逆转录聚合酶链反应法在北京市流感病毒型别鉴定中的应用

目的：建立在流感病毒型别鉴定中使用的逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）法。方法：用常规细胞培养法扩增病毒后,用2对型别鉴定引物和4对亚型鉴定引物进行RT－PCR反应。结果：在23株发生细胞病理变化的标本中RT－PCR阳性标本为10份,其中甲型7株（6株甲3亚型、1株甲1亚型）,乙型3株,结论：该方法快速、特异,灵敏,在流感病毒型别鉴定中具有较大的应用价值。     

重庆地区婴幼儿轮状病毒腹泻VP7型别分析

目的：研究重庆地区1998－2000年度秋冬季婴幼儿轮状病毒腹泻分子流行病学,方法：采用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）扩增婴幼儿腹泻便样中的编码轮状病毒VP7蛋白的全基因片段（1062bp),再用巢式－聚合酶链反应（net-PCR)对扩增得到的VP7基因进行分型,同时利用核苷酸序列分析方法进行分型。结果：在1998－1999年度130例婴幼儿腹泻便样中VP7基因阳性者50例（38．46％）,其中G1型占88％（44／50）,G3型占8％（4／50）,混合型占4％（2／50）,均为G1＋G3型,而1999－2000年度轮状病毒流行季节采集的112 标本中VP7基因扩增阳性者38例（33．93％）,其中G3型占78．95％（30／38）,G1型占13．16％（5／38）,混合型占7．89％（3／38）,均为G1＋G3型,苷酸序列分型结果与PCR分型结果一致。结论：重庆地区 1998－1999年度轮状病毒流行季节中流行的轮状病毒以G1型为主,而1999－2000年度轮状病毒流行季节中G3型为主,在连续两年的监测中出现轮状病毒血清型的转变。     

西安地区肾综合征出血热疫区型别研究

西安地区为肾综合征出血热 (ＨＦＲＳ)老疫区 ,其发病率、死亡率、病死率均高 ,严重危害广大人民身体健康。ＨＦＲＳ疫区型别研究 ,是ＨＦＲＳ流行病学中的一个重要课题 ,它将为制定防制策略 ,改进防制措施提供科学依据。中国地理流行病学调查证实 ,1990年前陕西属姬鼠型疫区〔     

西安地区肾综合征出血热疫区型别研究

西安地区为肾综合征出血热(HFRS)老疫区.据中国地理流行病学调查证实,1990年前属姬鼠型HFRS疫区[1].随着时间的推移,疫区型别有所变化,对此虽有零星报道[2-4],但未进行过系统的研究.为此,我们以户县为基地,并搜集周至、长安等县有关资料,对西安地区HFRS疫区型别进行了研究.     

厦门市1997～2005年肺结核病人型别分布分析

[目的]分析厦门市肺结核病人型别分布特征，为制定和实施结核病控制规划提供依据。[方法]对厦门市结核病防治所1997-2005年接诊的因症求诊、转诊的肺结核病人资料进行分析。[结果]6464例肺结核病人中，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型分别为20例、14例、6240例、190例。Ⅲ型病人占96．53％。男性与女性病人分别为4072例（63．00％）、2392例（37．00％）。2岁～、16岁～、26岁～、36～岁、46岁～、56岁～、66～84岁病人分别为：47例（0．73％）、1670例（25．84％）、2275例（35．19％）、924例（14．29％）、627例（9．70％）、450例（6．96％）、471例（7．29％）；农民、工人、其他职业病人分别为3783例（58．52％）、951例（14．71％）、1730例（26．76％）；流动人口与常住人口病人分别为5316例（82．24％）、1148例（17．76％）。[结论]总病人、年龄、性别、职业、流动与常住人口的肺结核型别分布，均以Ⅲ型为主，占96％以上，且差异均无统计学意义。     

SELEX技术在微生物检测中的应用

指数级富集配体的系统进化技术(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX),是20世纪90年代初建立的一项筛选技术,是一种研究核酸结构与功能的有效方法.它应用大容量的随机寡核苷酸文库,并结合体外PCR扩增技术,以指数富集能与靶分子特异结合的寡核苷酸,经过多轮筛选后,获得特异性强、亲和力高的寡核苷酸适配子(aptamers),具有库容量大、靶分子范围广、亲和力高、特异性强等优点,已成功应用于多种靶分子的筛选,除用于核苷酸序列、蛋白质、氨基酸外,还可用于染料、药物小分子(如茶碱)、生长因子、肽链、类固醇、糖类,甚至可用于完整的细胞、病毒、孢子和朊病毒等.其中蛋白类靶分子应用最多,包括酶、生长因子、抗体、转录因子、细胞黏附分子等.完整的病毒颗粒和细菌病原体也可通过SELEX技术筛选出高亲和力和特异性的寡核苷酸适配子.目前通过此技术筛选到的靶物质目的基因有近200种,SELEX技术为生物界、生物化学界、医学界提供了高效、快速的检测手段,特别是为小分子靶物质目的基因的结构及功能的研究开辟了广阔的前景.     

杭州市散发性戊型肝炎基因型别分析研究

目的了解杭州地区急性散发性戊型病毒性肝炎患者基因型特点。方法采用病毒核酸提取方法进行基因提取,荧光定量PCR方法筛选,选取代表株进行克隆测序,利用生物信息学软件进行多序列比对排列及构建进化树。结果对78份标本进行检测,经荧光PCR检测16份阳性,阳性率为20.51%。3株代表株经克隆测序,并进行BLAST比较和进化树分析,均属HEVⅣ型,与国内其他地区分离的Ⅳ型毒株核苷酸同源性为84.6%~96.7%。结论杭州地区的急性散发性戊型病毒性肝炎病毒属于Ⅳ型。     

荧光定量PCR在病原微生物检测中的应用

<正>常规PCR检测技术是一种特异、敏感的分子检测技术,在病原微生物的快速诊断方面发挥出了重要作用。但是普通PCR技术在实际工作中问题较多,尤其是机械化程度比较低,在PCR后处理方面基本需要依靠人工操作来实现。另外,普通PCR技术还有不能实现定量、PCR扩增产物易受污染等不足。荧光定量PCR技术是在普通PCR技术基础上发展起来的核酸定量新技术,其基本原理相同,仅在PCR反应体系中加入荧光基团,利用     

斑疹伤寒型别鉴定的研究

斑疹伤寒包括流行性斑疹伤寒和地方性斑疹伤寒两个病种,分型报告疫情是非常必要的.目前采用能够分型的微量补体结合试验作为实验室诊断的方法,但由于抗原高度交叉,只能以同源高于异源的血清效价来分型,但不能分型者为数不少.     

肺炎支原体基因检测与分型方法的建立及初步应用研究

目的 建立肺炎支原体PCR检测与分型鉴定方法，并应用于急性呼吸道感染患者肺炎支原体感染的检测及型别研究。方法 设计肺炎支原体P1粘附因子基因特异性引物采用套式PCR，对临床急性呼吸道感染患者的咽拭子标本进行肺炎支原体的检测与分型鉴定。结果 应用肺炎支原体FH参考株建立快速，实用的PCR检测及分型鉴定方法，在临床标本儿童组中未检出肺炎支原体，成人组中检出1例，型别鉴定为P1－1型。结论 套式PCR技术对肺炎支原体检测与分型鉴定具有相对快速，简便，实用和特异性，值得在临床早期诊断及分子流行病学研究方面推广应用。     

膜分离技术在微生物制药中的应用

本文主要论述了膜分离技术在氨基酸、抗生素及酶纯化分离中的运用、目前膜分离技术存在的问题及解决方法。     

福建省近年新检出的沙门氏菌型别分布报告

「目的」了解福建省近年首次检沙站氏菌血清型（变种）型别分布情况。「方法」对年５年从人、动物、饲料及外环境检出沙门氏菌进行血清分型,批出近年首次检出的血清型（变种）。「结果」福建省近５年首次检出１７个血清型（变种）沙门氏菌,其分布于２个ＤＮＡ同源群和１０个群（亚群）,其中ＤＮＡ同源群１１５个型,ＤＮＡ同源群Ⅲｂ２个型;Ａ￣Ｆ群１２个型,非Ａ￣Ｆ群５个型。ＤＮＡ同源群Ⅰ以信和非Ａ￣Ｆ群沙门氏菌检出率有     

微生物检测技术在食品检验中的应用

近年来,食品安全问题受到人们越来越多的重视。在食品的生产、加工、运输、储存与销售等环节中,均有可能受到微生物的污染,并引发食品腐败变质的问题。该文将对食品安全问题现状作充分结合,分析微生物检测技术在食品检验中的应用价值。     

PCR技术在卫生微生物检测中的应用

ＰＣＲ技术在卫生微生物检测中的应用叶怀庄，吴丽丽浙江医科大学公卫学院卫生检测中心杭州多聚酶链式反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）［１］是近年来分子生物学领域中一项具有革命性的技术突破，是基于天然ＤＮＡ复制的规律而设计的一种...     

LAMP技术在病原微生物检测中的应用

环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术是近年来发展出的一种敏感、特异、方便快捷的核酸扩增技术。与传统PCR方法相比,LAMP不需要热循环,为等温扩增,且由于LAMP反应中产生大量的副产物-白色焦磷酸镁沉淀,扩增产物可不经过电泳,通过肉眼观察或浊度计即可判定结果。因此LAMP是一种不需要热循环仪、肉眼即可判定结果的高度特异和敏感的DNA扩增方法,适合于现场、战时野外或条件较差的实验室进行病原微生物的快速检测。近年LAMP技术在病原微生物检测方面已有广泛应用,本文就这一方面的研究进展作一综述。     

Pyrosequencing技术在病原微生物检测中的应用

随着现代科学技术的发展,传统的依靠分离细菌来鉴定病原微生物的方法,已远远不能满足对现代各种病原微生物的诊断以及流行病学研究的需要.人们希望对病原体的检验方法能够更加快速、准确无误,且检测通量更高,人为影响因素尽可能减少.     

吉林省出血热宿主动物汉坦病毒型别分析

人类感染汉坦病毒能够导致两种严重的疾病：肾综合征出血热（出血热）和汉坦病毒肺综合征（迄今仅美洲发现）,汉坦病毒的主要宿主是啮齿类动物。吉林省为了科学防控出血热疫情,掌握汉坦病毒的型别分臣情况,在国家相关业务部门的大力支持下,开展了出血热宿主动物汉坦病毒（HV）的型别研究工作。本文主要针对该省HV的型别进行分析,对出血热科学防控起到积极推动作用。     

宫颈癌及癌前病变HPV型别分布与疫苗保护性研究

目的:分析来源于甘肃省的宫颈癌及高危型癌前病变组中人乳头瘤病毒(HPV)感染及HPV型别分布情况,预测HPV疫苗的潜在影响。方法:采用TCT、HC-Ⅱ检测进行宫颈病变筛查,异常者进行宫颈组织病理学检查;确诊为宫颈癌(ICC)或高危型癌前病变(≥CINⅡ)术前未进行放疗及化疗的为研究对象,标本运用SPF10-PCR技术进行分型检测。结果:ICC、≥CINⅡ中,HPV感染率分别为95.83%、96.37%。分布最广的为HPV16,累计感染分别为75.00%、57.81%;排第2位的是HPV18,分别为16.67%、26.56%;排第3位的是HPV58,分别为12.5%、20.31%。HPV16与HPV18混合感染为4.35%、11.29%。结论:HPV16、18型二价或HPV16、18、6、11型四价疫苗在本省宫颈癌的潜在保护能力较强,达69.56%。     

纳米孔测序技术在微生物基因组学研究中的应用

自然界里的微生物种类繁多,以往对微生物的研究大多集中在单一培养和定性分析方面,微生物基因组学从对微生物完整的全基因核苷酸测序入手,研究微生物基因组组成,并进一步分析组内各基因的精确结构、相互关系及表达调控,从而实现对微生物生物学功能的全面把握.传统测序方法读长短,后续数据分析和基因组拼接存在较大困难,第三代测序技术又称...