P27^kip1与出核因子CRM1在人淋巴瘤细胞系中的表达及相互关系

目的研究P27kip1与出核因子CRM1在淋巴瘤细胞中的表达及相互关系。方法运用血清饥饿同步化处理淋巴瘤细胞株Jurkat和Raji,10%血清刺激细胞增殖。Western blot分别检测生长阻滞及增殖的淋巴瘤细胞中P27kip1与CRM1的表达。用核浆分离方法检测P27kip1与CRM1分别在胞核、胞质的定位。免疫沉淀检测P27kip1与CRM1在淋巴瘤细胞中的结合。结果在不同状态的淋巴瘤细胞中,P27kip1与CRM1蛋白水平的表达均表现为负相关,并且P27kip1的核内外分布与CRM1的核内外分布一致。免疫沉淀结果验证在淋巴瘤细胞中P27kip1与CRM1相互结合。结论出核因子CRM1可能通过与P27kip1结合而影响P27kip1的核内外分布及表达水平,从而参与调控淋巴瘤细胞的生长。     

出核因子CRM1及p27在胶质瘤中的表达

目的 探讨出核因子CRM1、p27 10位丝氨酸(Ser10)磷酸化及p27蛋白在胶质瘤中的表达、相互关系及意义.方法 免疫组织化学SP法检测70例胶质瘤和10例非肿瘤对照脑组织标本中CRM1、p27Ser10磷酸化形式及p27蛋白的表达,Western blot检测6例新鲜胶质瘤标本中相应蛋白的表达.结果 CRM1及p27Ser10磷酸化形式在对照脑组织中表达不明显,在低级别胶质瘤中表达较少,在高级别胶质瘤中表达较多,两两比较差异均有统计学意义(P<0.01).p27在对照脑组织中表达明显,其表达水平随肿瘤级别增高而降低,差异有统计学意义(P<0.01).Western blot结果显示CRM1、p27Ser10磷酸化形式在胶质瘤中的表达水平与肿瘤细胞的恶性程度相关.相关分析显示:胶质瘤中CRM1蛋白表达与p27蛋白表达呈负相关(r=0.727,P<0.01),与p27Ser10磷酸化形式呈正相关(rs=0.954,P<0.01),与增殖指标Ki-67表达呈正相关(rs=0.799,P<0.01);p27Ser10磷酸化形式与p27蛋白表达呈负相关(rs=-0.744,P<0.01),与Ki-67表达呈正相关(rs=0.785,P<0.01).结论 在胶质瘤中高表达的CRM1可能通过识别并结合高表达的p27Ser10磷酸化形式,促进p27的出核降解,使p27表达降低,失去对细胞周期的调控,从而促进胶质瘤的恶性进展和增殖.     

磷酸化P27kip1的表达与非霍奇金淋巴瘤的恶性相关

目的探讨P27kip110位丝氨酸(Ser10)和187位苏氨酸(Thr187)磷酸化形式的蛋白质表达水平与非霍奇金淋巴瘤(NHL)恶性程度的关系。方法采用免疫组织化学方法检测88例NHL及15例良性增生淋巴结中Ser10、Thr187磷酸化P27kip1和P27kip1蛋白的表达,结合临床及病理资料进行统计分析。结果两种磷酸化位点的P27kip1蛋白在良性增生淋巴结(不包括生发中心)中的阳性率明显低于NHL,随着肿瘤侵袭性的增加,两种磷酸化位点的P27kip1蛋白表达水平增高,与增殖指标Ki-67呈正相关。Thr187磷酸化P27kip1蛋白的阳性率与P27kip蛋白表达水平呈正相关,Ser10磷酸化P27kip1蛋白的阳性率与P27kip1蛋白表达水平表现为负相关。结论磷酸化的P27kip1与NHL的恶性程度有关,联合检测磷酸化P27kip1与P27kip1蛋白的表达水平可为NHL的临床诊断和治疗提供参考。     

卵巢癌细胞系C-JUN激活蛋白-1与P27kip1表达的相关性

目的 探讨c-Jun激活区结合蛋白-1（Jab1）与p27kip1在卵巢癌细胞株HO-8910中的表达变化及相互关系。 方法 用血清饥饿及饥饿后释放处理HO-8910细胞,分别用Western blot及核浆分离技术检测Jab1 、p27kip1表达及亚细胞定位;用免疫沉淀方法检测Jab1与p27kip1的结合情况;脂质体介导法将Jab1基因转染HO-8910细胞,Western blot及核浆分离检测p27kip1表达。结果 血清饥饿导致HO-8910细胞生长周期停滞,p27kip1蛋白总量增加,且主要集中于胞核分布;Jab1蛋白总量减少,主要表达于核浆;血清释放后两者呈现相反的表达变化,但是p27kip1主要集中在胞质分布;p27kip1与Jab1在HO-8910细胞中存在相互结合的情况。脂质体转染Jab1后,p27kip1表达下降且定位有明显的胞质改变。结论 Jab1可能通过与p27kip1结合来介导p27kip1出核并影响其表达,从而参与调控HO-8910细胞的生长。     

尼美舒利对食管癌Eca-109细胞增殖及COX-2和P27kip1表达的影响

目的观察选择性COX-2抑制剂尼美舒利对食管癌Eca-109细胞增殖、凋亡及COX-2表达的影响,并探讨与抑癌基因P27kip1的关系。方法用MTT法测定Eca-109细胞增殖;透射电镜及流式细胞仪观察细胞凋亡及细胞周期;RT-PCR法检测Eca-109细胞COX-2mRNA表达变化;Westernblot检测COX-2和P27kip1蛋白表达变化。结果尼美舒利以时间、剂量依赖方式抑制Eca-109增殖,增加G0/G1期细胞比例;呈剂量依赖性诱导细胞凋亡,降低COX-2mRNA和蛋白表达,上调P27kip1蛋白表达。结论尼美舒利可抑制食管癌Eca-109细胞增殖,使细胞周期受阻于G0/G1期并诱导细胞凋亡。其机制可能是通过下调COX-2表达和上调P27kip1蛋白表达水平实现的。     

P27、SKP2在宫颈癌组织中的表达及相关性分析

目的研究蛋白P27和SKP2在宫颈癌组织中的表达及与临床各项病理指标的关系。方法选取大庆油田总医院病理科2004年6月至2006年6月40例宫颈癌、10例正常宫颈组织石蜡切块。用免疫组化（SP法）检测P27和SKP2的表达情况,并与临床病理特征进行比较。结果 P27和SKP2蛋白阳性表达均定位于癌细胞的细胞核内;P27和SKP2在宫颈癌组织中的阳性表达率分别为32.5%（13/40）和70.0%（28/40）,在正常宫颈组织中的阳性表达率分别为90.0%（9/10）和20.0%（2/10）,两者在宫颈癌和正常宫颈组织中的表达差别有显著意义（P〈0.01）;P27和SKP2在宫颈癌的表达与分化程度、临床分期、有无淋巴结转移有关（P〈0.05）,与病理类型无关（P〉0.05）;通过Spearm an等级相关分析结果显示,P27和SKP2在宫颈癌组织中的表达两者之间呈显著负相关（R=-0.433,P=0.005）。结论 P27和SKP2蛋白表达的情况与宫颈癌的发生和转移有密切关系,检测P27和SKP2的表达可作为了解宫颈癌生物学行为的参考指标。     

SKP2和p27kip1在结肠癌中的表达及其临床意义

结肠癌的发生、发展是涉及多因素、多步骤、多基因的过程,包括癌基因的突变和肿瘤抑制基因的失活。术后复发和转移是结肠癌患者的主要死因,筛查结肠癌高复发及高转移潜能患者是提高疗效的重要手段,但目前尚无高度特异性及高度敏感性的标志物。抑癌基因p27^kip1是细胞周期重要的负性调控因子,其缺失与肿瘤的发生、发展有关。SKP2蛋白特异作用于磷酸化的p27^kip1蛋白,使其通过泛素-蛋白酶体途径降解,与恶性肿瘤的发生有关。[第一段]     

p27~(kip1)在胃癌中的表达及与临床病理分期和预后的关系

目的 :探讨 p2 7kip1在胃癌中的表达状况及其预后价值。方法 :应用免疫组化技术 (S P法 )检测了 p2 7kip1在 6 7例胃癌中的表达。结果 :p2 7kip1在胃癌中的阳性表达率为 5 0 7% ,表达呈异质性。p2 7kip1的表达与胃癌的浸润深度 (P <0 0 5 )、淋巴结转移 (P <0 0 0 5 )、分化程度 (P <0 0 5 )及临床病理分期 (P <0 0 0 5 )显著相关 ,而与肿瘤大小、部位无关。结论 :p2 7kip1在胃癌中低表达反映了其恶性进展 ,是一个有价值的预后因子     

原癌基因c-myb与抑癌基因P27在子宫内膜癌中的表达及意义

目的 探讨原癌基因c-myb与抑癌基因P27在子宫内膜癌中的表达及意义.方法 采用免疫组化染色SP法对85例子宫内膜癌和63例同期因子宫肌瘤行子宫切除的正常子宫内膜组织中c-myb、P27蛋白进行检测,结合临床病理指标进行分析.结果 85例子宫内膜癌组织中c-myb的阳性率74.12％明显高于63例正常子宫内膜组织15.84％(x2=49.108,P＜0.001);而子宫内膜癌组织中P27的阳性率47.06％明显低于正常子宫内膜组织88.89％(x2=27.779,P＜0.001).在临床分级Ⅰ-Ⅱ期和Ⅲ-Ⅳ期表达的阳性率中,c-myb分别为64.71％和88.24％,差异有统计学意义(x2=5.887,P=0.015);P27分别为52.94％和38.24％,差异无统计学意义(x2=1.770,P=0.183).在组织学分级中,c-myb在分化程度越低的子宫内膜癌组织中表达越高,差异有统计学意义(x2=6.569,P=0.037);P27在分化程度越低的子宫内膜癌组织中的表达越低,差异也有统计学意义(x2=8.178,P=0.017);c-myb、P27表达在肌层浸润深度及有无淋巴结转移间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 c-myb参与子宫内膜癌发生、发展,P27抑制、阻滞子宫内膜癌细胞增生,两者可能作为子宫内膜癌基因治疗的靶位点,为子宫内膜癌的治疗提供新的思路.     

stathmin和P27kip1在大肠癌中的表达及意义

目的:探讨stathmin蛋白与p27kip1蛋白在大肠癌组织中的表达及意义.方法:应用免疫组织化学SABC法检测25例正常大肠黏膜组织、25例大肠腺瘤组织、47例大肠癌组织中stathmin蛋白及p27kip1蛋白的表达情况.结果:①stathmin蛋白在正常大肠黏膜组织、大肠腺瘤组织及大肠癌组织中的阳性表达率分别为20％、48％、74.47％;正常大肠黏膜组分别与大肠腺瘤组及大肠癌组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);大肠腺瘤组与大肠癌组比较,差异亦有统计学意义(P＜0.05):stathmin蛋白的表达与肿瘤的分化程度、有无淋巴结转移及TNM分期显著相关(P＜0.05).②p27kap1蛋白在正常大肠黏膜组织、大肠腺瘤组织及大肠癌组织中的阳性表达率分别为92％、80％、31.91％.正常大肠黏膜组与大肠癌组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);大肠腺瘤组与大肠癌组比较,差异亦有统计学意义(P＜0.05);正常大肠黏膜组与大肠腺瘤组比较,差异无统计学意义(P＞ 0.05);p27kip1蛋白的表达与肿瘤的分化程度及淋巴结转移有关(P＜0.05).③stathmin蛋白的表达与p27kip1蛋白的表达呈负相关(r=--0.695 3,P＜0.01).结论:stathmin蛋白在大肠癌组织中高表达,其表达程度与肿瘤的分化程度、淋巴结转移及TNM分期显著相关,p27kip1蛋白在大肠癌组织中低表达,其表达程度与肿瘤的分化程度及淋巴结转移显著相关,提示stathmin及p27kip1蛋白共同参与了大肠癌的发生、发展;stathmin蛋白可作为一种判断大肠癌恶性程度及侵袭转移的生物学指标.     

脑星形细胞瘤中P27kip1、P57kip2、CyclinE表达与恶性程度及预后关系

目的探讨P27^kip1、P57^kip2、CyclinE在脑星形细胞瘤的表达情况，并结合多种临床因素探讨其与肿瘤恶性程度及预后的关系。方法采用S-P免疫组化技术，检测50例脑星形细胞瘤及10例正常脑组织中P27^kip1、P57^kip2、CycLinE的表达．结果P27^kip1、P57^kip2及CyclinE在脑星形细胞瘤阳性表达随恶性程度不同有显著差异（P〈0．01）。通过Spearman等级相关分析P27^kip1与P57^kip2，CyclinE与P57^kip^2表达联系之间具有相关性（P〈0．05）。通过单因素及多因素条件Logistic回归模型表明肿瘤的病理级别、星形细胞瘤中P27^kip1、CyclinE表达是影响脑星形细胞瘤预后的主要因素。结论脑星形细胞瘤中P27~ipl，P57“”及CyclinE表达与肿瘤恶性程度相关；P27^kip1、P57^kip2及CyclinE表达两两之间具有相关性；肿瘤的病理级别、星形细胞瘤中P27^kip1、CyclinE表达可作为评价脑星形细胞瘤预后的独立指标。     

反转录病毒载体介导的P27kip1促HepG2细胞凋亡简

 目的 研究反转录病毒介导的P27kip1基因过表达对HepG2细胞的影响。 方法 构建携带有人P27kip1基因的反转录病毒载体,经脂质体介导转染PA317包装细胞,G418筛选获得稳定产毒细胞株,病毒感染HepG2细胞,筛选出P27kip1阳性克隆,Western blot检测P27kip1在HepG2中的表达,并通过细胞形态学观察、MTT、FCW等方法,检测P27kip1对HepG2细胞的影响。结果 成功构建了含有人P27kip1基因的pLNCX-P27反转录病毒载体并导入包装细胞获得了稳定产毒细胞株,病毒感染HepG2后P27kip1基因可在细胞内高表达,过表达P27kip1基因的细胞生长速度受阻,较多细胞阻滞于G1期,且凋亡增多。结论 构建的pLNCX-P27载体能稳定高效地将P27kip1基因导入HepG2细胞,过表达P27kip1可抑制细胞生长,加速凋亡。     

肝细胞癌患者肝组织中JAB1和P27kip1的表达变化及其临床意义

目的 研究肝细胞癌（HCC）组织中c-Jun激活域连接蛋白1（c-Jun activation domain binding protein 1,JAB1）的表达及与P27kip1(P27)间的关系,探讨JAB1与临床病理及预后的关系。方法 免疫组化检测HCC及 相应癌旁肝组织中JAB1和P27的表达。Western blot及免疫沉淀检测JAB1和P27的表达及相互作用。结果 HCC中,JAB1的表达高于癌旁肝组织,P27表达低于癌旁组织。JAB1的表达与组织分化程度、AFP值及转移相关（P<0.05）。HCC中JAB1与P27的表达呈负相关(r=－0.7077, P<0.001),并且能免疫共沉淀。结论 JAB1的表达与P27负相关,JAB1作为P27的负性调控因子,可能与HCC的恶性进展及预后相关。     

鼻咽癌中p27kip1表达及其与临床病理特征相关研究

Objective To inrestigate the expression of p27kip1 protein and its association with clinicopathologic features in nasopharyngeal carcinoma. Methods Immunohistochemistry was performed to detect p27kip1 expression in 60 paraffin- embedded nasopharyngeal carcinoma samples and 30 paraffinembedded non-cancer nasopharyngeal tissue samples. Results Nuclear and cytoplasmic p27kip1 staining was detected in nasopharyngeal carcinoma samples. Of 60 nasopharyngeal carcinoma samples, 46.7% (28/60)were positive for p27kip1 in cell nuclei, compared with as found in non-cancer nasopharyngeal tissue [90%(27/30), P＜0.01 ], and 68.3% (41/60) were positive in cytoplasma, compared with 20% (6/30) of noncancer nasopharyngeal tissue (P＜0.01). Both nuclear and cytoplasmic expression of p27kip1 were not associated to tumor size and local invasion, while positive nuclear expression of p27kip1 was significantly associated to nodal and remote metastasis and TNM stage. Cytoplasmic expression of p27kip1 was associated to nodal infiltration and TNM stage. Conclusions Compared to that in non-cancer tissue, p27kip1 is upregulated in cytoplasm and down- regulated in nuclei of nasopharyngeal carcinoma tissue, presenting a mislocalization. Less or no nuclear expression of p27kip1 may be associated to malignant progression of nasopharyngeal carcinoma. Abnormal expression and location of p27kip1 may be associated to nasopharyngeal stage and metastasis.     

Expression of p27kip1 in breast cancer and its prognostic significance

p27kip1 is a member of the KIP/CIP family of cyclin-dependent kinase inhibitors and is a negative cell-cycle regulator that is thought to play a role in tumour suppression. Reduced levels of this protein have been observed in a number of human cancers. However, evidence is conflicting as to whether p27kip1 has a role to play in breast cancer, including predicting behaviour and prognosis. The present investigation aimed to provide a definitive study of 830 breast cancer cases with median patient follow-up of 104 months to determine the true prognostic significance, if any. Immunohistochemical analysis of tissue microarrays and three scoring methods were used to assess p27kip1 expression. Univariate analysis showed a significant relationship between reduced p27kip1 expression and increasing tumour grade, nuclear pleomorphism, mitosis, and decreasing tubule formation (all p<0.001). Significant associations between reduced p27, negative oestrogen receptor status, and ductal/no special type tumours were also observed. Survival analysis demonstrated that patients with tumours with high p27kip1 levels had an improved survival compared with those with cancers with low expression. On multivariate analysis, when compared with existing factors, p27kip1 was not, however, an independent prognostic factor. It is concluded that the inverse relationship between p27kip1 levels and histological grade and individual grade components suggests a role for p27kip1 in both cell proliferation and differentiation, but is not clinically useful.