNA和蛋白检测及明胶酶谱分析MMPs活性。结果免疫印迹结果显示脂蛋白a可使巨噬细胞培养基中MMP-1、MMP-2、MMp09、MT1-MMP水平明显上调．其中MMP-2和MT1-MMP的活性形式明显增加；而其抑制剂TIMP-1、TIMP-2水平则明显减少，以前者的剂量效应最为明显。明胶酶谱分析表明条件培养基中MMP-9活性增强。逆转录聚合酶链式反应结果显示，MMP-1、MMP-2、MMP-9mRNA水平随Lp（a）刺激增强而增加，TIMP-1 mRNA水平则梯度降低，而MT1-MMP、TIMP-2的mRNA水平未见明显改变。结论研究发现Lp（a）可促进巨噬细胞表达多种MMPs，同时抑制TIMPs的表达，由此所致的MMPs／TIMPs表达及活性失衡最终可致基质过度降解，在整体情况下则可能促进斑块进展成不稳定斑块并破裂。为阐明Lp（a）的促动脉粥样硬化机制提供了新的线索。     

脂蛋白（a）和低密度脂蛋白对小鼠腹腔巨噬细胞内脂质的影响

将脂蛋白与巨大噬细胞一起培养（每亳升培养液中含脂蛋白胆固醇200μg）24h后用薄层层析法测定巨噬细胞内胆固醇酯（CE）的含量。结果表明，天然脂蛋白（a）对巨大噬细胞内CE的形成影响不明显（0.9μg cellpro,p＞0.05），LDL对巨大噬细胞内CE的形成有促进作用（4.0μg/mg cell pro,p＜0.05）,LP(a)与LDL的混合物能明显地促进巨大噬细胞内CE的形成（13.9mg cell pro ,p＜0.01），其增加量是LDL的3.48倍。     

急性冠脉综合征血脂特点与脂蛋白a的相关陛

目的研究急性冠脉综合征（ACS）患者的血脂特点及脂蛋白a（Lp（a））的相关性。方法对85例ACS患者的总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）、载脂蛋白A—I（ApoA）、载脂蛋白B（ApoB）、Lp（a）的含量进行测定,并与40例稳定性心绞痛（SA）患者比较,分析Lp（a）与血脂因素的相关性。结果ACS组TC、TG、LDL—C明显升高,血清Lp（a）浓度高于SA组（P〈0．001）.ACS组血清Lp（a）水平与血脂各指标无明显相关性（P〉0．10）。结论急性冠脉综合征存在血脂代谢紊乱,但Lp（a）含量与血脂因素没有相关性。     

神经节苷脂GM3对小鼠巨噬细胞脂质含量的影响

目的：探讨了苷脂GM3对小鼠巨噬细胞（MΦ）的脂质含量的影响。方法：采用45g／L无菌可溶性淀粉溶液刺激后，收集昆明种小鼠腹腔MΦ，经体外培养分为6组，应用常规酶法观察各组MΦ总胆固醇、游离胆固醇、胆固醇酯和刺激甘油三酯的变化。结果：GM3与低密度脂蛋白（LDL）同时存在，可促进MΦ对LDL的吸收，提高MΦ的脂质含量，而LDL、GM3单独存在时，不能显著升高MΦ内各种脂质含量。结论：GM3可能通过激活MΦ产生多种生物活性因子氧化LDL或通过GM3对LDL的非氧化修饰，促进MΦ对LDL的吸收，引起脂质堆积。     

高脂蛋白(a)血症致冠心病的研究进展

高脂蛋白(a)血症[Lp(a)]是否为冠心病的独立危险因子,Lp(a)与冠状动脉粥样硬化的关系至今还存在争议,但是大量研究表明,Lp(a)通过干扰脂质代谢与纤溶系统参与动脉粥样硬化(AS)和血栓形成,普遍以为高脂蛋白(a)[Lp(a)]血症是冠心病的独立危险因子。1脂蛋白(a)的生物学特征1963年,挪威遗传学家Berg在研究低密度脂蛋白(LDL)的遗传变异式时,偶然发现了一种特殊的抗原物质即Lp(a),Lp(a)与LDL相似,当时被认为是LDL的遗传变型,其含有二类载脂蛋白:ApoB100和Apo(a),Lp(a)与LDL不同之处在于,其除含ApoB100外还含有Apo(a),他们能通过1~2个…     

前列腺素E_2对巨噬细胞吞噬糖基化低密度脂蛋白作用的影响

目的 :观察非酶性糖基化低密度脂蛋白及前列腺素 E2 对体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞的作用。方法 :使糖基化低密度脂蛋白作用于体外培养的巨噬细胞 ,检测大剂量前列腺素 E2 作用后对细胞内过氧化脂质和脂滴含量的影响。结果 :巨噬细胞对糖基化低密度脂蛋白的吞噬能力加强 ,并表现出过氧化脂质含量增加 ,前列腺素 E2 对此有一定的抑制作用。结论 :初步揭示了糖尿病晚期动脉粥样硬化发生时泡沫细胞形成的机制 ,同时显示出大剂量前列腺素 E2 对此有一定抑制作用     

Role of VLDL receptor in the process of foam cell formation

Summary The role of very low density lipoprotein receptor (LVLDR) in the process of foam cell formation was investigated. After the primary cultured mouse peritoneal macrophages were incubated with VLDL, β-VLDL or low density lipoprotein (LDL), respectively for 24 h and 48 h, foam cells formation was identified by oil red O staining and cellular contents of triglyceride (TG) and total cholesterol (TC) were determined. The mRNA levels of LDLR, LDLR related protein (LRP) and VLDLR were detected by semi-quantitative RT-PCR. The results demonstrated that VLDL, β-VLDL and LDL could increase the contents of TG and TC in macrophages. Cells treated with VLDL or β-VLDL showed markedly increased expression of VLDLR and decreased expression of LDLR, whereas LRP was up-regulated slightly. For identifying the effect of VLDL receptor on cellular lipid accumulation, ldl-A7-VR cells, which expresses VLDLR and trace amount of LRP without functional LDLR, was used to incubate with lipoproteins for further examination. The results elucidated that the uptake of triglyceride-rich lipoprotein mediated by VLDLR plays an important role in accumulation of lipid and the formation of foam cells. QU Shen, male, born in 1954, Professor This project was supported by a grant from National Natural Sciences Foundation of China (No. 39970307).     

The effects of radix Salviae miltiorrhizae on lipid accumulation of peroxidized low density lipoprotein in mouse peritoneal macrophages--lipid analysis and morphological studies.

Mouse peritoneal macrophages were incubated in DMEM with pox-LDL and Rradix Salviae Miltiorrhizae (RSM) to investigate the effects of RSM on the internalization of peroxidized low density lipoprotein (pox-LDL) by using lipid analysis and electron microscopy. Lipid peroxide (LPO) concentrations were increased slightly in the medium after incubation of macrophages with normal LDL (n-LDL), while decreased significantly in the media after incubation of macrophages with pox-LDL. In the three groups with pox-LDL, it could be found that there was a dose-dependent decrease of concentrations of LPO and total cholesterol (TCH) in the two RSM groups, and the decrease in the two RSM groups was much greater than in the group without RSM. RSM accelerated a more decrease of LPO than cholesterol contents in the media containing pox-LDL. The ultrastructural studies also showed that RSM induced the accumulation of lipid droplets in the cytoplasm of mouse peritoneal macrophages. The results suggested that RSM could accelerate the phagocytosis and degradation of pox-LDL by macrophages.     

β-VLDL对巨噬细胞胆固醇含量及ACAT活性的影响

本文用含β-VLDL 的培养基体外培养小白鼠腹腔巨噬细胞,结果表明:β-VLDL 使细胞内胆固醇酯含量增加10倍;使胞内 ACAT 活性增加5倍.此提示β-VLDL 与动脉粥样硬化中泡沫细胞的形成密切相关.     

蔗糖酯-磷脂脂质体对家兔腹腔巨噬细胞膜磷脂含量的影响

目的:观察蔗糖酯与磷脂组成的脂质体对巨噬细胞膜磷脂含量变化的影响。方法:按不同比例将乙酸异丁酸蔗糖酯与卵磷脂、鞘磷脂和胆固醇混合,溶于乙醚中,然后注入pH7.2的PBS缓冲液中,制成卵磷脂脂质体及蔗糖酯-卵磷脂脂质体。用肝素沉淀法分离血浆中的LDL,再用铜诱导法进行氧化修饰。将分离纯化的家兔腹腔巨噬细胞与Ox-LDL共同孵育24h后,加入六种脂质体,继续孵育12～24h;此外,在Ox-LDL与巨噬细胞孵育的同时加入脂质体,共同培养24～36h,结束实验,用钼蓝比色法检测细胞膜磷脂。结果:刚纯化的家兔腹腔巨噬细胞的膜磷脂含量平均为(0.429±0.084)mg/百万个细胞,经与Ox-LDL共同孵育24h后,其细胞膜磷脂含量增加到(0.717±0.045)mg/百万个细胞(studentt=10.9119,P<0.01)。在巨噬细胞从Ox-LDL中充分摄取了胆固醇后,加入六种脂质体作用12、24h后,各组细胞的膜磷脂均低于荷脂细胞(或泡沫细胞)的膜磷脂含量(F值分别为2.9252、7.1916,P<0.05),而与刚纯化的巨噬细胞膜磷脂含量差异无统计学意义(F值分别为0.3444、0.2000,P>0.05);巨噬细胞与各种脂质体及Ox-LDL共同孵育24～36h后,经两种卵磷脂脂质体作用过的细胞的膜磷脂含量高于经四种蔗糖酯-卵磷脂脂质体作用过的细胞,其中含鞘磷脂的磷脂脂质体(EPC-I)作用过的细胞,膜磷脂含量虽高于四种蔗糖酯脂质体作用过的细胞,但差异无统计学意义(P>0.05),而不含鞘磷脂的磷脂脂质体(EPC-II)作用过的细胞,膜磷脂含量不仅明显高于四种蔗糖酯脂质体作用过的细胞(P<0.05),而且明显高于荷脂的或泡沫化的巨噬细胞(t值分别为3.7629、3.2399,P<0.01)。结论:巨噬细胞从Ox-LDL中摄取胆固醇的同时,Ox-LDL中的氧化磷脂可能通过弥散作用,使细胞膜的磷脂含量增高;加入脂质体后,可能因细胞膜与脂质体之间出现了氧化磷脂的浓度梯度,促使氧化磷脂向脂质体弥散,从而使细胞膜磷脂的含量降低。在脂质体与巨噬细胞及Ox-LDL共存的情况下,膜材与细胞膜组分相近的卵磷脂脂质体,可能通过融合或/和吞噬等方式使细胞的膜磷脂含量增加;蔗糖酯脂质体可能由于结构差异而不能与细胞膜之间进行类似的磷脂转移。     

氧化低密度脂蛋白循环免疫复合物诱导巨噬细胞胆固醇酯蓄积

目的:探讨氧化、天然低密度脂蛋白循环免疫复合物(Ox -LDL- IC)致动脉粥样硬化作用。　方法:采用人源的氧化、天然LDL与异源的抗载脂蛋白B(apoB)结合制备IC,观察不同浓度的Ox- LDL -IC对小鼠腹腔巨噬细胞胆固醇酯蓄积和泡沫细胞形成的影响。　结果:氧化、天然LDL- IC均可引起巨噬细胞内胆固醇酯大量堆积,其效果强于Ox -LDL(P<0. 001),而且随剂量的增加而升高,并转化为泡沫细胞;而天然LDL、抗apoB处理的巨噬细胞内未见胆固醇酯的堆积。　结论:LDL- IC可导致巨噬细胞转化为泡沫细胞,参与动脉粥样硬化的形成。     

云芝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞NO释放及抗氧化酶活性的影响

为探讨云芝多糖（PSK）预防动脉粥样硬化及防止氧化修饰低密度脂蛋白（O－LDL）对巨噬细胞的过氧化损伤的作用机理，考察了腹腔注射PSK对小鼠腹腔巨噬细胞谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶（SOD）活性及一氧化氮（NO）释放的作用，及脂多糖（LPS）对这一作用的影响。结果显示腹腔注射PSK可以使小鼠腹腔巨噬细胞SeGSHPx酶活性、non－SeGSHPx及SOD活性升高；在LPS作用下可进一步升高上述酶活性，使NO释放量有较大增加。     

Serum Lipoprotein (a) Concentration in Patients with Nephrotic Syndrome and Its Clinical Implication

Serum lipoprotein(a) [Lp(a)] concentration was determined in 42 patients with primary nephrotic syndrome (NS) and the relationships between Lp (a) and plasma lipids, apolipoproteins, serum creatinine (Scr), albumin, urinary proteins (Upro) were also analyzed. The results showed that: (1) serum Lp(a) concentrations in the patients with NS were higher than those in healthy controls;(2) the levels of serum Lp (a) were correlated positively with total cholesterol (TC), low density lipoprotein cholesterol (LDL-C), very low density lipoprotein cholesterol (VLDL-C), apolipoprotein B (Apo-B), Upros (Upro). It is concluded that the NS patients had the potential risk of suffering from coronary artery disease, glomerular sclerosis and thrombosis. The remission of NS may partially decrease the serum Lp(a) levels. Further studies are needed to explore the prevention and treatment of dislipedemia in patients with NS.     

蔗糖酯-磷脂脂质体阻碍家兔腹腔巨噬细胞摄取胆固醇

目的:将蔗糖酯掺入磷脂中制成脂质体,观测利用蔗糖酯包结胆固醇的作用影响胆固醇出入巨噬细胞的效果。方法:按3:3和1.5:3两种摩尔比例将蔗糖酯与卵磷脂混合,然后用乙醚注射法制备蔗糖酯-卵磷脂脂质体,用铜离子诱导法制备氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)。在家兔腹腔巨噬细胞充分摄取ox-LDL并转化成荷脂的或泡沫化的巨噬细胞之后及之前两种情况下,加入制备好的脂质体与之共同孵育,于细胞摄取ox-LDL后脂质体干预12、24h,及摄取ox-LDL前脂质体干预24、36h4个时段结束实验,然后检测细胞内胆固醇含量。结果:家兔腹腔巨噬细胞与ox-LDL共同孵育24h后,其细胞内胆固醇含量较孵育前明显增加(t=7.8353,P<0.01);加入各种脂质体作用12、24h后,各组细胞的细胞内胆固醇含量无明显减少(F值分别为0.2412、0.3145,P>0.05);在细胞充分摄取ox-LDL之前,加入脂质体共同孵育24、36h后,各组细胞内胆固醇含量均无明显增加,都低于荷脂的或泡沫化的巨噬细胞内胆固醇含量(P<0.05),尤以不含鞘磷脂的蔗糖酯-磷脂脂质体处理的细胞为著。结论:蔗糖酯脂质体及磷脂脂质体对于已经充分摄取胆固醇并已转化的荷脂细胞或泡沫细胞,均无促进其胆固醇外流的作用,但脂质体能阻碍巨噬细胞从ox-LDL中摄取胆固醇,且脂质体的组分差异,能影响其阻碍巨噬细胞从ox-LDL中摄取胆固醇的效率。