人巨细胞病毒被膜磷蛋白pp65的检测及其在肾移植受者CMV病诊断中的临床应用

目的 建立一种简便诊断肾移植受者人巨细胞病毒(HCMV)活动性感染的方法.方法 运用催化信号扩增法检测外周血白细胞中的人巨细胞病毒被膜磷蛋白pp65,并与抗HCMV-IgM检测法作比较.结果 检测100例肾移植受者中,HCMVpp65抗原阳性47例,IgM抗体检测阳性41例,pp65抗原阳性细胞数为(71±45)个,2×105个WBC,而有症状的CMV病29例,抗原阳性细胞指数为(83±46)个,2×105个WBC.对照组50名健康人,pp65抗原检测全为阴性.pp65的敏感性、特异性、阳性预测值与阴性预测值分别是100%、74.6%、61.7%和100%.结论 该法敏感、简便,可作为肾移植术后HCMV病的早期诊断并可指导抗病毒治疗.     

外周血白细胞人巨细胞病毒抗原检测及其临床意义

本文使用过氧化物酶抗过氧化物酶(PAP)法,对35例婴儿肝炎综合征患儿外周血白细胞分别进行了人巨细胞病毒(HCMV)前早期抗原(IEA)、早期抗原(EA)及晚期抗原(LA)检测。结果显示20例IEA阳性(20/35)、18例EA阳性(18/35);淋巴细胞、粒细胞、单核细胞均有较高阳性率,而LA阳性率较低(5/15)。5例阳性者恢复期复查,2例检测出HCMV抗原。HCMV IEA、EA检出阳性率明显高于血清抗HCMV IgM、急性期与恢复期双份血清抗HCMV IgG和尿HCMV分离。15例IEA阴性者仅1例抗HCMV IgM阳性,检测证实为巨细胞病毒感染,示其特异性、敏感性均佳,可作为HCMV急性活动性感染的较好诊断方法。     

肾移植受者外周血白细胞CMV抗原阳性细胞数及意义

【目的】探讨肾移植受者外周血白细胞巨细胞病毒(CMV)PP-65抗原阳性细胞数的变化及意义。【方法】用免疫细胞化学法检测外周血白细胞CMV-PP65抗原,术后头3个月每周1次。【结果】273例肾移植受者中124例术后检出CMV-PP65抗原阳性,初次检出CMV-PP65抗原的平均时间为(24.1±11.3)d,每5万白细胞中CMV抗原阳性细胞数均值为7.1±5.8,其中5例CMV抗原阳性细胞数超过10/5万白细胞。无症状性和症状性CMV感染受者初次检出CMV抗原阳性细胞数分别为(6.7±5.6)/5万白细胞、(10.1±9.3)/5万白细胞(P>0.05);峰值水平为(8.1±4.2)/5万白细胞、(26.3±5.7)/5万白细胞(P<0.05);分别有17例(15%)、12例(100%)患者其峰值超过10/5万白细胞(P<0.05)。抗病毒治疗中90例(72.6%)患者CMV抗原阳性细胞数进一步升高。【结论】肾移植受者在CMV感染早期病毒复制能力强,CMV抗原阳性细胞数峰值有助于预测症状性CMV感染。     

急性脱髓鞘脑病患者人巨细胞病毒pp65抗原血症检测的临床意义

目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)在急性脱髓鞘脑病(ADBD)中的病原学作用,并评估HCMV-pp65抗原血症在ADBD活动性HCMV感染早期诊断、抗病毒治疗及疗效判断中的价值。方法采用HCMV单克隆抗体免疫荧光法,对64例ADBD患者的外周血进行HCMV-pp65抗原检测,同时采用金标免疫斑点法检测血清HCMV-IgM,并对检测结果以及抗病毒药物应用与疗效进行分析。结果64例ADBD中HCMV-pp65阳性17例(26.6%),HCMV-IgM阳性8例(12.5%);HCMV-pp65阳性者,应用膦甲酸钠治疗9例,痊愈6例(66.7%),好转3例(33.3%);应用无环鸟苷治疗8例,痊愈2例(25.0%),好转4例(50.0%),无效2例(25.0%)。结论HCMV与ADBD的发生密切相关,HCMV-pp65抗原检测是一种敏感性、特异性强的方法,有助于HCMV感染疾病的早期诊断,指导抗病毒治疗及疗效的评价;膦甲酸钠对HCMV感染所致ADBD效果良好。     

肾移植受者活动性CMV感染的发生状况

目的明确肾移植患者术前CMV感染的发生率和术后活动性CMV感染的发生规律.方法检测27例健康成人、以及我院2002年3月至2003年6月138例尿毒症患者肾移植前血清抗CMV抗体(抗CMV-IgG、CMV-IgM);观察肾移植后CMV-pp65抗原血症的动态变化.结果27例健康成人血清抗CMV-IgM均为阴性、抗CMV-IgG的阳性率为70.4%、外周血CMV-pp65( )白细胞数为0～4个/5×10 4 WBC;尿毒症患者术前CMV-IgG、CMV-IgM阳性率分别为93.5%、7.1%,肾移植后外周血CMV-pp65( )白细胞数为0～2 280个/5×10 4 WBC(其中＞5者占87.0%)、其高峰期在术后第6～8周.结论肾移植受者术前CMV感染发生率明显高于健康人群,且至少有7.1%存在着活动性CMV感染;肾移植患者术后6个月内,活动性CMV感染发生率高达86.96%;术后第6～8周是活动性CMV感染最严重的时期.     

HCMV pp65抗原血症和UL83基因检测对肾移植术后HCMV感染的诊断价值

目的 探讨外周血白细胞人巨细胞病毒(HCMV)pp65抗原血症检测和UL83基因检测对肾移植术后HCMV感染的诊断价值和临床意义.方法 对77例肾移植受者术后定期随访患者外周血进行HCMV感染检测,分别进行外周血白细胞HCMV pp65抗原血症实验和PCR技术检测HCMV UL83基因,比较两种方法的诊断准确性.结果 ...     

孕早期人巨细胞病毒宫内活动性感染的诊断方法学研究

目的　探讨诊断孕早期HCMV宫内活动性感染的实验方法及其价值。方法　留取 68例有异常妊娠史的早孕妇女绒毛组织 ,分为两份 ,一份提取总RNA ,采用RT PCR检测其中的HCMVmRNA ,一部分制成冰冻切片 ,分别采用原位杂交技术 (ISH)检测HCMVmRNA ,免疫组织化学法检测HCMV早期抗原。结果　采用RT PCR检测到的孕早期绒毛组织HCMVmRNA阳性率为 39 7% ;ISH阳性率为 2 3 5 % ;免疫组化检测HCMV早期抗原阳性率2 2 1 %。RT PCR检出率明显高于ISH(P <0 0 5) ,而ISH与免疫组化的阳性率无显著性差异 (P >0 0 5)。结论　测定绒毛组织中的HCMVmRNA、早期抗原是HCMV宫内活动性感染的客观指标。RT PCR的敏感性最高 ,但ISH与免疫组化可同时作定位、定量观察 ,可操作性强 ,因而有较大的临床推广应用价值     

实时定量聚合酶链反应在肾移植后人巨细胞病毒活动性感染的临床应用研究

目的:建立血浆、外周血白细胞HCMV DNA实时定量聚合酶链反应检测方法,评价其监测肾移植后人巨细胞病毒活动性感染的临床应用价值。方法:用重组质粒PQHY-1制作标准曲线;分别用实时定量聚合酶链反应和免疫组织化学方法,对28例肾移植术后病人采血标本动态检测,并将结果进行比较。结果:实时定量PCR最低可检测出20拷贝/孔的HCMV DNA,且可重复性强(批内及批间误差均<5％),在102～107拷贝/孔的浓度范围时与Q值有很好的线性关系(r=-0.978)。与PP65抗原血症检测结果比较,血浆及外周血白细胞定时定量检测的灵敏度分别为88.5％,94.2％;特异度分别为97.8％,95.4％。HCMV活动性感染时血浆和外周血白细胞HCMV DNA平均含量分别为102.4拷ml和103.2拷贝/106PBL。血浆和外周血白细胞中HCMV DNA阳性检出时间较PP65抗原血症阳性检出时间平均要早1.6和3.8天。结论:实时定量聚合酶链反应检测方法是一种灵敏度高,特异度好的定量检测方法,可用于监测早期HCMV活动性感染。     

肾移植病人巨细胞病毒感染的研究

目的：了解不同免疫状态对活动性巨细胞病毒（CMV）感染发病率的影响。研究肾移植病人术后预防性应用抗CMV药物阿昔洛韦的作用。方法：用链霉亲和素－生物素（LSAB）法检测28例肾移植术后病人、27例发热病人和25例正常人的活动性CMV感染及CMV病的发病情况。同时检测肾移植术后1组（≤6个月组）及肾移植术后2组（＞6个月组）活动性CMV感染发病率及肾功（血肌酐）。结果：肾移植术后组、发热组、政党组活动性CMV感染发病率分别为21．4％、3．7％、0％;, 移植术后组与正常组活动性CMV感染发病率有统计学差异（P＜0．01）。发热组与正常组的发病无统计学差异（P＞0．05）。肾移植术后1组及2组活动性CMV感染发病率分别为29．4％,9．1％,二者无统计学差异（P＞0．05）。活动性CMV感染与CMV感病5万个白细胞中平均抗原阳性细胞数分别为13．5和55。结论：人群活动性CMV感染发病率与免疫状态相关。术后3个月内小剂量口服阿昔洛韦对活动性CMV感染有一定预防作用。LSAB法可快速、早期诊断活动性CMV感染与CMV病,且抗原阳性细胞量与感染严重程度有关。     

肾移植患者活动性巨细胞病毒感染临床研究

目的明确肾移植患者术前巨细胞病毒(CMV)感染的发生率和术后活动性CMV感染的发生规律。方法检测55例健康成人以及我院2002年3月~2005年8月期间377例尿毒症患者肾移植前血清抗CMV抗体(抗CMV-IgG、CMV-IgM);观察肾移植后CMV-pp65抗原血症的动态变化。结果55例健康成人抗CMV-IgG的阳性率为69.1%、血清抗CMV-IgM均为阴性、外周血CMV-pp65( )白细胞数为0~4个/5×104WBC;尿毒症患者术前CMV-IgG、CMV-IgM阳性率分别为94.2%、6.9%,肾移植术后6个月内,患者外周血CMV-pp65( )白细胞数为0~3 142个/5×104WBC(其中>5例占86.7%),其高峰期在术后第6~8周。结论肾移植受者术前CMV感染发生率明显高于健康人群,且约有6.9%存在着活动性CMV感染;肾移植患者术后6个月内,活动性CMV感染发生率高达86.7%;术后第6~8周是活动性CMV感染最严重的时期。