姜黄素对β-淀粉样肽(25-35)诱导去血清培养PC12细胞周期异常与细胞凋亡的影响

目的探讨姜黄素(Cur)对β-淀粉样肽(25-35)(βamyloid peptide-25-35,Aβ25-35)诱导体外去血清培养的PC12细胞周期异常与凋亡的影响.方法PC12细胞用常用的去血清培养使细胞同步于G0期,用MTT比色法分析细胞存活率,流式细胞仪检测分析细胞周期与凋亡,Hoechst33258荧光染色观察细胞核凋亡的形态学改变,RT-PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测p21基因的变化.结果用不同终浓度(0,1.25,2.5,5,10,20 μmol·L-1)Cur预处理去血清培养的PC12细胞1 h,再用Aβ25-35处理24 h,细胞存活率增加;Aβ25-35引起的S期细胞百分率明显减少,凋亡率明显降低(P＜0.01),亚二倍体峰消失;核固缩、碎裂减少;p21 mRNA表达和P21蛋白表达增加.结论Cur可以影响Aβ25-35诱导的去血清培养PC12细胞周期分布及减少凋亡,可能与上调p21的表达有关.     

姜黄素对Aβ25-35诱导去血清培养PC12细胞p53、p21基因表达的影响

目的：在β-淀粉样肽（25—35）[βamyloid peptide-（25—35），Aβ25—35]诱导去血清培养PC12细胞周期异常模型的基础上．研究姜黄素（Curcumin，Cur）对Ap25-35诱导体外去血清培养的PC12细胞p53、p21基因表达的影响；方法：种入培养瓶的PC12细胞贴壁后用常用的去血清培养法使细胞同步于G0期，每次实验分对照组（0）、诱导组和保护组，通过RT—PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测p53、p2l基因表达水平的变化.结果用5μmol／LCur预处理细胞1h，再加入终浓度为25μmol／L Aβ25-35处理0～20h，与Aβ25-35诱导组比较，     

姜黄素对Aβ25-35诱导去血清培养PC12细胞周期变化与凋亡的影响

目的：探讨姜黄素（Curcumin，Cur）对β-淀粉样肽（25—35）[βamyloid peptide-（25-35），Aβ25-35]诱导体外去血清培养的PC12细胞周期变化与细胞凋亡的影响。方法：种人培养瓶或板的PC12细胞贴壁后用常用的去血清培养法使细胞同步于G0期，用MTT比色法分析细胞存活率；流式细胞仪检测分析细胞周期的改变与凋亡的时间关系，Hoechst33258-PI荧光染色观察细胞核凋亡的形态学改变；DNA电泳观察细胞凋亡时特异性梯状条带（DNA—Ladder）；结果（1）用终浓度分别为0～20μmol／L的姜黄素（Cur）处理去血清培养PC12细胞24h，     

姜黄素影响Aβ25-35诱导去血清培养PC12细胞周期变化与细胞凋亡的可能机制

目的：探讨姜黄素（Curcumin，Cur）对Aβ25—35诱导体外去血清培养PC12细胞周期异常与细胞凋亡的可能影响机制。方法种人培养瓶或板的PC12细胞贴壁后用常用的去血清培养法使细胞同步于G0期，每次实验分对照组（0）、诱导组和保护组；流式细胞仪检测分析细胞周期的改变与凋亡的时间关系；通过RT-PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测cyclin D1、cdk4、pRb、E2F1、bax等基因表达水平的变化。结果：（1）去血清培养24h．PC12细胞大约90％同步于G0／G1期；（2）25μmoL／L Aβ25-35处理8、16h。     

原花青素对Aβ25-35诱导去血清培养PC12细胞细胞周期相关基因表达变化的影响

目的探讨原花青素（Proanthocyanidins，PAC）对β-淀粉样肽（25—35）[βamyloid peptide-（25—35），Aβ25-35]诱导体外去血清培养PC12细胞周期相关基因p21、CDK4、磷酸化pRb、E2F1表达异常的影响。方法种入培养瓶的PC12细胞贴壁后用常用的去血清培养法使细胞同步于C0期，分为0对照组、Aβ25-35诱导组、PAC保护组，按实验需要分别在不同时间加入药物并收集细胞，通过RT—PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测p21、cdk4、pRb、E2F1基因表达水平的变化。     

姜黄素影响Aβ_(25-35)诱导PC12细胞周期变化与细胞凋亡的可能机制

目的探讨姜黄素(curcum in,Cur)对β-淀粉样肽(25-35)[β-amyloidpeptide-(25-35),Aβ25-35]诱导体外血清饥饿培养的PC12细胞周期异常与凋亡保护作用的可能机制。方法5μmol.L-1Cur预处理同步于G0期的PC12细胞,加入终浓度为25μmol.L-1Aβ25-35处理0～20h,用RT-PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测p21、CDK4、E2F1、bax的表达。结果与Aβ25-35诱导组比较,Cur保护组p21mRNA和p21蛋白的表达增加;CDK4、E2F1、baxmRNA和CDK4、Bax蛋白的表达降低。结论Cur可能通过上调p21的表达,下调CDK4、E2F1、bax的表达,对Aβ25-35诱导的PC12细胞周期异常与凋亡起保护作用。     

肉苁蓉总苷对β淀粉样蛋白25-35诱导PC12细胞凋亡的保护作用

目的研究肉苁蓉总苷(GCs)对β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞凋亡的保护作用。方法体外培养的大鼠PC12细胞分6组:正常对照组、模型组、银杏叶片组(40mg·L-1)、GCs低剂量组(25mg·L-1)、GCs中剂量组(50mg·L-1)和GCs高剂量组(100mg·L-1)。细胞培养至对数生长期时分别加入上述各组药物,每日1次。培养h96时,模型组、银杏叶片组和GCs各剂量组分别加入终浓度20μmol·L-1的Aβ25-35,正常对照组以等体积培养基替代。继续培养24h和48h时,光镜观察各组细胞的形态及生长情况,MTT比色法检测各组细胞的存活率,分光光度法检测细胞中乳酸脱氢酶(LDH)活性,流式细胞术AnnexinⅤ/PI法检测细胞凋亡率。结果与正常对照组比较,模型组细胞数目显著减少,部分细胞皱缩,变圆、脱落的细胞数目较多,其存活率显著降低、LDH活性明显提高、凋亡率显著增加(P<0.01)。与模型组相比,GCs各剂量组细胞数目显著增多,细胞形态学变化明显改善,细胞的存活率增高、LDH活性下降、凋亡率降低,有非常显著差异(P<0.01)。其中,GCs高剂量作用48h效果最显著。结论GCs对Aβ25-35引起的PC12凋亡细胞损伤具有明显的保护作用。     

原花青素对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞凋亡的影响及其机制的研究

目的　探讨原花青素(Procyanidins,PC)对β淀粉样肽25~35(βamyloidpeptide25 -35, Aβ25-35 )诱导PC12细胞凋亡的影响及其机制。方法　采用MTT比色法分析细胞存活率, Hoechst33258 PI荧光染色法检测凋亡, RT PCR检测P53和bcl 2基因mRNA表达,Westernblot检测P53和Bcl 2蛋白表达。结果　不同剂量PC预处理PC12细胞 1h可剂量依赖性对抗Aβ25-35引起的凋亡,提高细胞的存活率,减少Aβ25-35引起的核固缩,凝聚和碎裂,降低P53mRNA表达以及P53蛋白表达,增加bcl 2mRNA表达以及Bcl 2蛋白表达。结论　PC可剂量依赖性对抗Aβ25-35对PC12细胞的毒性作用,其机制可能与下调凋亡基因P53和上调抗凋亡基因bcl 2表达有关。     

APP17肽对Aβ25-35诱导神经细胞凋亡保护作用

目的通过形态学和生化学指标观察APP17肽对Aβ25-35诱发SH-SY5Y细胞凋亡是否有保护作用,并对其保护作用机制作进一步的探讨.方法选用细胞形态观察、半定量LM-PCR DNA ladder Assay和流式细胞仪定量测定细胞凋亡率的方法观察APP17肽是否对Aβ25-35诱发SH-SY5Y细胞凋亡有保护作用;通过测定细胞MTT代谢率,共聚焦显微镜观察Aβ25-35和APP17肽对细胞内过氧化物含量、线粒体膜电位的影响以及Western Blotting 观察细胞内凋亡诱导因子AIF及核转录因子NF-κB的表达情况,探讨了APP17肽的保护作用机制. 结果 APP17肽可以明显改善Aβ25-35造成的细胞形态损伤,显著降低细胞凋亡比率;与Aβ25-35损伤组相比,APP17肽预孵育能明显提高细胞MTT代谢率,稳定线粒体膜电位,减少AIF的表达;有效降低Aβ25-35引起的细胞内过氧化物含量增高;并且使具有神经保护作用的核转录因子NF-κB表达增加. 结论 APP17肽可以稳定线粒体功能、降低细胞内过氧化物含量,激活NF-κB并使其持续表达,对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡有比较明显的保护作用.     

Daidizein对β淀粉样蛋白诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的研究Daid ize in对β淀粉样蛋白(Aβ_1-42)诱导的PC12细胞损伤的保护作用。方法用Aβ_1-42处理诱导体外培养的PC12细胞损伤,并用不同浓度的Daid ize in进行保护,显微观察细胞形态的改变,LDH法和MTT法检测细胞膜的损伤情况。结果保护组细胞数比损伤组显著增多,受损变圆的细胞数较少,细胞形态明显改善,保护组上清液LDH活性显著低于损伤组(P<0.01),MTT值显著高于损伤组(P<0.01)。结论Daid ize in对Aβ_1-42诱导的PC12细胞损伤具有显著的保护作用。     

Daidizein对β淀粉样蛋白诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的研究Daid ize in对β淀粉样蛋白(Aβ1-42)诱导的PC12细胞损伤的保护作用。方法用Aβ1-42处理诱导体外培养的PC12细胞损伤,并用不同浓度的Daid ize in进行保护,显微观察细胞形态的改变,LDH法和MTT法检测细胞膜的损伤情况。结果保护组细胞数比损伤组显著增多,受损变圆的细胞数较少,细胞形态明显改善,保护组上清液LDH活性显著低于损伤组(P<0.01),MTT值显著高于损伤组(P<0.01)。结论Daid ize in对Aβ1-42诱导的PC12细胞损伤具有显著的保护作用。     

远志皂苷对β淀粉样蛋白片段1-40诱导PC12细胞凋亡的抑制作用

目的探讨远志皂苷抑制β淀粉样蛋白片段1-40(Aβ1-40)诱导的PC12细胞凋亡的作用机制。方法采用聚集状的Aβ1-40 25μmol·L-1诱导PC12细胞凋亡,然后将处理后的PC12细胞分为Aβ1-40模型组和远志皂苷50,100和200μmol·L-1组,同时设正常细胞对照组。采用MTT比色法检测细胞存活率;膜联蛋白-Ⅴ和PI双染法检测细胞凋亡率;免疫细胞化学法检测细胞凋亡基因Bcl-2和Bax及细胞色素c(Cyt c)表达阳性的细胞百分率;Western印迹法检测PC12细胞中Cyt c的表达水平。结果与正常对照组比较,Aβ1-40模型组PC12细胞的存活率明显降低(P<0.01),为(31±7)%;Bcl-2阳性表达细胞率降低(P<0.01),为(23.9±1.9)%;Bax和Cyt c阳性表达细胞率升高(P<0.01),分别为(79.0±3.7)%和(49.2±3.6)%,Bcl-2/Bax阳性表达细胞比值为0.30。与模型对照组比较,远志皂苷50,100和200μmol·L-1作用24 h后,细胞存活率分别升高至(51±13)%,(64±7)%和(84±10)%(P<0.01);Bcl-2阳性率升高至(38.7±0.9)%,(53.7±1.6)%和(60.3±0.8)%(P<0.01),Bax阳性率分别降低为(60.8±1.9)%,(41.5±2.2)%和(32.7±1.4)%(P<0.01),Bcl-2/Bax比值亦分别上升为0.64,1.29和1.84;Cyt c阳性率分别降低至(45.4±3.4)%,(30.2±2.2)%和(27.5±1.0)%(P<0.05,P<0.01)。与正常对照组比较,模型组PC12细胞凋亡率和Cyt c蛋白表达水平亦明显升高(P<0.01);远志皂苷50,100和200μmol·L-1作用24h,PC12细胞凋亡率和Cyt c表达水平较模型组均降低(P<0.01)。结论远志皂苷对Aβ1-40诱导的PC12细胞凋亡具有明显的抑制作用,其作用机制可能是抑制Bax和Cyt c表达,增加Bcl-2表达和Bcl-2/Bax比值,从而阻断内源性细胞凋亡通路。     

银杏总内酯对β-淀粉样肽25-35片段所致小鼠学习记忆障碍的影响

阿尔采末病(AD)的主要神经病理变化是老年斑、神经纤维缠结和血管淀粉样变,临床表现为记忆障碍和认知功能低下.研究发现AD患者脑内细胞外沉积的凝聚态的β-淀粉样肽(β-Amyloid peptide, β-AP)具有神经毒性,并可导致一系列病理行为[1].已知β-淀粉样肽是老年斑的一种重要组成成分,特别是β-AP中第25-35片段肽链的凝聚态比溶解态更具强的神经毒性作用[2].本研究采用一次性icv凝聚态β-AP25-35制成的痴呆动物模型观察银杏总内酯对此模型的保护作用.     

阿魏酸钠对抗Aβ25-35诱导的鼠神经元凋亡作用研究

目的 探讨阿魏酸钠对β淀粉样蛋白(Aβ25-35)通过谷氨酸诱导的鼠皮层神经元凋亡的影响.方法 培养的皮层神经元分别与谷氨酸(20μmol/L)、Aβ25-35(5μmol/L)、Aβ25-35(5μmol/L)+谷氨酸(20μmol/L)孵育,采用Hoechst 33258荧光染色法分析神经细胞凋亡;然后用谷氨酸( 50μmol/L)诱导神经元凋亡,采用荧光染色法和Westem blot观察阿魏酸钠的保护作用.结果 单独应用Aβ25-35(5μmol/L)和单独加入谷氮酸(20μmol/L)引起的皮层神经元凋亡率与对照组无明显差异;Aβ25-35与皮层神经元共同孵育5天,接着用谷氨酸处理24h,细胞凋亡率从正常的9.2%+1.5%增加到43%±8%:阿魏酸钠能够显著降低谷氨酸诱导的神经细胞凋亡百分比至21%±5%,并对抗谷氨酸引起的Bcl-2蛋白表达的降低.结论 阿魏酸钠能够减弱Aβ25-35提高谷氨酸毒性诱导的鼠皮层神经元凋亡.     

MCI-186对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞氧化损伤韵神经保护作用

目的 探讨MCI-186(edaravone)对阿尔茨海默病(AD)细胞损伤的保护作用.方法 利用淀粉样β蛋白25-35(Aβ_(25-35))诱导PCI2细胞制备成AD细胞模型;采用MTT法确定Aβ_(25-35)抑制PC12细胞生长的半数抑制浓度(IC_(50))和MCF-186对AD细胞保护作用最强时的浓度;利用邻菲罗啉化学发光法测定羟自由基(.OH)含量,确定MCI-186清除.OH最强作用时的浓度.结果 Aβ_(25-35)诱导PC12细胞的IC_(50)是29.76 μmol/L,此浓度的Aβ_(25-35)对PC12细胞生长的最大抑制率发生在36 h;30 μol/L Aβ_(25-35)诱导PC12细胞36 h可以制成理想的AD细胞模型.20 μmol/L MCI-186清除.OH作用最强,即对AD细胞的保护作用最强.结论 MCI-186可以通过清除Aβ_(25-35)产生的.OH,在AD中发挥其神经细胞保护作用.     

梓醇保护L-谷氨酸和Aβ25-35损伤PC12细胞作用比较作用比较

目的观察梓醇对L-Glu和Aβ25-35损伤PC12细胞的保护作用的异同。方法常规培养神经元样PCI2细胞，预先加入梓醇及对照生理盐水24h后分别加L—Glu 5mmol／L和Aβ25-35 20μmol／L损伤24h，K252a干预组细胞在梓醇前1h加入200nmol／LK252a。MTT法测定细胞存活率，放射配基结合分析测定M2受体密度。结果梓醇100μmol／L明显提高细胞存活率（P〈0．01），10μmol／L、100μmol／L升高M2受体密度（P〈0．05，P〈0．01），K252a部分阻断梓醇对Aβ25-35损伤细胞的保护作用，对梓醇保护L—Glu损伤的阻断作用更强。结论梓醇对L—Glu和Aβ25-35损伤PC12细胞保护作用有差异。     

梓醇保护L-谷氨酸和Aβ25-35损伤PC12细胞作用比较作用比较

目的观察梓醇对L-Glu和Aβ25-35损伤PC12细胞的保护作用的异同。方法常规培养神经元样PCI2细胞，预先加入梓醇及对照生理盐水24h后分别加L—Glu 5mmol／L和Aβ25-35 20μmol／L损伤24h，K252a干预组细胞在梓醇前1h加入200nmol／LK252a。MTT法测定细胞存活率，放射配基结合分析测定M2受体密度。结果梓醇100μmol／L明显提高细胞存活率（P〈0．01），10μmol／L、100μmol／L升高M2受体密度（P〈0．05，P〈0．01），K252a部分阻断梓醇对Aβ25-35损伤细胞的保护作用，对梓醇保护L—Glu损伤的阻断作用更强。结论梓醇对L—Glu和Aβ25-35损伤PC12细胞保护作用有差异。     

白果内酯对抗淀粉样β-肽25-35所致PC12细胞毒作用(英文)

目的:观察白果内酯对β-淀粉样蛋白片段25-35(Aβ25-35)所致PC12细胞毒性的影响。方法:用噻唑兰(MTF)及乳酸脱氢酶法检测PC12细胞的存活率;硫代巴比妥酸法测定细胞脂质过氧化;并同时检测了细胞内抗氧化酶活性。结果:白果内酯(25-100)μmol·L~(-1)剂量依赖性地抑制Aβ25-35(100 μmol·L~(-1))引起的细胞存活率下降,脂质过氧化及抗氧化酶活性下降。结论:白果内酯具有对抗Aβ25-35引起的PC12细胞毒性的作用。     

Protective Effect of Eecdysterone on the PC12 Cell CytotoxicityInduced by beta-amyloid 25-35

Objective. To study the effect of ecdysterone (ECR) on beta - amyloid peptide fragment 25-35 ( Aβ25-35 )-induced PC12 cell cytotoxicity, and further to expore its mechanism. Methods: PC12 survial was monitored by LDH release and 3-(4, 5-dimethylthiazol-yl-2, 5-diphenyhetrazolium bromide (MTT) assays. The content of malondi-