miR-802及其靶基因ROS1在口腔鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:研究miRNA-802（miR-802）及其靶基因ROS1在口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）中的表达及潜在临床意义。方法:收集原发OSCC组织及相应癌旁组织标本23例;荧光定量PCR检测各标本中miR-802及ROS1的表达;免疫组织化学检测各标本中ROS1的表达;结合患者临床病理资料,分析miR-802及ROS1在OSCC发生发展中可能的临床意义。结果:与癌旁组织相比较,OSCC组织中miR-802的表达显著降低（P<0.001）,而ROS1的表达显著升高（P<0.01）;相关性分析显示miR-802与ROS1在OSCC中的表达呈显著负相关（r=-0.746,P<0.0001）;miR-802与ROS1的表达水平与患者年龄,性别、肿瘤大小等临床病理特征无显著相关性,而与TNM分期及淋巴结转移有显著相关性（P<0.05）。结论:miR-802通过介导其靶基因ROS1参与调控口腔鳞状癌的发生发展过程。     

乳腺癌患者组织中miR-6861-5p的表达及临床意义

目的:研究乳腺癌患者组织中微小RNA-6861-5p（miR-6861-5p）的表达水平及临床意义。方法:完全随机选取本院2013年7月至2017年7月住院患者乳腺癌组织139例、良性病变组织101例及癌旁组织79例,实时定量PCR检测miR-6861-5p表达水平并分析乳腺癌组织miR-6861-5p的表达与临床病理特征的相关性。以43例完成随访患者治疗前miR-6861-5p表达量的中位数,将其分为miR-6861-5p高表达组（24例）和低表达组（19例）,Log-rank单因素分析比较两组患者的生存期差异。结果:乳腺癌组织中miR-6861-5p的RNA表达水平（9.242±3.188）显著高于良性病变组织（7.224±3.249）（P<0.01）及癌旁组织（7.221±2.594）（P<0.01）,其表达水平与肿瘤分期、淋巴结转移情况及激素受体表达相关（P<0.05）;miR-6861-5p在Luminal B-like型的表达量（10.910±2.386）显著高于TNBC亚型（7.605±2.565）（P<0.001）;miR-6861-5p高表达组的3年生存率低于miR-6861-5p低表达组（P=0.023）。结论:乳腺癌组织中miR-6861-5p的表达水平显著增高,是乳腺癌疾病进展、淋巴结转移及分子分型的潜在生物标志物。     

miR-138-5p在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的 探讨微小RNA-138-5p（miR-138-5p）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及临床意义。方法 采用实时荧光定量PCR（QPCR）检测102例NSCLC组织和98例癌旁组织中miRNA-138-5p表达， 分析miRNA-138-5p表达与NSCLC临床病理特征（性别、年龄、TNM分期、肿瘤直径和淋巴结转移）的关系；Kaplan-Miere法绘制生存曲线，差异行Log-rank检验；Cox回归模型分析影响总生存（OS）的因素。结果 QPCR检测结果显示，NSCLC组织中miR-138-5p表达水平为0.42±0.11，显著低于癌旁组织的1.03±0.28，差异具有统计学意义 （P＜0.05）。miR-138-5p表达与TNM分期、肿瘤直径及淋巴结转移均有关（P＜0.05）。miR-138-5p高表达者的中位OS＞36个月，显著高于低表达者的26个月，差异有统计学意义（P＜0.05）。Cox单因素分析显示除miR-138-5p表达外，淋巴结转移、肿瘤直径和TNM分期也与OS有关（P＜0.05）。结论 miR-138-5p在NSCLC中表达下调，其表达与NSCLC发生发展、预后有关， miR-138-5p可作为NSCLC诊断和预后预测新的靶点。     

血管内皮生长因子与膜型基质金属蛋白酶-1在口腔鳞状细胞癌表达及意义

[目的]检测血管内皮生长因子（VEGF）和膜型基质金属蛋白酶-1（MT1-MMP）在口腔鳞状细胞癌（OSCC）中的表达,并探讨其意义。[方法]采用免疫组织化学SP法检测VEGF、MT1-MMP在40例OSCC和10例口腔正常黏膜组织中的表达。[结果]VEGF和MT1-MMP在OSCC组织中的阳性表达率分别为67．50％和75．00％,在正常口腔黏膜组织中均阴性表达．差异有显著性（P〈0．001）。VEGF表达与OSCC的临床分期（P〈0．05）及淋巴结转移显著相关（P〈0．011,与肿瘤的分化程度无关。MT1-MMP表达与OSCC的分化程度（P〈0．05）及淋巴结转移显著相关（P〈0．01）,但与肿瘤的临床分期无相关性。VEGF与MT1-MMP表达呈正相关（rs=0．650,P〈0．001）。[结论]VEGF与MT1-MMP在OSCC发生发展中起重要作用,共同促进OSCC的浸润转移。     

血清miR-153和miR-142-3p表达在宫颈癌诊断和预后评估中的价值

摘 要：［目的］ 探讨宫颈癌患者血清miR-153及miR-142-3p的表达及其在宫颈癌诊断和预后评估中的价值。［方法］ 选取2014年1月至2017年3月收治的宫颈癌患者142例,采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测宫颈癌患者血清miR-153及miR-142-3p表达水平。绘制ROC曲线分析miR-153及miR-142-3p对宫颈癌诊断的截断值,并以此为标准将宫颈癌患者分为高表达和低表达,对两组临床病理特征进行比较。采用多因素Cox回归模型分析影响宫颈癌患者术后预后不良的危险因素。［结果］ 宫颈癌组血清miR-153（0.76±0.38 vs 1.92±0.95）及miR-142-3p（2.14±1.06 vs 8.15±3.20）表达水平明显低于对照组（P<0.01）。血清miR-153及miR-142-3p表达水平诊断宫颈癌的最佳截断值分别为1.31和4.93,AUC分别为0.817（95%CI：0.755～0.878）和0.850（95%CI：0.791～0.912）。血清miR-153及miR-142-3p低表达与宫颈癌患者的临床分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移及脉管浸润有关（P<0.05）。miR-153及miR-142-3p低表达与宫颈癌患者生存期短有关（P<0.01）。多因素Cox回归模型分析显示,临床分期、浸润深度、淋巴结转移、miR-153＜1.32及miR-142-3p＜4.93是影响宫颈癌患者预后不良的独立危险因素。［结论］ 血清miR-153及miR-142-3p表达水平在宫颈癌患者中明显下调,miR-153及miR-142-3p有望作为宫颈癌诊断及预后评估的生物学标志物。     

上皮性卵巢癌血清miR-1294及miR-4443的表达及其与预后的关系

目的:探讨上皮性卵巢癌（epithelial ovarian cancer,EOC）患者血清miR-1294及miR-4443的表达水平及其与患者临床病理特征和预后的关系。方法:选取我院2015年1月至2017年12月收治的106例EOC患者作为EOC组,另选取90例卵巢良性肿瘤患者作为良性组和60例正常健康女性作为对照组,检测血清miR-1294及miR-4443表达水平。以miR-1294及miR-4443的最佳截断值为标准将EOC患者分为高miR-1294组（n=33）、低miR-1294组（n=73）和高miR-4443组（n=36）、低miR-4443组（n=70）。EOC患者预后不良的危险因素应用单因素及多因素COX回归模型进行分析。结果:血清miR-1294表达水平（0.48±0.13 vs 1.16±0.57、1.21±0.62）在EOC组明显低于良性组和对照组（P均<0.001）。血清miR-4443表达水平（0.71±0.18 vs 1.36±0.64、1.45±0.70）在EOC组明显低于良性组和对照组（P均<0.001）。miR-1294和miR-4443高表达组的EOC患者临床分期、分化程度、淋巴结转移及腹膜转移与miR-1294和miR-4443低表达组比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。Kaplan-Meier分析显示,EOC患者生存期短与miR-1294及miR-4443低表达有关（P<0.001）。多因素分析显示,EOC患者预后不良的独立危险因素为淋巴结转移［HR（95%CI）=1.885（1.206～4.118）］、腹膜转移［HR（95%CI）=3.106（2.315～6.226）］、miR-1294＜0.73［HR（95%CI）=2.614（1.865～5.512）］及miR-4443＜1.04［HR（95%CI）=1.975（1.508～4.903）］。结论:miR-1294及miR-4443的低表达与EOC患者生存期短有关,是EOC患者预后预测的生物标志物。     

miRNA-17-5p在胃癌患者血清中的表达及其临床意义

目的:探讨miRNA-17-5p在胃癌患者血清中的表达情况以及临床意义。方法:前瞻性选取54例胃癌患者及54例健康对照者纳入研究,抽取所有研究对象的血清标本,提取总RNA,逆转录后实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测miR-17-5p在血清中的表达水平,并分析miR-17-5p的表达与胃癌临床病理特征的关系。结果:miR-17-5p在胃癌患者血清中的表达量为0.67±0.11,显著低于对照组2.67±0.29,差异具有统计学意义（P<0.05）。胃癌患者血清 miR-17-5p的表达与胃癌患者的肿瘤大小、淋巴结转移及临床分期密切相关（P<0.05）,但与患者年龄、性别及肿瘤分化程度无明显相关（P>0.05）。结论:miR-17-5p在胃癌患者血清中表达下调,且与患者临床病理指标密切相关,是胃癌临床诊断的有效分子指标。     

血清miR-6861-5p检测在乳腺癌临床诊治中的价值探讨

  目的  研究miR-6861-5p在乳腺癌患者血清中的表达,并探讨miR-6861-5p表达在乳腺癌患者临床诊治中的价值。  方法  通过实时荧光定量PCR法（RT-qPCR）检测2012年1月至2015年6月山东省德州市第二人民医院112例乳腺癌患者、37例乳腺良性病变和53例健康女性血清miR-6861-5p相对表达量,分析血清miR-6861-5p表达与乳腺癌患者临床病理和术后复发之间的关系,并探讨其表达对乳腺癌的临床诊断价值。  结果  乳腺癌患者血清miR-6861-5p相对表达量为（7.99±1.63）,显著高于良性病变患者（6.45±1.06）（P＜0.05）和健康研究对象（6.43±1.28）（P＜0.05）;血清miR-6861-5p表达与乳腺癌患者淋巴结转移、肿瘤组织ER、PR和HER-2表达、TNM分期、分子分型以及组织学分期显著相关（均P＜0.05）;肿瘤切除后乳腺癌患者血清miR-6861-5p表达量显著降低;治疗前血清miR-6861-5p诊断乳腺癌的敏感度和特异度分别为69.6%和77.8%,且与乳腺癌患者术后复发率有关。  结论  miR-6861-5p在乳腺癌患者血清中表达上调,是术前乳腺癌诊断、肿瘤分期、癌细胞转移和术后监测乳腺癌复发的潜在生物标志物。      

长链非编码RNA PVT1和miR-30d-5p在肝内胆管癌组织中的表达及其与预后相关性分析

目的:分析肝内胆管癌（ICC）组织中长链非编码RNA PVT1（lncRNA PVT1）和miR-30d-5p的表达,探讨其与ICC患者临床病理因素及预后的关系。方法:收集2012年3月至2015年9月间经手术切除的47例ICC组织和相应癌旁组织（≥5 cm）。采用实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测组织中lncRNA PVT1、miR-30d-5p表达水平,分析二者表达与临床病理因素及3年总生存率（OS）的关系。结果:ICC组织中lncRNA PVT1表达水平显著高于癌旁组织（P＜0.05）,miR-30d-5p表达水平明显低于癌旁组织（P＜0.05）。lncRNA PVT1表达与ICC患者肿瘤直径、组织分化程度、TNM分期和淋巴结转移有关（P＜0.05）,miR-30d-5p表达与ICC患者组织分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关（P＜0.05）。ICC组织中lncRNA PVT1表达与miR-30d-5p表达呈负相关（P＜0.05）。lncRNA PVT1低表达者3年OS明显高于高表达者（P＜0.05）,miR-30d-5p高表达者3年OS显著高于低表达者（P＜0.05）。组织分化程度、TNM分期、lncRNA PVT1表达、miR-30d-5p表达均是影响ICC患者预后的独立危险因素（P＜0.05）。结论:ICC组织中lncRNA PVT1高表达、miR-30d-5p低表达,二者表达与ICC患者组织分化程度、TNM分期及预后有关。     

蛋白酪氨酸磷酸酶基因、血管内皮生长因子在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及意义

目的:探讨口腔鳞状细胞癌（OSCC）组织中的蛋白酪氨酸磷酸酶基因（PTEN）、血管内皮生长因子（VEGF）的表达及意义。方法:选取我院2015年4月至2017年9月获取的90例OSCC患者的肿瘤组织标本（OSCC组）和45例癌旁正常口腔黏膜组织标本（对照组）,采用免疫组织化学染色技术检测两组标本中PTEN蛋白、VEGF蛋白的表达情况,并分析不同病理学分级、临床分期、淋巴结转移的OSCC患者肿瘤组织中PTEN蛋白、VEGF蛋白阳性表达差异。结果:OSCC组标本中PTEN、VEGF蛋白阳性表达率分别为35.56%、75.56%,对照组标本中PTEN、VEGF蛋白阳性表达率分别为73.33%、31.11%,两组比较差异具有统计学意义（P＜0.05）;在Ⅲ期和Ⅳ期、低分化、发生淋巴结转移的OSCC患者组织中PTEN蛋白阳性表达率显著低于Ⅰ期和Ⅱ期、高分化和中分化、未发生淋巴结转移的OSCC患者,差异均具有统计学意义（P＜0.05）;在Ⅲ期和Ⅳ期、低分化、发生淋巴结转移的OSCC患者组织中VEGF蛋白阳性表达率显著高于Ⅰ期和Ⅱ期、高分化和中分化、未发生淋巴结转移的OSCC患者,差异均具有统计学意义（P＜0.05）。结论:OSCC组织中PTEN蛋白表达水平显著降低,VEGF蛋白表达水平显著升高,并且与肿瘤的发生发展关系密切。     

微小RNA-30c在肾癌组织中的表达及其临床意义

目的   探讨微小RNA-30c（miR-30c）在肾癌组织中的表达及其临床病理特征和预后关系。方法   收集本院2012年1月至2015年12月经手术切除的95例肾癌组织和82例癌旁组织标本,采用实时定量PCR（QPCR）检测以上组织中miR-30c水平,分析miR-30c表达与肾癌临床病理参数（性别、年龄、TNM分期、淋巴结转移、远处转移和T分期）及预后的关系,采用Cox回归模型进行多因素分析。结果  QPCR检测发现95例肾癌组织中miR-30c的表达水平为0.561±0.378,低于82例癌旁组织的1.220±0.820（P＜0.05）。肾癌组织中miR-30表达与性别、远处转移和年龄均无关（P＞0.05）,而与TNM分期、淋巴结转移和T分期均有关（P＜0.05）,其中Ⅲ～Ⅳ期、淋巴结转移及T3～T4期的miR-30c相对表达量分别为0.422±0.219、0.442±0.299和0.408±0.194,均低于Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移及T1～T2期的0.671±0.439、0.619±0.400和0.654±0.431（P＜0.05）;Ⅲ～Ⅳ期、淋巴结转移及T3～T4期的miR-30c高表达率分别为21.43％（9／42）、16.13％（5／31）和19.44％（7／36）,均低于Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移及T1～T2期的41.51％（22／53）、16.13％（26／64）和40.68％（24／59）,差异均有统计学意义（P＜0.05）。miR-30c低表达组的中位总生存期为37.0个月,短于高表达组（＞60.0个月）,差异有统计学意义（P＜0.05）。Cox回归模型分析发现,TNM分期、淋巴结转移、远处转移、T分期及miR-30c表达均是影响预后的独立因素。结论   肾癌组织中miR-30c低表达,miR-30c参与肾癌的发生发展且与预后有关,其中miR-30c低表达者的预后较差,是影响预后的独立因素。     

AEG-1在口腔鳞状细胞癌中的表达及与预后的关系

目的探讨星形细胞上调基因-1（AEG-1）在口腔鳞状细胞癌中的表达及其与临床病理特征和患者预后的关系。方法 应用Western blotting检测AEG-1在口腔鳞癌细胞系（CAL27、SCC4、Tca8113、Tb、Ts）及人永生化表皮细胞HaCaT中的表达;应用免疫组织化学方法检测AEG-1在87例口腔鳞癌和20例正常口腔黏膜组织中的表达,并分析AEG-1表达与口腔鳞癌临床病理特征的关系;采用Kaplan-Meier法进行生存分析,Cox风险比例回归模型分析影响口腔鳞癌患者预后的独立因素。结果 AEG-1在口腔鳞癌细胞系CAL27、SCC4、Ts及Tb中高表达;AEG-1在口腔鳞癌和正常口腔黏膜组织中的高表达率分别为51.7％（45／87）和10.0％（2／20）,差异有统计学意义（P=0.001）。口腔鳞癌的AEG-1表达与分化程度、临床分期、T分期及淋巴结转移有关;生存分析显示,AEG-1低表达组的5年生存率为38.7％,高于高表达组的18.0％,差异有统计学意义（P=0.001）;单因素生存分析显示AEG-1、临床分期、T分期及淋巴结转移为影响口腔鳞癌预后的因素;Cox多因素分析显示AEG 1是影响口腔鳞癌患者预后的独立因素（RR=1.948,95％CI：1.013～3.744,P=0.046）。结论 AEG-1过表达与口腔鳞癌的发生、发展密切相关,可作为判断口腔鳞癌恶性程度和不良预后的参考指标。     

中国女性宫颈鳞癌与腺癌生物学行为比较的系统评价

目的：探讨宫颈鳞癌（SCC）和宫颈腺癌（AC）在生物学行为方面存在的差异,为宫颈癌的合理诊治提供循证依据.方法：利用Meta分析的方法综合评价国内公开发表的所有关于SCC和AC的相关文献,最终符合入选标准的文献共5篇,包含2151例患者,宫颈鳞癌1675例、宫颈腺癌476例.采用RevMan5.1软件进行统计分析,评价指标：肿瘤生长方式、FIGO分期、分化程度、淋巴 结转移、卵巢转移及宫旁浸润.结果：Meta分析结果显示：宫颈鳞癌肉眼观呈溃疡型所占比例明显高于腺癌 患者（RR=1.96,95%CI：0.99-3.90,P=0.047）,而内生型所占比例明显低于腺癌患者（RR=0.50,95%CI：0.32-0.78,P=0.002）;宫颈鳞癌和腺癌FIGO分期和总体分化程度差异无统计学意义（P均大于0.05）;宫颈腺癌淋巴结转移和卵巢转移都明显高于鳞癌患者（RR=0.56,95%CI：0.35-0.90,P=0.02）,（RR=0.17,95%CI：0.07-0.44,P=0.0002）;宫颈鳞癌和腺癌宫旁浸润差异无统计学意义（P＞0.05）.结论：宫颈鳞癌与腺癌肿瘤生长方式存在差异;宫颈腺癌淋巴结转移和卵巢转移都明显高于鳞癌患者;宫颈鳞癌和腺癌FIGO分期,总体分化程度,宫旁浸润无明显差异.     

ULK1在胃癌中的表达及其临床意义

目的 探讨胃癌组织中ULK1的表达及其临床意义。方法 收集2013年1月至2013年12月145例胃癌组织和50例癌旁组织。采用免疫组化SP法检测上述组织中ULK1的表达,分析其表达与临床病理特征和预后的关系。结果 胃癌组织和癌旁组织中ULK1的阳性表达率分别为80％（116／145）和16％（8／50）,差异有统计学意义（P＜0.05）。ULK1表达与胃癌浸润深度、分化程度、淋巴结侵犯、TNM分期和复发转移有关（P＜0.05）,与年龄、脉管侵犯、HER 2和p53无关（P＞0.05）。ULK1无表达、低表达和高表达组患者的中位生存时间分别为44.8个月（95％CI：40.5～49.2个月）、427个月（95％CI：39.9～45.6个月）和37.7个月（95％CI：33.0～42.4个月）,差异有统计学意义（P=0.007）。     

p53蛋白表达与上皮性卵巢癌恶性程度及预后的关系研究

目的：研究p53蛋白表达与上皮性卵巢癌恶性程度及预后的关系。方法：采用免疫组化SP法测定26例上皮性卵巢癌中p53蛋白表达。结果：p53蛋白在黏液性、浆液性、内膜样卵巢癌中的表达率（88.9%、75%、100%）无明显差异（P〉0.05）;三种卵巢癌的复发率分别为33.3%、12.5%、0,以黏液性癌最高,三者之间有显著差异（P〈0.05）;p53蛋白在淋巴结转移卵巢癌患者中均为高表达（100%）,与无淋巴结转移者（68.75%）相比差异明显（P〈0.05）;另外,淋巴结转移卵巢癌患者的复发率（40%）较无淋巴结转移患者（6.25%）明显增高（P〈0.05）。p53蛋白在I-II期和III-IV期卵巢癌的高表达（50%、100%）具有显著差异（P〈0.01）,不同期别卵巢癌复发的几率也存在显著差异,其中I-II期复发率为0,III-IV期复发率为31.25%。结论：p53蛋白的高表达与上皮性卵巢癌的恶性程度及预后有着密切的关系。     

microRNA-545抑制宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响

【摘 要】目的 探讨microRNA-545（miR-545）在宫颈癌组织及细胞系中的表达情况,并探讨其对宫颈癌Hela细胞生物学行为的影响。方法 采用实时定量PCR（qPCR）检测52例宫颈癌组织、30例宫颈上皮内瘤样变（CIN）组织和25例正常宫颈组织石蜡包埋组织中的miR-545表达水平,分析miR-545表达与宫颈癌临床病理特征的关系,并检测其在宫颈癌细胞株Hela、Siha、CaSki、C33a及宫颈正常上皮细胞中的表达情况。采用miR-545的特异性过表达载体pcDNA6.2／GW／EmGFP-miR-545转染miR-545表达水平最低的宫颈癌细胞（过表达组）,同时设pcDNA6.2/GW/EmGFP-miR空载体组和空白对照组。分析转染后Hela细胞的增殖水平（四甲基偶氮唑盐法）、凋亡情况（流式细胞仪Annexin V／PI双染法）及细胞周期（流式细胞仪PI单染法）。结果 宫颈癌组织中miR-545的相对表达量为0.245±0.051,低于CIN组织的0.761±0.073和正常宫颈组织的1.027±0.024,差异有统计学意义（P＜0.05）,且宫颈癌组织中miR-545水平与临床分期、分化程度及淋巴结转移有关（P＜0.05）;与宫颈正常上皮细胞相比,宫颈癌细胞的miR-545水平均降低,由高到低依次为CaSki、C33a、Siha和Hela细胞;与空载体组和空白对照组相比,转染过表达载体细胞的增殖抑制率、凋亡率及G0／G1期细胞比例均升高,而S、G2／M期细胞比例均降低,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 miR-545在宫颈癌组织和细胞中均为低表达,上调其水平可达到抑制增殖、诱导凋亡和阻滞细胞周期的作用,在宫颈癌防治中具有一定价值。     

非小细胞肺癌组织miR—10b表达临床意义分析

目的：探讨非小细胞肺癌（non-smallcelllungcancer,NSCLC）组织miR-10b的表达及其与临床病理因素的关系。方法：收集2005—01—01—2006—12—01中国医科大学附属第一医院病理科存档蜡块50例NSCLC和癌旁肺组织（距离癌组织〉3cm）,采用实时定量PCR检测NSCLC组织和相应癌旁组织中miR-10b的表达,分析miR-10b表达与临床病理参数的相关性,通过Kaplan-Meier进行生存分析。结果：50例NSCLC组织和相应癌旁组织中,34例癌组织miR-10b表达高于癌旁组织;癌组织miR-10b表达为1．55±0．57,相应癌旁组织为1．01±0．38,t=-2．182,P=0.034。miR—10b的表达水平与病理分期（U=189,P=0．010）和淋巴结转移（χ^2=6．650,P=0.010）呈正相关,而与其他临床病理因素如性别、年龄、发病部位、病理分型和分化等均无相关性。miR-10b高表达的NSCLC患者5年生存率为4％（1／25）,明显低于miR-10b低表达患者的32％（8／25）,χ^2=6．504,P=0．011。结论：miR-10b在NSCLC的发生发展中起着重要作用,可能成为NSCLC预后判断的指标,miRNA可能成为NSCLC分子诊断和靶向治疗的重要指标。     

miR-490-3p逆转MCF-7／ADM细胞对阿霉素耐药性的影响

【摘 要】目的 探讨miR-490-3p在阿霉素（ADM）耐药乳腺癌细胞系MCF-7／ADM中的表达情况及其对MCF-7／ADM细胞增殖、凋亡和ADM耐药的影响。方法 以野生型人乳腺癌细胞系MCF-7及其耐药型细胞系MCF-7／ADM为研究对象,用实时荧光定量PCR（qPCR）比较两种细胞中miR-490-3p的表达水平,将miR-490-3p的过表达载体pcDNA1（+）miR-490-3p瞬时转染至MCF-7／ADM细胞（过表达组）后采用qPCR检测转染效果,同时设pcDNA3.1（-）空载体对照组和空白对照组;采用MTT法测定转染pcDNA3.1（+）miR-490-3p对各组MCF-7/ADM细胞增殖能力的影响,测定ADM对MCF-7／ADM细胞的增殖抑制率并计算半数抑制浓度（IC50）及逆转倍数以评价对ADM敏感性的变化;分别于瞬时转染48 h后用Annexin V／FITC流式细胞术检测各组MCF-7/ADM细胞的凋亡率,Western blotting检测耐药蛋白P-糖蛋白（P-gp）,乳腺癌耐药蛋白（BCRP）和多药耐药相关蛋白1（MRP1）的表达,荧光分光光度计检测胞内ADM药物浓度,流式细胞仪检测P-gp活性。结果 MCF-7／ADM细胞中miR-490-3p的表达水平为0.24±0.07,显著低于野生型MCF-7细胞的1.02±0.03（P＜0.05）;过表达组瞬时转染24～96 h的miR-490-3p水平持续升高,均高于空载体对照组和空白对照组（P＜0.05）;过表达组的增殖抑制率随转染时间的延长而增加,转染24、48、72和96 h的增殖抑制率依次为（17.52±1.87）％、（31.67±2.79）％、（45.09±1.88）％和（61.82±2.52）％,高于空载体对照组（P＜0.05）;ADM对过表达组的IC50值为（11.27±2.34）μg／ml,低于空白对照组的和空载体对照组（P＜0.05）,且过表达组相对于空白对照组和空载体对照组的逆转倍数分别为3.35倍和3.39倍;与其余两组相比,过表达组的MCF-7/ADM细胞早、晚期凋亡率和细胞内药物浓度均升高,P-gp、BCRP和MRP1表达及P-gp活性均降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 上调miR-490-3p可逆转MCF-7／ADM细胞对ADM的耐药性,可能通过降低耐药蛋白表达及抑制P-gp活性有关,且升高其水平可抑制细胞增殖并诱导凋亡。