P物质及其受体对成纤维细胞的作用

成纤维细胞是创伤修复过程中重要的功能细胞,也是瘢痕组织中的主要细胞成分,能合成细胞外基质中的多种成分.     

P物质对大鼠成纤维细胞碱性成纤维细胞生长因子及其受体表达的影响

目的　探讨P物质 (SP)对大鼠肉芽组织成纤维细胞碱性成纤维细胞生长因子 (bF GF)及其受体 (FGFR 1)表达的影响。方法　采用成纤维细胞体外培养和逆转录 多聚酶链反应(RT PCR)技术 ,观察SP在不同浓度 ( 1× 10 - 9～ 1× 10 - 5mol L)及孵育时间 ( 0、3、6、12、2 4h)情况下刺激成纤维细胞后 ,其bFGF、FGFR 1mRNA表达情况。结果　SP可上调大鼠成纤维细胞bF GF、FGFR 1mRNA表达。SP对bFGF的量 效曲线呈双相分布 ,最大效应浓度为 1× 10 - 7mol L。但SP仅在高浓度 ( 1× 10 - 6 ～ 1× 10 - 5mol L)时促进FGFR 1表达。在最大效应浓度 ( 1× 10 - 7～ 1× 10 - 5mol L)时 ,SP对bFGF、FGFR 1表达的上调作用分别于刺激细胞后 3、12h达高峰。结论　SP对大鼠肉芽组织成纤维细胞bFGF、FGFR 1基因表达存在直接影响 ,其表现形式与SP的刺激浓度及孵育时间有关 ,这可能是SP在创伤修复中发挥作用的机制之一。     

P物质对肉芽组织成纤维细胞bFGF表达的调控作用及意义

目的　观察感觉神经肽P物质 (substanceP ,SP)对离体培养的肉芽组织成纤维细胞中碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor ,bFGF)表达的特点及调控作用。　方法　采用甲醛注射的方法造成Wistar大鼠局部无菌性炎性反应 ,提取肉芽组织进行成纤维细胞原代培养 ;采用RT PCR方法检测SP对肉芽组织成纤维细胞bFGF基因表达的调控作用 ,观察时间及剂量 效应关系 ;采用Western blot方法检测bFGF蛋白表达情况 ,观察时间及剂量 -效应关系。结果　 10 -7mol/LSP可诱导成纤维细胞bFGFmRNA的表达 ,在作用后 3、6h与对照组比较 ,差异有非常显著性意义 (P <0 .0 1) ;12h后可检测到bFGF蛋白表达明显增强 (P <0 .0 1) ,2 4h达高峰 ,4 8h后逐渐回落。SP在 10 -9～ 10 -5mol/L范围内可显著促进成纤维细胞bFGFmRNA表达 ,在 10 -8～ 10 -5mol/L范围可诱导bFGF蛋白的表达 ,均在 10 -7mol/L剂量点达到峰值 (P <0 .0 1)。　结论　SP可诱导肉芽组织成纤维细胞bFGF基因和蛋白的表达 ,且呈现出一定的时间和剂量特点 ,在SP调控创伤愈合的作用中具有重要意义。     

P物质对肉芽组织成纤维细胞表皮生长因子的表达调控及其意义

目的 探讨感觉神经肽P物质(SP)对离体培养的肉芽组织成纤维细胞表皮生长因子(EGF)表达的调控作用及特点。方法 采用甲醛注射的方法造成Wistar大鼠局部无菌性炎性反应，提取肉芽组织进行成纤维细胞原代培养；采用逆转录—聚合酶链反应(RT—PCR)方法检测SP对肉芽组织成纤维细胞EGF基因表达的调控作用，观察时间及剂量—效应关系；采用Western-blotting方法检测EGF蛋白表达情况，观察时间及剂量—效应关系。结果 10^-7mol/L SP可诱导成纤维细胞EGF mRNA的表达，在作用后6h与对照组比，差异有显著性(P＜0．01)；SP在10^-8-10^-6mol/L范围内可以显著促进成纤维细胞EGF mRNA表达，在10^-7mol/L达到峰值，10^-5mol/L时与对照组差异无显著性(P＞0．05)。10^-7mol/L SP作用12h后可检测到EGF蛋白明显表达增强(P＜0．01)，24h达高峰，48h后逐渐有所回落。SP在在10^-8--10^-5mol/L范围可诱导EGF蛋白的表达，均在10^-7mol/L剂量点达到峰值(P＜0．01)。结论 SP可诱导肉芽组织成纤维细胞EGF基因和蛋白的表达，且呈现出一定的时间和剂量特点，在SP调控创伤愈合的作用中具有重要意义。     

成纤维细胞生长因子-10及其受体对胎儿皮肤附件形成的诱导作用

目的:探讨成纤维细胞生长因子-10(FGF10)及其受体(FGFR2b或Bek)在胎儿皮肤附件(SA)形成中的表达特征及其生物学意义.方法:对130块分别来自26例不同胎龄(EGA 8～31周)胎儿,5个不同部位(头、下颌、耳垂、肩和胸骨柄)的皮肤标本,采用病理学、免疫组化方法和计算机图像扫描技术检测FGF10、Bek、细胞角蛋白-19(CK19)、Bcl-2和细胞增殖核抗原(PCNA)在胎儿皮肤组织的表达水平.结果:除EGA8周胎儿缺乏典型的皮肤组织学结构和FGF10和Bek蛋白表达外,所有蛋白在E11周以后的皮肤内都有阳性表达.在EGA11周,表皮下成团分布的间质细胞过表达FGF10、PCNA和Bcl-2,表皮细胞和周皮细胞则所有蛋白均呈强阳性表达;在EGA13周时表皮细胞局灶性增殖形成SA胚芽,并逐渐向真皮内生长、分化和迁移;在EGA11～31周的皮肤组织内,真皮内间质细胞表达FGF10、PCNA和Bcl-2以及SA上皮细胞表达FGF10、Bek、PCNA、CK19和Bcl-2蛋白呈现与生长发育同步的表达特征,但单个细胞表达的平均光密度(A)值则随胎龄增加而逐渐下降(P＜0.05～0.001).结论:间质细胞旁分泌的FGF10与上皮细胞膜Bek特异性结合,是诱导胚胎SA上皮细胞生长及其形态发生的重要信号,但有关SA的形成部位和种类及其与FGF10蛋白表达的相互关系仍有待深入研究.     

碱性成纤维细胞生长因子及其受体与前列腺增生症

前列腺增生症（benign prostatic hyperplasia,BPH）是导致老年男性下尿路症状（lower urinary tract symptoms,LUTS）的主要原因之一。60岁以上的男性人群中约70%以上患此疾病,常导致尿潴留、肾功能损害和感染等并发症。     

P物质上调正常人真皮成纤维细胞TGF-β1的mRNA表达

目的 探讨神经肽P物质（SubstanceP,SP）与瘢痕形成间的调控关系。方法 体外分离培养正常人真皮成纤维细胞，分别加入SP及其受体特异性拮抗剂L－703，606乙酸盐，MTT法测定细胞生长增殖量；采用细胞爬片法培养细胞，加入SP对细胞作用后，应用TGF－β1mRNA特异性探针行细胞原位杂交，计算细胞的TGF－β1mRNA阳性表达率，并经图像分析测定阳怀细胞TGF－β1mRNA的表达强度，分析SP与真皮纤维细胞TGF－β1mRNA表达间的关系。结果 SP可促进体外培养的正常人真皮成纤维细胞的生长，其作用与SP浓度呈现依赖关系，当浓度达到25ng/ml时，刺激细胞生长的速度达最大值，可使细胞较对照组提前4d融合；正常人真皮纤维细胞受25ng/ml时时，刺激细胞生长的速率达最大值，可命名细胞较对照组提前4d后即可见细胞表达TGF－β1mRNA的阳性率及强度均显著增加；SP对正常人真皮纤维细胞的上述效应，均可被其受体拮抗剂L－703，606乙酸盐所抑制。结论 SP可促进正常人真皮纤维细胞的生长增殖，同时上调细胞的TGF－β1mRNA表达；提示SP可能为皮肤损伤后痕形成过程中启动成纤维细胞表型转化的重要调节因子。     

P311在成纤维细胞表型转化中作用的研究进展

P311又名PTZ17（pentylenetetrazol17），是新近发现的一个8-kDa的蛋白，主要存在于神经细胞，恶性胶质细胞，平滑肌细胞及软骨细胞中。研究发现P311基因在参与细胞分化过程中起着非常重要的作用，且在促进神经修复、创伤愈合、肿瘤的浸润和扩散、癫痫发生、胚胎发育，肺泡发生等方面均发挥了重要的生物学功能。成纤维细胞肌成纤维细胞表型转化是组织纤维化的主要机制之一。与普通成纤维细胞相比，肌成纤维细胞具有更强的增殖和分泌细胞因子及胶原的能力，并具有收缩性，从而促进纤维疤痕形成及挛缩。近来研究发现P311在参与调控成纤维细胞表型转化中有重要作用。本文将对P311在成纤维细胞表型转化中作用及可能机制进行综述。     

P物质及其受体在胰腺癌细胞中的表达

目的 了解P物质(SP)、神经激肽-1受体(NK-1R)及中性肽链内切酶(NEP)在胰腺癌细胞中表达。方法应用实时定量逆转录-聚合酶链反应(RQ-RT-PCR)技术,检测正常胰腺、胰腺癌组织和7株胰腺癌细胞中前速激肽原A(PPT-A)、NK-1R和NEP的mRNA表达,应用Westernblot检测NK-1R和NEP的蛋白水平。结果正常胰腺组织PPT-A的mRNA表达水平为0.430 0±0.464 7,胰腺癌组织中为1.790 0±1.833 1(P<0.05);正常胰腺NK-1R的mRNA表达水平为0.088 2±0.086 8,胰腺癌组织中为2.154 5±2.103 1(P<0.01);正常胰腺组织NEP的mRNA表达水平为3.234 7±6.301 0,胰腺癌为8.606 9±8.703 2(P>0.05)。Western Blot结果发现,胰腺癌组织中NK-1R蛋白也过度表达,而NEP的蛋白水平未相应上调。结论 胰腺癌组织中SP和NK-1R都明显上调,而SP的降解酶——NEP未相应上调,这表明胰腺癌组织中SP的产生与灭活的平衡被打破,产生过多的SP,发挥过度的生物学效应。     

维甲酸对成纤维细胞作用的体外观察

目的探讨维甲酸治疗瘢痕的作用机理及其用于临床的可能性。方法采用成纤维细胞体外培养技术，并将３ＨＴｄＲ（胸腺嘧啶核苷）掺入成纤维细胞ＤＮＡ中，研究维甲酸对体外培养成纤维细胞生长增殖，ＤＮＡ合成及超微结构的影响。结果维甲酸对成纤维细胞生长增殖，ＤＮＡ合成有不同程度的抑制作用，呈剂量效应关系；扫描电镜和透射电镜观察显示，维甲酸对成纤维细胞合成胶原有抑制作用。结论维甲酸治疗瘢痕的作用机理可能与抑制成纤维细胞生长增殖，阻抑成纤维细胞ＤＮＡ合成及影响成纤维细胞胶原合成有关     

P物质对胃癌细胞增殖的作用

目的观察不同浓度P物质对体外培养的胃癌细胞的促增殖作用及其途径。方法人胃癌细胞系MKN45在RPMI1640培养液中培养。采用免疫组织化学染色的方法观察胃癌细胞表达P物质特异性受体NK-1的情况。运用^3H-胸腺嘧啶脱氧核苷掺入指数作为判断细胞增殖的指标，向胃癌细胞的培养液中加入不同浓度的P物质，并运用SP的受体NK-1的特异性拮抗剂（ASN-1377642）后观察SP对胃癌细胞的增殖情况的改变。结果免疫组织化学染色方法证实，人胃癌细胞系MKN45表达SP的特异性受体NK-1；在一定的浓度范围内SP可促进低分化MKN45的增殖并呈剂量依赖性，受体NK-1的特异性拮抗剂可以抑制SP对胃癌细胞的促增殖作用。结论胃癌细胞表达SP的受体NK-1，SP对胃癌细胞有促增殖作用；其作用的完成是通过与受体NK-1结合有关。     

P物质对培养大鼠肉芽组织成纤维细胞bFGF、TGFβ1表达的影响

目的：观察P物质刺激培养大鼠肉芽组织成纤维细胞后生长因子bFGF、TGFβ1 mRNA及其蛋白在不同时相点表达的特点，探讨P物质调控创面愈合的作用。方法：将培养的Wistar大鼠肉芽组织成纤维细胞分为SP组和对照组。在SP组的培养液中加入100M的P物质，对照组除不加P物质外，余处理同SP组。分别用原位杂交和免疫组化方法检测P物质刺激后成纤维细胞内源性bFGF、TGFβ1蛋白及其mRNA表达的变化特征。结果：P物质刺激后，bFGF、TGFβ1 mRNA及其蛋白表达显著增加，bFGFmRNA在刺激后8h达峰值，TGFβ1 mRNA在刺激后5h达峰值，bFGF、TGFβ1蛋白在刺激后12h达峰值。结论：P物质对成纤维细胞内源性生长因子的上调作用，可能是神经肽在创伤愈合过程中促进成纤维细胞增殖，以及在组织修复瘢痕化程度方面发挥作用的分子生物学机制。     

P物质对培养大鼠肉芽组织成纤维细胞bFGF、TGFβ1表达的影响

目的观察P物质刺激培养大鼠肉芽组织成纤维细胞后生长因子bFGF、TGF β1 mRNA及其蛋白在不同时相点表达的特点,探讨P物质调控创面愈合的作用.方法将培养的Wistar大鼠肉芽组织成纤维细胞分为SP组和对照组,在SP组的培养液中加入10-7M的P物质,对照组除不加P物质外,余处理同SP组.分别用原位杂交和免疫组化方法检测P物质刺激后成纤维细胞内源性bFGF、TGF β1蛋白及其mRNA表达的变化特征.结果P物质刺激后,bFGF、TGF β1 mRNA及其蛋白表达显著增加,bFGF mRNA在刺激后8h达峰值,TGF β1 mRNA在刺激后5h达峰值,bFGF、TGF β1蛋白在刺激后12h达峰值.结论P物质对成纤维细胞内源性生长因子的上调作用,可能是神经肽在创伤愈合过程中促进成纤维细胞增殖,以及在组织修复瘢痕化程度方面发挥作用的分子生物学机制.     

碱性成纤维细胞生长因子及其受体在肾癌组织中的表达

碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）可诱发血管形成、刺激癌细胞生长。本研究试图通过检测ｂＦＧＦ及其受体ＦＧＦＲ－１在正常肾和肾癌组织的表达方式，探讨其临床意义。作者针对３６例石蜡包埋的肾癌及其正常肾组织，配合微波炉抗原修复法进行ｂＦＧＦ和ＦＧＦＲ－１的ＬＳＡＢ免疫组化染色。结果显示：ｂＦＧＦ与ＦＧＦＲ－１的染色结果基本一致；全部正常肾组织和２９例肾癌的细胞外基质为非均一性阳性染色；１２例原发性肾癌、２例癌转移灶和体外培养的ＧＲＣ－１细胞的癌细胞胞浆为阳性染色，且多为均一性染色。癌细胞胞浆的ｂＦＧＦ染色多见于Ｔ３－４期肿瘤，与Ｔ１－２期比较有显著性差异（Ｐ＝０．０２）。作者认为，ｂＦＧＦ和ＦＧＦＲ－１可同时表达于正常肾和肾癌组织，提示ｂＦＧＦ和ＦＧＦＲ－１的表达与功能密切相关；癌细胞胞浆ｂＦＧＦ阳性表达与肿瘤分期有关，提示ｂＦＧＦ是促进肾癌发展的原因之一。     

成纤维细胞在皮肤创伤愈合中的作用及其调控

成纤维细胞是创伤愈合中主要的修复细胞之一，在细胞因子等因素的调控下，成纤维细胞发生增殖，迁移，并合成，分泌胶原和细胞外基质成分以及原酶等，参与肉芽组织形成，创口收缩，瘢痕形成及组织重建的过程，在创伤愈合过程中起重要作用。     

γ干扰素对瘢痕成纤维细胞的生物学作用

目的 探讨瘢痕成纤维细胞生物学活动的调控因素。方法 以瘢痕成纤维细胞为研究对象，观察基因重组γ干扰素（下简称ＩＦＮ－γ）对瘢痕组织中成纤维细胞的生长增殖、胶原合成及其重构等生物学活动的影响。结果 ＩＦＮ－γ可以抑制瘢痕成纤维细胞的生长增殖、胶原合成以及胶原纤维凝胶的收缩。结论 表明ＩＦＮ－γ是创伤修复与瘢痕形成过程中的一种负性调节因子，有望在病理性瘢痕的防治中发挥重要作用。     

γ干扰素对瘢痕成纤维细胞的生物学作用

目的探讨瘢痕成纤维细胞生物学活动的调控因素。方法以瘢痕成纤维细胞为研究对象,观察基因重组γ干扰素(下简称IFN-γ)对瘢痕组织中成纤维细胞的生长增殖、胶原合成及其重构等生物学活动的影响。结果 IFN-γ可以抑制瘢痕成纤维细胞的生长增殖、胶原合成以及胶原纤维凝胶的收缩。结论表明IFN-γ是创伤修复与瘢痕形成过程中的一种负性调节因子,有望在病理性瘢痕的防治中发挥重要作用。     

成纤维细胞生长因子对手术创面愈合的作用

本文介绍成纤维细胞生长因子的作用机理及对手术创面愈合的任用，并探讨了在临床上的应用价值。