雾化吸入布地奈德对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β和CTGF表达的影响研究

目的:探讨雾化吸入布地奈德(BUD)对肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子(TGF)-β和结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响.方法:将45只SD大鼠随机分为3组:生理盐水空白对照组(NS组)、博来霉素模型组(BLM组)和布地奈德干预组(BUD组),并在处理后d7、d14、d28每组分别随机处死5只,苏木精-伊红(HE)和Masson染色对肺组织的肺泡炎及肺纤维化程度评分,酶联免疫吸附法(ELISA)测定肺泡灌洗液(BALF)中TGF-β、CTGF的浓度.结果:实验过程中,NS组大鼠均未发生肺泡炎和肺纤维化,BLM组和BUD组大鼠较NS组均发生肺泡炎和肺纤维化(P<0.05),BLM组大鼠的肺泡炎和肺纤维化均呈进行性加重,BUD组大鼠d7肺泡炎最为严重,随后开始好转,肺纤维化一直加重.NS组大鼠BALF中TGF-β和CTGF表达水平较低,BLM组和BUD组大鼠中各时间点的表达水平均显著高于NS组(P<0.05),且BUD组的表达水平显著低于BLM组(P<0.05).结论:雾化吸入布地奈德,抗纤维化作用明显,显著降低大鼠肺组织TGF-β和CTGF表达水平.     

大鼠肺纤维化过程中转化生长因子-β1在不同肺组织中的表达变化及意义

目的观察转化生长因子-β(TGFβ-1)在博莱霉素(BLM)所诱导的肺纤维化大鼠肺泡灌洗液中的动态变化及其意义。方法 BLM制成大鼠肺间质纤维化模型,观察组13只大鼠气管注入BLM 0.2~0.3m l,对照组5只大鼠气管注入等量生理盐水,并将各组动物处死后提取肺组织及支气管肺泡灌洗液(BALF)进行病理定量分析,检测BALF中TGFβ-1的水平变化。结果观察组TGFβ-1水平高于对照组,第7、14天比较差异有统计学意义(P<0.01)。TGFβ-1在观察组成纤维细胞(Fb)和肺泡巨噬细胞(AM)中表达于实验第7天显著增强,于实验第14天达到高峰,至第28天有所降低,但明显高于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论 TGFβ-1在肺纤维化中及其病理发生发展过程中均发挥重要作用。     

大鼠肺纤维化过程中转化生长因子-β1在不同肺组织中的表达变化及意义

目的 观察转化生长因子-β(TGF-β<,1>)在博莱霉素(BLM)所诱导的肺纤维化大鼠肺泡灌洗液中的动态变化及其意义.方法 BLM制成大鼠肺间质纤维化模型,观察组13只大鼠气管注入BLM 0.2～0.3ml,对照组5只大鼠气管注入等量生理盐水,并将各组动物处死后提取肺组织及支气管肺泡灌洗液(BALF)进行病理定量分析,检测BALF中TGF-<,1>的水平变化.结果 观察组TGF-β<,1>水平高于对照组,第7、14天比较差异有统计学意义(P<0.01).TGF-β<,1>在观察组成纤维细胞(Fb)和肺泡巨噬细胞(AM)中表达于实验第7天显著增强,于实验第14天达到高峰,至第28天有所降低,但明显高于对照组(P<0.05或P<0.01).结论 TGF-β<,1>在肺纤维化中及其病理发生发展过程中均发挥重要作用.     

卡托普利对博来霉素诱导大鼠肺纤维化的影响

目的探讨博来霉素（bleomycin）中毒肺BLM纤维化机制及卡托普利对BLM中毒肺纤维化的干预作用。方法 60只SD大鼠随机分为3组：正常对照（control）组、单纯BLM染毒（BLM）组和BLM染毒卡托普利（captopril,CPT）治疗（BLM＋CPT）组。14 d后处死各组动物,记录肺系数;病理组织学检查。结果 BLM染毒后大鼠肺系数增大,肺泡炎、肺纤维化程度积分明显增高。CPT均明显减轻了大鼠肺损伤、肺纤维化程度。结论 CPT对BLM中毒大鼠肺损伤、肺纤维化程度有一定改善作用,可能与其抑制血管紧张素Ⅱ有关。     

白细胞介素32在博来霉素诱导的小鼠肺纤维化组织中的表达及意义

目的 探讨白细胞介素32(IL-32)在博来霉素(BLM)诱导的小鼠肺纤维化过程中各期的表达和意义.方法 将72只雄性小鼠随机分为三组,每组24只.分别给予0.9%氯化钠注射液0.04 ml(C组)和等量的BLM(5 mg/kg)(B、A组),一次性气管内灌注.A组在BLM灌注后每天给予地塞米松5 mg/kg腹腔注射.然后各组分别于第3、7、14和28天各处死6只小鼠,取肺组织,做病理切片、免疫组织化学染色,应用Western blot法测定IL-32表达.结果 B组肺组织病理切片按时间顺序呈现由肺泡炎至纤维化动态改变.B组肺组织中IL-32蛋白表达水平高于C组(P＜0.01)和A组.结论 IL-32在肺纤维化形成过程中高表达,可能在肺纤维化形成的早中期发挥重要作用.     

环孢素A对实验大鼠肺纤维化的干预作用

目的 研究环孢素A(CsA)对大鼠肺纤维化的干预作用.方法 平阳霉素(BLM)气管内注入建立大鼠肺纤维化模型,观察CsA对支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞成分和转化生长因子-β(TGF-β)的含量、肺组织学变化,应用SABC法检测肺组织中纤维连接蛋白(FN)和血小板衍化生长因子(PDGF)表达的作用.结果 应用BLM后第7天即有严重肺泡炎性改变,第28天有严重的肺纤维化,而CsA组,早期只有轻度炎性改变,BALF中细胞计数及TGF-β含量较BLM组低(P＜0.05),FN及PDGF表达显著弱于BLM组(P＜0.01).结论 CsA可能通过抑制FN、PDGF的表达及TGF-β的生成干预BLM致肺纤维化.     

沙利度胺通过下调转化生长因子-β_1肿瘤坏死因子-α抑制大鼠肺纤维化

目的观察沙利度胺对博来霉素所致大鼠肺纤维化的影响,并探讨其可能作用机制。方法选择健康雄性Wistar大鼠45只,随机分为正常对照组(N组)、肺纤维化模型组(M组)和沙利度胺治疗组(T组)3组,每组各15只。M组于气管内滴注博来霉素(BLM)5mg/kg生理盐水诱导肺纤维化,造模次日起每日腹腔内注射二甲基亚砜(DMSO)液;T组同样方法造模,次日起每日腹腔内注射沙利度胺(4mg/只)DMSO溶液;N组气管内滴注生理盐水,次日起每日腹腔内注射DMSO液。各组动物均于制模后的第7、14、28天分别随机处死5只动物,取肺组织行病理切片行苏木素-伊红(HE)染色和Masson染色,观察肺泡炎和肺纤维化程度;碱水解法检测肺组织羟脯氨酸(Hyp)含量;双抗夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定肺泡灌洗液(BALF)中转化生长因子β1(TGF-β1)及肿瘤坏死因子(TNF)-α的含量。结果 M组纤维化程度逐渐加重,于第28天形成明显的肺纤维化;其肺泡炎、纤维化评分,Hyp、TGF-β1、TNF-α的含量与N组比较均明显升高(P<0.05)。T组各时间点肺泡炎程度显著低于M组(P<0.05)。第14、28天,T组肺纤维化程度及肺组织Hyp含量较M组均明显降低(P<0.05)。此外,T组BALF中TGF-β1、TNF-α的含量亦低于M组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论沙利度胺可减轻BLM诱导的大鼠肺纤维化,其作用机制可能是通过下调TGF-β1及TNF-α在肺内的表达而实现的。     

硫化氢在大鼠肺纤维化中的表达

目的：研究内源性硫化氢（H2S）在大鼠肺纤维化中的表达。方法：①实验分组：将健康Wistar大鼠30只随机分为对照组、模型组（肺纤维化组）。②模型制备：采用气管内注射博来霉素（BLM—A5）建立肺纤维化模型。③评价：通过对大鼠肺组织形态学,病理学观察,评价模型成功与否。④观察指标：于试验的第7、14、28天时每组分别处死5只大鼠。采用去蛋白分析方法测量血浆中H2S含量．取肺组织行HE染色和Mallory三色染色。结果：①模型组大鼠血浆中H2S含量第7天时较对照组降低50％．第14天时降低32％．第28天时降低21％（P〈0．01）。②造模后首先出现肺泡炎。随着时间的延长,炎性反应逐渐减轻,肺纤维化程度逐渐加重。结论：①经过观察．采用气管内注射博来霉素（BLM—A5）的方法成功的制备了大鼠肺纤维化模型。②正常大鼠体内存在一定量的硫化氢。③硫化氢参与了大鼠肺纤维化发展的病理生理过程。     

苦参碱对博来霉素所致肺间质纤维化大鼠的保护作用

目的:研究苦参碱对肺间质纤维化大鼠的保护作用。方法:采用气管内灌注博来霉素(BLM)的方法建立大鼠肺纤维化模型,设正常对照组、模型组、小剂量苦参碱组(50 mg/kg)、大剂量苦参碱组(100 mg/kg)和氢化可的松组(100 mg/kg),每组18只,再各分为d 7、14和d 28组。观察各组不同时期病理切片和肺组织羟脯氨酸(HYP)浓度,测定肺组织丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH- PX)含量。结果:苦参碱组和氢化可的松组的肺泡炎和肺纤维化程度及HYP含量显著地低于模型组(P<0.05);苦参碱和氢化可的松能明显降低肺间质纤维化大鼠肺组织MDA水平,提高GSH-PX含量(P<0.01)。结论:苦参碱能减轻BLM诱导的大鼠肺纤维化,这种作用有可能通过改善肺间质纤维化大鼠体内氧化应激状态实现。     

枇杷叶三萜酸对博来霉素致大鼠肺纤维化的干预作用

目的观察博来霉素(BLM)致大鼠肺纤维化模型的超微病理过程,肺组织匀浆MDA含量、SOD活性,血清iN-OS、eNOS、NO活性的动态变化及枇杷叶三萜酸(TAL)对其的影响。方法通过气管内一次性滴注博来霉素(5 mg.kg-1)复制大鼠肺纤维化模型。治疗组于造模后d 2开始灌胃给予150 mg.kg-1 TAL。各组大鼠于给药后d 7、14、28随机取样8只。采集血清,留取肺组织制备肺组织匀浆,分别测定匀浆中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、血清中一氧化氮(NO)含量、诱生型及内皮型一氧化氮合酶(iNOS、eNOS)活性。制备电镜标本行电镜观察。结果电镜可见,模型7 d组大鼠Ⅰ、Ⅱ型肺泡上皮胞质水肿,线粒体肿胀,嵴空化。血管内皮细胞肿胀,肺泡隔胶原增多。肺间质及肺泡腔内炎性细胞增多。14、28 d BLM组Ⅰ型肺泡上皮胞质水肿更明显,Ⅱ型细胞较7 d BLM组减少,巨噬细胞凋亡增加,间质纤维组织增生明显。TAL能明显改善模型组大鼠肺脏组织结构,减轻肺纤维化增生程度。与正常组相比,模型组各时间段血清iNOS活性、肺匀浆MDA含量均升高,而eNOS活性下降(P<0.01 or P<0.05);模型7、14 d血清NO含量增加,肺组织匀浆SOD活性下降(P<0.01 or P<0.05),模型组28 d恢复正常。TAL给药可降低各时段增高的iNOS、NO及MDA含量,同时升高SOD及eNOS活性(P<0.01 or P<0.05)。结论博来霉素诱发大鼠肺纤维化早期以肺泡炎为主,28 d肺纤维化为主要病变。肺内一氧化氮合酶的含量变化,NO的大量生成及过氧化可能是促使肺纤维化形成的重要因素,TAL对肺纤维化的防治作用可能与其调节iNOS、eNOS比例、抗脂质过氧化有关。     

结缔组织生长因子在肺间质纤维化发病机制中的地位和作用

为了解结缔组织生长因子 (connective tissue growth factor,CTGF)在大鼠肺纤维化模型中的表达状况及其在肺纤维化发病机制中的作用 ,将 42只 Wistar大鼠随机分为模型组 (M组 )和对照组 (C组 ) ,M组气管内灌注博莱霉素 ,C组气管内灌注生理盐水。于灌注后第 7、14、2 8天每组分别处死大鼠 7只 ,制备大鼠肺组织切片。用免疫组化 SABC法分别检测两组大鼠肺组织中 CTGF及转化生长因子β1 (TGF-β1 )、 型胶原纤维 (Collagen )的蛋白在肺内的表达水平。结果显示 ,CTGF作为 TGF -β1 的下游因子 ,可能通过促进细胞外基质 (ECM)如胶原蛋白等合成而在博莱霉素诱导的肺纤维化形成过程中起重要作用     

蛋白酶激活受体-1在肺纤维化大鼠肺组织中的表达

目的探讨在博莱霉素所致大鼠肺纤维化模型肺组织中蛋白酶激活受体-1的表达。方法将体重180-250g的SD清洁级雄性大鼠48只,按完全随机方法分为对照组及博莱霉素(BLM)组,BLM组大鼠气管内注入0.9-1.25ml博莱霉素A5(BLMA5,5mg/kg),对照组在同样条件下向气管内注入等量的生理盐水。两组动物于气管灌注后第7、14、28、40d分别随机处死6只。组化方法检测肺组织PAR-1的表达;Masson染色检测肺组织纤维化,按Ashcroft评分法,评估肺纤维化的严重程度,结果(1)对照组无明显胶原沉积,BLM组随着时间的延长,可见明显胶原沉积,BLM组/对照组两组在第7、14、28、40d肺间质纤维化Ashcroft评分分别为24±3.72/3±0.63、46.4±4.09/4±0.63、69.3±3.78/3±1.41、64.5±5.96/3±1.67,两组有显著性差异(P﹤0.05)。(2)BLM组/对照组两组在第7、14、28、40d平均每高倍镜视野肺组织PAR-1阳性细胞数分别为:9.93±1.47/2.5±1.52、16.67±2.16/1.83±1.17、17.67±2.16/2.17±0.75、16.0±2.28/2.17±1.17。BLM组各时间点肺组织PAR-1阳性细胞数较正常对照组增多,两组具有显著统计学差异(P﹤0.05)。(3)肺间质纤维化程度与PAR-1阳性细胞数呈正相关(r=0.76)。结论博莱霉素所致大鼠肺纤维化模型肺组织中蛋白酶激活受体-1的表达增强;蛋白酶激活受体-1的表达可能在博来霉素所致肺纤维化中其重要作用。     

沙苑子总黄酮对博莱霉素致大鼠肺纤维化的干预作用及其机制研究

目的探讨沙苑子总黄酮(FAC)对博莱霉素(BLM)所致实验性大鼠肺纤维化的干预作用,并探讨其作用机制。方法采用气管内滴注博莱霉素法制作大鼠肺纤维化模型,并随机分为6组。给予沙苑子总黄酮灌胃(ig)治疗28 d后,腹主动脉放血法处死动物,测定血清和总抗氧化能力(T-AOC)及肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量;ELISA的方法检测实验大鼠肺泡灌洗液中IL-1β和IL-6的含量;取固定部位肺组织作HE及Masson染色,进行病理组织学观察;电镜观察大鼠肺组织的超微结构变化;Westen blot法检测沙苑子总黄酮TGF-β/Smad信号通路相关蛋白的表达。结果与模型组相比,沙苑子总黄酮各组大鼠肺组织中HYP含量明显降低(P<0.01或P<0.05),且有剂量依赖趋势;大鼠血清及肺组织中T-AOC增强(P<0.01或P<0.05);肺泡灌洗液中细胞因子IL-1β及IL-6的含量明显降低(P<0.01或P<0.05);组织病理学观察肺泡炎症(P<0.01或P<0.05)及肺组织纤维化(P<0.01或P<0.05)的程度明显减轻;West-ern blot检测结果显示TGF-β/Smad信号通路相关蛋白TGF-β、Smad2、α-SMA含量均明显降低。结论沙苑子总黄酮对博莱霉素致大鼠肺纤维化病变有一定的治疗作用,其作用机制可能与其抑制炎症细胞因子的活化、抗氧化作用、抑制胶原的形成以及调控TGF-β/Smad信号通路有关。     

奥曲肽对博来霉素诱导的大鼠肺纤维化的干预作用

目的 探讨奥曲肽对博来霉素(BLM)诱导的大鼠肺纤维化的干预作用.方法 32只Wistar大鼠随机均分为四组,A、B、C三组以气管内滴注BLM 5 mg/kg建立肺纤维化模型;D组给予等体积生理盐水作为空白对照.造模后,A组皮下注射奥曲肽50 μg/kg,每天2次;B组腹腔注射地塞米松1 mg/kg,每天1次;连续用药21 d.第21天取材,采用HE及Masson染色法观察肺组织病理变化,碱水解法测肺组织羟脯氨酸(HYP)含量,ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中转化生长因子β1 (TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)的水平.结果 与D组比较,C组大鼠肺组织炎症和纤维化明显,肺组织HYP含量和BALF中TGF-β1和CTGF表达增高;而A、B两组的上述指标均低于C组(P＜0.05).结论 奥曲肽能显著减轻肺纤维化大鼠肺组织肺泡炎及肺纤维化程度;其机制可能与其降低纤维化组织TGF-β1和CTGF表达有关.     

甘草次酸衍生物TY501抗肺纤维化作用及机制研究

目的探索甘草次酸衍生物TY501对博莱霉素(BLM)诱导的肺纤维化模型大鼠的抗肺纤维化作用及初步机制。方法将40只大鼠随机分成5组:假手术组、模型组、吡非尼酮组、TY501高剂量组和低剂量组。经气道给予BLM制备大鼠肺纤维化模型,每天灌胃给予受试药。实验结束后,测定肺系数、氧分压(Pa O2),测定BALF中ALB、ALP、LDH以及肺组织中GSH、HYP含量,测定血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(COL4)含量。结果 1肺纤维化早期肺泡炎阶段相关指标:各治疗组与模型组相比,肺系数显著下降(P<0.05)、Pa O2明显升高(P<0.05);与模型组相比,各治疗组大鼠BALF中ALP、ALB以及LDH呈下降趋势(P<0.05);模型组肺组织匀浆中GSH含量反馈性增高,与假手术组相比存在明显差异(P<0.05),各治疗组较模型组含量降低(P<0.05);(2)肺纤维化晚期肺间质纤维化阶段:大鼠肺组织HYP、血清PCⅢ(TGF-β通路指标)、血清COL4(MMPs通路指标)含量,各治疗组较模型组呈下降趋势,差异有显著性(P<0.05)。结论 TY501对肺纤维化治疗存在价值,能够减轻BLM诱导的肺纤维化程度。TY501可能通过阻断TGF-β的作用、抑制MMPs等多途径抑制肺纤维化的发生,减轻肺纤维化症状。     

当归黄芪醇提物与水提物对实验性大鼠肺纤维化的干预作用

目的：观察当归黄芪醇提物（EE）与水提物（WE）对博来霉素（bleomycin,BLM）所致大鼠肺间质纤维化模型的干预作用。方法：采用BLM气道注入法复制实验性大鼠肺纤维化模型,运用形态计量学方法及肺组织羟脯氨酸（hydroxyproline,Hyp）含量变化动态评价EE和WE对大鼠肺纤维化的干预作用。结果：EE和WE均能改善BLM所致大鼠肺纤维化组织形态,且肺指数及肺泡炎HE染色分级评分均降低,组织中胶原纤维面积减少,肺组织Hyp含量降低(P<0.05)。结论：EE和WE均能减慢实验性大鼠肺间质纤维化的进程,对肺间质纤维化早期具有一定的治疗作用。     

芪术合剂对肺纤维化鼠转化生长因子-β1的影响

目的:探讨芪术合剂对肺纤维化鼠的治疗作用。方法:将60只大鼠随机分为正常组(A组)、模型组(B组)、芪术合剂组(C组)和强的松组(D组)。经气管滴入博莱霉素复制肺纤维化大鼠模型,并分组予以治疗,于治疗第3,7,21天分批处死各组大鼠,每次每组6只。用免疫组化法观察肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达,并测定透明质酸(HA)含量及支气管肺泡灌洗液炎细胞水平。结果:随着时间的变化,模型组TGF-β1表达明显增加,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01),芪术合剂组比同期模型组低。结论:芪术合剂可通过抑制TGF-β1的表达,降低HA水平从而起到抗博莱霉素致肺纤维化的作用。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的干预作用及其机制研究

目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对实验性大鼠肺纤维化的干预作用及可能的作用机制。方法大鼠随机分为正常对照组、模型组、醋酸泼尼松组和EGCG大、中、小剂量组。通过气管内注入博莱霉素(BLM)复制大鼠肺纤维化模型,于造模后d 2各治疗组开始给药,给药后d7、14、28处死大鼠,取肺组织,观察形态学变化,并测定生化指标。结果EGCG能减少实验性肺纤维化大鼠肺组织中胶原沉积及降低肺系数(P<0.05,P<0.01),提高T-AOC、SOD水平(P<0.05,P<0.01),减轻肺部的病理损害。结论EGCG对BLM诱导产生的大鼠肺纤维化有一定的抑制作用。     

芪术合剂干预肺纤维化大鼠TGF-β1 mRNA表达的实验研究

目的：观察中药芪术合剂对博莱霉素致大鼠肺间质纤维化的干预作用及其机制。方法：将60只健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、芪术合剂组和强的松组。经气管滴入博莱霉素复制肺纤维化大鼠模型，分组予以治疗，于治疗3、7、21d分批处死各组大鼠，每次每组6只。观察肺组织病理变化和TGF—β1 mRNA的表达。结果：模型组在不同时段TGF—β1 mRNA表达较正常对照组明显增高，芪术合剂组与同期模型组比较明显降低，芪术合剂组和强的松组经干预后肺泡炎和肺纤维化有所减轻。结论：中药芪术合剂具有显著抑制博莱霉素致大鼠肺纤维化的作用，抑制TGF—β1 mRNA的表达是其可能的机制之一。     

胆红素对烟雾损伤大鼠肺泡巨噬细胞的保护作用

目的:探讨胆红素对烟雾损伤所致肺泡巨噬细胞(AM)的保护作用,寻求防治肺气肿发生、发展的新途径。方法:将健康Wistar大鼠36只,随机分为正常对照组、肺气肿模型组和胆红素干预组。模型组及干预组采用自制大鼠实验性被动吸烟装置熏烟,连续6个月。干预组在熏烟前予以间接胆红素灌胃;模型组和对照组予以生理盐水灌胃。3组动物自由饮食饮水,6个月后处死动物,取材检测;病理形态学检查;采用支气管肺泡灌洗技术收集AM并纯化培养。观察细胞培养液上清中MDA与MO含量。结果:光镜下对照组大鼠肺组织肺泡分布较均匀;模型组大鼠肺组织肺泡普遍扩张,扩张的肺泡融合成较大的囊腔;胆红素干预组肺组织肺泡部分有扩张;模型组与对照比较MDA、MO含量升高(P<0.05);干预组与模型组比较MDA、NO含量降低(P<0.05)。结论:胆红素对于AM有一定的保护作用。