手术创伤对大鼠空间学习记忆能力及海马GFAP和S100蛋白表达的影响

目的探讨手术创伤对大鼠空间学习记忆能力及海马胶原纤维酸性蛋白(GFAP)、S100蛋白表达的影响。方法SD大鼠98只随机分为三组:对照组(A组,n=14)、麻醉组(B组,n=42)、手术组(C组,n=42),B、C组根据麻醉、手术后1d或3d或7d分为3个亚组B1、B3、B7组和C1、C3、C7组,每亚组14只。在相应的时间点用Y型电迷宫测试大鼠的空间学习记忆能力,同时用免疫组织化学方法检测海马GFAP和S100蛋白的表达。结果(1)学习记忆能力测试表明:C1组的刺激电压[(53±8)V]高于正常对照A组[(39±7)V](P<0.01)。C1、C3组大鼠Y型电迷宫测试达到学会标准时总共学习的次数分别为(67±26)次、(60±18)次,比其余各组明显增多(P<0.01)。C7组的学习次数[(41±11)次]与A组[(28±7)次]的差异无显著性(P>0.05)。(2)C1组GFAP、S100的表达增多。结论手术创伤可暂时影响大鼠的空间学习记忆能力,并引起海马GFAP、S100蛋白表达的增加,海马星形胶质细胞可能参与了学习记忆过程。     

酒精中毒对小鼠海马星形胶质细胞表达GFAP及学习记忆的影响

目的:研究不同剂量酒精组小鼠海马胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达并探讨其意义。方法:用不同剂量的酒精(12.5%、25%和50%)灌喂8周龄雌性小鼠,用Morris水迷宫测试小鼠学习记忆功能,用免疫组织化学染色观察星形胶质细胞表达GFAP的状态。结果:高、中剂量组小鼠游泳轨迹为随机性,潜伏期延长;高、中剂量组海马GFAP表达增强,星形胶质细胞数目增多及面密度升高。结论:GFAP表达增强、胶质细胞增生可能与酒精中毒引起的学习记忆减退有关。     

穹窿海马伞损伤对成年鼠学习记忆和海马GFAP阳性细胞的影响

目的:探讨穹窿海马伞(ＦＦ)损伤鼠学习记忆能力与海马胶质纤维性蛋白(ＧＦＡＰ)阳性细胞之间的关系。方法:切断ＳＤ成年大鼠左侧ＦＦ,用Ｙ迷宫和免疫组化结合图像分析系统测试大鼠学习记忆能力和海马ＧＦＡＰ阳性细胞的变化情况及相互关系。结果:损伤２周后,损伤组损伤侧海马ＣＡ１区辐射层和齿状回分子层ＧＦＡＰ阳性细胞数密度(Ｎｖ)较正常组分别增多３０．２９%和３０．１５%(均Ｐ＜０．０１),胞体面积分别增加１６．０４%和１９．４２%(均Ｐ＜０．０１),齿状回分子层体密度(ＶｃｖＢ)增大１９．４０%(Ｐ＜０．０５)。经相关分析,大鼠学习记忆能力与海马ＣＡ１区ＧＦＡＰ阳性细胞Ｎｖ呈负相关(ｒ＝－０．８３６,Ｐ＜０．０１),与齿状回Ｎｖ呈负相关(ｒ＝－０．７９２,Ｐ＜０．０１)。结论:海马星形胶质细胞可能参与学习记忆过程。     

慢性间歇性缺氧对大鼠学习记忆及海马CA3区GFAP表达的影响

目的 探讨慢性间歇性缺氧以及复氧对大鼠学习记忆功能及海马CA3区胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达的影响.方法 24只SD大鼠,分为空白组(UC组)、慢性间歇性缺氧组(CIH组)和复氧组(RH组),CIH组建立慢性间歇性缺氧模型,RH组前4周同CIH组,后4周正常饲养,所有大鼠在模型建立后进行Morris水迷宫测试后检测大鼠海马CA3区GFAP的表达.结果 ①Morris水迷宫逃避潜伏期成绩:CIH组＞RH组＞UC组(P＜0.01,P＜0.05);②穿越平台次数及跨越目标象限时间占整个游泳的时间百分率的比较:UC组＞RH组＞CIH组(P＜0.01,P＜0.05);③海马CA3区GFAP阳性产物COD值比较:CIH组＞RH组＞UC组(P＜0.01).结论 ①慢性间歇性缺氧可引起大鼠学习记忆功能的下降,复氧后大鼠学习记忆功能有所提高;②大鼠学习记忆功能的下降可能与海马CA3区GFAP的变化有关.     

新生Wistar鼠海马CA1区GFAP和Syp的表达

目的动态观察Wistar鼠生后7～21d海马CA1区胶原纤维酸性蛋白(GFAP)和突触素(Syp)的表达并探讨其意义.方法应用免疫组化的方法动态观察Wistar大鼠生后7d、8d、10d、14d、21d海马CA1区GFAP和Syp的表达.结果海马CA1区Syp和GFAP的表达随日龄增加而增加.结论 Wistar大鼠海马CA1区GFAP和Syp的表达随日龄增加而增加,表明新生Wistar大鼠脑于生后大脑处于不断生长发育阶段,测定GFAP和Syp是研究新生鼠脑发育的有效指标之一.     

电磁辐射对大鼠学习记忆能力和海马神经元形态的影响

目的:观察电磁辐射对大鼠学习记忆能力和海马神经元形态的影响.方法:48只Wistar大鼠随机分为8组(n=6):辐射组(6个)、假辐射组(1个)、空白对照组(1个).辐射组大鼠头部接受频率为900MHz、功率密度为2000μW/cm2的近场辐射,连续辐射30d后以Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力,硫堇染色观察海马神经元的形态变化.结果:与空白对照组大鼠相比,假辐射组的学习记忆能力无明显变化(P>0.05),各辐射组大鼠的学习记忆能力明显下降(P<0.05).硫堇染色结果显示,空白对照组和假辐射组大鼠海马神经元形态与数目均无明显变化;各辐射组大鼠海马CA1区和CA3区锥体细胞层变薄,细胞排列紊乱、疏松,胞浆尼氏体较减少,并出现大量神经元缺失.结论:900MHz微波电磁辐射可导致大鼠的空间学习记忆功能下降.     

Ghrelin和Obestatin对大鼠空间学习记忆能力影响

目的 探讨Ghrelin和Obestatin对正常大鼠空间学习记忆能力的影响.方法 大鼠随机分为Ghrelin高剂量组、低剂量组和对照组-1;Obestatin高剂量组、低剂量组和对照组-2.Ghrelin各组双侧海马CA3区微量注射不同剂量Ghrelin和等量生理盐水;Obestatin各组侧脑室微量注射不同剂量的Obestatin和等量生理盐水.应用水迷宫方法 检测大鼠的空间学习记忆能力.结果 水迷宫隐匿平台实验中Ghrelin高剂量组的潜伏期与对照组-1相比明显缩短,撤平台实验中Ghrelin高剂量组在原象限游泳的时间和总路程的百分比与对照组相比明显增加.Obestatin各组在隐匿平台和撤平台实验中的结果 都没有统计学差异.结论 海马微量注射Ghrelin可明显提高大鼠的空间学习记忆能力,该作用可能与Ghrelin激活海马部位有关;侧脑室注射Obestatin, 在水迷宫实验中未能观察到大鼠空间学习记忆能力的提高.     

化学点燃癫痫大鼠在水迷宫中学习记忆能力与海马中GFAP表达的关系

有关化学点燃癫痫大鼠在水迷宫中学习记忆能力与脑中胶原性酸性蛋白 (ｇｌｉａｌｆｉｂｒｉｌｌａｒｙａｃｉｄｉｃｐｒｏ ｔｅｉｎ ,ＧＦＡＰ)表达的关系 ,国内外未见报道。本研究拟探讨ＰＴＸ化学点燃癫痫大鼠在水迷宫中学习记忆能力及其与发作频率及类型的关系 ,以及学习记忆能力与ＧＦＡＰ表达变化的关系 ,以期为研究癫痫患者的记忆损害及其治疗提供线索 ,以提高其生活质量。1　材料与方法1 1　动物及分组　 4 4只健康成年雄性Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗ ｌｅｙ大鼠随机分为点燃组 (ｎ =31)和对照组 (ｎ =13)。其中 ,点燃组又分为癫痫全面发作组 (Ａ组 ,ｎ=8) ,每日腹腔注射ＰＴＸ 1 5ｍｇ·     

环磷酰胺对脑缺血再灌注海马GFAP表达的影响

目的观察环磷酰胺对脑缺血再灌注后大鼠大脑海马区胶原纤维酸性蛋白（GFAP）表达的影响。方法设正常组、假手术组、缺血再灌注组（I／R）和环磷酰胺处理组（T）,以改良Longa线栓法建立sD大鼠局灶性脑缺血模型。处理组缺血后1h给予环磷酰胺腹腔注射,处理组和I／R组均于缺血后2h形成再灌注,每组均分为三个时间段（24h、72h和5d）分别观察。应用免疫组织化学技术检测各组脑组织不同时段以及正常脑组织中海马GFAP的表达情况。结果脑缺血再灌注5d内,随着缺血时间的延长,GFAP在海马区星形胶质细胞中的阳性表达逐渐增多,缺血24h后即有表达,缺血再灌注72h后增多,5d后表达最高;经过环磷酰胺处理后,海马区GFAP表达减少（P〈0．05）。正常组及假手术组未见GFAP表达。结论大鼠脑缺血再灌注后5d内GFAP在海马中的表达与缺血时间呈明显的相关性,随着缺血时间延长而增加。用环磷酰胺处理后GFAP表达明显减少,提示环磷酰胺对缺血诱导的星形胶质细胞活化具有抑制作用,可能对脑缺血再灌注损伤的恢复起重要作用。     

麻醉及手术创伤对老年大鼠认知功能及海马突触结构的影响

目的 探讨麻醉和手术创伤对老年大鼠认知功能及海马突触结构的影响.方法 18月龄SD大鼠56只随机分为3组:对照组(C组,n=8)、麻醉组(A组,n=24)、手术组(O组,n=24),A、O组根据麻醉和手术后1、3和7 d分为3个亚组A1、A3、A7组和O1、O3、O7组,每亚组8只.在相应的时间点用Moms水迷宫测试老年大鼠的认知功能,电镜定量测量海马CA3区多形层的突触结构.结果 与C组比较,A1、O1、O3组Morris水迷寓测试潜伏期及游泳距离明显延长(P＜0.05),01、03组通过原平台次数明显减少(P＜0.01);与A1组比较,O1组潜伏期明显延长(P＜0.05),游泳距离无明显差异.与C组比较,O1、O3组海马CA3区多形层突触间隙宽度加大变宽(P＜0.01)、突触后膜致密物厚度变薄(P＜0.01)、突触活性区长度缩短(P＜0.05)、突触界面曲率减小(P＜0.01)、穿孔性突触百分率亦下降,07组恢复正常;各麻醉组突触形态改变差异无统计学意义.结论 麻醉和手术创伤可损害老年大鼠的认知功能,而海马突触的可塑性可能是术后认知功能障碍的结构基础.     

重组人红细胞生成素对癫痫持续状态大鼠海马p-Akt和XIAP的影响

目的 观察重组人红细胞生成素(recombinant human EPO,rHuEPO)对戊四氮(Pentylenetetrazol,PTZ)点燃的癫痫持续状态(status epilepticus,SE)的SD大鼠海马神经元磷酸化蛋白激酶B(p-PKB/p-Akt)和X-连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibtor of apoptosis protein,XIAP)表达的影响,应用磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidyl inositol 3 kinase,P13K)抑制剂LY294002进一步探讨rHuEPO作用的可能机制.方法 采用PTZ制作大鼠SE模型,将点燃后的大鼠随机分为PTZ组(PTZ+NS)、rHuEPO组(PTZ+rHuEPO)、LY294002组(PTZ+LY294002+rHuEPO)、LY294002溶剂二甲基亚砜(DMSO)对照组(PTZ+DMSO+rHuEPO),正常对照组腹腔注射生理盐水(n=35).观察大鼠行为学和脑电图的改变;TUNEL法检测海马神经细胞的凋亡情况;免疫组织化学法观察p-Akt、XIAP的表达;RT-PCR法检测各组大鼠海马XIAPmRNA的表达;Western blot法检测各组大鼠海马Akt、P-Akt蛋白的表达.结果 正常对照组仅见少量凋亡细胞,p-Akt和XIAP阳性细胞、p-Akt蛋白、XIAP mRNA均有少量表达;PTZ组与rHuEPO组、LY294002组、LY294002溶剂DMSO对照组比较,p-Akt和XIAP阳性细胞数、P-Akt蛋白表达及XIAP mRNA表达均减少(P<0.05),凋亡细胞数增加(P<0.05);rHuEPO组、LY294002溶剂DMSO对照组与LY294002组比较,p-Akt和XIAP阳性细胞数、p-Akt蛋白表达及XIAP mRNA表达均增加(P<0.05),凋亡细胞数减少(P<0.05).结论 rHuEPO在SE模型中活化了PI3K/Akt,提高p-Akt蛋白的表达,进而对线粒体凋亡途径的相关调控因子XIAP的表达进行了调控,从而介导线粒体凋亡途经,发挥抗凋亡、促存活的神经保护作用.     

海马Ghrelin对大鼠学习记忆的影响及机制研究

目的 探讨海马Ghrelin对大鼠学习记忆能力的影响及机制.方法 采用海马CA1区微量注射Ghrelin及一氧化氮合酶(NOS)抑制剂等,利用跳台实验及Morris水迷宫进行定位航行实验和空间搜索实验,观察海马Ghrelin对大鼠学习记忆的影响并分析可能机制.结果 海马CA1区注射Ghrelin可明显增加大鼠学习记忆能力,表现为跳台实验中大鼠从安全台跳下的潜伏期明显延长[(5.3±1.7)min vs (3.5±1.6)min,t =2.44,P ＜0.05],5 min内大鼠遭受电击次数明显减少[(0.8±0.7)次 vs (1.9±1.0)次,t =2.85,P ＜0.05],Morris 水迷宫实验中大鼠找到平台的潜伏期明显缩短[(10.6±3.6)min vs (17.2±6.1)min,t =2.95,P ＜0.01],但海马CA1区注射Ghrelin受体阻断剂[D-Lys(3)]-GHRP-6可明显消除上述Ghrelin促进大鼠学习记忆的作用[潜伏期(3.5±1.7)min vs (4.9±1.2)min,t =2.13,P ＜0.05];注射NOS抑制剂L-NAME可明显减弱Ghrelin促进大鼠学习记忆能力[潜伏期(3.4±1.5)min vs (4.9±1.2)min,t =2.47,P ＜0.05];而海马CA1区注射Ghrelin抗血清可明显减弱大鼠认知作用,表现为跳台实验中大鼠从安全台跳下的潜伏期明显缩短[(1.8±1.4)min vs (3.5±1.6)min,t =2.53,P ＜0.05],5 min内大鼠遭受电击次数明显增加[(3.2±0.9)次 vs (1.9±1.0)次,t =3.06,P ＜0.01],Morris 水迷宫实验中大鼠找到平台的潜伏期明显延长[(25.8±7.0)min vs (17.2±6.1)min,t =2.93,P ＜0.01].结论 海马CA1区内外源性Ghrelin均可提高大鼠学习记忆能力,而该作用可能与海马内NO合成有关.     

抑郁模型大鼠海马S100β蛋白的表达研究

目的:探讨抑郁模型大鼠海马S100β蛋白的表达及抑郁症的发病机制.方法:选用Wistar成年雄性大鼠30只,随机分为正常对照组和抑郁模型组,应用孤养和慢性不可预知的温和应激(Chronic unpredictable mild stress,CUMS)联合建立抑郁模型,用免疫组化法检测抑郁大鼠海马S100β蛋白的表达.结果:与正常对照组相比,抑郁模型组大鼠海马S100β阳性细胞体积有所增大,显色较深,S100β蛋白表达增强,其灰度值(120.6±14.3)与正常对照组(145.6±10.0)相比差异有统计学意义(P＜0.01).结论:慢性温和应激可诱发抑郁,引起海马SIOOβ蛋白表达增加,海马星形胶质细胞可能参与了抑郁的发生、发展.     

氟西汀对强迫游泳大鼠空间学习记忆及血清S100B水平的影响

目的 探讨氟西汀对应激抑郁模型大鼠空间学习记忆和血清S100B水平的影响.方法 将成年雄性SD大鼠按照随机数字表分为6组:对照组(A)、抑郁模型组(B)、抑郁模型+给药1天组(C)、抑郁模型+给药1周组(D)、抑郁模型+给药2周组(E)和抑郁模型+给药4周组(F),每组动物10只,抑郁模型为强迫大鼠游泳.氟西汀的剂量为10 mg/kg,给药方式为灌胃.应用Morris水迷宫测试大鼠的空间学习记忆情况.采用ELISA检测各组大鼠血清S100B水平.结果 在Morris水迷宫定位航行实验中,B组大鼠平均逃避潜伏期显著大于A组(P＜0.05);E组、F组与B组比较,其平均逃避潜伏期缩短,差异有统计学意义(P＜0.05);各组空间探索中,B组大鼠在第一象限的停留时间显著较A组长(P＜0.05);D、E、F大鼠在目标象限的时间(第三象限)明显长于在其它3个象限的停留时间(F=5.162,P＜0.01).E组和F组血清S100B水平[(0.91±0.23) ng/ml,(0.85±0.21) ng/ml]显著低于B组[(1.26±0.61) ng/ml,P＜0.05],但与对照组[(0.92 ±0.30ng/ml)]比较,差异无统计学意义(P＞0.05),抑郁模型状态水迷宫行为学指标(平均逃避潜伏期、偏离角、过台次数及平台象限游泳时间)与血清S100B水平无显著性相关关系(相关系数分别为0.107,0.068,-0.174,-0.09).结论 氟西汀长期用药明显改善抑郁模型大鼠空间学习记忆的损害,逆转抑郁模型大鼠升高的血清S100B水平.     

环境对低氧缺血性脑损伤新生鼠海马GFAP表达的影响

目的 研究不同环境刺激对低氧缺血性脑损伤（hypoxic-ischemic brain damage,HIBD）新生大鼠海马胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）表达的影响。方法按RiCC法制备7日龄sD大鼠HIBD模型,随机分为3组：丰富环境组（enriched environment,EE）、贫瘠环境组（impoverished environment,IE）和标准环境组（standard environment,SE）。另设假手术组（Sham）。各组大鼠于术后第1天开始分别给予不同环境刺激。术后第28天,通过穿梭箱实验测试学习记忆能力,免疫组织化学染色检测海马GFAP的表达。结果在学习记忆能力上,IE组明显差于Sham组、SE组和EE组（P〈0．01）,SE组差于Sham组和EE组（P〈0．01）,Sham组和EE组差异无统计学意义（P〉0．05）。海马GFAP免疫组织化学染色结果显示,Sham组GFAP阳性细胞数分别低于其它3组（P〈0．01）,而EE组分别高于SE组和IE组（P〈O．05）,IE组低于SE组,但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论丰富环境刺激可以增加海马GFAP的表达,促进神经再生,改善学习记忆能力,而贫瘠环境刺激却使海马GFAP表达减少,阻碍神经再生,加重学习记忆能力的损害。     

游泳训练对新生大鼠学习记忆和海马神经发生的影响

目的 观察游泳训练对新生大鼠学习记忆和海马神经发生的影响。方法雄性7日龄新生SD大鼠随机分为对照和游泳训练组。训练组大鼠出生后第11天进行无负重游泳训练3周。Morris水迷宫法检测学习记忆能力,BrdU⁺/NeuN⁺免疫荧光双标染色分析海马神经发生,Western blot检测海马脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达。结果对照和游泳训练组大鼠随着训练天数增加,寻找平台潜伏期均明显缩短(均P<0.05);定位航行实验的第二、三和四天,游泳训练组大鼠寻找平台潜伏期较对照组均显著减小(均P<0.05)。游泳训练组大鼠穿越目标次数何时间明显增加(均P<0.05)。与对照相比,游泳训练组大鼠海马齿状回NeuN＋/BrdU＋阳性数量显著增加(P<0.05),BDNF表达显著增加(P<0.05)。结论游泳训练提高了新生大鼠的学习记忆能力,其机制可能与游泳训练显著上调大鼠海马BDNF的表达促进海马神经发生有关。