重型再生障碍性贫血患者骨髓中辅助性T细胞亚群数量及功能的变化

目的　研究重型再生障碍性贫血 (SAA)患者在免疫抑制治疗 (IST)恢复前后骨髓中辅助性T细胞 (Th细胞 )亚群改变情况及与造血功能的关系。方法　以流式细胞仪测定 2 4例发病期、15例恢复期SAA患者及 16名正常对照者骨髓中Th细胞亚群及CD3 CD8 细胞改变情况 ;以放射免疫法测定 2 0例发病期SAA患者、12例IST后恢复期患者及 16名正常对照者血清中TNF α、IL 4水平 ;评价Th1与CD3 CD8 细胞、TNF α的相关关系 ;评价Th1、CD3 CD8 细胞、TNF α、IL 4及Th1/Th2平衡与网织红细胞、中性粒细胞绝对值的相关关系。结果　正常对照组骨髓中Th1细胞、Th2细胞百分率及Th1/Th2比值分别为 (0 .4 2± 0 .30 ) %、(0 .2 4± 0 .17) %、1.5 7± 0 .93;发病期SAA分别为 (4 .87± 2 .6 4 ) %、(0 .4 1±0 .2 6 ) %、2 1.2 2± 5 .0 7,均显著多于正常对照 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,恢复期分别为 (0 .5 3± 0 .2 2 ) %、(0 .4 4± 0 .15 ) %、1.38± 0 .4 5 ,与正常对照组相当 (P均 >0 .0 5 ) ;CD3 CD8 细胞亦由发病期的(32 .32± 18.6 9) %显著下降为 (13.76± 2 .96 ) % (P <0 .0 1) ;SAA发病期血清中TNF α、IL 4为 (4 .2 9± 3.15 ) μg/L、(1.2 4± 0 .73) μg/L ,高于正常对照组的 (1.2 1± 1.16 ) μg/L     

肺炎支原体肺炎患儿辅助性T细胞亚群和细胞因子检测的临床意义

肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniae,Mp）是引起人类非典型肺炎和许多呼吸道感染的主要病原体之一,还可导致如心血管症、神经症状等呼吸道以外的并发症,对人类的健康构成了较大的威胁[1]。     

特异性细胞因子对T辅助17细胞和T调节性细胞表达的调节作用

目的 探讨多种细胞因子包括转化生长因子β(TGF-β)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素2(IL-2)对CD+4T淋巴细胞的分化调节作用.方法 将人外周血T淋巴细胞、鼠脾脏T淋巴细胞在不同的刺激条件下进行体外培养,采用流式细胞仪分析活化T淋巴细胞中CD+4IL-17+T辅助17细胞(Th17细胞)、C+4IL-17+T淋巴细胞、CD+4CD+25FOXP+3T调节性细胞(Treg细胞)的表达情况.结果 鼠脾脏T淋巴细胞培养液中有TGF-β存在时可促进Treg细胞、rh17细胞和CD+8;IL-17+T淋巴细胞分化,表达水平分别为(7.8±2.2)%、(12.6±3.1)%、(10.1±2.6)%.无细胞因子培养的同类细胞为实验对照组,表达水平分别为(4.8±0.6)%、(1.7±0.5)%、(1.0±0.4)%,差异均有统计学意义(q=4.09、8.80、9.61,P<0.05或P<0.01).TGF-β与IL-6细胞因子共同存在时可促进Th17和CD+8IL-17+T淋巴细胞分化,表达水平分别为(17.8±5.3)%、(15.0±4.2)%,而分化受抑制的Treg细胞的表达水平为(4.I±1.2)%,与TGF-β组同类细胞表达水平比较差异均有统计学意义(q=5.03、5.17、5.04,P均<0.01).在TGF-β刺激的T淋巴细胞中加入IL-2细胞因子可使Th17细胞、CD+8;IL-17+T淋巴细胞表达减少,同时伴有Treg细胞表达量的增加;在加入抗IL-2后结果相反,即Th17细胞、CD+8IL-17+T淋巴细胞表达水平增加,Treg细胞表达水平减少.人外周血T淋巴细胞上Th17、CD+8IL-17+、Treg细胞表达水平变化趋势与鼠脾脏淋巴细胞相似.结论 不同细胞因子对于调控Th17细胞和Treg细胞之间的平衡起着十分重要的作用.     

肿瘤病人T细胞核仁嗜银蛋白和辅助性T细胞亚群变化

目的　探讨肿瘤病人外周血单个核细胞 (PBMC)中T细胞核仁嗜银蛋白 (AgNORs)变化和辅助性T(Th)细胞亚群变化的关系及其临床意义。方法　PBMC经多克隆T细胞活化剂刺激 ,以图像分析法检测AgNORs区面积与细胞核仁面积的百分比 (I.S % ) ;PBMC被离子霉素和佛波醇酯活化 5h后 ,以酶联免疫斑点法 (ELISPOT)检测γ干扰素 (IFNγ)和白细胞介素 4(IL 4)产生细胞的频度( % ) ;以离子霉素加佛波醇酯刺激 2 4h ,用ELISA试剂盒检测培养上清液中的IFNγ 和IL 4水平。结果86例肿瘤病人和 44名正常人 ,PBMC中活化T细胞AgNORs表达分别为 ( 4 90± 1 2 0 )I S %和 ( 7 82±1 2 8)I S % ,肿瘤组下降非常显著 (P <0 0 5 ) ;肿瘤组PBMC中Th2细胞频度显著上升 ,Th/Th2比值显著下降 ;同时 ,肿瘤组PBMC产生IFNγ 和IL 4水平发生相应变化 ,变化方式与Th亚群变化相似 ;肺癌转移组与未转移组、复发组与未复发组相比 ,Th1细胞数、Th1/Th2之比和IFNγ 的产生下降非常显著 ;在肿瘤组AgNORs表达与Th1细胞频度、Th1/Th2比值、IFNγ 产生和肿瘤病人生活质量评分呈正相关。结论　肿瘤病人PBMC中T细胞表达AgNORs下降 ,与患者Th1细胞功能下降呈正相关。     

三阴性乳腺癌外周血及病灶微环境辅助性和调节性T细胞表达

目的分析三阴性乳腺癌(trip nenegative breast cancer,TNBC)患者外周血及病灶微环境辅助性T细胞和调节性T细胞的表达水平。方法选择2012年1—4月经临床及病理确诊的女性TNBC 34例(TNBC组)、非三阴性乳腺癌(NTNBC)39例(NTNBC组)及同期确诊为乳腺良性疾病女性患者27例(对照组),均检测外周血及病灶微环境辅助性T细胞(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)和调节性T细胞(CD4CD25+Treg和CD4+CD25+Foxp3+Treg),并进行比较。结果 TNBC组外周血及病灶微环境CD3+、CD4+水平、CD4+/CD8+比值均明显低于NTNBC及对照组,而CD8+水平则明显高于其他两组(P0.05);TNBC组外周血及病灶微环境CD4CD25+Treg及CD4+CD25+Foxp3+Treg表达水平均明显高于NTNBC组及对照组(P0.05)。结论 TNBC患者存在明确的外周血及病灶微环境调节性T细胞和辅助性T细胞异常表达,其可作为本病免疫学病因诊断及评估疗效的特征性标识,并为今后寻找TNBC免疫治疗途径提供试验数据。     

干燥综合征患者肺功能变化及其与辅助性T细胞失衡的相关性

目的：观察干燥综合征（SS）患者肺功能参数与细胞因子的变化,探讨 SS 肺功能变化与 Th 细胞的关系。方法采用肺功能仪检测 SS 患者肺功能,ELISA 法检测血清白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）、白细胞介素-17（IL-17）、肿瘤坏死因子（TNF）-a 水平,观察 SS 患者肺功能参数与 Th 细胞的关系。结果SS 患者肺功能降低率为76．66％;与健康对照组比较,SS 组肺功能参数明显降低（P ＜0．05或 P ＜0．01）,血清 IL-6、TNF-a、IL-17、Th1／Th2表达升高,IL-10水平较低（P ＜0．05）;相关性分析显示,SS 患者肺功能参数一秒用力呼气容积占用力肺活量比值（FEV1／FVC）、一氧化碳弥散功能（DLCO）与 IL-6呈负相关,最大呼气中段流量（MEF25-75）、用力最大呼气流量（PEF）与 IL-17呈负相关,用力呼气50％流量、用力呼气25％流量与TNF-a 呈负相关,MEF25-75、PEF、DLCO 与 Th1／Th2呈负相关（P ＜0．05或 P ＜0．01）。MEF25-75与 IL-10呈正相关（P ＜0．05）。结论干燥综合征患者存在肺功能水平的降低,且肺功能降低与炎性细胞因子表达及 T-help-er 细胞分泌失衡有关。     

黄芪注射液对银屑病患者T淋巴细胞亚群及细胞因子的影响

目的：探讨黄芪注射液治疗银屑病的机制。方法：对20例进行期寻常型银屑病患者应用黄芪注射液治疗,10名健康志愿者作为正常对照组,分离外周血淋巴细胞与血清,应用流式细胞仪和ELISA测定,观察患者治疗前后和正常对照组各指标的变化情况。结果：与正常对照组相比,病例组治疗前IL-2,sIL-2R,CD4^＋T,CD4^＋T／CD8^＋T含量升高（P〈0．05）,CD8^＋T,mIL-2R表达下降（P〈0．05）;治疗后,IL-2,sIL-R,CD4^＋T,CD4^＋T／CD8^＋T含量降低（P〈0．05）,CD87T,mIL-2R表达升高（P〈0．05）。结论：黄芪注射液是治疗进行期银屑病的一个有效药物,它的治疗作用可能是通过调节细胞因子的表达,抑制T淋巴细胞而实现的。     

瑞舒伐他汀钙对冠心病合并糖尿病患者辅助性T细胞亚群的干预作用

目的通过观察瑞舒伐他汀钙对冠心病合并糖尿病患者的外周血中辅助性T细胞亚群的干预作用,推测瑞舒伐他汀钙在治疗过程中的非调脂作用。方法选取冠心病合并糖尿病患者90例,随机分为安慰剂对照组(45例)和瑞舒伐他汀钙治疗组(45例),在治疗前及给予安慰剂或瑞舒伐他汀钙(10mg/晚)治疗1个月后,提取外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞术检测Th1/Th2细胞水平。结果 (1)瑞舒伐他汀钙组治疗1个月后,血浆中总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)与治疗前及对照组相比,均有显著性下降,差异具有统计学意义(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和甘油三酯(TG)变化无统计学意义;(2)瑞舒伐他汀钙组治疗1个月后,患者外周血中Th1细胞水平与治疗前及对照组相比显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01),Th2细胞水平与治疗前及对照组相比显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论瑞舒伐他汀钙除具有较强的调脂作用外,还可以改善外周血辅助性T细胞亚群的失衡,从而延缓冠心病合并糖尿病患者的动脉粥样硬化进程,此可能为他汀类药物抗动脉粥样硬化的机制之一。     

癌症患者的T淋巴细胞亚群免疫功能的研究

目的为研究癌症患者的T细胞亚群及细胞因子的分泌情况。方法分离癌症患者与健康人外周血单个核细胞,用流式细胞仪测定外周血CD4 和CD8 细胞,同时用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定其血清细胞因子IFN-γ和IL-4的含量。结果癌症患者组的CD4 细胞比例偏低(P<0·05),CD8 细胞比例明显偏高(P<0·01),CD4 /CD8 比值倒置,低于对照组(P<0·01)。IFN-γ的水平低于对照组,而IL-4无差异。T细胞亚群Th1/Th2比值与对照组差异有统计学意义(P<0·05)。结论癌症患者T淋巴细胞的免疫功能存在不同程度的低下。     

肿瘤病人T细胞核仁嗜银蛋白和辅助性T细胞亚群变化

目的:探讨肿瘤病人外周血单个核细胞(PBMC)中T细胞核仁嗜银蛋白(AgNORs)变化和辅助性T(Th)细胞亚群变化的关系及其临床意义。方法PBMC经多克隆T细胞活化剂刺激,以图像分析法检测AgNORs区面积与细胞核仁面积的百分比(1.S％):PBMC被离子霉素和佛波醇酯活化5h后,以酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测IFNY、和IL-4产生细胞的频度(％):以离子霉素加佛波醇酯刺激24h,用ELISA试刑盒检测培养上清液中的IFNY、和IL-4水平。结果 肿瘤病人(n=86)和正常人(n=44),PBMC中活化T细胞的AgNORs表达分别为4.9±1.21.S％和.7.82±1.28 1.S％,肿瘤组非常显著下降,P<0.05:肿瘤组PBMC中1112细胞额度显著上升,Th1／Th2比值显著下降:同时,肿瘤组PBMC产生IFN和IL-4水平发生相应变化,变化方式与Th亚群变化相似:在肺癌组中,转移的与未转移的,复发的与未复发的相比,Th1细胞数、Th1／Th2之比和IFNY、产生水平非常显著下降:在肿瘤组AgNORs表达与Th1细胞频度、Th1／Th2比值、IFNY产生和肿瘤病人生活状态的Kamofsky评分正相关。结论 现有病例观察结果表明,肿瘤病人PBMC小T细胞表达AgNORs下降,与患者Th1细胞功能下降正相关。     

流式细胞术测肺癌患者外周血T细胞亚群及其与临床病理的关系

目的：探讨应用流式细胞术检测肺癌患者细胞免疫功能的方法及其与临床病理的关系。方法：应用三色免疫荧光流式细胞仪测定105例肺癌患者及18例正常对照者外周血T细胞亚群CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、NK细胞、CD4^＋／CD8^＋比值。结果：全组肺癌患者外周血中各T淋巴细胞亚群比例较正常对照组无显著性差异；Ⅰ期、Ⅱ期肺癌患者和健康对照组之间T细胞各亚群相比没有统计学差异；Ⅲ期、Ⅳ期肺癌患者和健康对照组相比：CD4^＋明显降低（P=0．04）；CD8^＋则明显升高（P=0．02）；CD4^＋／CD8^＋较正常有所下降，但没有显著性差异。结论：外周血T细胞亚群的检测有助于对肺癌患者的病情、临床分期以及机体免疫状态的判断，晚期肺癌患者机体免疫状态成紊乱型改变。     

小细胞肺癌患者外周血辅助性T细胞的表达情况及临床意义

目的研究小细胞肺癌(SCLC)患者外周血中辅助性T细胞1(Th1)、Th2、Th17及调节性T淋巴细胞(Treg)的表达情况,探讨其在SCLC进展中的作用。方法选择2016年1月至2018年4月本院收治的44例住院的SCLC患者(SCLC组)及24名健康者(对照组)作为研究对象。采用流式细胞法检测两组研究对象外周血中Th1、Th2、Th17及Treg细胞的表达情况,应用微量样本多指标流式蛋白定量技术(CBA)检测血清中的细胞因子IFN-γ、IL-17及IL-10的表达情况。结果SCLC组患者的外周血中Th1细胞、Th1/Th2、IFN-γ表达水平显著低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。SCLC组患者的外周血中Th2、Treg、Th17、Treg/Th17、IL-17、IL-10表达水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论SCLC患者外周血中Th1/Th2的降低、Treg/Th17的升高可能与SCLC的致病机理及预后密切相关,该结论将为SCLC的治疗提供新的思路。     

干扰素对真性红细胞增多症外周血单个核细胞表达TRAIL等凋亡诱导基因的影响

目的研究干扰素(IFN)对真性红细胞增多症(PV)患者外周血单个核细胞(PBMNC)的自然杀伤(NK)细胞活性及肿瘤坏死冈子相关凋亡诱导配体(TRAIL)等凋亡诱导基因表达的调节作用。方法取12例 PV 患者 PBMNC,用乳酸脱氢酶释放法检测 NK 细胞活性并计算裂解单位(LU),用 RNA 酶保护分析法检测 TRAIL 及其他凋亡诱导基因的表达。结果 PV 患者 PBMNC 的 NK 细胞活性在未经处理组为(152.0±146.6)LU,IFNα1b 及 IFNα2b 处理组分别为(250.9±197.4)LU 和(355.9±249.9)LU,与未处理组相比均显著升高(P<0.05和 P<0.01)。而 PV 患者的 PBMNC 经过IFNα1b及 IFNα2b 刺激后,TRAIL mRNA 的表达明显增加,且 IFNα上调 FLICE,DR3,DR4和TNFRp55基因表达,诱导 FasL,Fas,TRADD 和 RIP 基因的表达。为了确定 TRAIL 在 IFNα诱导的 NK细胞活性中所起的作用,应用中和实验表明 TRAIL 受体 DR4-Fc 及 DR5-Fc 多肽能够部分阻断 IFNα2b提高的 NK 细胞活性。结论 IFNα诱导/上调 TRAIL 及其他凋亡诱导基因在 PV 患者 PBMNC 的表达,并介导 IFNα提高的 NK 细胞活性,这可能是 IFNα治疗 PV 的机制之一。     

肺癌患者外周血调节性T细胞的检测及意义

目的探讨肺癌患者外周血CD4 CD25 调节T细胞水平的变化及其意义。方法采用流式细胞术检测68例肺癌患者外周血CD4 CD25 调节T细胞水平,并进行分层分析。结果肺癌组外周血CD4 CD25 调节T细胞水平(28.6±9.24)%,明显高于30例健康对照组CD4 CD25 T细胞水平(11.12±3.32)%(P<0.01)。进一步分层分析显示:随肺癌进展,外周血CD4 CD25 T细胞水平显著升高,进展期尤其明显[Ⅰ Ⅱ期:(19.52±3.32),n=22;Ⅲ期:(27.28±8.26)☆%,n=25,P<0.01;Ⅳ期:(32.31±15.63)%,n=21,P<0.01]。结论肺癌患者外周血CD4 CD25 调节T细胞水平明显高于正常,且与肿瘤的发生发展密切相关。去除这群细胞可能有效诱导肿瘤免疫,为肿瘤治疗提供一种新的方法。     

卵巢癌患者手术前后外周血Th1/Th2细胞因子表达

目的评价卵巢癌患者外周血Th1/Th2细胞因子表达水平。方法流式细胞微球阵列检测42例卵巢癌患者手术前后和20例健康女性外周血Th1类细胞因子（IFN-γ,IL-2）和Th2类细胞因子（IL-4,5,10）的表达水平。结果与正常对照组相比,卵巢癌Th2类细胞因子（IL-4,5,10）均高于正常对照组,尤其是IL-10明显高于正常对照组（6.09&#177;4.01vs.3.26&#177;1.38,t=4.34,P〈0.05）。术后卵巢癌Th1类细胞因子（IFN-γ,IL-2）均较术前有所下降,但差异无统计学意义（t分别=-0.82、0.54,P均〉0.05）;术后Th2类细胞因子（IL-4,5,10）均较术前有所下降,尤其是术后IL-10水平明显低于术前水平（4.84&#177;2.75vs.6.09&#177;4.01,t=4.83,P〈0.05）。结论卵巢癌患者Th1细胞向Th2细胞漂移,手术治疗能逆转其漂移状态。Th1/Th2细胞因子检测可为卵巢癌的免疫治疗提供参考依据。     

突发性耳聋患者外周血T细胞亚群的变化

目的探讨突发性耳聋患者外周血中T细胞亚群的变化情况.方法采用流式细胞术测定43例突发性耳聋患者外周血 T细胞亚群数,并与20例健康对照进行比较.结果突发性耳聋组CD+3T细胞、CD+4T细胞、CD+8T细胞以及CD+4/CD+8分别为67.91±4.99、36.98±4.38、30.96±4.03、1.22±0.31.与对照组比较,CD+3T细胞(P=0.062)、CD++4T细胞(P=0.013)和CD+4/CD+8值(P=0.007)呈不同程度降低;CD+8T细胞(P=0.005)、CD+4T细胞(P=0.032)和CD+4/CD+8值(P=0.006)较治疗前呈不同程度升高,CD+8T细胞(P=0.020).结论突发性耳聋的发病与T细胞亚群数的变化有关,即与机体免疫功能有关.     

乌司他丁对胃肠道术后炎性因子与外周血T淋巴细胞亚群的影响

目的观察胃肠道手术术前静脉滴注乌司他丁对术后炎性因子与外周血T淋巴细胞亚群的影响,探讨其作用机制。方法选择2012年7月至2014年6月收治的115例胃肠道手术患者随机分为研究组(60例)和对照组(55例),研究组手术麻醉诱导前静脉滴注乌司他丁2.5kU/kg,对照组静脉滴注5%葡萄糖氯化钠注射液,术后常规处理,比较术前及术后1、3d的血清炎性因子水平及外周血T淋巴细胞亚群变化情况。结果两组术后1、3d白细胞介素(IL)-6、IL-8、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α、C反应蛋白(CRP)水平呈先上升、后下降趋势;研究组术后1、3d的IL-6、IL-8、TNF-α、CRP水平均明显低于对照组,IL-10则高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。两组术后1、3dT淋巴细胞亚群中CD4~+、CD8~+呈先下降、后上升趋势,研究组CD4~+/CD8~+逐渐上升,对照组CD4~+/CD8~+先下降、后上升;研究组术后1、3dCD4~+与CD4~+/CD8~+均明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05),CD8~+低于对照组,差异无统计学意义(P0.05)。结论胃肠道手术应用乌司他丁能有效降低炎性介质的释放,改善手术应激状态时的细胞免疫功能,减轻手术造成功能性器官的损害。     

Human prostate cancer cells induce inflammatory cytokine secretion by peripheral blood mononuclear cells

A substantial number of studies provide evidence that inflammation may play a significant role in the pathogenesis of prostate cancer via increased activity of inflammatory cytokines, particularly IL-6. We have previously shown that peripheral blood mononuclear cells (PBMC) are capable of carrying out an in vitro “immunomodulatory dialog” with colon cancer cells expressed by an increased production of pro-inflammatory cytokines by PBMC. The aim of the current study was to examine the model of cell-to-cell interaction between PBMC and prostate cancer cells from two lines – androgen resistant (PC-3) and androgen-dependent (LNCaP). For that purpose, cancer cells from both lines were incubated with PBMC, and cytokine secretion by PBMC was evaluated. The results showed a cell-concentration dependent increase in secretion of the pro-inflammatory cytokine IL-6 by PBMC induced by cells from both lines, whereas generation of IL-1β and the anti-inflammatory cytokine IL-10 were found to be increased after incubation with PC-3 cells only. The secretion of IL-10 was slightly lower following incubation of PBMC with supernatants derived from PC-3 cells. The results of the study support the possibility that prostate cancer cell-induced cytokine production by PBMC, and particularly IL-6, are involved in prostate cancer development. The discrepancy between the effect of the two prostate cancer cell lines on cytokine secretion by PBMC may be due to their different androgen dependency.