四种方法检测粪便中轮状病毒的比较

用电镜(EM)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和协同凝集试验(CoA)等四种方法检测腹泻患儿粪便中轮状病毒,在20份四种方法全检标本中,EM 阳性13份,PAGE16份,ELISA14份,CoA16份。在70份PAGE、ELISA 和 CcA 三种方法检测标本中,PAGE 阳性率为76%,ELISA60%,CoA79%。以 PAGE 为参照,ELISA 和 CoA 两法的敏感性各为75%和91%,特异性各为88%和59%,诊断准确度各为79%和83%。本文对四种方法的优缺点作了评价。     

催化系统对聚丙烯酰胺凝胶聚合的影响

目的探讨不同的催化系统对不同酸碱条件下聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)凝胶聚合的影响。方法采用不同剂量的过硫酸铵(AP)四甲基乙二胺(TEMED)催化系统组合和过硫酸铵(AP)硫酸亚铁(FeSO4)-抗坏血酸(VC)催化系统组合,进行碱性PAGE和酸性PAGE,观察各组凝胶聚合所需时间。结果AP-TEMED在碱性电泳中应用,0.05%～0.1%的AP和0.1%的TEMED用量,凝胶聚合在0.5h内完成;在酸性电泳中应用时,0.2%的AP和0.3%～0.4%的TEMED用量,凝胶聚合在2h内完成。AP-VC-FeSO4催化系统应用于酸性电泳时设计的10组用量,48h均未发现凝胶形成。结论AP-TEMED催化系统在碱性PAGE中的效果好于酸性PAGE。在碱性电泳中,以0.05%～0.1%的AP和0.1%的TEMED为宜;在酸性电泳中,以0.2%的AP和0.3%～0.4%的TEMED为宜。     

两种凝胶电泳法在含蛋白中药材鉴定中应用的比较研究

目的：比较两种凝胶电泳地（梯度PAGE与平板PAGE）在含蛋白中药材鉴定中的优劣。方法：以4种桃仁和3种牛蒡子为样品，通过平板PAGE与梯度PAGE进行电泳分离。结果：梯度PAGE与板PAGE对相同样品进行电泳发现，梯度PAGE的电泳条带比平板PAGE的多,而且梯度PAGE的条带清晰度高，结论：梯度PAGE对含蛋白中药材的鉴定明显优于平板PAGE。     

用PAGE电泳法检测腹泻婴幼儿粪便中轮状病毒RNA

目的　探讨婴幼儿轮状病毒感染诊断方法。方法　用聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)检测轮状病毒RNA。结果　 41份腹泻婴幼儿粪便标本中有 16份为RNA阳性 ,阳性率为 39%。结论　用PAGE电泳方法检测轮状病毒RNA准确可靠 ,不易出现假阳性     

两种果子狸血清IgG纯化方法的比较

目的探讨一种具有简便快捷、高纯度、活性好的果子狸血清IgG纯化方法。方法比较Hitrap Protein A亲和层析和PAGE电泳两种纯化法对果子狸血清IgG的纯化,用PAGE还原电泳和Western-Blot法对IgG作纯度鉴定。结果对Hitrap Protein A纯化的果子狸血清IgG,其活性虽好,但纯度不高;而非还原PAGE电泳所纯化的果子狸血清IgG不但纯度高(>95%)、并具有较强的免疫活性。结论非还原PAGE电泳法纯化果子狸血清IgG,是一种具有高纯度、免疫活性强的纯化方法。     

聚丙烯酰胺梯度凝胶法测定低密度脂蛋白颗粒直径方法的建立

目的建立具有良好敏感性、重复性的聚丙烯酰胺梯度凝胶法(PAGE),以测定低密度脂蛋白(LDL)颗粒的大小。方法灌注3%～16%的聚丙烯酰胺梯度凝胶,分离LDL颗粒,并与经典的密度梯度超速离心法(DUC)进行比较。对于凝胶法进行板内和板间重复性的测定。随后分别观察-30℃和-70℃下保存24周的血清对采用凝胶法分离LDL颗粒的影响。结果与DUC法相比,PAGE法的敏感度为70%,特异度为100%。凝胶分离LDL亚组分的平均板内差异为0.44%,平均板间差异为2.05%。-30℃和-70℃分别保存2、4、8、16和24周对血清LDL颗粒直径无明显影响。结论本研究建立的3%～16%的PAGE法具有较好的敏感性和重复性,具有临床和科研使用的可行性。     

蜂毒素的SDS-PAGE质控方法研究

目的　建立以 SDS- PAGE进行蜂毒素质量控制的方法。方法　将通过凝胶色谱法从蜜蜂毒中分离纯化所得到的蜂毒素 ,以 SDS- PAGE法测定其相对分子质量 ,并通过凝胶成像扫描测定蜂毒素纯度。结果　蜂毒素样品电泳后在凝胶块上显示为均一条带 ,相对分子质量约为 2 80 0 ,含量为 (90 .5 9± 0 .85 ) % ,与 HPL C测定结果平行。结论　 SDS- PAGE法作为蜂毒素的质控方法 ,结果准确、可靠、简便     

桃仁蛋白梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳的研究

电泳作为一种分离蛋白质的手段已是含蛋白中药材鉴定的常用方法。聚丙烯酰胺凝胶电泳( PAGE)是利用丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺聚合形成的立体网状物作为载体对不同的带电物质进行分离的电泳方法。梯度 PAGE是 PAGE的改进方法 ,可用来将不同大小的蛋白质分开 ,配合标准相对分子质量蛋白可以对待测蛋白质进行相对分子质量测定。从已有的资料来看 ,用于鉴定的电泳方法有平板PAGE[1] ,圆盘 PAGE[2 ] ,SDS- PAGE[3] ,高效毛细管电泳 [4 ] ,同功酶等电聚焦 [5] ,醋酸纤维薄膜电泳 [6]等。到目前为止 ,还未见用梯度 PAGE法进行中药鉴定…     

PAGE5基因在肝细胞癌中的表达及对增殖与转移的影响

目的 研究PAGE5基因在肝细胞癌(以下简称肝癌)样本及肝癌细胞株中的表达情况以及被沉默后对肝癌细胞株PLC/PRF/5及Focus细胞生长及转移能力的影响,分析PAGE5与甲胎蛋白(AFP)基因在肝癌组织样本中表达的相关性.方法 采用半定量PCR方法检测PAGE5在32例肝癌组织样本及其癌旁组织以及12株人肝癌细胞株中的表达;分析48例肝癌组织样本中PAGE5与AFP基因表达;同时观察干扰PAGE5表达后肝癌细胞增殖及转移能力的改变.结果 在34.4％的肝癌组织样本中PAGE5基因表达上调;PAGE5基因表达与AFP表达水平呈正相关;利用RNA干扰技术沉默PAGE5基因表达后,PLC/PRF/5及Focus转移能力明显下降.结论 PAGE5基因在肝癌发生及维持肝癌细胞恶性表型中可能起到重要作用,深入研究PAGE5基因在肝癌中的功能,有望成为肝癌诊断标志物及潜在的治疗靶点.     

胃疾病患者的血清蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳的谱型

我们对正常成人、多种胃良性疾患患者和胃癌患者共212例进行血清蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)研究。通过定量分析各病例组血清蛋白PAGE谱型,根据所发现的规律性变化,提出胃癌癌变的模式,并探讨血清蛋白PAGE临床应用价值。     

重庆地区小儿轮状病毒肠炎研究

作者于1985年11—12月用PAGF检测108例腹泻患儿,79例显示特异性HRV的RNA基因带,PAGE阳性者,77.2%在发病3天以内,96.2%在5天以内。患儿均急性起病,呈蛋花或米汤样大便,49例(62.0%)每日解便8—10次或更多,镜检有脂肪颗粒,很少有白细胞。51例(64.5%)伴呕吐,每日1—5次,多为2—3次。41例(51.9%)有不同程度发热、咳嗽、流涕。56例(70.9%)有中、轻度失水,45例经口服补液后可纠正。整个病程7.4天,无死亡。PAGE电泳长型与短型之间临床表现上无差别     

凝胶电泳的凝胶浓度和交联度的正确选择

聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术现在已成为分析蛋白质、酶和核酸这类复杂的大分子化合物的一种极为有力的工具。但影响样品分辨率的因素有很多,其中以凝胶的浓度(T%)和交联度(C%)的影响最大,故最为重要。作者详细地总结了前人对凝胶结构的分析后,提出在 PAGE 中,对未知样品电泳宜先在C%=4%,T%=5-10.5%的系列浓度分离胶,C%=20%,T%=3.5%的浓缩胶中作 Disc-PAGE,选择该样品的最适分离胶浓度。再按此分离胶浓度作 Vertical-PAGE,并在加样品量时作样品量的梯度,优     

改良PAGE快速诊断婴幼儿轮状病毒肠炎

我们对常规的PAGE法进行改进,不用浓缩胶,缩短了电泳、染色时间;应用本改良PAGE法与ELISA法进行比较,检测39例2岁以下患儿腹泻大便,其结果用改良PAGE法检测为23例阳性、16例阴性,用ELISA法检测为18例阳性、21例阴性。改良PAGF法能直接检测出轮状病毒的核酸区带,既比ELISA法敏感,又比常规的PAGE法快速。     

用PAGE法检测婴幼儿腹泻粪便中轮状病毒核酸的研究

本文首次在国内报告用PAGE法对轮状病毒感染作分子流行病学调查,并首次确认该病毒是本地区引起婴幼儿急性腹泻的主要病原(据我们手头资料)。本研究从151份急性腹泻患儿粪便中提取轮状病毒核酸,用PAGE法进行核酸检测,共测出轮状病毒核酸阳性标本90份(阳性率为59.6%),其中86份的RNA基因图型为“长型”,仅4份为“短型”。我们对轮状病毒核酸检测方法亦作了一些改进。     

重庆地区婴幼儿腹泻轮状病毒RNA的分析

轮状病毒基因组RNA经聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分析可分出11个RNA片段。分析该病毒基因组RNA之PAGE图谱类型对了解轮状病毒引起的地区流行规律具有重要意义。Herring等报告可省去密度梯度离心纯化病毒颗粒等步骤直接从病儿粪便中提取轮状病毒RNA做PAGE分析。目前,这种方法己用于轮状病毒感染病人的快速诊断和分子流行病学的调查。     

天南星类中药材的PAGE鉴别

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳 (简称PAGE)技术 ,对天南星类中药材进行鉴别分析结果表明 :三种天南星药材样品的PAGE图谱完全不同 ,可作为天南星类中药材鉴别的一种有效方法。     

秋泻灵加丽珠肠乐治疗不同电泳型轮状病毒性肠炎

本研究从2006年8月～2007年3月收集了56例婴幼儿肠炎的大便,用酶联免疫吸附试验(ELISA)和聚丙烯酷胺凝胶电泳(PAGE)检测,结果ELISA阴性者45例,PAGE阴性者28例,28例PAGE阴性者中18例为电泳RNA长型,10例为电泳RNA短型,PAGE阴性者均用秋泻灵加丽珠肠乐治疗,结果发现对长型的效果优于短型轮状病毒性肠炎,提示轮状病毒性电泳RNA长型和短型的毒性有差异.     

内皮细胞生长因子的分离纯化及生物活性的研究

介绍了内皮细胞生长因子(ECGF)一种分离纯化的方法,经硫酸铵分级盐析和肝素亲和层析可得到高纯度的ECGF。经SDS—PAGE电泳分析其分子量为17000,等电点为4.8。肝素与ECGF的生物活性密切相关,并可使已失活的(ECGF)恢复70%～80%的生物活性。     

人血浆纤维联接蛋白的纯化制备及分析鉴定

采用亲合层析法制备纤维联接蛋白 (Fn)制剂 ,经免疫扩散法和 SDS- PAGE法分析 ,其纯度达免疫纯和电泳纯 (90 %～ 95% )。生物学实验结果表明 :纯化 Fn能促进培养基中肾小球细胞附壁和生长。并阐述其临床应用价值 ,为临床应用作准备     

人轮状病毒感染的几种实验室诊断方法比较研究

本实验采用醋酸纤维膜对流免疫电泳(CIEP)、聚丙稀酰胺凝胶电泳(PAGE)酶联免疫吸附试验(ELISA),对经直接电镜(DEM)证实轮状病毒阳性或阴性的腹泻患儿的粪便标本进行检测,以比较它们检出轮状病毒的敏感性。结果表明:40例轮状病毒阳性粪便标本,CIEP有38例呈现明显沉淀线(38/40),ELISA有37例呈现阳性(37/40);19例轮状病毒阳性粪液,PAGE检测有12例轮状病毒dsRNA阳性。它们的敏感性为CIEP与DEM和ELISA相似,PAGE比DEM低。我们认为CIEP和PAGE的设备简单、操作方便、诊断快速,适用于一般医院常规病毒实验诊断。